Mga kalamangan at kahinaan ng pananaliksik ng isda sa oncology. Fluorescence in situ hybridization (FISH)

Ang kanser sa suso (BC) ay isang pangkaraniwang uri ng oncology at, sa kasamaang-palad, wala pang nagagawang paraan ng therapy na nagbibigay ng buong garantiya ng lunas. Samakatuwid, ang pinakamahusay na paraan para sa pasyente ay ang pag-iwas at napapanahong pagsusuri cancer sa suso. Isda - pagsusuri para sa kanser sa suso ay ang pinaka-modernong paraan ng pananaliksik na nagbibigay-daan sa iyo upang idirekta ang paggamot ng pasyente sa pinakatamang landas.

Sa kabila ng malawak na karanasang naipon sa pag-aaral at paggamot sa sakit na ito, hindi pa rin maipahiwatig ng gamot panlabas na mga kadahilanan, nagiging sanhi ng malignant na tumor mammary gland. Wala sa mga kilalang carcinogens ang maaaring mapagkakatiwalaang nauugnay sa paglitaw ng sakit na ito. Mga modernong paraan Ang mga diagnostic sa pangkalahatan ay nagbibigay ng magagandang resulta at nagbibigay-daan upang matukoy nang may mataas na katumpakan ang pagkakaroon o kawalan ng sakit at ang yugto ng pag-unlad. Gayunpaman, hindi lahat ng mga ito ay nagbibigay ng komprehensibong impormasyon na nagpapahintulot sa iyo na tumpak na magreseta ng paggamot.

  1. Kumpletong bilang ng dugo - sinusuri ang antas ng mga leukocytes, erythrocyte sedimentation rate at hemoglobin. Ang unang dalawang tagapagpahiwatig sa pagtaas ng oncology, ang huli, sa kabaligtaran, ay bumababa. Gayunpaman, ang pagsusuri na ito ay nagpapahintulot sa amin na hatulan lamang ang pagkakaroon ng ilang mga problema sa katawan. Gumawa ng tumpak na diagnosis ng kanser mammary gland» sa tulong nito ay imposible, lalo na sa maagang yugto pag-unlad ng tumor.
  2. Biochemistry - tinutukoy ang antas ng mga enzyme at electrolytes, na ginagawang posible upang hatulan ang pagkakaroon ng metastases. Gayunpaman, ang mga datos na ito ay hindi palaging layunin. Ipinapakita rin ng pag-aaral na ito ang presensya sa dugo ng ilang oncommarker na tumutulong sa pagsubaybay sa presensya ng kanser na tumor at ang deployment nito.
  3. Pinapayagan ka ng spectral analysis na matukoy ang pagkakaroon ng cancer na may posibilidad na higit sa 90%, kabilang ang sa isang maagang yugto.Ang pamamaraan ay batay sa pag-aaral ng dugo sa ilalim ng infrared radiation, na nagbibigay-daan sa iyo upang matukoy ang komposisyon ng molekular nito.
  4. Biopsy - ay ginagawa sa pamamagitan ng pagkuha ng tissue sample mula sa dibdib at karagdagang cytological analysis, na tumutukoy sa presensya mga selula ng kanser at ang kanilang bilang, na nakasalalay sa antas ng pag-unlad ng sakit.
  5. Tinutukoy ng genetic analysis ang predisposition ng pasyente sa pagbuo ng breast cancer.Isinasagawa ito sa pamamagitan ng pag-detect ng ilang gene sa dugo na responsable sa paghahatid ng cancer mula sa henerasyon hanggang sa henerasyon.

Gayunpaman, ang pinakabago at mabisang paraan ang pananaliksik ngayon ay ang tinatawag na FISH (fish) test. Ang pagdadaglat sa pagsasalin mula sa Ingles ay parang "intracellular fluorescent hybridization".

Ang pamamaraan ng pagsusuri ng isda ay medyo bago - ito ay ginamit mula noong 1980. Gayunpaman, sa kabila ng pagiging kumplikado at mataas na presyo, nagawa niyang kumita mga positibong pagsusuri parehong mga doktor at mga pasyente na, salamat sa kanya, matagumpay na naalis ang cancer.

Para sa paglaki ng mga selula ng suso sa katawan ng tao responsable para sa isang gene na tinatawag na HER2. Ang pangalang isinalin mula sa Ingles ay nangangahulugang Human Estrogen Receptor - 2. Karaniwan, ang mga receptor ng gene na ito ay gumagawa ng HER2, isang protina na kumokontrol sa paghahati ng mga selula ng glandula. Ang isang cancerous na tumor (karaniwan ay isang carcinoma) sa simula nito ay "niloloko" sa gene na ito, na pinipilit itong lumaki ng karagdagang tissue na gagamitin ng tumor para sa pag-unlad nito. Lumilitaw ang anomalyang ito sa humigit-kumulang 30% ng mga kaso at nailalarawan sa pamamagitan ng terminong "amplification".

Kaya, ang katawan mismo ng pasyente ay nakakatulong na bumuo ng oncology. Kung ang prosesong ito ay hindi tumigil, kung gayon kahit na ang pinaka-moderno at makapangyarihang paraan ng paggamot ay maaaring hindi makatulong sa pasyente.

Ang pag-aaral ng amplification ng HER2 gene ay karaniwang isinasagawa sa dalawang yugto:

  • IHC (immunohistochemical test);
  • direkta FISH - pagsusuri (fluorescent hybridization).

Sa ilalim lokal na kawalan ng pakiramdam Ang pasyente ay sumasailalim sa isang biopsy - pagkuha ng mga sample ng tissue na ipinadala sa isang espesyal na laboratoryo.

Una, ang immunohistochemistry ay karaniwang ginagawa - isang mikroskopikong pagsusuri ng isang sample ng tissue ng isang kanser na tumor. Tinutukoy nito ang pangunahing presensya ng HER2 gene sa tissue ng tumor. Ang pag-aaral na ito ay mas mura kaysa sa fish test, at mas madali at mas mabilis na gawin. Gayunpaman, hindi ito nagbibigay ng ganoong tumpak na impormasyon. Ang resulta ay tinutukoy sa mga numero mula zero hanggang tatlong puntos. Kung ang resulta ay mas mababa sa o katumbas ng isa, ang HER2 gene ay wala sa tumor at hindi na kailangan ng karagdagang pananaliksik. Dalawa hanggang tatlong puntos estado ng hangganan, higit sa tatlong - malignant formation ay nasa proseso ng paglago at ito ay kinakailangan upang magpatuloy sa ikalawang yugto ng diagnosis.

