Ang mga pamamaraan para sa pagsusuri sa laboratoryo ng mga impeksyon sa viral ay nahahati sa maraming malalaking grupo.
- Mga direktang pamamaraan, na binubuo sa pagtuklas nang direkta sa biological na materyal ng virus mismo o mga antibodies dito.
- Ang mga hindi direktang pamamaraan ay binubuo sa artipisyal na produksyon ng virus sa makabuluhang dami, at ang karagdagang pagsusuri nito.
Ang pinaka-kaugnay na mga pamamaraan ng diagnostic sa pang-araw-araw na pagsasanay ay kinabibilangan ng:
Mga pamamaraan ng serological diagnostic - pagtuklas sa serum ng dugo ng pasyente ng ilang antibodies o antigens bilang resulta ng reaksyon ng antigen-antibody (AG-AT). Iyon ay, kapag naghahanap ng isang tiyak na antigen sa isang pasyente, ang isang naaangkop na artipisyal na synthesized na antibody ay ginagamit, at, nang naaayon, sa kabaligtaran, kapag ang mga antibodies ay nakita, ang mga synthesized na antigens ay ginagamit.
Immunofluorescence reaction (RIF)
Batay sa paggamit ng dye-labeled antibodies. Sa pagkakaroon ng isang viral antigen, ito ay nagbubuklod sa mga may label na antibodies, at ang isang tiyak na kulay ay sinusunod sa ilalim ng mikroskopyo, na nagpapahiwatig ng isang positibong resulta. Sa pamamaraang ito, sa kasamaang-palad, imposible ang isang quantitative interpretation ng resulta, ngunit isang qualitative lamang.
Ang posibilidad ng quantitative determination ay nagbibigay ng enzyme immunoassay (ELISA). Ito ay katulad ng RIF, gayunpaman, hindi mga tina ang ginagamit bilang mga marker, ngunit ang mga enzyme na nagko-convert ng mga walang kulay na substrate sa mga kulay na produkto, na ginagawang posible upang mabilang ang nilalaman ng parehong antigens at antibodies.
- Ang mga hindi nakatali na antibodies at antigens ay nahuhugasan.
- Ang isang walang kulay na substrate ay idinagdag at ang paglamlam ay magaganap sa mga balon na may antigen na ating nakikita magkakaroon ng isang enzyme na nauugnay sa antigen, pagkatapos kung saan ang intensity ng luminescence ng kulay na produkto ay tinatantya sa isang espesyal na aparato.
Natutukoy ang mga antibodies sa katulad na paraan.
Ang reaksyon ng hindi direktang (passive) hemagglutination (RPHA).
Ang pamamaraan ay batay sa kakayahan ng mga virus na magbigkis ng mga pulang selula ng dugo. Karaniwan, ang mga pulang selula ng dugo ay nahuhulog sa ilalim ng tablet, na bumubuo ng tinatawag na button. Gayunpaman, kung mayroong isang virus sa biological na materyal na pinag-aaralan, ito ay magbubuklod sa mga erythrocytes sa isang tinatawag na payong na hindi mahuhulog sa ilalim ng balon.
Kung ang gawain ay upang makita ang mga antibodies, maaari itong gawin gamit hemagglutination inhibition reactions (HITA). Ang iba't ibang mga sample ay inilalagay sa balon na may virus at mga erythrocytes. Sa pagkakaroon ng mga antibodies, ibibigkis nila ang virus, at ang mga pulang selula ng dugo ay mahuhulog sa ilalim na may pagbuo ng isang "button".
Ngayon ay pag-isipan natin ang mga paraan ng direktang pag-diagnose ng mga nucleic acid ng mga pinag-aralan na virus, atuna sa lahat tungkol sa PCR (Polymerase Chain Reaction) .
Ang kakanyahan ng pamamaraang ito ay upang makita ang isang tiyak na fragment ng DNA o RNA ng isang virus sa pamamagitan ng paulit-ulit na pagkopya nito sa ilalim ng mga artipisyal na kondisyon. Ang PCR ay maaari lamang isagawa gamit ang DNA, iyon ay, para sa mga RNA virus, kailangan munang magsagawa ng reverse transcription reaction.
Ang direktang PCR ay isinasagawa sa isang espesyal na aparato na tinatawag na amplifier, o isang thermal cycler, na nagpapanatili ng kinakailangang temperatura. Binubuo ang pinaghalong PCR ng idinagdag na DNA, na naglalaman ng fragment ng interes sa amin, mga primer (isang maikling nucleic acid fragment na pantulong sa target na DNA, nagsisilbing primer para sa synthesis ng complementary strand), DNA polymerase, at nucleotides.
Mga hakbang sa pag-ikot ng PCR:
- Ang denaturation ay ang unang yugto. Ang temperatura ay tumataas sa 95 degrees, ang mga kadena ng DNA ay naghihiwalay sa bawat isa.
- Pagsusubo ng panimulang aklat. Ang temperatura ay ibinaba sa 50-60 degrees. Hinahanap ng mga panimulang aklat ang komplementaryong rehiyon ng kadena at itali dito.
-
Synthesis. Ang temperatura ay muling itinaas sa 72, ito ang gumaganang temperatura para sa DNA polymerase, na, simula sa mga primer, ay nagtatayo ng mga chain ng anak na babae.
Ang cycle ay paulit-ulit ng maraming beses. Pagkatapos ng 40 cycle, 10 * 12 degrees ng mga kopya ng mga kopya ng nais na fragment ay nakuha mula sa isang molekula ng DNA.
Sa real-time na PCR, ang mga synthesize na kopya ng isang fragment ng DNA ay may label na dye. Inirerehistro ng aparato ang intensity ng glow at inilalagay ang akumulasyon ng nais na fragment sa kurso ng reaksyon.
Ang mga modernong pamamaraan ng mga diagnostic sa laboratoryo na may mataas na pagiging maaasahan ay ginagawang posible upang makita ang pagkakaroon ng isang virus - ang pathogen sa katawan, madalas bago lumitaw ang mga unang sintomas ng sakit.
mga reaksyon ng immune ginagamit sa diagnostic at immunological na pag-aaral sa mga may sakit at malusog na tao. Para sa layuning ito, mag-apply mga pamamaraan ng serological , ibig sabihin, mga pamamaraan para sa pag-aaral ng mga antibodies at antigens gamit ang mga reaksyon ng antigen-antibody na tinutukoy sa serum ng dugo at iba pang mga likido, pati na rin sa mga tisyu ng katawan.
Pagtuklas sa serum ng dugo ang mga antibodies ng pasyente laban sa mga antigen ng pathogen ay nagpapahintulot sa iyo na gumawa ng diagnosis ng sakit. Ginagamit din ang mga serological na pag-aaral upang makilala ang mga microbial antigens, iba't ibang biologically active substance, mga grupo ng dugo, tissue at tumor antigens, immune complex, cell receptor, atbp.
Kapag naghihiwalay ng mikrobyo mula sa pasyente, nakikilala ang pathogen sa pamamagitan ng pag-aaral ng mga antigenic na katangian nito gamit ang immune diagnostic sera, ibig sabihin, blood sera ng hyperimmunized na hayop na naglalaman ng mga partikular na antibodies. Ito ang tinatawag na serological identification mga mikroorganismo.
Malawakang ginagamit sa microbiology at immunology agglutination, precipitation, neutralization reactions, reactions involving complement, using labeled antibodies and antigens (radioimmunological, enzyme immunoassay, immunofluorescent method). Ang mga nakalistang reaksyon ay naiiba sa nakarehistrong epekto at pamamaraan ng pagtatanghal, gayunpaman, lahat sila ay batay sa reaksyon ng pakikipag-ugnayan ng antigen sa antibody at ginagamit upang makita ang parehong mga antibodies at antigens. Ang mga reaksyon ng kaligtasan sa sakit ay nailalarawan sa pamamagitan ng mataas na sensitivity at pagtitiyak.
