Rak dojke (BC) je uobičajena vrsta onkologije i, nažalost, još uvijek nije razvijena niti jedna metoda liječenja koja daje potpunu garanciju izlječenja. Stoga je najbolje rješenje za pacijenta prevencija i pravovremena dijagnoza RMJ. Analiza ribe na rak dojke je najsavremenija istraživačka metoda koja vam omogućava da usmjerite liječenje pacijenta na najispravniji put.
Unatoč ogromnom akumuliranom iskustvu u proučavanju i liječenju ove bolesti, medicina još uvijek nije u stanju da ukaže vanjski faktori, uzrokujući maligni tumor mlečne žlezde. Nijedan od poznatih kancerogena ne može se pouzdano povezati s pojavom ove bolesti. Savremene metode dijagnostika uglavnom daje dobre rezultate i omogućava da se tačno utvrdi prisustvo ili odsustvo bolesti i faza razvoja. Međutim, ne pružaju svi sveobuhvatne informacije koje vam omogućavaju da precizno prepišete liječenje.
- Kompletna krvna slika - provjerava nivo bijelih krvnih zrnaca, brzinu sedimentacije eritrocita i hemoglobina. Prva dva pokazatelja se povećavaju u onkologiji, a posljednji se, naprotiv, smanjuje. Međutim, ova analiza nam omogućava da sudimo samo o prisutnosti određenih problema u tijelu. Postavite tačnu dijagnozu raka mlečne žlezde„Ne možete ga koristiti, pogotovo na rana faza razvoj tumora.
- Biohemija - određuje nivo enzima i elektrolita, što nam omogućava da procenimo prisustvo metastaza. Međutim, ovi podaci nisu uvijek objektivni. Ova studija također pokazuje prisustvo određenih tumorskih markera u krvi, koji pomažu u praćenju prisutnosti kancerozni tumor i njegovu lokaciju.
- Spektralna analiza vam omogućava da utvrdite prisustvo raka s vjerovatnoćom većom od 90%, uključujući i u ranoj fazi.Metoda se zasniva na proučavanju krvi pod infracrvenim zračenjem, što vam omogućava da odredite njen molekularni sastav.
- Biopsija - izvodi se vađenjem uzorka tkiva iz dojke i daljom citološkom analizom kojom se utvrđuje prisustvo ćelije raka i njihov broj, koji zavisi od stepena razvoja bolesti.
- Genetsko testiranje određuje sklonost pacijentkinji za razvoj raka dojke.Obavlja se otkrivanjem određenih gena u krvi koji su odgovorni za prijenos raka s generacije na generaciju.
Međutim, najnoviji i efikasan metod Današnja istraživanja su takozvani FISH (riblji) test. Skraćenica prevedena s engleskog zvuči kao "intracelularna fluorescentna hibridizacija".
Phish testiranje je relativno nova metoda - koristi se od 1980. godine. Međutim, uprkos složenosti i visokoj cijeni, uspio je zaraditi pozitivne kritike kako od ljekara tako i od pacijenata koji su se zahvaljujući njemu uspješno riješili raka.
Za rast ćelija dojke u ljudsko tijelo Reaguje gen koji se zove HER2. Ime u prevodu sa engleskog znači ljudski estrogenski receptor - 2. Normalno, receptori ovog gena proizvode HER2, protein koji reguliše deobu ćelija žlezde. Kancerozni tumor (obično karcinom) u svom nastanku "prevari" ovaj gen, prisiljavajući ga da raste dodatno tkivo, koje će tumor koristiti za svoj razvoj. Ova anomalija se javlja u otprilike 30% slučajeva i karakterizira je termin "amplifikacija".
Na taj način, sam organizam pacijenta pomaže da se rak razvije. Ako se ovaj proces ne zaustavi, pacijentu možda neće pomoći ni najmodernije i najmoćnije metode liječenja.
Testiranje amplifikacije HER2 gena obično se provodi u dvije faze:
- IHC (imunohistohemijski test);
- direktna FISH analiza (fluorescentna hibridizacija).
Ispod lokalna anestezija Pacijentu se radi biopsija – uzimaju se uzorci tkiva koji se šalju u specijalizovanu laboratoriju.
Prvi korak je obično imunohistohemija, mikroskopska analiza uzorka tkiva raka. On određuje osnovno prisustvo HER2 gena u tumorskom tkivu. Ova studija je mnogo jeftinija od testa na ribu, a takođe je lakša i brža za izvođenje. Međutim, ne daje tako tačne podatke, rezultat se određuje u brojevima od nula do tri boda. Ako je rezultat manji ili jednak jedan, onda je gen HER2 odsutan u tumoru i nema potrebe za daljnjim istraživanjem. Od dva do tri boda - granično stanje, više od tri - maligna formacija je u procesu rasta i potrebno je preći na drugu fazu dijagnoze.