Ang isang pag-aaral ng isda para sa kanser sa suso ay isinasagawa tulad ng sumusunod: mga elemento ng mga molekula ng DNA (deoxyribonucleic acid) na may label na espesyal na tina. Ang mga marker na ito ay ipinapasok sa mga molekula ng DNA ng pasyente at tinutukoy kung ang HER2 amplification ay nagaganap at sa anong antas. Ang pagsusuri ay isinasagawa sa totoong oras, inihambing ng doktor ang rate ng paghahati ng gene sa site ng di-umano'y tumor na may rate ng paghahati ng karaniwang lugar ng dibdib.

Sa kanser sa suso, ang pag-aaral ng FISH ay maaaring magbigay ng mga sumusunod na resulta:

  • positibo ang reaksyon - ang rate ng paghahati ng HER2 gene sa tissue ng tumor ay lumampas sa normal na dalawang beses o higit pa, kung saan kinakailangan ang karagdagang therapy;
  • ang reaksyon ay negatibo - ang HER2 ay hindi kasangkot sa proseso ng paghahati ng selula ng kanser at, kung may tumor pa rin, ang gene na ito ay hindi magpapagana sa pag-unlad nito.

Kaya, ginagawang posible ng pagsusuri na matukoy ang maling pag-uugali ng HER2 gene at itama ang paggamot sa pamamagitan ng paglalapat sa parallel therapy na naglalayong sugpuin ang gene na ito. Sa kasalukuyan, ang gamot na Herceptin ay ginagamit para dito.

Kung ang pagsusuri sa isda ay hindi ginawa sa isang napapanahong paraan o kung ang mga resulta ay hindi binibigyang pansin, ang doktor ay walang data sa pag-uugali ng HER2. Sa kasong ito, ang paggamot ay inireseta nang hindi isinasaalang-alang ang posibleng agresibong aktibidad ng gene na ito. Malamang, ang naturang therapy ay hindi magdadala ng mga resulta - ang tumor ay patuloy na agresibong bubuo.

Bilang karagdagan sa itaas, ang pagsubaybay sa pag-uugali ng HER2 gene ay nagbibigay sa mga oncologist ng pag-unawa sa antas ng pagiging agresibo ng tumor at ang kakayahang mahulaan ang bilis ng paglaki at pagkalat nito. Ito ay gumaganap nang husto mahalagang papel sa pagdidisenyo ng pangangalaga sa pasyente. Tukuyin kung kailangan ng appointment mabigat na paggamot(halimbawa, radiation o chemistry), o magiging sapat na ito therapy sa hormone, may katuturan ba interbensyon sa kirurhiko o ito ay opsyonal.

Mga kalamangan at kahinaan ng pagsusuri ng isda

Tulad ng iba pang paraan ng diagnostic, ang FISH research ay may mga kalamangan at kahinaan nito.

Gayunpaman, sa kabila ng ilang pag-aalinlangan, na posibleng nauugnay sa pagiging bago ng pamamaraang ito, mayroon itong hindi maikakaila na mga pakinabang:
  1. Ang pag-aaral ay isinasagawa nang mabilis - ang resulta ay handa na sa loob ng ilang araw, habang ang iba pang mga diagnostic na pamamaraan ay tumatagal ng hanggang ilang linggo. Ang sandaling ito ay napakahalaga sa paglaban sa oncology.
  2. Bilang karagdagan sa pag-aaral ng kanser sa suso, pinapayagan ka ng pagsusuri na malaman ang predisposisyon ng isang pasyente sa oncology ng anumang organ. lukab ng tiyan. Ang pasyente ay binibigyan ng isang detalyadong ulat, na ginagabayan kung saan maaari siyang sumailalim sa karagdagang mga pagsusuri para sa pag-iwas. posibleng pag-unlad kanser.
  3. Dahil sa mga detalye ng pagsusuri ng isda, maaari nitong tuklasin ang pinakamaliit na genetic anomalya na hindi masuri ng ibang mga pamamaraan.
  4. Hindi tulad ng ibang uri ng pananaliksik, ligtas ang fish test para sa pasyente. Bilang karagdagan sa isang biopsy, hindi ito nangangailangan ng anumang karagdagang traumatikong epekto.

Itinuturing ng ilang oncologist na kontrobersyal ang bisa ng fish test. Ang mga ito ay batay sa mga pag-aaral na hindi nagpakita ng makabuluhang bentahe ng pamamaraang ito sa mas murang pag-aaral ng IHC.

Gayundin, ang mga minus ng pagsubok sa isda ay kinabibilangan ng mga sumusunod na kadahilanan:
  • mataas na gastos ng pananaliksik;
  • dahil sa ang katunayan na ang mga marker na ipinakilala sa DNA ay medyo tiyak, hindi sila maaaring gamitin sa ilang bahagi ng mga chromosome;
  • ang pagsusuri ay hindi nagbubunyag ng lahat ng genetic na pinsala, na maaaring humantong sa mga diagnostic error.

Sa pangkalahatan, sa kabila ng pagpuna, ang pagsusuri ng isda ay ang pinakamabilis at pinakatumpak sa mga pamamaraan para sa pag-diagnose ng breast carcinoma. Mahalaga rin na pinapayagan nitong mahulaan ang pag-unlad ng ilang iba pang uri ng oncology.