Mga tampok ng pakikipag-ugnayan ng isang antibody na may isang antigen ay ang batayan ng mga diagnostic na reaksyon sa mga laboratoryo. Reaksyon sa vitro sa pagitan ng antigen at antibody ay binubuo ng isang tiyak at di-tiyak na yugto. SA tiyak na yugto mayroong isang mabilis na tiyak na pagbubuklod ng aktibong site ng antibody sa determinant ng antigen. Pagkatapos ay dumating di-tiyak na yugto - mas mabagal, na kung saan ay ipinahayag sa pamamagitan ng nakikitang pisikal na phenomena, halimbawa, ang pagbuo ng mga natuklap (agglutination phenomenon) o namuo sa anyo ng labo. Ang yugtong ito ay nangangailangan ng ilang mga kundisyon (electrolytes, pinakamainam na pH ng daluyan).
Ang pagbubuklod ng isang antigen determinant (epitope) sa aktibong site ng isang antibody Fab fragment ay dahil sa mga puwersa ng van der Waals, hydrogen bond, at hydrophobic na pakikipag-ugnayan. Ang lakas at dami ng antigen na nakagapos ng mga antibodies ay nakadepende sa affinity, avidity ng antibodies at kanilang valency.
Mga immunodeficiencies, parehong pangunahin at lalo na pangalawa ay laganap sa mga tao. Ang mga ito ang sanhi ng pagpapakita ng maraming mga sakit at mga kondisyon ng pathological, samakatuwid, nangangailangan sila ng pag-iwas at paggamot sa mga immunotropic na gamot.
34. Inactivated (corpuscular) na mga bakuna. Resibo. Aplikasyon. Mga kalamangan. Bahid.
Mga bakunang hindi aktibo (pinatay, particulate o molekular).- mga paghahanda na, bilang aktibong prinsipyo, ay kinabibilangan ng mga kultura ng mga pathogenic na virus o bacteria na pinatay ng isang kemikal o pisikal na pamamaraan (cellular, virion) o mga complex ng antigens na nakuha mula sa mga pathogenic microbes na naglalaman ng mga proteksiyon na antigens (subcellular, subvirion vaccines).
Upang ihiwalay ang mga antigenic complex (glycoproteins, LPS, protina) mula sa bakterya at mga virus, ginagamit ang trichloroacetic acid, phenol, enzymes, at isoelectric precipitation.
Ang mga ito ay nakuha sa pamamagitan ng lumalaking pathogenic bacteria at mga virus sa artipisyal na nutrient media, inactivated, nakahiwalay na mga antigenic complex, purified, itinayo sa anyo ng isang likido o lyophilic na paghahanda.
Ang bentahe ng ganitong uri ng bakuna ay ang relatibong kadalian ng pagkuha (pangmatagalang pag-aaral at paghihiwalay ng mga strain ay hindi kinakailangan). Kabilang sa mga disadvantage ang mababang immunogenicity, ang pangangailangan para sa triple na paggamit at mataas na reactogenicity ng mga pormal na bakuna. Gayundin, kumpara sa mga live na bakuna, panandalian lang ang immunity na kanilang nakukuha.
Sa kasalukuyan, ang mga sumusunod na pinatay na bakuna ay ginagamit: tipus, pinayaman ng Vi antigen; bakuna sa kolera, bakuna sa pertussis.
119. Serological test na ginagamit upang masuri ang mga impeksyon sa viral.
Pagtuklas sa serum ng dugo ang mga antibodies ng pasyente laban sa mga antigen ng pathogen ay nagpapahintulot sa iyo na gumawa ng diagnosis ng sakit. Ginagamit din ang mga serological na pag-aaral upang makilala ang mga microbial antigens, iba't ibang biologically active substance, mga grupo ng dugo, tissue at tumor antigens, immune complex, cell receptor, atbp.
Kapag naghihiwalay ng mikrobyo mula sa pasyente, nakikilala ang pathogen sa pamamagitan ng pag-aaral ng mga antigenic na katangian nito gamit ang immune diagnostic sera, ibig sabihin, blood sera ng hyperimmunized na hayop na naglalaman ng mga partikular na antibodies. Ito ang tinatawag na serological identification mga mikroorganismo.
Malawakang ginagamit sa microbiology at immunology agglutination, precipitation, neutralization reactions, reactions involving complement, using labeled antibodies and antigens (radioimmunological, enzyme immunoassay, immunofluorescent method). Ang mga nakalistang reaksyon ay naiiba sa nakarehistrong epekto at pamamaraan ng pagtatanghal, gayunpaman, lahat sila ay batay sa reaksyon ng pakikipag-ugnayan ng antigen sa antibody at ginagamit upang makita ang parehong mga antibodies at antigens. Ang mga reaksyon ng kaligtasan sa sakit ay nailalarawan sa pamamagitan ng mataas na sensitivity at pagtitiyak.
Mga tampok ng pakikipag-ugnayan ng isang antibody na may isang antigen ay ang batayan ng mga diagnostic na reaksyon sa mga laboratoryo. Reaksyon sa vitro sa pagitan ng antigen at antibody ay binubuo ng isang tiyak at di-tiyak na yugto. SA tiyak na yugto mayroong isang mabilis na tiyak na pagbubuklod ng aktibong site ng antibody sa determinant ng antigen. Pagkatapos ay dumating di-tiyak na yugto - mas mabagal, na kung saan ay ipinahayag sa pamamagitan ng nakikitang pisikal na phenomena, halimbawa, ang pagbuo ng mga natuklap (agglutination phenomenon) o namuo sa anyo ng labo. Ang yugtong ito ay nangangailangan ng ilang mga kundisyon (electrolytes, pinakamainam na pH ng daluyan).
Ang pagbubuklod ng isang antigen determinant (epitope) sa aktibong site ng isang antibody Fab fragment ay dahil sa mga puwersa ng van der Waals, hydrogen bond, at hydrophobic na pakikipag-ugnayan. Ang lakas at dami ng antigen na nakagapos ng mga antibodies ay nakadepende sa affinity, avidity ng antibodies at kanilang valency.
Sa tanong tungkol sa express diagnostics:
1. Maaaring masuri ang isang kulturang nakahiwalay sa dalisay nitong anyo. 2. Sa mga laboratoryo na may espesyal na kagamitan (dapat may pahintulot) 3. Pagsunod sa mga mahigpit na alituntunin tulad ng: nakahiwalay na silid, kinakailangan ng mga espesyal na proteksiyon na suit, ipinag-uutos na kumpletong sanitization ng mga lugar pagkatapos magtrabaho kasama ang pathogen, sanitization ng mga mananaliksik pagkatapos ng trabaho. Mga paraan ng express diagnostics. 1. Bacteriology - pinagsamang polytropic nutrient media para sa mabilis na pag-aaral ng morphs, tinctor, biochem. ari-arian. Paggamit ng enzyme indicator tape, electrophysical method, paraan ng mga paper disc na pinapagbinhi ng iba't ibang substance (glucaso, lactose, atbp.) 2. Phage diagnostics. 3. Serodiagnosis - Ang pamamaraan ni Mancini, reaksyon ng pag-ulan sa gel ayon sa Ascoli, RA, RPHA. 4. Bacterioscopy - direkta at hindi direktang RIF. Ipahayag ang mga pamamaraan ng diagnostic para sa: Cholera - MZ Ermolyeva, distrito ng immobilization na may cholera diagnostic serum, RIF. Tularemia - RA sa salamin, RPHA Chume - pag-type ng phage, ang paraan ng mga disc ng papel na karbohidrat, RPHA. Anthrax - Paraan ng Ascoli, RIF, RPGA. Ang likas na katangian ng paglago: mayroong tatlong nagkakalat (facultative anaerobes), malapit sa ibaba (obligate anaerobes) at ibabaw (obligate aerobes.)
Paghihiwalay ng purong kultura ng anaerobic bacteria
Sa pagsasanay sa laboratoryo, madalas na kinakailangan na magtrabaho kasama ang mga anaerobic microorganism. Ang mga ito ay mas mabilis sa nutrient media kaysa sa aerobes, madalas silang nangangailangan ng mga espesyal na pandagdag sa paglago, nangangailangan sila ng pagtigil ng suplay ng oxygen sa panahon ng kanilang paglilinang, ang kanilang panahon ng paglago ay mas mahaba. Samakatuwid, ang pakikipagtulungan sa kanila ay mas kumplikado at nangangailangan ng malaking pansin ng mga bacteriologist at mga katulong sa laboratoryo.