Istraživanje raka dojke na ribama provodi se na sljedeći način: označeni elementi DNK (deoksiribonukleinska kiselina) molekula specijalna boja. Ovi markeri se ubacuju u pacijentove DNK molekule i određuju da li i na kom nivou dolazi do pojačanja HER2. Analiza se provodi u realnom vremenu, doktor uspoređuje stopu podjele gena na mjestu sumnje na tumor sa stopom podjele normalnog područja dojke.
Za rak dojke, FISH testiranje može dati sljedeće rezultate:
- reakcija je pozitivna - brzina podjele gena HER2 u tumorskom tkivu je dvostruko veća od normalne ili viša, u kom slučaju je neophodna dodatna terapija;
- reakcija je negativna - HER2 nije uključen u proces diobe stanica raka i, ako je tumor još uvijek prisutan, ovaj gen neće katalizirati njegov razvoj.
Dakle, analiza omogućava utvrđivanje abnormalnog ponašanja gena HER2 i prilagođavanje liječenja uz pomoć paralelne terapije usmjerene na supresiju ovog gena. Trenutno se za to koristi lijek Herceptin.
Ako na vrijeme ne izvršite ribotest ili ne obratite pažnju na njegove rezultate, liječnik neće imati podatke o ponašanju HER2. U tom slučaju, liječenje će biti propisano bez uzimanja u obzir moguće agresivne aktivnosti ovog gena. Najvjerojatnije, takva terapija neće donijeti rezultate - tumor će se nastaviti agresivno razvijati.
Pored onoga što je gore opisano, praćenje ponašanja gena HER2 daje onkolozima razumijevanje stepena agresivnosti tumora i mogućnost predviđanja brzine njegovog rasta i širenja. Igra veoma važnu ulogu u dizajniranju tretmana pacijenata. Određuje da li postoji potreba za terminom ozbiljno liječenje(na primjer, zračenje ili hemija), ili će to biti dovoljno hormonska terapija, ima li smisla hirurška intervencija ili je opciono.
Prednosti i nedostaci analize ribe
Kao i svaka druga dijagnostička metoda, FISH istraživanje ima pozitivne i negativne strane.
Međutim, unatoč određenom skepticizmu, koji je možda povezan s novitetom ove tehnike, ona ima neosporne prednosti:- Studija se provodi brzo - rezultat je gotov za nekoliko dana, dok druge dijagnostičke metode traju i do nekoliko sedmica. Ova tačka je izuzetno važna u borbi protiv raka.
- Osim proučavanja raka dojke, analiza vam omogućava da saznate predispoziciju određenog pacijenta na onkologiju bilo kojeg organa trbušne duplje. Pacijentu se dostavlja detaljan izvještaj, na osnovu kojeg se može naknadno podvrgnuti pregledima radi prevencije. mogući razvoj rak.
- Zbog specifičnosti analize ribe, može se koristiti za otkrivanje najsitnijih genetskih abnormalnosti koje se ne mogu dijagnosticirati drugim metodama.
- Za razliku od nekih drugih vrsta testova, fiš test je siguran za pacijenta. Osim biopsije, ne zahtijeva nikakve dodatne traumatske efekte.
Neki onkolozi smatraju da je efikasnost testa na ribu kontroverzna. Oslanjaju se na studije koje nisu otkrile značajnu prednost ove metode u odnosu na jeftiniju IHC studiju.
Također, nedostaci testa ribe uključuju sljedeće faktore:
- visoka cijena istraživanja;
- zbog činjenice da su markeri uneseni u DNK donekle specifični, ne mogu se koristiti na nekim dijelovima hromozoma;
- analiza ne otkriva sva genetska oštećenja, što može dovesti do dijagnostičkih grešaka.
Općenito, uprkos kritikama, analiza ribe je najbrža i najpreciznija metoda za dijagnosticiranje karcinoma dojke. Važno je i to što omogućava predviđanje razvoja nekih drugih vrsta onkologije.
Bilo koji rak se najlakše liječi ranim fazama razvoj. Nažalost, ironično, većina poznate vrste maligne tumore je izuzetno teško dijagnosticirati u ranim fazama. Osim toga, mnoge od dijagnostičkih metoda koje se koriste su dugotrajne i ne daju potpuno objektivnu sliku. Analiza ribe ne samo da daje najtačniju sliku o stanju tumora, već vam omogućava da zaštitite pacijenta od oblika liječenja koji su destruktivni za tijelo (na primjer, kemoterapija), budući da je stupanj agresivnosti tumora utvrđena i, shodno tome, vjerovatnoća metastaza.