Ang anumang kanser ay pinakamadaling gamutin maagang yugto pag-unlad. Sa kasamaang palad, balintuna, karamihan sa kilalang species Ang mga malignant na tumor ay napakahirap masuri sa mga unang yugto. Bilang karagdagan, marami sa mga diagnostic na pamamaraan na ginamit ay tumatagal ng oras at hindi nagbibigay ng isang ganap na layunin na larawan. Ang pagsusuri ng isda ay hindi lamang nagbibigay ng pinakatumpak na larawan ng estado ng tumor, ngunit nagbibigay-daan din sa iyo na i-save ang pasyente mula sa mapanirang paraan ng paggamot para sa katawan (halimbawa, chemotherapy), dahil ang antas ng pagiging agresibo ng tumor at, nang naaayon, ang Natutukoy ang posibilidad ng metastases.

paraan ng hybridization sa lugar ng kinaroroonan* (sa lugar, lat.) ay batay sa kakayahan ng DNA o RNA na bumuo ng mga matatag na hybrid molecule na may DNA / RNA probes nang direkta sa paghahanda ng mga fixed chromosome at interphase nuclei. Gamit ang pamamaraang ito, matutukoy mo ang eksaktong lokasyon ng halos anumang sequence ng DNA o RNA nang direkta sa cell, cell nucleus o sa mga chromosome.

Para sa hybridization. sa lugar ng kinaroroonan angkop na cytological o histological na paghahanda ng mga selula ng anumang mga tisyu o organo, na inihanda ayon sa mga karaniwang pamamaraan. Sa isang klinikal na cytogenetic laboratoryo, ginagamit ang mga paghahanda ng mga kulturang lymphocytes. peripheral na dugo, mga cell ng cytotrophoblast ng chorionic epithelium, kultura at hindi nalilinang na mga selula ng amniotic fluid, iba't ibang mga tisyu mula sa materyal ng pagpapalaglag, pati na rin ang mga pahid ng buccal epithelial cells at dugo.

paraan ng hybridization sa lugar ng kinaroroonan ay partikular na kahalagahan para sa mga praktikal na cytogenetics dahil sa pagbuo ng isang non-isotopic na variant batay sa paggamit ng mga probes na may label na non-radioactive modified nucleotides. Ang mga non-isotopic na variant ng hybridization sa mga paghahanda (lalo na ang mga fluorescent) ay may isang bilang ng mga pakinabang kumpara sa mga isotopic: mataas na resolution, na katumbas ng resolution ng isang mikroskopyo (0.1 - 0.2 μm), hindi na kailangan para sa statistical processing ng mga resulta, bilis at kaligtasan para sa mga mananaliksik sa kalusugan

Bilang karagdagan, ang kumbinasyon ng iba't ibang binagong mga sample na nakitang ginagamit iba't ibang sistema detection, ay nagbibigay-daan sa iyo upang sabay na matukoy ang lokasyon ng dalawa o higit pang mga sequence ng DNA sa isang cell o sa isang metaphase plate. At ang paggamit ng mga paulit-ulit na sequence na may label na fluorochromes bilang DNA probes ay binabawasan ang oras ng pamamaraan sa 7-9 na oras (classic non-isotope hybridization ay tumatagal ng dalawang araw, isotope variants mula sa isang linggo hanggang isang buwan), na kung saan ay lalong mahalaga para sa prenatal diagnosis. Paggamit paraan ng ISDA sa cytogenetic diagnostics ay nagbibigay-daan upang makilala ang istruktura chromosomal rearrangements, itatag ang katangian ng mga marker chromosome, pag-aralan ang mga numerical na paglabag ng chromosome set, tulad ng sa metaphase chromosome, at sa interphase nuclei.

Prinsipyo ng pamamaraan ng FISH

Sa kaibuturan paraan ng ISDA namamalagi ang reaksyon ng hybridization sa pagitan ng isang artipisyal na nilikhang DNA probe at ang komplementaryong nucleotide sequence nito nuclear DNA. Ang molekula ng DNA ay binubuo ng dalawang helical nucleotide chain, at ang hybridization ay posible lamang kung magkahiwalay ang mga chain. Upang idiskonekta ang mga chain ng DNA nucleotide, ginagamit ang denaturation (para sa kasunod na hybridization, parehong ang DNA sa nuclei ng sample na pinag-aaralan at ang DNA probe mismo ay dapat na denatured). Pagkatapos ng denaturation, ang DNA probe ay nag-hybrid sa komplementaryong nucleotide sequence nito at maaaring matukoy gamit ang isang fluorescent microscope.

kaya, pangkalahatang anyo protocol para sa pagtatakda ISDA maaaring ipakita sa sumusunod na anyo:

1. Paghahanda ng isang histological o cytological na paghahanda.
Ang paghahanda ng isang histological na paghahanda ay isinasagawa ayon sa karaniwang pamamaraan: pagputol, pagmamarka, mga kable, pagbuhos, microtomy, paglalagay ng slice sa isang glass slide at deparaffinization. Kapag naghahanda ng isang cytological na paghahanda, ang mga espesyal na precipitating solution at centrifugation ay ginagamit, na ginagawang posible upang makakuha ng concentrated cell suspension.

2. Pre-treatment (kung kinakailangan).
Ang paghahanda ay pinoproseso ng mga protease upang maalis ang pagkakaroon ng mga protina na humahadlang sa hybridization.

3. Paglalapat ng DNA probe sa paghahanda at kasunod na denaturation.
Upang ma-denature ang probe at sample ng DNA, ginagamot sila ng formamide at pinainit sa temperatura na humigit-kumulang 85-90°C.

4. Hybridization.
Pagkatapos ng denaturation, ang gamot ay pinalamig sa isang tiyak na temperatura (37°C sa kaso Klinikal na pananaliksik) at incubated sa isang mahalumigmig na silid sa loob ng ilang oras (ang tagal ng incubation ay ipinahiwatig sa bawat tiyak na protocol). Sa kasalukuyan, ang mga awtomatikong hybridizer ay ginagamit para sa denaturation at hybridization.

5. Paglalaba.
Kapag nakumpleto na ang hybridization, ang mga hindi nakatali na probe ay dapat na hugasan, na kung hindi man ay lilikha ng background na magpapahirap sa pagsusuri ng mga resulta ng FISH. Para sa pag-flush, isang solusyon na naglalaman ng citrate at sodium chloride (SSC) ay karaniwang ginagamit.

6. Counter-staining.
Sa tulong ng mga fluorescent dyes (DAPI - 4,6-diamidin-2-phenylindole; propidium iodide), lahat ng nuclear DNA ay nabahiran.