Mahalagang protektahan ang materyal na naglalaman ng anaerobic pathogens mula sa mga nakakalason na epekto ng atmospheric oxygen. Samakatuwid, inirerekumenda na kunin ang materyal mula sa foci ng purulent infection sa panahon ng kanilang pagbutas gamit ang isang syringe, ang oras sa pagitan ng pagkuha ng materyal at paghahasik nito sa isang nutrient medium ay dapat na maikli hangga't maaari.
Dahil ang espesyal na nutrient media ay ginagamit para sa paglilinang ng anaerobic bacteria, na hindi dapat maglaman ng oxygen at may mababang potensyal na redox (-20 -150 mV), ang mga tagapagpahiwatig ay ipinakilala sa kanilang komposisyon - resazurin, methylene blue at iba pa, na tumutugon sa isang pagbabago sa potensyal na ito. Sa paglaki nito, ang mga walang kulay na anyo ng mga tagapagpahiwatig ay ipinagpatuloy at binabago ang kanilang kulay: ang resazurin ay nabahiran ng medium pink, at methylene blue - asul. Ang ganitong mga pagbabago ay nagpapahiwatig ng imposibilidad ng paggamit ng media para sa paglilinang ng anaerobic microbes.
Nakakatulong ito upang bawasan ang potensyal na redox ng pagpasok sa medium ng hindi bababa sa 0.05% agar, na, sa pamamagitan ng pagtaas ng lagkit nito, ay nakakatulong upang mabawasan ang supply ng oxygen. Ito, sa turn, ay nakakamit din sa pamamagitan ng paggamit ng sariwa (hindi lalampas sa dalawang oras pagkatapos ng produksyon) at pinababang kulturang media.
Dapat pansinin na dahil sa mga kakaibang uri ng fermentative na metabolismo ng anaerobic bacteria, nangangailangan sila ng media na mas mayaman sa nutrients at bitamina. Ang pinakakaraniwang ginagamit ay mga pagbubuhos ng cardio-utak at atay, toyo at yeast extract, casein hydrolytic digest, peptone, tryptone. Ito ay ipinag-uutos na magdagdag ng mga kadahilanan ng paglago tulad ng tween-80, hemin, menadione, buo o hemolyzed na dugo.
Ang paghihiwalay ng isang purong kultura ng mga aerobic microorganism ay binubuo ng isang bilang ng mga hakbang. Sa unang araw (yugto 1 ng pag-aaral), ang pathological na materyal ay dinadala sa isang sterile na lalagyan (test tube, flask, vial). Pinag-aaralan ito para sa hitsura, pagkakapare-pareho, kulay, amoy at iba pang mga palatandaan, ang isang pahid ay inihanda, pininturahan at sinusuri sa ilalim ng mikroskopyo. Sa ilang mga kaso (talamak na gonorrhea, salot), sa yugtong ito posible na gumawa ng isang nakaraang pagsusuri, at bilang karagdagan, piliin ang media kung saan ihahasik ang materyal. Kinuha ko ito gamit ang isang bacteriological loop (madalas na ginagamit), na may isang spatula na sumusunod sa pamamaraan ng Drygalsky, na may cotton-gauze swab. Ang mga tasa ay sarado, nakabaligtad, nilagdaan ng isang espesyal na lapis at inilagay sa isang termostat sa pinakamabuting kalagayan na temperatura (37 ° C) sa loob ng 18-48 taon. Ang layunin ng yugto ay upang makakuha ng mga nakahiwalay na kolonya ng mga mikroorganismo. Gayunpaman, kung minsan upang itambak ang materyal, ito ay inihahasik sa likidong nutrient media.
Ang mga smear ay inihanda mula sa mga kahina-hinalang kolonya, na nabahiran ng Gram method upang pag-aralan ang morphological at tinctorial properties ng mga pathogen, at ang mga mobile bacteria ay sinusuri sa isang "nakabitin" o "durog" na patak. Ang mga palatandaang ito ay may napakahusay na halaga ng diagnostic sa paglalarawan ng ilang uri ng mga mikroorganismo. Ang mga labi ng mga pinag-aralan na kolonya ay maingat na inalis mula sa ibabaw ng daluyan nang hindi hawakan ang iba at inoculated sa isang slant agar o sa mga sektor ng isang Petri dish na may isang nutrient medium upang makakuha ng isang purong kultura. Ang mga test tube o mga pinggan na may mga pananim ay inilalagay sa isang termostat sa pinakamabuting kalagayan na temperatura sa loob ng 18-24 na oras.
Sa likidong nutrient media, ang bakterya ay maaari ding lumago nang iba, kahit na ang mga tampok ng mga pagpapakita ng paglago ay mas mahirap kaysa sa mga solid.
Ang mga bakterya ay may kakayahang magdulot ng nagkakalat na labo ng daluyan, habang ang kulay nito ay maaaring hindi magbago o makakuha ng kulay ng pigment. Ang pattern ng paglago na ito ay madalas na sinusunod sa karamihan ng facultative anaerobic microorganisms.
Minsan may nabubuong precipitate sa ilalim ng tubo. Maaari itong maging madurog, homogenous, malapot, malansa, atbp. Ang medium sa itaas nito ay maaaring manatiling transparent o maging maulap. Kung ang mga mikrobyo ay hindi bumubuo ng isang pigment, ang namuo ay may matingkad o madilaw-dilaw na kulay. Bilang isang patakaran, ang anaerobic bacteria ay lumalaki sa isang katulad na ranggo.
Ang paglago ng pader ay ipinakita sa pamamagitan ng pagbuo ng mga natuklap, mga butil na nakakabit sa mga panloob na dingding ng test tube. Ang daluyan ay nananatiling transparent.
Ang aerobic bacteria ay kadalasang lumalaki sa ibabaw. Kadalasan ang isang pinong walang kulay o mala-bughaw na pelikula ay nabuo sa anyo ng isang halos hindi kapansin-pansin na patong sa ibabaw, na nawawala kapag ang daluyan ay inalog o nabalisa. Ang pelikula ay maaaring kahalumigmigan, makapal, may niniting, malansa na pagkakapare-pareho at dumikit sa loop, na lumalawak para dito. Gayunpaman, mayroon ding isang siksik, tuyo, malutong na pelikula, ang kulay nito ay nakasalalay sa pigment, na ginawa ng mga mikroorganismo.
Kung kinakailangan, ang isang smear ay ginawa, nabahiran, sinusuri sa ilalim ng isang mikroskopyo, at ang mga mikroorganismo ay binibinhan ng isang loop sa ibabaw ng isang siksik na nutrient medium upang makakuha ng mga nakahiwalay na kolonya.
Sa ikatlong araw (yugto 3 ng pag-aaral), ang likas na katangian ng paglago ng isang purong kultura ng mga mikroorganismo ay pinag-aralan at ang pagkakakilanlan nito ay isinasagawa.
Una, binibigyang pansin ang mga katangian ng paglaki ng mga mikroorganismo sa daluyan at ang isang pahid ay ginawa, paglamlam nito gamit ang pamamaraang Gram, upang masuri ang kultura para sa kadalisayan. Kung ang bakterya ng parehong uri ng morpolohiya, laki at tinctorial (kakayahang magkulay) na mga katangian ay sinusunod sa ilalim ng mikroskopyo, napagpasyahan na ang kultura ay dalisay. Sa ilang mga kaso, na sa pamamagitan ng hitsura at mga katangian ng kanilang paglaki, ang isa ay maaaring gumawa ng isang konklusyon tungkol sa uri ng mga nakahiwalay na pathogens. Ang pagtukoy sa mga species ng bakterya sa pamamagitan ng kanilang mga morphological features ay tinatawag na morphological identification. Ang pagtukoy sa uri ng mga pathogen sa pamamagitan ng kanilang mga kultural na katangian ay tinatawag na cultural identification.
Gayunpaman, ang mga pag-aaral na ito ay hindi sapat upang makagawa ng pangwakas na konklusyon tungkol sa uri ng mga nakahiwalay na mikrobyo. Samakatuwid, pinag-aaralan nila ang mga biochemical na katangian ng bakterya. Ang mga ito ay medyo iba-iba.