Metoda hibridizacije in situ* (in situ, lat.) zasniva se na sposobnosti DNK ili RNK da formiraju stabilne hibridne molekule sa DNK/RNA sondama direktno na preparatima fiksnih hromozoma i interfaznih jezgara. Koristeći ovu metodu, moguće je odrediti tačnu lokaciju gotovo svake DNK ili RNK sekvence direktno u ćeliji, ćelijsko jezgro ili na hromozomima.
Za izvršenje hibridizacije in situ Pogodni su citološki ili histološki preparati ćelija bilo kojeg tkiva ili organa, pripremljeni prema standardnim metodama. U kliničkoj citogenetskoj laboratoriji koriste se kultivirani preparati limfocita periferna krv, ćelije citotrofoblasta korionskog epitela, kultivisane i nekultivisane ćelije amnionske tečnosti, različita tkiva iz abortusnog materijala, kao i razmazi bukalnih epitelnih ćelija i krvi.
Metoda hibridizacije in situ je od posebnog značaja za praktičnu citogenetiku, zahvaljujući razvoju ne-izotopske varijante zasnovane na upotrebi sondi obeleženih neradioaktivnim modifikovanim nukleotidima. Neizotopske opcije za hibridizaciju na preparatima (posebno fluorescentnim) imaju niz prednosti u odnosu na izotopske: veća rezolucija, koja je jednaka rezoluciji mikroskopa (0,1 - 0,2 mikrona), nema potrebe za statističkom obradom rezultata, brzina i sigurnost za zdravstvene istraživače
Osim toga, kombinacija različito modificiranih uzoraka otkrivena korištenjem različiti sistemi detekcija, omogućava vam da istovremeno odredite lokaciju dvije ili više DNK sekvenci u jednoj ćeliji ili na jednoj metafaznoj ploči. A upotreba ponavljajućih sekvenci označenih fluorohromima kao DNK sondi skraćuje vreme procedure na 7 - 9 sati (klasična neizotopska verzija hibridizacije traje dva dana, izotopske varijante od nedelju dana do mesec dana), što je posebno važno za prenatalni dijagnoza. Upotreba FISH metoda u citogenetskoj dijagnostici omogućava identifikaciju strukturnih hromozomskih preuređivanja, ustanoviti prirodu markerskih hromozoma, analizirati numeričke povrede hromozomskog skupa, kao u metafazni hromozomi, iu interfaznim jezgrima.
Princip FISH metode
U srži FISH metoda leži u reakciji hibridizacije između umjetno stvorene DNK sonde i komplementarne sekvence nukleotida nuklearna DNK. Molekul DNK se sastoji od dva spiralno povezana nukleotidna lanca, a hibridizacija je moguća samo ako se lanci razdvoje. Da bi odvojili nukleotidne lance DNK, pribjegavaju denaturaciji (za naknadnu hibridizaciju, i DNK u jezgrima uzorka za testiranje i sama DNK sonda moraju biti denaturirani). Nakon denaturacije, DNK sonda se hibridizira sa svojom komplementarnom sekvencom nukleotida i može se otkriti pomoću fluorescentnog mikroskopa.
dakle, opšti oblik protokol za podešavanje RIBA može se predstaviti u sljedećem obliku:
1. Priprema histološkog ili citološkog uzorka.
Priprema histološkog uzorka vrši se prema standardna šema: rezanje, označavanje, ožičenje, ugrađivanje, mikrotomija, stavljanje preseka na staklo i deparatiranje. Prilikom pripreme citološkog preparata koriste se posebne otopine za taloženje i centrifugiranje, što omogućava dobivanje koncentrirane suspenzije stanica.
2. Predtretman (ako je potrebno).
Lijek se tretira proteazama kako bi se eliminiralo prisustvo proteina koji ometaju hibridizaciju.
3. Primjena DNK sonde za pripremu i naknadnu denaturaciju.
Da bi se denaturirala sonda i DNK uzorka, oni se tretiraju formamidom i zagrijavaju na temperaturu od oko 85-90°C.
4. Hibridizacija.
Nakon denaturacije, lijek se hladi na određenu temperaturu (37°C u slučaju kliničkim ispitivanjima) i inkubiraju u vlažnoj komori nekoliko sati (trajanje inkubacije je navedeno u svakom posebnom protokolu). Trenutno se za denaturaciju i hibridizaciju koriste automatski hibridizatori.
5. Pranje.
Nakon što je hibridizacija završena, potrebno je isprati nevezane sonde, koje bi inače stvorile pozadinu koja bi otežala procjenu rezultata FISH analize. Za ispiranje se obično koristi otopina koja sadrži natrijum citrat i hlorid (SSC).