7. Pagsusuri ng mga resulta gamit ang isang fluorescent microscope. Pagsasagawa ng mga nakagawiang operasyon (deparaffinization, Paunang pagproseso, paghuhugas) ay maaaring awtomatiko.

* - Ang materyal ay inihanda batay sa impormasyon mula sa mga bukas na mapagkukunan.

Dahil ang FISH test ay maaaring makakita ng mga genetic abnormalities, nagdudulot ng kanser, ito ay isang mabisang paraan para sa pag-diagnose ng ilang uri ng kanser. Ginagamit din ang pagsusulit upang kumpirmahin ang diagnosis at pinapayagan kang makakuha Karagdagang impormasyon O posibleng kahihinatnan sakit at ang advisability ng paggamit ng chemotherapy.

Halimbawa, sa mga pasyenteng may kanser sa suso, ang FISH test ng tissue na kinuha sa panahon ng biopsy ay nakakatulong na matukoy ang pagkakaroon ng mga kopya ng HER2 gene sa mga selula.

Ang mga cell na may mga kopya ng HER2 gene ay mayroon malaking dami HER2 receptors, na tumatanggap ng mga signal na nagpapasigla sa paglaki ng mga selula ng kanser sa suso. Samakatuwid, para sa mga pasyente na may mga kopya ng gene ng HER2, ipinapayong gumamit ng Herceptin (trastuzumab), isang gamot na pumipigil sa kakayahan ng mga receptor ng HER2 na makatanggap ng mga signal.

Dahil sa mataas na gastos at kamag-anak na hindi naa-access ng FISH test, isa pang pagsubok para sa pag-detect ng breast cancer, ang immunohistochemistry (IHC), ay mas karaniwang ginagamit.

Mayroong kontrobersya sa mga medikal na lupon tungkol sa mataas na pagganap ng pagsubok sa FISH kumpara sa mga karaniwang pagsusuri. Gayunpaman, salamat sa teknikal na pag-unlad Ang FISH test ay nagiging mas mura at mas naa-access sa iba't ibang klinikal na setting.

Paano gumagana ang FISH test

Kapag nagsasagawa ng FISH test sa sample ng tissue ng pasyente, ginagamit ang mga fluorescent na label na nagbubuklod lamang sa ilang mga rehiyon ng chromosome. Pagkatapos, gamit ang isang fluorescent microscope, ang mga rehiyon ng mga chromosome kung saan nakatali ang mga fluorescent probes ay tinutukoy, at ang pagkakaroon ng posibleng mga paglihis pumukaw sa pag-unlad ng kanser.

Ang mga selula ng kanser ay maaaring magpakita ng mga sumusunod na abnormalidad:

  • translocation - ang paglipat ng isang seksyon ng isang chromosome sa isang bagong posisyon sa pareho o isa pang chromosome;
  • inversion - isang pagliko ng isang seksyon ng isang chromosome sa pamamagitan ng 180 degrees habang pinapanatili ang isang koneksyon sa chromosome mismo;
  • pagtanggal - pagkawala ng bahagi ng isang chromosome;
  • pagdoble - pagdodoble ng isang seksyon ng isang chromosome, na humahantong sa isang labis na nilalaman ng mga kopya ng isang gene sa isang cell.

Ang mga pagsasalin ay tumutulong sa pag-diagnose ng ilang uri ng leukemia, lymphoma, at sarcoma. Ang pagkakaroon ng duplikasyon sa mga selula ng kanser sa suso ay tumutulong sa doktor na pumili ng pinakamahusay na paggamot.

Ang bentahe ng FISH test kaysa sa mga karaniwang cytogenetic na pagsusuri (na sumusuri sa genetic na komposisyon ng mga cell) ay na ito ay nakakatuklas ng kahit na ang pinakamaliit na genetic na pagbabago na hindi makikita sa isang conventional microscope.

Iba pa mahalagang pagkakaiba Ang FISH test ay ang posibilidad na maisagawa ito sa mga cell na hindi pa nagsisimulang aktibong bumuo. Ang iba pang mga pagsusuri ay ginagawa lamang sa mga cell pagkatapos na lumaki ang mga ito sa lab sa loob ng dalawang linggo, kaya ang buong proseso ay maaaring tumagal ng hanggang tatlong linggo, kung saan ang mga resulta ng pagsubok sa FISH ay makukuha sa loob ng ilang araw.

Mga halimbawa ng FISH test para sa diagnosis ng cancer

Bagama't ang pagsusulit sa FISH ay kadalasang ginagamit upang pag-aralan ang mga genetic na abnormalidad sa kanser sa suso, nakakatulong din itong makakuha mahalagang impormasyon tungkol sa iba pang uri ng cancer.

Halimbawa, kapag nag-diagnose ng cancer Pantog Ang FISH test para sa mga urine cell ay mas tumpak kaysa sa hindi tipikal na mga cell test. Bilang karagdagan, pinapayagan ka nitong matukoy ang pag-ulit ng kanser sa pantog 3-6 na buwan nang mas maaga.

Nakakatulong din ang FISH test na makita ang mga chromosomal abnormalities sa leukemia, kabilang ang mga cell na nagpapahiwatig ng isang agresibong anyo ng chronic lymphocytic leukemia (CLL). Ang mga pasyente na may isang agresibong anyo ng CLL ay maaaring mangailangan ng agarang paggamot, habang para sa mga hindi gaanong agresibong anyo, ang pagmamasid ay maaaring sapat.

FISH test controversy

Hindi lahat ng eksperto ay sumasang-ayon na ang FISH test ang pinaka tumpak na pagsusuri para sa diagnosis ng mga kanser na madaling kapitan sa Herceptin.

Noong 2010, sinabi ng mga siyentipiko mula sa Mayo Institute (Ireland) na ang mas murang IHC test ay halos kasing epektibo sa pagtukoy ng pagkamaramdamin sa Herceptin bilang ang FISH test.

Pinuna ng iba pang mga eksperto ang FISH test dahil sa hindi pagtukoy ng maliliit na mutasyon gaya ng maliliit na pagtanggal, pagsingit, at point mutations, at para sa pagbabalewala sa ilang inversion.