Kadalasan, pinag-aaralan ang saccharolytic, proteolytic, peptolytic, hemolytic properties, ang pagbuo ng decarboxylase, oxidase, catalase, plasmacoagulase, DNase, fibrinolysin enzymes, ang pagbawas ng nitrates sa nitrite, at mga katulad nito. Para dito, may mga espesyal na nutrient media na inoculated sa mga microorganism (variegated Hiss series, MPB, curdled whey, milk, atbp.).
Ang pagtukoy sa uri ng pathogen sa pamamagitan ng biochemical properties nito ay tinatawag na biochemical identification.
PARAAN NG PAGLINANG AT PAG-ISOLATION NG PURE BACTERIA CULTURE Para sa matagumpay na paglilinang, bilang karagdagan sa maayos na napiling media at maayos na ginawang inoculation, ang pinakamainam na kondisyon ay kinakailangan: temperatura, kahalumigmigan, aeration (supply ng hangin). Ang paglilinang ng mga anaerobes ay mas mahirap kaysa sa aerobes; iba't ibang mga pamamaraan ang ginagamit upang alisin ang hangin mula sa nutrient medium. Ang paghihiwalay ng ilang uri ng bakterya (purong kultura) mula sa materyal na pagsubok, na kadalasang naglalaman ng pinaghalong iba't ibang microorganism, ay isa sa mga yugto ng anumang pag-aaral ng bacteriological. Ang isang purong microbial culture ay nakuha mula sa isang nakahiwalay na microbial colony. Kapag ihiwalay ang isang purong kultura mula sa dugo (hemoculture), ito ay preliminarily "paglago" sa isang likidong daluyan: 10-15 ml ng sterile na dugo ay inoculated sa 100-150 ml ng isang likidong daluyan. Ang ratio ng inihasik na dugo at nutrient medium 1:10 ay hindi sinasadya - ito ay kung paano nakakamit ang pagbabanto ng dugo (ang hindi natunaw na dugo ay may masamang epekto sa mga microorganism). Mga yugto ng paghihiwalay ng isang purong kultura ng bakterya Stage I (katutubong materyal) Microscopy (magaspang na ideya ng microflora). Paghahasik sa siksik na nutrient media (pagkuha ng mga kolonya). Stage II (isolated colonies) Pag-aaral ng mga kolonya (cultural properties ng bacteria). Microscopic na pag-aaral ng microbes sa isang stained smear (morphological properties ng bacteria). Inoculation sa nutrient agar slant upang ihiwalay ang isang purong kultura. Stage III (purong kultura) Ang pagtukoy ng kultura, morphological, biochemical at iba pang mga katangian para sa pagkilala ng isang bacterial culture PAGKILALA NG BACTERIA Ang pagkilala sa mga nakahiwalay na bacterial culture ay isinasagawa sa pamamagitan ng pag-aaral sa morpolohiya ng bakterya, ang kanilang kultura, biochemical at iba pang mga katangian na likas sa bawat isa. uri ng hayop.
No. 1 Serological test na ginagamit para sa diagnosis mga impeksyon sa viral.
Ginagamit ang mga immune reaction sa diagnostic at immunological na pag-aaral sa mga may sakit at malulusog na tao. Para sa layuning ito, mag-apply mga pamamaraan ng serological, ibig sabihin, mga pamamaraan para sa pag-aaral ng mga antibodies at antigens gamit ang mga reaksyon ng antigen-antibody na tinutukoy sa serum ng dugo at iba pang mga likido, pati na rin sa mga tisyu ng katawan.
Ang pagtuklas ng mga antibodies laban sa mga antigen ng pathogen sa serum ng dugo ng pasyente ay ginagawang posible upang masuri ang sakit. Ginagamit din ang mga serological na pag-aaral upang makilala ang mga microbial antigens, iba't ibang biologically active substance, mga grupo ng dugo, tissue at tumor antigens, immune complex, cell receptor, atbp.
Kapag ang isang mikrobyo ay nahiwalay sa isang pasyente, ang pathogen ay nakikilala sa pamamagitan ng pag-aaral ng mga antigenic na katangian nito gamit ang immune diagnostic sera, ibig sabihin, blood sera ng mga hyperimmunized na hayop na naglalaman ng mga partikular na antibodies. Ito ang tinatawag na serological identification ng mga microorganism.
Sa microbiology at immunology, ang agglutination, precipitation, neutralization reactions, reactions involving complement, gamit ang may label na antibodies at antigens (radioimmunological, enzyme immunoassay, immunofluorescent method) ay malawakang ginagamit. Ang mga nakalistang reaksyon ay naiiba sa nakarehistrong epekto at pamamaraan ng pagtatanghal, gayunpaman, lahat sila ay batay sa reaksyon ng pakikipag-ugnayan ng antigen sa antibody at ginagamit upang makita ang parehong mga antibodies at antigens. Ang mga reaksyon ng kaligtasan sa sakit ay nailalarawan sa pamamagitan ng mataas na sensitivity at pagtitiyak.
Ang mga tampok ng pakikipag-ugnayan ng isang antibody na may isang antigen ay ang batayan ng mga diagnostic na reaksyon sa mga laboratoryo. Ang in vitro reaksyon sa pagitan ng isang antigen at isang antibody ay binubuo ng isang tiyak at isang di-tiyak na yugto. Sa tiyak na yugto, mayroong isang mabilis na tiyak na pagbubuklod ng aktibong site ng antibody sa determinant ng antigen. Pagkatapos ay dumating ang di-tiyak na yugto - mas mabagal, na ipinakita sa pamamagitan ng nakikitang pisikal na phenomena, tulad ng pagbuo ng mga natuklap (agglutination phenomenon) o namuo sa anyo ng labo. Ang yugtong ito ay nangangailangan ng ilang mga kundisyon (electrolytes, pinakamainam na pH ng daluyan).
Ang pagbubuklod ng isang antigen determinant (epitope) sa aktibong site ng isang antibody Fab fragment ay dahil sa mga puwersa ng van der Waals, hydrogen bond, at hydrophobic na pakikipag-ugnayan. Ang lakas at dami ng antigen na nakagapos ng mga antibodies ay nakadepende sa affinity, avidity ng antibodies at kanilang valency.
No. 2 Ang mga sanhi ng ahente ng leishmaniasis. Taxonomy. Tampok. Microbiological diagnostics. Paggamot.
Taxonomy: uri Sarcomastigophorae, subtype Mastigophora - flagella, klase Zoomastigophora, order Kinetoplastida, genus Leishmania.
paglilinang: NNN culture medium na naglalaman ng defibrinated rabbit blood agar. Lumalaki din ang Leishmania sa chorion-allantoic membrane ng chick embryo at sa mga cell culture.
Epidemiology: sa mga bansang may mainit na klima. Ang mekanismo ng paghahatid ng mga pathogen ay naililipat, sa pamamagitan ng kagat ng mga vectors - lamok. Ang pangunahing pinagmumulan ng mga pathogens: sa cutaneous anthroponotic leishmaniasis - mga tao; na may cutaneous zoonotic leishmaniasis - rodents; na may visceral leishmaniasis - mga tao; na may mucocutaneous leishmaniasis - mga rodent, ligaw at alagang hayop.
Pathogenesis at klinika. Mayroong dalawang causative agent ng cutaneous leishmaniasis: L. tropica, ang causative agent ng anthroponotic leishmaniasis, at L. major, ang causative agent ng zoonotic cutaneous leishmaniasis.