6. Protiv bojenje.
Koristeći fluorescentne boje (DAPI - 4,6-diamidin-2-fenilindol; propidijum jodid), sva nuklearna DNK je obojena.
7. Analiza rezultata pomoću fluorescentnog mikroskopa. Izvođenje rutinskih operacija (deparavanje, Preliminarna obrada, pranje) može se automatizirati.
* - Materijal je pripremljen na osnovu informacija iz otvorenih izvora.
Budući da FISH test može otkriti genetske abnormalnosti, izazivanje raka, to je efikasna metoda za dijagnosticiranje određenih vrsta raka. Test se takođe koristi za potvrdu dijagnoze i omogućava dobijanje Dodatne informacije O mogući ishod bolesti i preporučljivosti primjene kemoterapije.
Na primjer, kod pacijenata s rakom dojke, FISH testiranje tkiva uzetog iz biopsije pomaže u određivanju prisutnosti kopija HER2 gena u stanicama.
Ćelije sa kopijama HER2 gena imaju velika količina HER2 receptori, koji primaju signale koji stimulišu rast ćelija raka u dojci. Stoga je za pacijente sa kopijama HER2 gena preporučljivo koristiti Herceptin (trastuzumab), sredstvo koje inhibira sposobnost HER2 receptora da primaju signale.
Zbog visoke cijene i relativne nedostupnosti FISH testa, češće se koristi drugi test za otkrivanje raka dojke, imunohistohotomija (IHC).
U medicinskim krugovima postoji debata o visokoj efikasnosti FISH testa u poređenju sa standardnim testovima. Međutim, hvala tehnički napredak FISH testiranje postaje sve jeftinije i dostupnije u različitim kliničkim okruženjima.
Kako funkcioniše FISH test?
Prilikom izvođenja FISH testa na uzorku tkiva pacijenta, koriste se fluorescentne oznake koje se vezuju samo za određene regije hromozoma. Zatim se pomoću fluorescentnog mikroskopa određuju regije hromozoma za koje su vezane fluorescentne sonde i prisutnost moguća odstupanja, provocirajući razvoj raka.
Sljedeće abnormalnosti se mogu naći u ćelijama raka:
- translokacija - prijenos dijela hromozoma na novu poziciju na istom ili drugom hromozomu;
- inverzija - okretanje dijela hromozoma za 180 stepeni uz održavanje veze sa samim hromozomom;
- delecija - gubitak dijela hromozoma;
- duplikacija je udvostručenje dijela hromozoma, što dovodi do viška kopija gena u ćeliji.
Translokacije pomažu u dijagnosticiranju nekih vrsta leukemije, limfoma i sarkoma. Prisustvo duplikacije u ćelijama raka dojke pomaže doktoru da odabere optimalni tretman.
Prednost FISH testa u odnosu na standardne citogenetske testove (koji ispituju genetski sastav ćelija) je u tome što može otkriti čak i najmanje genetske promjene koje se ne mogu vidjeti konvencionalnim mikroskopom.
Za druge bitna razlika FISH test omogućava da se provede na stanicama koje se još nisu počele aktivno razvijati. Ostali testovi se rade na ćelijama tek nakon što su dvije sedmice uzgajane u laboratoriji, tako da cijeli proces može potrajati i do tri sedmice, s tim da se rezultati FISH testa znaju za nekoliko dana.
Primjeri FISH testa za dijagnozu raka
Iako se FISH test najčešće koristi za analizu genetskih abnormalnosti kod raka dojke, on također pomaže da se dobije važna informacija o drugim vrstama raka.
Na primjer, prilikom dijagnosticiranja raka Bešika FISH test ćelija urina daje preciznije rezultate od testova za abnormalne ćelije. Osim toga, omogućava vam da otkrijete recidiv raka mokraćne bešike 3-6 mjeseci ranije.
FISH test također pomaže u otkrivanju hromozomskih abnormalnosti kod leukemije, uključujući ćelije koje ukazuju na agresivni oblik kronične limfocitne leukemije (CLL). Pacijenti s agresivnim oblicima CLL mogu zahtijevati hitno liječenje, dok manje agresivni oblici mogu zahtijevati opservaciju.
Kontroverza FISH testa
Ne slažu se svi stručnjaci da je FISH test najviše tačna analiza za dijagnozu karcinoma osjetljivih na Herceptin.
Naučnici sa Instituta Mayo u Irskoj su 2010. izvijestili da je jeftiniji IHC test bio gotovo jednako efikasan kao i FISH test za određivanje osjetljivosti na herceptin.