Pagpapabuti ng pagsubok sa FISH

Sa kabila ng katotohanan na ang teknolohiya ng pagsubok ng FISH ay hindi pa pinapayagan ang pagsusuri sa lahat ng bahagi ng mga kromosom, patuloy itong umuunlad sa direksyong ito.

Halimbawa, noong 2007, inanunsyo ng mga siyentipiko ng Canada ang pagbuo ng isang microscope slide-sized na chip na magpapahintulot sa isang FISH test na maisagawa gamit ang isang device na akma sa iyong palad.

Tinatawag na FISH Test on a Chip, ang pinahusay na pagsubok na ito ay maghahatid ng mga resulta sa isang araw at mas mura kaysa sa iba pang mga pagsubok.

Kanser sa mammary - mapanganib na sakit, na, ayon sa mga istatistika, ay nangunguna sa mga sakit na may kanser sa mga kababaihan. Ang panganib na magkaroon ng sakit na ito ay tumataas sa lahat ng kababaihan na higit sa 40 taong gulang at maaaring dahil sa ilang iba pang mga kadahilanan. Kabilang sa karamihan posibleng dahilan ang mga sanhi ng kanser sa suso ay kinabibilangan ng labis na katabaan, genetic o namamana na predisposisyon, maagang pagsisimula ng regla at huli na pagkumpleto, hormonal o radiation therapy.

Bilang karagdagan, ang panganib ng morbidity ay tumaas sa nulliparous na mga babae at mga babaeng nagkaroon ng cancer. Ang mga lalaki ay maaari ring magkaroon ng kanser sa suso.

Mga uri at pamamaraan ng diagnosis

Ang unang hakbang sa pag-diagnose ng kanser sa suso ay isang regular na pagsusuri ng isang mammologist. Ang mga babaeng higit sa 40 ay dapat magkaroon ng mga pagsusuring ito nang hindi bababa sa isang beses bawat dalawang taon. Ang doktor ay nagsasagawa ng isang visual na pagsusuri, palpation at mammography ng mga glandula ng mammary. Ang mga visual na palatandaan ng pag-unlad ng sakit ay maaaring:

Pangkalahatang Impormasyon

Ang X-ray ng dibdib (mammography) ay nagpapahintulot sa iyo na matukoy ang presensya, laki at lokasyon ng tumor. Upang mapabuti ang katumpakan ng mga resulta na nakuha, ang teknolohiya ng pagpapakilala ahente ng kaibahan. Kung ang tumor ay nakita na, pagkatapos ay ang paraan ng pneumocystography ay ginagamit - ang pag-alis ng tumor fluid at ang pagpapakilala ng hangin sa lukab. Kung ang pagkakaroon ng isang tumor ay hindi tinukoy, pagkatapos ay ginagamit ang ductography - ang pagpapakilala ng isang contrast agent sa mga duct ng gatas.

Ang mga pamamaraan na ito ay nagbibigay-daan sa iyo upang mailarawan ang pagkakaroon ng mga pormasyon sa mga tisyu ng mammary gland.

Kung ang pagkakaroon ng tumor ay makikita rin sa mammography, ang pasyente ay binibigyan ng referral sa isang hanay ng mga diagnostic measure:

Sa ultrasound, maaaring makilala ng doktor ang isang tumor mula sa isang cyst at linawin ang lokalisasyon ng pagbuo. Pagkatapos nito, ang isang sample ng tissue ay kinuha mula dito para sa isang biopsy. Ang isang biopsy ay nagpapahintulot sa iyo na malaman ang uri ng pagbuo: benign o malignant, at din upang matukoy kung ang tumor ay umaasa sa hormone. Ang impormasyong ito ay nagpapahintulot sa doktor na magpasya sa isang diskarte sa paggamot, ngunit hindi palaging ginagawang posible upang matukoy ang yugto. Kadalasan, kahit na sa lahat ng kailangan mga aktibidad sa diagnostic maaari lamang itong matukoy pagkatapos ng operasyon.

Ang mekanismo ng histological studies

Ang isang tissue biopsy ay ginagawa bago at pagkatapos ng operasyon. Ang pamamaraan ay isinasagawa pagkatapos ng paglilinaw ng lokalisasyon ng edukasyon.

Ang biopsy ay ang proseso ng pag-alis ng isang piraso ng tissue, at ang pag-aaral nito ay tinatawag na " pagsusuri sa histological o simpleng "histology".

Ang isang medikal na manggagawa, gamit ang isang espesyal na karayom, ay kumukuha ng isang maliit na halaga ng tissue mula sa neoplasm, o ang tumor na naalis na mula sa katawan ng pasyente ay ipinadala para sa histological examination. Pagkatapos ang fragment ng tissue ay nabahiran at pinoproseso sa isang espesyal na paraan upang madagdagan ang kaibahan at gawing mas madali ang pag-aaral. Ang hiwa ay sinusuri gamit ang isang mikroskopyo ng isang espesyalista at nagbibigay ng konklusyon tungkol sa kalidad ng pagbuo ng tumor. Karamihan sa pag-aaral na ito ay nakasalalay sa pagkaasikaso at mga kwalipikasyon ng katulong sa laboratoryo na nagbibigay ng konklusyon.

Ang isang kaugnay na pag-aaral ay immunohistochemistry. Sa pangkalahatan, maaari rin itong tawaging "histology", dahil. ang pamamaraan ay batay sa pag-aaral ng mga tisyu, ngunit ang immunohistochemistry ay isang mas advanced na paraan ng pagsusuri. Ang tisyu sa pag-aaral na ito ay nabahiran din ng mga espesyal na reagents, na hindi lamang nagpapahusay sa visual na kaibahan, ngunit pinagsama din ang ("label") na may mga antibodies sa isang espesyal na paraan, na ginagawang posible upang tukuyin ang higit pang mga katangian ng neoplasma. Ang reaksyon sa kasong ito ay nangyayari nang mas mabilis, na nagbibigay-daan sa iyo upang mabilis na makuha ang mga resulta ng pagsusuri.