Ang anthroponotic cutaneous leishmaniasis ay nailalarawan sa pamamagitan ng isang mahabang panahon ng pagpapapisa ng itlog - ilang buwan. Sa lugar ng kagat ng lamok, lumilitaw ang isang tubercle, na tumataas at nag-ulserate pagkatapos ng 3 buwan. Ang mga ulser ay mas madalas na matatagpuan sa mukha at itaas na paa, na may peklat sa pagtatapos ng taon. Ang zoonotic cutaneous leishmaniasis (maagang ulcerative leishmaniasis, Pendinsky ulcer, rural form) ay mas talamak. Ang panahon ng pagpapapisa ng itlog ay 2-4 na linggo. Ang mga umiiyak na ulser ay mas madalas na naisalokal sa mas mababang mga paa't kamay. Ang mucocutaneous leishmaniasis ay sanhi ng leishmania ng L. braziliensis complex; bubuo ng granulomatous at ulcerative lesyon ng balat ng ilong, mauhog lamad ng bibig at larynx. Antraponous visceral leishmaniasis ay sanhi ng leishmania ng L. donovani complex; sa mga pasyente, apektado ang atay, pali, lymph node, bone marrow at digestive tract.
Immunity: patuloy na habambuhay
Sa mga pahid (mula sa mga tubercle, mga nilalaman ng mga ulser, mga punctates mula sa mga organo), na may mantsa ayon sa Romanovsky-Giemsa, maliit, hugis-itlog na leishmania (amastigotes) ay matatagpuan sa intracellularly na matatagpuan. Upang ihiwalay ang isang purong kultura ng pathogen, ang inoculation ay ginagawa sa NNN medium: incubation para sa 3 linggo. Ang mga pamamaraan ng serological ay hindi sapat na tiyak. Posibleng gumamit ng RIF, ELISA.
Ang skin allergy test para sa HRT sa leishmanin ay ginagamit sa epidemiological studies ng leishmaniasis.
Paggamot: Sa visceral leishmaniasis, ang mga paghahanda ng antimony at diamidines (pentamidine) ay ginagamit. Sa cutaneous leishmaniasis - quinacrine, amphotericin.
Pag-iwas: sirain ang mga may sakit na hayop, isagawa ang paglaban sa mga daga at lamok. Ang immunoprophylaxis ng cutaneous leishmaniasis ay isinasagawa sa pamamagitan ng inoculation ng isang live na kultura ng L. major.
TICKET#28
№ 1Mga immunoglobulin, istraktura at mga function.
likas na katangian ng immunoglobulins. Bilang tugon sa pagpapakilala ng isang antigen, ang immune system ay gumagawa ng mga antibodies - mga protina na maaaring partikular na magbigkis sa antigen na naging sanhi ng kanilang pagbuo, at sa gayon ay lumahok sa mga immunological na reaksyon. Ang mga antibodies ay nabibilang sa?-globulins, ibig sabihin, ang bahagi ng mga protina ng serum ng dugo na pinakamaliit na gumagalaw sa isang electric field. Sa katawan, ang?-globulins ay ginawa ng mga espesyal na selula - mga selula ng plasma. Ang mga α-globulin na nagdadala ng mga function ng antibodies ay tinatawag na immunoglobulins at tinutukoy ng simbolo na Ig. Samakatuwid, ang mga antibodies ay mga immunoglobulin na ginawa bilang tugon sa pagpapakilala ng isang antigen at may kakayahang partikular na makipag-ugnayan sa parehong antigen.
Mga pag-andar. Ang pangunahing pag-andar ay ang pakikipag-ugnayan ng kanilang mga aktibong sentro sa kanilang mga pantulong na determinants ng antigens. Ang pangalawang function ay ang kanilang kakayahang:
Itali ang antigen upang neutralisahin ito at alisin ito mula sa katawan, ibig sabihin, makilahok sa pagbuo ng proteksyon laban sa antigen;
Makilahok sa pagkilala ng isang "banyagang" antigen;
Tiyakin ang pakikipagtulungan ng mga immunocompetent na selula (macrophages, T- at B-lymphocytes);
Makilahok sa iba't ibang anyo ng immune response (phagocytosis, killer function, GNT, HRT, immunological tolerance, immunological memory).
Istraktura ng mga antibodies. Sa mga tuntunin ng komposisyon ng kemikal, ang mga protina ng immunoglobulin ay nabibilang sa mga glycoprotein, dahil binubuo sila ng protina at asukal; binuo mula sa 18 amino acids. Mayroon silang mga pagkakaiba sa species na pangunahing nauugnay sa isang hanay ng mga amino acid. Ang kanilang mga molekula ay may cylindrical na hugis, nakikita sila sa isang electron microscope. Hanggang sa 80% ng mga immunoglobulin ay may sedimentation constant na 7S; lumalaban sa mahinang acids, alkalis, pag-init hanggang 60 °C. Posibleng ihiwalay ang mga immunoglobulin mula sa serum ng dugo sa pamamagitan ng pisikal at kemikal na mga pamamaraan (electrophoresis, isoelectric precipitation na may alkohol at mga acid, salting out, affinity chromatography, atbp.). Ang mga pamamaraang ito ay ginagamit sa produksyon sa paghahanda ng immunobiological na paghahanda.
Ang mga immunoglobulin ay nahahati sa limang klase ayon sa kanilang istraktura, antigenic at immunobiological properties: IgM, IgG, IgA, IgE, IgD. Ang mga immunoglobulin M, G, A ay may mga subclass. Halimbawa, ang IgG ay may apat na subclass (IgG, IgG 2, IgG 3, IgG 4). Ang lahat ng mga klase at subclass ay naiiba sa pagkakasunud-sunod ng amino acid.
Ang mga molekula ng immunoglobulin ng lahat ng limang klase ay binubuo ng mga polypeptide chain: dalawang magkaparehong mabibigat na kadena H at dalawang magkaparehong light chain - L, na konektado ng mga tulay na disulfide. Ayon sa bawat klase ng immunoglobulins, i.e. M, G, A, E, D, nakikilala ang limang uri ng mabibigat na tanikala: ? (mu), ? (gamma), ? (alpha), ? (epsilon) at? (delta), naiiba sa antigenicity. Ang mga light chain ng lahat ng limang klase ay karaniwan at may dalawang uri: ? (kappa) at? (lambda); Ang mga L-chain ng immunoglobulins ng iba't ibang klase ay maaaring sumali (recombine) sa parehong homologous at heterologous H-chain. Gayunpaman, ang magkaparehong L-chain (? o?) lamang ang maaaring nasa parehong molekula. Ang parehong H- at L-chain ay may variable - V na rehiyon, kung saan ang pagkakasunud-sunod ng amino acid ay hindi matatag, at isang pare-pareho - C na rehiyon na may pare-parehong hanay ng mga amino acid. Sa magaan at mabibigat na kadena, ang NH 2 - at COOH-terminal na mga grupo ay nakikilala.
Sa panahon ng pagproseso? -Globulin mercaptoethanol ay sumisira sa disulfide bond at ang immunoglobulin molecule ay nabubulok sa magkahiwalay na chain ng polypeptides. Kapag nalantad sa proteolytic enzyme papain, ang immunoglobulin ay nahahati sa tatlong fragment: dalawang non-crystallizing fragment na naglalaman ng determinant group sa antigen at tinatawag na Fab fragment I at II, at isang crystallizing Fc fragment. Ang mga fragment ng FabI at FabII ay magkatulad sa mga katangian at komposisyon ng amino acid at naiiba sa Fc fragment; Ang mga Fab- at Fc-fragment ay mga compact formation na magkakaugnay ng mga nababaluktot na seksyon ng H-chain, dahil sa kung saan ang mga molekula ng immunoglobulin ay may nababaluktot na istraktura.
Ang parehong H-chain at L-chain ay may magkahiwalay, linearly na konektadong mga compact na rehiyon na tinatawag na mga domain; mayroong 4 sa kanila sa H-chain, at 2 sa L-chain.
Ang mga aktibong site, o mga determinant, na bumubuo sa mga V-region ay sumasakop sa humigit-kumulang 2% ng ibabaw ng isang molekula ng immunoglobulin. Ang bawat molekula ay may dalawang determinant na nauugnay sa mga hypervariable na rehiyon ng H at L na mga kadena, ibig sabihin, ang bawat molekula ng immunoglobulin ay maaaring magbigkis ng dalawang molekula ng antigen. Samakatuwid, ang mga antibodies ay divalent.
Ang karaniwang istraktura ng isang molekula ng immunoglobulin ay IgG. Ang natitirang mga klase ng immunoglobulins ay naiiba sa IgG sa mga karagdagang elemento ng organisasyon ng kanilang mga molekula.