Drugi stručnjaci su kritizirali FISH test zbog neuspjeha u otkrivanju malih mutacija, kao što su mala brisanja, umetanja i tačkastih mutacija, te zbog ignorisanja nekih inverzija.
Poboljšanje FISH testa
Uprkos činjenici da FISH test tehnologija još ne dozvoljava analizu svih hromozomskih regiona, ona se stalno razvija u tom pravcu.
Na primjer, 2007. godine kanadski naučnici su najavili razvoj čipa veličine mikroskopskog stakalca koji bi omogućio da se FISH testiranje provede pomoću uređaja koji stane u dlan.
Ovaj poboljšani test, nazvan FISH test na čipu, pružit će rezultate u roku od jednog dana i koštat će manje od ostalih testova.
Rak dojke - opasna bolest, koji prema statistici zauzima prvo mjesto među oboljenjima od raka kod žena. Rizik od razvoja ove bolesti se povećava kod svih žena starijih od 40 godina i može biti posljedica nekoliko drugih faktora. Među najvećim vjerovatnih uzroka pojava raka dojke uključuje gojaznost, genetsku ili nasljedna predispozicija, rani početak menstruacije i kasni završetak, hormonska ili zračna terapija.
Osim toga, povećava se rizik od morbiditeta neporođajne žene i žene koje su već imale rak. Muškarci takođe mogu dobiti rak dojke.
Vrste i metode dijagnoze
Prva faza dijagnosticiranja raka dojke je rutinski pregled kod mamologa. Žene starije od 40 godina treba da se podvrgnu takvim pregledima najmanje jednom u dvije godine. Liječnik vrši vizualni pregled, palpaciju i mamografiju mliječnih žlijezda. Vizualni znakovi razvoja bolesti mogu uključivati:
opće informacije
Rendgen dojke (mamografija) vam omogućava da utvrdite prisustvo, veličinu i lokaciju tumora. Kako bi se povećala točnost dobivenih rezultata, koristi se tehnologija ubrizgavanja kontrastno sredstvo. Ako je tumor već otkriven, tada se koristi metoda pneumocistografije - uklanjanje tumorske tekućine i uvođenje zraka u šupljinu. Ako prisutnost tumora nije navedena, tada se koristi duktografija - uvođenje kontrastnog sredstva u mliječne kanale.
Ove metode vam omogućavaju da vizualizirate prisutnost formacija u tkivu dojke.
Ukoliko prisustvo tumora postane očito i na mamografiji, pacijentkinja se daje uput za niz dijagnostičkih mjera:
Pomoću ultrazvuka, liječnik može razlikovati tumor od ciste i razjasniti lokaciju formacije. Nakon toga se iz njega uzima uzorak tkiva za biopsiju. Biopsija vam omogućava da saznate vrstu tumora: benigni ili maligni, a također i utvrdite je li tumor ovisan o hormonima. Ove informacije omogućavaju doktoru da odluči o strategiji liječenja, ali ne omogućava uvijek određivanje faze. Često, čak i sa svim potrebnim dijagnostičke aktivnosti može se utvrditi tek nakon operacije.
Mehanizam histoloških studija
Biopsija tkiva se radi i prije i nakon operacije. Postupak se provodi nakon što se razjasni lokalizacija formacije.
Biopsija je proces odstranjivanja komada tkiva, a njeno proučavanje se zove “ histološki pregled"ili jednostavno "histologija".
Medicinski radnik posebnom iglom uklanja malu količinu tkiva iz tumora ili se tumor koji je već uklonjen iz tijela pacijenta šalje na histološki pregled. Zatim se fragment tkiva posebno boji i obrađuje kako bi se povećao kontrast i olakšalo proučavanje. Specijalista pregleda presjek pomoću mikroskopa i daje mišljenje o kvaliteti formiranja tumora. Mnogo toga u ovoj studiji zavisi od pažnje i kvalifikacije laboratorijskog tehničara koji daje zaključak.
Slična studija je imunohistohemija. Općenito se može nazvati i „histologijom“, jer metoda se zasniva na proučavanju tkiva, ali je imunohistohemija naprednija metoda analize. U ovoj studiji, tkivo je obojeno i posebnim reagensima, koji ne samo da pojačavaju vizualni kontrast, već se na poseban način kombinuju („označavaju“) s antitijelima, što omogućava razjašnjavanje više karakteristika tumora. U ovom slučaju, reakcija se odvija mnogo brže, što vam omogućava da brzo dobijete rezultate analize.
Imunohistohemija omogućava ne samo da se razjasni tip tumora, već i da se planira strategija lečenja pacijenata na osnovu identifikovanja osetljivosti tumorskog tkiva na razne vrste terapeutski efekti. Osim toga, ova studija je maksimalno automatizirana, što nam omogućava da minimiziramo vjerojatnost dijagnostičke greške zbog ljudskog faktora.