Ang immunohistochemistry ay nagbibigay-daan hindi lamang upang linawin ang uri ng neoplasma, ngunit din upang magplano ng diskarte sa paggamot ng pasyente batay sa pagtuklas ng pagiging sensitibo ng tumor tissue sa iba't ibang uri therapeutic effect. Bilang karagdagan, ang pagsasagawa ng pag-aaral na ito ay awtomatiko hangga't maaari, na nagpapaliit sa posibilidad ng isang diagnostic error dahil sa kadahilanan ng tao.

Meron din modernong mga hakbang diagnostics upang makita ang pagkakaroon ng tumor sa katawan: ito ay isang spectral analysis ng dugo, immunological (biochemical) analysis, FISH-test ng tumor tissue. Ang isang genetic na pagsusuri sa dugo ay nagpapahintulot sa sinumang babae na i-verify ang pagkakaroon o kawalan ng mga kinakailangan para sa paglitaw ng kanser sa suso. Pinapayagan ka ng CT at MRI na tumpak na matukoy ang lokalisasyon ng tumor at subaybayan ang dinamika ng pag-unlad nito, suriin ang istraktura ng neoplasma.

Paano matukoy ang cancer sa pamamagitan ng pagsusuri sa dugo?

Ang pagsusuri sa dugo ay pangunahing inireseta ng isang doktor pagkatapos ng pagsusuri sa ultrasound. May mga sitwasyon kapag ang isang pasyente, sa kanyang sariling inisyatiba, ay nag-donate ng dugo sa mga marker ng bintana o pagsusuri ng genetic upang matukoy kung ikaw ay nasa panganib para sa kanser sa suso. Sa ibang Pagkakataon pangkalahatang pagsusuri ang dugo ay maaaring magsilbing dahilan para makipag-ugnayan sa isang oncology dispensary (kasama ang palpation ng isang selyo o mga visual na senyales ng kanser).

Pagsusuri ng biochemical

Ang dugo bilang isang materyal para sa pananaliksik ay nagbibigay-daan sa mga sumusunod na hakbang sa diagnostic:

Kasabay nito, tanging ang unang dalawang pagsusuri ay maaaring tawaging mga dalubhasang pamamaraan para sa pagtukoy ng kanser, ang pangalawa ay higit pa sa isang panukalang pang-iwas kaysa sa isang pagpapatakbo. Dalawang iba pang pagsusuri sa dugo ang pangunahing isinasagawa bago ang operasyon upang matukoy ang estado ng katawan at ang lawak ng proseso. Gayunpaman, tulad ng nabanggit na, kung ang isang selyo ay naramdaman sa dibdib at sa parehong oras ang isang pangkalahatang pagsusuri sa dugo ay nagpapakita ng higit sa dalawang negatibong diagnostic coefficient, ito ay isang dahilan upang makipag-ugnay sa isang espesyalista. Ang mga negatibong coefficient ay mga tagapagpahiwatig sa labas ng pamantayan sa ilang mga parameter ng komposisyon ng dugo.

Ang isang biochemical na pagsusuri sa dugo ay nagpapakita ng pagkakaroon ng mga antibodies sa mga selula ng tumor. Ang ganitong mga katawan ay tinatawag na mga marker ng tumor. Ang bilang at uri ng mga marker ng tumor ay nakasalalay sa mga detalye (lokalisasyon) ng cancerous na tumor at ang yugto ng pag-unlad nito. Kasama sa mga marker ng tumor ang:


Sa kaso ng kanser sa suso, ang dumadating na manggagamot ay pangunahing interesado sa pagkakaroon ng CA-15-3 tumor marker, dahil ang presensya nito sa dugo ay malinaw na nagpapahiwatig ng isang sakit sa kanser sa suso. Ang pag-decipher ng resulta ay tumatagal ng isang average ng isang araw. Ang pagsusuri ng biochemical ay isinasagawa nang maraming beses sa panahon ng sakit. Ang dugo para sa kanya ay kinuha mula sa isang ugat sa umaga sa isang walang laman na tiyan. Dalawang linggo bago ang pagsusuri, ang pasyente ay huminto sa pagkuha ng lahat mga gamot(tutukoy ng dumadating na manggagamot). Dalawang araw bago mag-donate ng dugo, hindi ka maaaring uminom ng alak, mataba at pritong pagkain.

Isang oras bago ang pamamaraan, hindi ka maaaring manigarilyo at ito ay kanais-nais na bawasan ang emosyonal na stress. Dugo sa pagsusuri ng biochemical kadalasan ay hindi agad sumusuko pagkatapos ng radiation at physiotherapy.

Kahulugan ng genetic factor

Bago pag-usapan ang tungkol sa isang genetic blood test, ang pagkakaiba sa pagitan ng mga konsepto ng "genetic" at "hereditary" ay dapat bigyang-diin. genetic factor ang paglitaw ng kanser ay isang mas malawak na konsepto na nagpapahiwatig hindi lamang ang pagkakaroon ng mga kamag-anak na may kanser sa suso, kundi pati na rin ang isang tiyak na mutation ng gene, dahil sa kung saan ang panganib ng sakit na ito ay tumataas.

Ang namamana na kadahilanan ay nagpapahiwatig ng isang potensyal na panganib ng kanser sa suso batay sa kasaysayan ng pamilya. Kasabay nito, hindi lamang ang mga kababaihan, kundi pati na rin ang mga lalaki ay maaaring makakuha ng mutant gene, ngunit ang carrier nito ay hindi kinakailangang magkasakit.

Ang sinumang babae ay maaaring sumailalim sa isang genetic analysis. Ito ay lalo na inirerekomenda para sa mga may direktang kamag-anak na nagkaroon ng kanser sa suso. Bago ang pamamaraan para sa pagbibigay ng dugo para sa pagsusuri, ang isang espesyalista sa larangan ng genetika ay dapat makipag-usap sa pasyente, na magpapaliwanag ng mga nuances ng pag-decipher ng mga resulta. Espesyal na pagsasanay bago mag-donate ng dugo mula sa pasyente ay hindi kinakailangan.