Bilang tugon sa pagpapakilala ng anumang antigen, ang mga antibodies ng lahat ng limang klase ay maaaring magawa. Karaniwan, ang IgM ay ginawa muna, pagkatapos ay ang IgG, ang natitira - ilang sandali.
No. 2 Ang causative agent ng chlamydia. Taxonomy. Tampok. Microbiological diagnostics. Paggamot.
Taxonomy: order Chlamydiales, pamilya Chlamydaceae, genus Chlamydia. Ang genus ay kinakatawan ng species na C.trachomatis, C.psittaci, C.pneumoniae.
Ang mga sakit na dulot ng chlamydia ay tinatawag chlamydia. Ang mga sakit na dulot ng C. trachomatis at C. pneumoniae ay anthroponoses. Ang Ornithosis, ang causative agent kung saan ay C. psittaci, ay isang zooanthroponotic infection.
Morpolohiya ng chlamydia: maliit, gramo "-" bacteria, spherical na hugis. Huwag bumuo ng mga spores, walang flagella at kapsula. Cell wall: 2-layer na lamad. Mayroon silang glycolipids. Ang gramo ay pula. Ang pangunahing paraan ng paglamlam ay ayon sa Romanovsky-Giemsa.
2 anyo ng pag-iral: elementarya na katawan (hindi aktibong nakakahawang mga particle, sa labas ng cell); reticular na katawan (sa loob ng mga cell, vegetative form).
Paglilinang: Maaari lamang palaganapin sa mga buhay na selula. Sa yolk sac ng pagbuo ng mga embryo ng manok, mga sensitibong hayop at sa kultura ng cell
Enzymatic na aktibidad: maliit. Nag-ferment sila ng pyruvic acid at nag-synthesize ng mga lipid. Hindi kayang mag-synthesize ng mga high-energy compound.
Antigenic na istraktura: Antigens ng tatlong uri: genus-specific thermostable lipopolysaccharide (sa cell wall). Nakilala sa tulong ng RSK; species-specific antigen ng isang likas na protina (sa panlabas na lamad). I-detect gamit ang RIF; variant-specific antigen ng isang likas na protina.
mga kadahilanan ng pathogenicity. Ang mga protina ng panlabas na lamad ng chlamydia ay nauugnay sa kanilang mga katangian ng malagkit. Ang mga adhesin na ito ay matatagpuan lamang sa elementarya. Ang Chlamydia ay gumagawa ng endotoxin. Ang ilang chlamydia ay natagpuan na may heat shock protein na maaaring magdulot ng mga autoimmune reaction.
paglaban. Mataas sa iba't ibang mga kadahilanan sa kapaligiran. Lumalaban sa mababang temperatura, pagpapatayo. Sensitibo sa init.
Ang C. trachomatis ay ang causative agent ng mga sakit ng genitourinary system, mata at respiratory tract sa mga tao.
Ang trachoma ay isang talamak na nakakahawang sakit na nailalarawan sa pinsala sa conjunctiva at cornea ng mga mata. Antroponosis. Ipinadala sa pamamagitan ng contact-household na paraan.
Pathogenesis: nakakaapekto sa mauhog lamad ng mga mata. Ito ay tumagos sa epithelium ng conjunctiva at cornea, kung saan ito ay dumarami, na sumisira sa mga selula. Ang follicular keratoconjunctivitis ay bubuo.
Diagnostics: pagsusuri ng mga scrapings mula sa conjunctiva. Sa mga apektadong selula, kapag nabahiran ayon sa Romanovsky-Giemsa, ang mga cytoplasmic inclusions ng purple na kulay ay matatagpuan, na matatagpuan malapit sa nucleus - katawan ng Provachek. Ginagamit din ang RIF at ELISA upang makita ang isang tiyak na chlamydial antigen sa mga apektadong selula. Minsan sila ay gumagamit ng paglilinang ng chlamydia trachoma sa mga embryo ng manok o kultura ng cell.
Paggamot: antibiotics (tetracycline) at immunostimulants (interferon).
Pag-iwas: Nonspecific.
Ang urogenital chlamydia ay isang sakit na nakukuha sa pakikipagtalik. Ito ay isang talamak / talamak na nakakahawang sakit, na kung saan ay nailalarawan sa pamamagitan ng isang nangingibabaw na sugat ng genitourinary tract.
Ang impeksyon sa tao ay nangyayari sa pamamagitan ng mga mucous membrane ng genital tract. Ang pangunahing mekanismo ng impeksyon ay pakikipag-ugnay, ang paraan ng paghahatid ay sekswal.
Ang kaligtasan sa sakit: cellular, na may serum ng mga nahawaang - tiyak na antibodies. Pagkatapos ng inilipat na sakit - hindi ito nabuo.
Mga diagnostic: Sa mga sakit ng mata, ginagamit ang isang bacterioscopic na paraan - ang mga intracellular inclusions ay napansin sa mga scrapings mula sa epithelium ng conjunctiva. Ang RIF ay ginagamit upang makita ang chlamydia antigen sa mga apektadong selula. Sa kaso ng pinsala sa genitourinary tract, ang isang biological na pamamaraan ay maaaring ilapat, batay sa impeksyon sa materyal ng pagsubok (mga scrapings ng epithelium mula sa urethra, puki) ng cell culture.
Pahayag ng RIF, ELISA ay nagbibigay-daan sa iyo upang makita ang mga antigen ng chlamydia sa materyal na pagsubok. Serological method - para sa pagtuklas ng IgM laban sa C. trachomatis sa diagnosis ng pneumonia sa mga bagong silang.
Paggamot. antibiotics (azithromycin mula sa macrolide group), immunomodulators, eubiotics.
Pag-iwas. Tanging hindi tiyak (paggamot sa mga pasyente), personal na kalinisan.
Ang venereal lymphogranuloma ay isang sakit na nakukuha sa pakikipagtalik na nailalarawan sa pamamagitan ng mga sugat ng mga genital organ at rehiyonal na lymph node. Ang mekanismo ng impeksyon ay pakikipag-ugnay, ang ruta ng paghahatid ay sekswal.
Immunity: paulit-ulit, cellular at humoral na kaligtasan sa sakit.
Diagnostics: Ang materyal para sa pag-aaral ay nana, biopsy mula sa mga apektadong lymph node, serum ng dugo. Bacterioscopic method, biological (paglilinang sa yolk sac ng isang embryo ng manok), serological (RCC na may paired sera ay positibo) at allergological (intradermal test na may chlamydia allergen) na pamamaraan.
Paggamot. Antibiotics - macrolides at tetracyclines.
Pag-iwas: Hindi tiyak.
C. pneumoniae - ang causative agent ng respiratory chlamydia, ay nagdudulot ng talamak at talamak na brongkitis at pulmonya. Antroponosis. Ang impeksyon ay sa pamamagitan ng airborne droplets. Pumasok sila sa mga baga sa pamamagitan ng upper respiratory tract. Magdulot ng pamamaga.
Diagnostics: pagtatakda ng RSK para sa pagtuklas ng mga tiyak na antibodies (paraan ng serological). Sa pangunahing impeksiyon, ang pagtuklas ng IgM ay isinasaalang-alang. Ginagamit din ang RIF upang makita ang chlamydial antigen at PCR.
Paggamot: Isinasagawa sa tulong ng mga antibiotics (tetracyclines at macrolides).
Pag-iwas: Hindi tiyak.
Ang C. psittaci ay ang causative agent ng ornithosis, isang talamak na nakakahawang sakit na nailalarawan sa pamamagitan ng pinsala sa mga baga, nervous system, at parenchymal organs (liver, spleen) at pagkalasing.
Zooanthroponosis. Mga mapagkukunan ng impeksyon - mga ibon. Ang mekanismo ng impeksyon ay aerogenic, ang ruta ng paghahatid ay nasa hangin. Ang causative agent ay sa pamamagitan ng mucus. humihinga ang mga shell. pathways, sa epithelium ng bronchi, alveoli, multiplies, pamamaga.
Diagnostics: Ang materyal para sa pag-aaral ay dugo, plema ng pasyente, serum ng dugo para sa serological testing.