Postoje također savremenim merama dijagnostika koja vam omogućava da otkrijete prisustvo tumora u tijelu: ovo je spektralni test krvi, imunološka (biohemijska) analiza, FISH test tumorskog tkiva. Genetski test krvi omogućava svakoj ženi da potvrdi da li ima ili nema preduslove za rak dojke. CT i MRI omogućavaju precizno određivanje lokacije tumora i praćenje dinamike njegovog razvoja, procjenjujući strukturu tumora.
Kako otkriti rak pomoću krvne pretrage?
Test krvi obično prepisuje ljekar nakon ultrazvučnog pregleda. Postoje situacije kada pacijent samoinicijativno daruje krv za markere ili genetska analiza da identifikujete svoju predispoziciju za rak dojke. U nekim slučajevima opšta analiza krv može biti razlog za kontaktiranje onkološke klinike (zajedno s palpacijom kvržice ili vizualnim znacima raka).
Biohemijska analiza
Krv kao materijal za istraživanje omogućava provođenje sljedećih dijagnostičkih mjera:
Pritom se samo prve dvije analize mogu nazvati specijaliziranim metodama za određivanje karcinoma, od kojih je druga više preventivna nego operativna mjera. Druge dvije krvne pretrage rade se uglavnom prije operacije kako bi se utvrdilo stanje tijela i obim procesa. Međutim, kao što je već spomenuto, ako se osjeti kvržica u grudima, a opći test krvi pokaže više od dva negativna dijagnostička koeficijenta, to je razlog da se obratite specijalistu. Negativni koeficijenti su pokazatelji izvan norme u određenim parametrima sastava krvi.
Biohemijski test krvi može otkriti prisustvo antitijela na tumorske stanice. Takva tijela se nazivaju tumorski markeri. Broj i vrsta tumorskih markera zavise od specifičnosti (lokacije) tumora raka i faze njegovog razvoja. Tumorski markeri uključuju:
U slučaju karcinoma dojke, ljekara će prvenstveno zanimati prisustvo tumorskog markera CA-15-3, jer njegovo prisustvo u krvi jasno ukazuje na rak dojke. Dekodiranje rezultata u prosjeku traje jedan dan. Biohemijska analiza se radi nekoliko puta tokom bolesti. Krv se za to uzima iz vene u prvoj polovini dana na prazan želudac. Dvije sedmice prije testa pacijent prestaje uzimati sve lijekovi(potvrđuje se kod ljekara). Dva dana prije davanja krvi ne treba piti alkohol, masnu ili prženu hranu.
Sat vremena prije zahvata ne smijete pušiti i preporučljivo je smanjiti emocionalni stres. Krv na biohemijske analize Obično se ne uzimaju odmah nakon zračenja i fizioterapeutskog tretmana.
Određivanje genetskih faktora
Prije nego što govorimo o genetskom testiranju krvi, vrijedno je naglasiti razliku između pojmova "genetski" i "nasljedni". Genetski faktor Pojava raka je širi pojam koji podrazumijeva ne samo prisustvo srodnika oboljelih od raka dojke, već i specifičnu mutaciju gena koja povećava rizik od ove bolesti.
Nasljednost implicira potencijalni rizik od raka dojke na osnovu porodične anamneze. Istovremeno, ne samo žene, već i muškarci mogu primiti mutantni gen, ali se njegov nosilac neće nužno razboljeti.
Svaka žena može da se podvrgne genetskom testiranju. Ovo se posebno preporučuje onima čiji su direktni srodnici imali rak dojke. Prije davanja krvi za analizu, pacijent treba razgovarati sa specijalistom iz područja genetike, koji će objasniti nijanse dešifriranja rezultata. Posebna obuka Pacijent nije dužan to učiniti prije davanja krvi.
U slučaju pozitivnog rezultata na mutaciju BRCA gena, ali u nedostatku druge alarmantnih simptoma, nema potrebe za panikom. Ženama s mutacijama ovih gena može se savjetovati da se podvrgavaju redovnom samopregledu i fizičkim pregledima kao preventivnim mjerama. Nakon 40 godina, ima smisla razmišljati o uklanjanju jajnika i grudi, ženama mlađi uzrast koji ne planiraju da imaju decu u budućnosti, ponekad se preporučuje da uzimaju kontracepcija. Odluka o ovim mjerama u potpunosti leži na plećima same žene i zahtijeva promišljen pristup i konsultacije sa ljekarima.
Najnovije dijagnostičke metode
Spektralni test krvi otkriva prisustvo tumora u tijelu s vjerovatnoćom do 93%. Ovo je relativno jeftina dijagnostička metoda, koja se zasniva na zračenju krvnog seruma infracrvenim spektrom i analizi njegovog molekularnog sastava.