Sa kaso ng isang positibong resulta ng mutation ng BRCA, ngunit sa kawalan ng iba sintomas ng pagkabalisa, hindi na kailangang mag-panic. Para sa mga babaeng may mutation sa mga gene na ito, ang mga regular na pagsusuri sa sarili at pisikal na pagsusuri ay maaaring irekomenda bilang mga hakbang sa pag-iwas. Pagkatapos ng 40 taon, makatuwirang isipin ang tungkol sa pag-alis ng mga ovary at suso, mga kababaihan mas batang edad na hindi nagpaplanong magkaroon ng mga anak sa hinaharap, kung minsan ay inirerekomenda ang pagkuha mga contraceptive. Ang desisyon sa mga hakbang na ito ay ganap na nakasalalay sa mga balikat ng babae mismo at nangangailangan ng isang maalalahanin na diskarte at konsultasyon sa mga doktor.

Ang pinakabagong mga pamamaraan ng diagnostic

Ang isang spectral analysis ng dugo ay nagpapakita ng pagkakaroon ng mga neoplasma sa katawan na may posibilidad na hanggang 93%. Ito ay medyo murang diagnostic na paraan batay sa infrared irradiation ng serum ng dugo at pagsusuri ng molekular na komposisyon nito.

Ang konklusyon sa spectral analysis ng dugo ay ibinibigay sa prinsipyo ng "presence-absence" at naglalayong makilala ang karamihan sa mga uri ng malignant na mga tumor. Gayundin, ang pag-aaral na ito ay maaaring matukoy ang yugto ng pag-unlad ng kanser sa suso. Ang interpretasyon ng mga resulta ay nagaganap sa laboratoryo at hindi nangangailangan ng karagdagang opinyon ng doktor.

Upang makapag-donate ng dugo para sa spectral analysis, kinakailangang kumpletuhin ang pag-inom ng gamot 2 buwan bago ang pamamaraan. Mula sa sandali ng X-ray o iba pang pagkakalantad, pati na rin ang chemotherapy, hindi bababa sa 3 buwan ang dapat lumipas. Bilang karagdagan, ang babae ay hindi dapat buntis o may regla sa oras ng pag-sample ng dugo. Ang sampling ng dugo ay nagaganap sa isang walang laman na tiyan sa umaga. Ang spectral analysis ng dugo ay tumatagal ng average na 12 araw ng trabaho.

Isa sa pinakabagong mga pamamaraan ang diagnosis ng mga kanser ay ang tinatawag na "fish test" (FISH, fluorescent hybridization). Ang pagiging epektibo nito ay tinatalakay pa, ang pangunahing isyu ng pagiging posible nito ay ang magastos na pamamaraan ng pananaliksik. Ang kakanyahan ng pamamaraan ay binubuo sa pag-label ng mga fragment ng cell na may fluorescent na komposisyon at higit pa mikroskopikong pagsusuri mga selula. Ayon sa kung aling mga bahagi ng genetic na materyal ang nakipag-ugnayan sa mga may label na mga fragment, maaari itong maunawaan kung ang pasyente ay may predisposisyon sa kanser at kung anong mga paraan ng paggamot ang magiging may kaugnayan sa isang partikular na kaso.

Ang FISH test ay hindi nangangailangan ng ganap na mature na mga cell, kaya ang pagsusuri na ito ay mas mabilis kaysa sa iba pang mga pagsubok sa laboratoryo. Bilang karagdagan, ang paraan ng FISH ay nagbibigay-daan sa iyo upang mas malinaw na obserbahan ang genetic na pinsala, na hindi posible sa iba pang mga uri ng pagsusuri. Ang FISH test ay kadalasang ginagamit partikular para makita ang kanser sa suso, ngunit gumagana din ito upang makita ang ilang iba pang uri ng kanser.

Ang mga disadvantages ng FISH test ay kasama, bilang karagdagan sa mataas na gastos nito, ang imposibilidad na magtrabaho sa ilang bahagi ng mga chromosome dahil sa pagiging tiyak ng mga marka. Bilang karagdagan, binabalewala ng FISH test ang ilang uri ng mutasyon at mga break sa genetic code, na maaaring maging isang mahalagang pagtanggal sa diagnosis. Paghahambing na Pag-aaral Ang FISH na may mas murang pagsusuri sa IHC ay nagpakita ng walang makabuluhang kalamangan sa pagtukoy ng pagkamaramdamin sa Herceptin ng mga selula ng kanser. Gayunpaman, ang FISH test para sa sa sandaling ito ay ang pinakamabilis sa mga pamamaraan ng mataas na katumpakan diagnosis ng kanser.

Isang modernong paraan ng pagsusuri ng cytogenetic, na nagbibigay-daan upang matukoy ang husay at dami ng mga pagbabago sa mga kromosom (kabilang ang mga pagsasalin at microdeletion) at ginagamit para sa differential diagnosis malignant na sakit ng dugo at mga solidong tumor.

Mga kasingkahulugan ng Ruso

Fluorescent in situ hybridization

Pagsusuri ng ISDA

Ingles na kasingkahulugan

Fluorescence sa lugar ng kinaroroonan hybridization

Paraan ng pananaliksik

Fluorescent in situ hybridization.

Anong biomaterial ang maaaring gamitin para sa pananaliksik?

Tissue sample, tissue sample sa paraffin block.

Paano maayos na maghanda para sa pananaliksik?

Walang kinakailangang paghahanda.

Pangkalahatang impormasyon tungkol sa pag-aaral

Fluorescent in situ hybridization (FISH) sa- lugar hybridization) ay isa sa pinaka makabagong pamamaraan diagnosis ng chromosomal abnormalities. Ito ay batay sa paggamit ng DNA probes na may label na fluorescent na label. Ang mga DNA probes ay espesyal na synthesize ng mga fragment ng DNA, ang pagkakasunud-sunod nito ay pantulong sa pagkakasunud-sunod ng DNA ng mga pinag-aralan na aberrant chromosome. Kaya, ang mga sample ng DNA ay naiiba sa komposisyon: iba't ibang, tiyak na mga sample ng DNA ay ginagamit upang matukoy ang iba't ibang mga abnormalidad ng chromosomal. Ang mga DNA probe ay nag-iiba din sa laki: ang ilan ay maaaring idirekta sa isang buong chromosome, ang iba sa isang partikular na locus.