Ang isang biological na paraan ay ginagamit - ang paglilinang ng chlamydia sa yolk sac ng isang embryo ng manok, sa cell culture. Serological na pamamaraan. Mag-apply ng RSK, RPHA, ELISA, gamit ang paired blood serum ng pasyente. Intradermal allergy test na may ornithine.
Paggamot: antibiotics (tetracyclines, macrolides).
TICKET#29
No. 1 Ang causative agent ng dipterya. Taxonomy at katangian. May kondisyon na pathogenic corynebacteria. Microbiological diagnostics. Pagtuklas ng anatoxic immunity. Tukoy na pag-iwas at paggamot.
Ang diphtheria ay isang talamak na nakakahawang sakit na nailalarawan sa pamamagitan ng pamamaga ng fibrinous sa pharynx, larynx, mas madalas sa ibang mga organo at pagkalasing. Ang causative agent nito ay Corynebacterium diphtheriae.
Taxonomy. Ang Corynebacterium ay kabilang sa dibisyon ng Firmicutes, ang genus na Corynebacterium.
Morphological at tinctorial properties. Ang causative agent ng diphtheria ay nailalarawan sa pamamagitan ng polymorphism: manipis, bahagyang hubog na mga rod (pinakakaraniwan), coccoid at branching form ay matatagpuan. Ang bakterya ay madalas na matatagpuan sa isang anggulo sa bawat isa. Hindi sila bumubuo ng mga spores, walang flagella, maraming mga strain ang may microcapsule. Ang isang tampok na katangian ay ang pagkakaroon ng mga butil ng volutin sa mga dulo ng stick (nagdudulot ng hugis club na hugis). Ang causative agent ng diphtheria ayon sa Gram stain ay positibo.
mga katangiang pangkultura. Facultative anaerobe, opt. temperatura. Ang microbe ay lumalaki sa espesyal na nutrient media, halimbawa, sa Clauberg's medium (blood-tellurite agar), kung saan ang diphtheria bacillus ay nagbibigay ng mga kolonya ng 3 uri: a) malaki, kulay abo, may tulis-tulis na mga gilid, radial striation, na kahawig ng mga daisies; b) maliit, itim, matambok, na may makinis na mga gilid; c) katulad ng una at pangalawa.
Depende sa mga katangian ng kultura at enzymatic, 3 biological na variant ng C. diphtheriae ay nakikilala: gravis, mitis at intermediate intermedius.
aktibidad ng enzymatic. Mataas. Nag-ferment sila ng glucose at maltose sa pagbuo ng acid, hindi nabubulok ang sucrose, lactose at mannitol. Hindi sila gumagawa ng urease at hindi bumubuo ng indole. Gumagawa ng enzyme cystinase, na pumuputol ng cysteine sa H 2 S. Bumubuo ng catalase, succinate dehydrogenase.
mga katangian ng antigenic. Ang mga O-antigen ay mga thermostable polysaccharides na matatagpuan malalim sa cell wall. K-antigens - mababaw, thermolabile, grayish-specific. Sa tulong ng sera sa K-antigen C. diph. nahahati sa mga serovar (58).
mga kadahilanan ng pathogenicity. Isang exotoxin na nakakagambala sa synthesis ng protina at, bilang resulta, nakakaapekto sa mga selula ng myocardium, adrenal glands, kidney, at nerve ganglia. Ang kakayahang gumawa ng exotoxin ay dahil sa presensya sa cell ng isang prophage na nagdadala ng tox gene na responsable para sa pagbuo ng lason. Mga enzyme ng pagsalakay - hyaluronidase, neuraminidase. Ang microcapsule ay kabilang din sa mga kadahilanan ng pathogenicity.
paglaban. Lumalaban sa pagpapatayo, mababang temperatura, kaya sa loob ng ilang araw maaari itong maimbak sa mga bagay, sa tubig.
Epidemiology. Ang pinagmulan ng dipterya - mga taong may sakit Ang impeksyon ay nangyayari nang mas madalas sa pamamagitan ng respiratory tract. Ang pangunahing ruta ng paghahatid ay nasa eruplano, at posible rin ang ruta ng pakikipag-ugnay - sa pamamagitan ng linen, mga pinggan.
Pathogenesis. Ang entrance gate ng impeksyon ay ang mauhog lamad ng pharynx, ilong, respiratory tract, mata, maselang bahagi ng katawan, ibabaw ng sugat. Sa site ng entrance gate, ang fibrinous na pamamaga ay sinusunod, ang isang katangian na pelikula ay nabuo, na halos hindi nakahiwalay mula sa pinagbabatayan na mga tisyu. Ang mga bakterya ay naglalabas ng exotoxin na pumapasok sa dugo - nagkakaroon ng toxinemia. Ang lason ay nakakaapekto sa myocardium, kidney, adrenal glands, at nervous system.
Klinika. Mayroong iba't ibang mga anyo ng lokalisasyon ng dipterya: dipterya ng pharynx, na sinusunod sa 85-90% ng mga kaso, dipterya ng ilong, larynx, mata, vulva, balat, mga sugat. Ang panahon ng pagpapapisa ng itlog ay mula 2 hanggang 10 araw. Ang sakit ay nagsisimula sa lagnat, sakit kapag lumulunok, ang hitsura ng isang pelikula sa tonsils, namamaga lymph nodes. Ang pamamaga ng larynx, nabubuo ang diphtheria croup, na maaaring humantong sa asphyxia at kamatayan. Ang iba pang malubhang komplikasyon na maaari ring maging sanhi ng kamatayan ay ang nakakalason na myocarditis, paralisis ng mga kalamnan sa paghinga.
Ang kaligtasan sa sakit. Pagkatapos ng sakit - patuloy, matinding antitoxic immunity. Ang partikular na kahalagahan ay ang pagbuo ng mga antibodies sa fragment B. Nine-neutralize nila ang diphtheria histotoxin, na pumipigil sa pagkakabit ng huli sa cell. Antibacterial immunity - unstressed, grayish-specific
Microbiological diagnostics. Sa tulong ng isang tampon, ang isang pelikula at uhog mula sa lalamunan at ilong ay kinuha mula sa pasyente. Upang makagawa ng isang paunang pagsusuri, posible na gumamit ng isang bacterioscopic na paraan. Ang pangunahing paraan ng diagnostic ay bacteriological: inoculation sa Klauber II medium (blood-tellurite agar), sa isang siksik na serum medium upang makita ang produksyon ng cystinase, sa Hiss medium, sa isang medium upang matukoy ang toxigenicity ng pathogen. Ang intraspecific na pagkakakilanlan ay binubuo sa pagtukoy ng bio- at serovar. Para sa pinabilis na pagtuklas ng diphtheria toxin, ang mga sumusunod ay ginagamit: RIHA (indirect hemagglutination reaction) na may antibody erythrocyte diagnosticum, isang antibody neutralization reaction (ang pagkakaroon ng lason ay hinuhusgahan ng epekto ng pagpigil sa hemagglutination); RIA (radioimmune) at ELISA (enzymatic immunoassay).
Paggamot. Ang pangunahing paraan ng therapy ay ang agarang pangangasiwa ng isang tiyak na antitoxic antidiphtheria equine liquid serum. Human immunoglobulin antidiphtheria para sa intravenous administration.
Mga kaugnay na bakuna: DTP (absorbed pertussis-tetanus vaccine), DTP (absorbed diphtheria-tetanus toxoid).
№ 2 Mga klase ng immunoglobulin, ang kanilang mga katangian.
Ang mga immunoglobulin ay nahahati sa limang klase ayon sa kanilang istraktura, antigenic at immunobiological properties: IgM, IgG, IgA, IgE, IgD.
Immunoglobulin class G. Ang Isotype G ay ang bulk ng Ig serum. Ito ay bumubuo ng 70-80% ng lahat ng serum Ig, habang ang 50% ay matatagpuan sa tissue fluid. Ang average na nilalaman ng IgG sa serum ng dugo ng isang malusog na may sapat na gulang ay 12 g/l. Ang kalahating buhay ng IgG ay 21 araw.