Zaključak o spektralnoj analizi krvi daje se po principu „prisutnost-odsutnost“ i ima za cilj identifikaciju većine vrsta malignih tumora. Ovim testom se takođe može utvrditi stadijum razvoja raka dojke. Rezultati se dešifruju u laboratoriji i ne zahtevaju dodatno mišljenje lekara.
Da biste dali krv za spektralnu analizu, potrebno je prestati uzimati lijekove 2 mjeseca prije zahvata. Od trenutka rendgenskog ili drugog zračenja, kao i kemoterapije, moraju proći najmanje 3 mjeseca. Osim toga, žena ne smije biti trudna ili imati menstruaciju u vrijeme uzimanja krvi. Uzimanje krvi se vrši na prazan želudac u prvoj polovini dana. Spektralni test krvi traje u prosjeku 12 radnih dana.
Jedan od najnovije metode Dijagnoza raka je takozvani “fiš test” (FISH, fluorescentna hibridizacija). O njegovoj djelotvornosti se još uvijek raspravlja, a glavno pitanje njegove izvodljivosti je skupa procedura istraživanja. Suština metode je označavanje ćelijskih fragmenata fluorescentnim sastavom i zatim mikroskopski pregledćelije. Na osnovu toga s kojim su dijelovima genetskog materijala povezani označeni fragmenti, može se razumjeti da li pacijent ima predispoziciju za rak i koje metode liječenja će biti relevantne u konkretnom slučaju.
FISH test ne zahtijeva potpuno zrele ćelije, tako da je mnogo brži za izvođenje od drugih laboratorijskih testova. Osim toga, FISH metoda vam omogućava jasnije promatranje genetskih oštećenja, što je nemoguće učiniti drugim vrstama analiza. FISH test se najčešće koristi za otkrivanje raka dojke, ali radi i za otkrivanje nekoliko drugih vrsta raka.
Nedostaci FISH testa uključuju, pored njegove visoke cijene, nemogućnost rada na nekim regijama hromozoma zbog specifičnosti oznaka. Osim toga, FISH test zanemaruje neke vrste mutacija i kvarova u genetskom kodu, što može biti važan propust u dijagnozi. Komparativne studije FISH sa jeftinijim IHC testom nije pokazao značajnu korist u određivanju osjetljivosti ćelija raka na Herceptin. Međutim, FISH test za ovog trenutka je najbrži među visokoprecizne metode dijagnoza raka.
Moderna metoda citogenetske analize koja omogućava određivanje kvalitativnih i kvantitativnih promjena u hromozomima (uključujući translokacije i mikrodelecije) i koristi se za diferencijalna dijagnoza maligne bolesti krvi i solidnih tumora.
Sinonimi ruski
Fluorescentna in situ hibridizacija
FISH analiza
engleski sinonimi
Fluorescencija in-situ hibridizacija
Metoda istraživanja
Fluorescentna in situ hibridizacija.
Koji se biomaterijal može koristiti za istraživanje?
Uzorak tkiva, uzorak tkiva u parafinskom bloku.
Kako se pravilno pripremiti za istraživanje?
Nije potrebna priprema.
Opće informacije o studiji
Fluorescentna in situ hibridizacija (FISH, od engleskog fluorescence in- situ hibridizacija) je jedan od naj savremenim metodama dijagnoza hromozomskih abnormalnosti. Zasniva se na upotrebi fluorescentno obeleženih DNK sondi. DNK sonde su posebno sintetizirani fragmenti DNK, čija je sekvenca komplementarna sekvenci DNK aberantnih hromozoma koji se proučavaju. Dakle, DNK testovi se razlikuju po sastavu: različiti, specifični DNK testovi se koriste za otkrivanje različitih hromozomskih abnormalnosti. DNK sonde se također razlikuju po veličini: neke mogu biti usmjerene na cijeli kromosom, druge na određeni lokus.
Tokom procesa hibridizacije, ako su aberantni hromozomi prisutni u uzorku koji se proučava, oni se vezuju za DNK sondu, koja se, kada se pregleda pomoću fluorescentnog mikroskopa, određuje kao fluorescentni signal ( pozitivan rezultat FISH test). U odsustvu aberantnih hromozoma, nevezane DNK sonde se „ispiru“ tokom reakcije, što se, kada se pregleda pomoću fluorescentnog mikroskopa, definiše kao odsustvo fluorescentnog signala (negativan rezultat FISH testa). Metoda vam omogućava da procijenite ne samo prisutnost fluorescentnog signala, već i njegov intenzitet i lokalizaciju. Dakle, FISH test nije samo kvalitativna, već i kvantitativna metoda.