Sa panahon ng proseso ng hybridization, kung may mga aberrant na chromosome sa sample ng pagsubok, nagbubuklod sila sa DNA probe, na, kapag sinusuri gamit ang isang fluorescent microscope, ay tinutukoy bilang isang fluorescent signal ( positibong resulta pagsubok ng ISDA). Sa kawalan ng mga aberrant chromosome, ang hindi nakatali na mga sample ng DNA ay "hugasan" sa panahon ng reaksyon, na, kapag sinusuri gamit ang isang fluorescent microscope, ay tinukoy bilang kawalan ng isang fluorescent signal (negatibong resulta ng pagsubok sa FISH). Ginagawang posible ng pamamaraan na suriin hindi lamang ang pagkakaroon ng isang fluorescent signal, kundi pati na rin ang intensity at localization nito. Kaya, ang FISH test ay hindi lamang isang qualitative kundi isang quantitative na paraan.

Ang FISH test ay may ilang mga pakinabang sa iba pang mga cytogenetic na pamamaraan. Una sa lahat, ang pag-aaral ng FISH ay maaaring ilapat sa parehong metaphase at interphase nuclei, iyon ay, sa mga hindi naghahati na mga selula. Ito ang pangunahing bentahe ng FISH sa mga klasikal na paraan karyotyping (halimbawa, paglamlam ng mga chromosome ayon sa Romanovsky-Giemsa), na nalalapat lamang sa metaphase nuclei. Ginagawa nitong higit na pag-aaral ang FISH eksaktong paraan upang matukoy ang mga abnormalidad ng chromosomal sa mga tisyu na may mababang aktibidad ng proliferative, kabilang ang mga solidong tumor.

Dahil ang FISH test ay gumagamit ng stable na DNA ng interphase nuclei, ang iba't ibang biomaterial ay maaaring gamitin para sa pananaliksik - fine-angle aspirates aspirasyon biopsy, smears, aspirates utak ng buto, biopsy specimens at, mahalaga, napreserba ang mga fragment ng tissue, gaya ng histological blocks. Kaya, halimbawa, ang isang FISH test ay maaaring matagumpay na maisagawa sa paulit-ulit na paghahanda na nakuha mula sa isang histological block ng isang specimen ng biopsy ng suso kapag kinukumpirma ang diagnosis ng "breast adenocarcinoma" at ang pangangailangan upang matukoy ang katayuan ng HER2/neu ng tumor. Dapat bigyang-diin na sa sandaling ito ang pag-aaral ng FISH ay inirerekomenda bilang isang confirmatory test kapag tumatanggap ng hindi tiyak na resulta ng immunohistochemical study ng tumor para sa HER2/neu tumor marker (IHC 2+).

Ang isa pang bentahe ng FISH ay ang kakayahang makakita ng mga microdeletion na hindi natukoy ng classical na karyotyping o PCR. Ito ay partikular na kahalagahan sa mga kaso ng pinaghihinalaang DiGeorge syndrome at velocardiofacial syndrome.

Ang FISH test ay malawakang ginagamit sa differential diagnosis ng mga malignant na sakit, pangunahin sa oncohematology. Chromosomal abnormalities na nauugnay sa klinikal na larawan at ang data ng immunohistochemical studies ay ang batayan para sa pag-uuri, pagpapasiya ng mga taktika sa paggamot at pagbabala ng mga sakit na lympho- at myeloproliferative. mga klasikong halimbawa ay talamak myeloid leukemia - t (9;22), talamak promyelocytic leukemia– t (15;17), talamak na lymphocytic leukemia- trisomy 12 at iba pa. Para sa mga solidong tumor, ang pag-aaral ng FISH ay kadalasang ginagamit sa pagsusuri ng kanser sa suso, pantog, colon, neuroblastoma, retinoblastoma, at iba pa.

Ang pag-aaral ng FISH ay maaari ding gamitin sa prenatal at preimplantation diagnosis.

Ang FISH test ay madalas na isinasagawa kasama ng iba pang mga pamamaraan ng molecular at cytogenetic diagnostics. Ang resulta ng pag-aaral na ito ay sinusuri kasabay ng mga resulta ng karagdagang laboratoryo at instrumental na datos.

Ano ang ginagamit ng pananaliksik?

  • Para sa differential diagnosis ng mga malignant na sakit (dugo at solidong organo).

Kailan nakaiskedyul ang pag-aaral?

  • Kapag pinaghihinalaang mayroon malignant na sakit dugo o solidong mga bukol, ang mga taktika ng paggamot at ang pagbabala nito ay nakasalalay sa chromosomal na komposisyon ng tumor clone.

Ano ang ibig sabihin ng mga resulta?

Positibong resulta:

  • Ang pagkakaroon ng mga aberrant chromosome sa sample ng pagsubok.

Negatibong resulta:

  • Ang kawalan ng aberrant chromosome sa sample ng pagsubok.

Ano ang maaaring makaapekto sa resulta?

  • Bilang ng mga aberrant chromosome.

  • Pag-aaral ng immunohistochemical klinikal na materyal(gamit ang 1 antibody)
  • Immunohistochemical na pag-aaral ng klinikal na materyal (gamit ang 4 o higit pang mga antibodies)
  • Pagpapasiya ng katayuan ng tumor ng HER2 paraan ng ISDA
  • Pagpapasiya ng katayuan ng tumor ng HER2 sa pamamagitan ng pamamaraang CISH

Sino ang nag-utos ng pag-aaral?

Oncologist, pediatrician, obstetrician-gynecologist, geneticist.

Panitikan

  • Wan TS, Ma ES. Molecular cytogenetics: isang kailangang-kailangan na tool para sa diagnosis ng kanser. Anticancer Res. 2005 Hul-Ago;25(4):2979-83.
  • Kolialexi A, Tsangaris GT, Kitsiou S, Kanavakis E, Mavrou A. Epekto ng cytogenetic at molecular cytogenetic na pag-aaral sa hematologic malignancies. Chang Gung Med J. 2012 Mar-Abr;35(2):96-110.
  • Mühlmann M. Molecular cytogenetics sa metaphase at interphase cells para sa cancer at genetic na pananaliksik, diagnosis at pagbabala. Application sa mga seksyon ng tissue at mga suspensyon ng cell. Genet Mol Res. 2002 Hun 30;1(2):117-27.