FISH test ima niz prednosti u odnosu na druge citogenetske metode. Prije svega, FISH istraživanje se može primijeniti i na metafazna i interfazna jezgra, odnosno na ćelije koje se ne dijele. Ovo je glavna prednost FISH-a u odnosu na klasičnim načinima kariotipizacija (na primjer, bojanje hromozoma Romanowsky-Giemsa), koja se primjenjuje samo na metafazna jezgra. Ovo čini istraživanje FISH više precizna metoda za određivanje hromozomskih abnormalnosti u tkivima sa niskom proliferativnom aktivnošću, uključujući solidne tumore.
Budući da FISH test koristi stabilnu DNK interfaznih jezgara, za istraživanje se može koristiti širok spektar biomaterijala - aspirati finog ugla aspiraciona biopsija, brisevi, aspiracije koštana srž, uzorci biopsije i, što je važno, očuvani fragmenti tkiva, kao što su histološki blokovi. Na primjer, FISH test se može uspješno izvesti na ponovljenim uzorcima dobijenim iz histološkog bloka biopsije dojke kada se potvrđuje dijagnoza adenokarcinoma dojke i potreba za određivanjem HER2/neu statusa tumora. Posebno treba naglasiti da se u ovom trenutku FISH studija preporučuje kao potvrdni test kada se dobije neodređeni rezultat imunohistohemijske studije tumora na tumor marker HER2/neu (IHC 2+).
Još jedna prednost FISH-a je njegova sposobnost detekcije mikrodelecija koje nisu otkrivene klasičnom kariotipizacijom ili PCR-om. Ovo je od posebnog značaja ako se sumnja na DiGeorgeov sindrom i velokardiofacijalni sindrom.
FISH test ima široku primjenu u diferencijalnoj dijagnozi malignih bolesti, prvenstveno u onkohematologiji. Kromosomske abnormalnosti u kombinaciji sa kliničku sliku i podaci iz imunohistohemijskih studija su osnova za klasifikaciju, određivanje taktike lečenja i prognozu limfo- i mijeloproliferativnih bolesti. Klasični primjeri su hronična mijeloična leukemija – t (9;22), akutna promijelocitna leukemija– t (15;17), hronična limfocitna leukemija– trisomija 12 i dr. Što se tiče solidnih tumora, FISH testiranje se najčešće koristi u dijagnostici raka dojke, raka mokraćne bešike, raka debelog creva, neuroblastoma, retinoblastoma i drugih.
FISH testiranje se također može koristiti u prenatalnoj i preimplantacijskoj dijagnostici.
FISH test se često izvodi u kombinaciji s drugim molekularnim i citogenetskim dijagnostičkim metodama. Rezultat ove studije ocjenjuje se u kombinaciji s rezultatima dodatnih laboratorijskih i instrumentalnih podataka.
Za šta se koristi istraživanje?
- Za diferencijalnu dijagnozu malignih bolesti (krv i čvrsti organi).
Kada je predviđeno učenje?
- Ako sumnjate na prisustvo maligna bolest krvni ili solidni tumori, čija taktika liječenja i prognoza zavise od kromosomskog sastava tumorskog klona.
Šta znače rezultati?
Pozitivan rezultat:
- Prisustvo aberantnih hromozoma u uzorku za testiranje.
Negativan rezultat:
- Odsustvo aberantnih hromozoma u ispitivanom uzorku.
Šta može uticati na rezultat?
- Broj aberantnih hromozoma.
- Imunohistohemijska studija klinički materijal(koristeći 1 antitelo)
- Imunohistohemijska studija kliničkog materijala (koristeći 4 ili više antitijela)
- Određivanje statusa tumora HER2 FISH metoda
- Određivanje statusa HER2 tumora CISH metodom
Ko naručuje studiju?
Onkolog, pedijatar, akušer-ginekolog, genetičar.
Književnost
- Wan TS, Ma ES. Molekularna citogenetika: nezamjenjiv alat za dijagnozu raka. Anticancer Res. 2005 Jul-Aug;25(4):2979-83.
- Kolialexi A, Tsangaris GT, Kitsiou S, Kanavakis E, Mavrou A. Uticaj citogenetskih i molekularnih citogenetskih studija na hematološke maligne bolesti. Chang Gung Med J. 2012. mar-apr;35(2):96-110.
- Mühlmann M. Molekularna citogenetika u metafaznim i interfaznim stanicama za rak i genetička istraživanja, dijagnozu i prognozu. Primjena u presjecima tkiva i suspenzijama ćelija. Genet Mol Res. 2002 Jun 30;1(2):117-27.