Ang IgG ay isang monomer na mayroong 2 antigen-binding centers (maaari itong sabay na magbigkis ng 2 antigen molecule, samakatuwid, ang valence nito ay 2), isang molekular na timbang na humigit-kumulang 160 kDa at isang sedimentation constant na 7S. May mga subtype na Gl, G2, G3 at G4. Na-synthesize ng mature B-lymphocytes at plasma cells. Ito ay mahusay na tinukoy sa serum ng dugo sa tuktok ng pangunahin at pangalawang tugon ng immune.
May mataas na affinity. IgGl at IgG3 bind complement, at G3 ay mas aktibo kaysa sa Gl. Ang IgG4, tulad ng IgE, ay may cytophilicity (tropism, o affinity, para sa mga mast cell at basophils) at kasangkot sa pagbuo ng isang type I allergic reaction. Sa mga immunodiagnostic na reaksyon, ang IgG ay maaaring magpakita ng sarili bilang isang hindi kumpletong antibody.
Madaling dumaan sa placental barrier at nagbibigay ng humoral immunity sa bagong panganak sa unang 3-4 na buwan ng buhay. Maaari rin itong mailihim sa sikreto ng mga mucous membrane, kabilang ang gatas sa pamamagitan ng pagsasabog.
Ang IgG ay nagbibigay ng neutralisasyon, opsonization at pag-label ng antigen, na nag-trigger ng complement-mediated cytolysis at antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity.
Immunoglobulin class M. Ang pinakamalaking molekula ng lahat ng Ig. Ito ay isang pentamer na mayroong 10 antigen-binding center, ibig sabihin, ang valency nito ay 10. Ang molekular na timbang nito ay halos 900 kDa, ang sedimentation constant ay 19S. May mga subtype na Ml at M2. Ang mabibigat na kadena ng molekula ng IgM, hindi tulad ng iba pang mga isotype, ay binuo mula sa 5 mga domain. Ang kalahating buhay ng IgM ay 5 araw.
Ito ay bumubuo ng halos 5-10% ng lahat ng serum Ig. Ang average na nilalaman ng IgM sa serum ng dugo ng isang malusog na may sapat na gulang ay humigit-kumulang 1 g/l. Ang antas na ito sa mga tao ay naabot sa edad na 2-4 na taon.
Ang IgM ay phylogenetically ang pinaka sinaunang immunoglobulin. Na-synthesize ng mga precursor at mature na B-lymphocytes. Ito ay nabuo sa simula ng pangunahing immune response, ito rin ang unang na-synthesize sa katawan ng isang bagong panganak - ito ay tinutukoy na sa ika-20 linggo ng intrauterine development.
Ito ay may mataas na avidity at ang pinaka-epektibong complement activator sa classical pathway. Nakikilahok sa pagbuo ng serum at secretory humoral immunity. Bilang isang polymeric na molekula na naglalaman ng isang J-chain, maaari itong bumuo ng isang secretory form at maitago sa pagtatago ng mga mucous membrane, kabilang ang gatas. Karamihan sa mga normal na antibodies at isoagglutinin ay IgM.
Hindi dumadaan sa inunan. Ang pagtuklas ng mga partikular na isotype M antibodies sa serum ng dugo ng isang bagong panganak ay nagpapahiwatig ng isang dating intrauterine infection o placental defect.
Ang IgM ay nagbibigay ng neutralisasyon, opsonization at pag-label ng antigen, nagpapalitaw ng complement-mediated cytolysis at antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity.
Immunoglobulin class A. Umiiral sa serum at secretory form. Humigit-kumulang 60% ng lahat ng IgA ay matatagpuan sa mucosal secretions.
Serum IgA: Ito ay bumubuo ng halos 10-15% ng lahat ng serum Ig. Ang serum ng dugo ng isang malusog na may sapat na gulang ay naglalaman ng mga 2.5 g / l ng IgA, ang maximum ay naabot sa edad na 10. Ang kalahating buhay ng IgA ay 6 na araw.
Ang IgA ay isang monomer, mayroong 2 antigen-binding centers (i.e., 2-valent), isang molekular na timbang na humigit-kumulang 170 kDa, at isang sedimentation constant na 7S. Mayroong mga subtype na A1 at A2. Na-synthesize ng mature B-lymphocytes at plasma cells. Ito ay mahusay na tinukoy sa serum ng dugo sa tuktok ng pangunahin at pangalawang tugon ng immune.
May mataas na affinity. Maaaring isang hindi kumpletong antibody. Hindi nagbubuklod ng pandagdag. Hindi dumaan sa placental barrier.
Ang IgA ay nagbibigay ng neutralisasyon, opsonization at pag-label ng antigen, na nag-trigger ng antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity.
Secretory IgA: Hindi tulad ng serum, ang secretory sIgA ay umiiral sa polymeric form bilang isang di- o trimer (4- o 6-valent) at naglalaman ng J- at S-peptides. Molecular weight 350 kDa at mas mataas, sedimentation constant 13S and above.
Ito ay na-synthesize ng mga mature na B-lymphocytes at ang kanilang mga inapo - mga selula ng plasma ng kaukulang espesyalisasyon sa loob lamang ng mga mucous membrane at inilabas sa kanilang mga lihim. Ang dami ng produksyon ay maaaring umabot sa 5 g bawat araw. Ang slgA pool ay itinuturing na pinakamarami sa katawan - ang bilang nito ay lumampas sa kabuuang nilalaman ng IgM at IgG. Hindi ito matatagpuan sa serum ng dugo.
Ang secretory form ng IgA ay ang pangunahing kadahilanan sa tiyak na humoral na lokal na kaligtasan sa sakit ng mauhog lamad ng gastrointestinal tract, genitourinary system at respiratory tract. Dahil sa S-chain, lumalaban ito sa mga protease. Ang slgA ay hindi nag-a-activate ng complement ngunit epektibong nagbubuklod sa mga antigens at ni-neutralize ang mga ito. Pinipigilan nito ang pagdirikit ng mga mikrobyo sa mga epithelial cells at ang generalization ng impeksyon sa loob ng mauhog lamad.
Immunoglobulin class E. Tinatawag ding reagin. Ang nilalaman sa serum ng dugo ay napakababa - humigit-kumulang 0.00025 g / l. Ang pagtuklas ay nangangailangan ng paggamit ng mga espesyal na napakasensitibong pamamaraan ng diagnostic. Molecular weight - mga 190 kDa, sedimentation constant - mga 8S, monomer. Ito ay bumubuo ng halos 0.002% ng lahat ng nagpapalipat-lipat na Ig. Ang antas na ito ay naabot ng 10-15 taong gulang.
Ito ay na-synthesize ng mga mature na B-lymphocytes at plasma cells pangunahin sa lymphoid tissue ng bronchopulmonary tree at ng gastrointestinal tract.
Hindi nagbubuklod ng pandagdag. Hindi dumaan sa placental barrier. Ito ay may binibigkas na cytophilicity - tropismo para sa mga mast cell at basophils. Nakikilahok sa pagbuo ng agarang uri ng hypersensitivity - uri I reaksyon.
Immunoglobulin class D. Walang gaanong impormasyon tungkol sa Ig ng isotype na ito. Halos ganap na nakapaloob sa serum ng dugo sa isang konsentrasyon ng tungkol sa 0.03 g / l (mga 0.2% ng kabuuang bilang ng nagpapalipat-lipat na Ig). Ang IgD ay may molecular weight na 160 kDa at isang sedimentation constant na 7S, isang monomer.
Hindi nagbubuklod ng pandagdag. Hindi dumaan sa placental barrier. Ito ay isang receptor para sa mga precursor ng B-lymphocytes.
TICKET#30
No. 1 Ang causative agent ng amoebiasis. Taxonomy. Katangian. Microbiological diagnostics. tiyak na paggamot.
Taxonomy: phylum Sarcomastigophorae, subphylum Sarcodina, klase Lobosia, order Amoebida.
Morpolohiya: Mayroong dalawang yugto ng pag-unlad ng pathogen: vegetative at cystic. Ang vegetative stage ay may ilang mga anyo: malaking vegetative (tissue), maliit na vegetative; precystic form, katulad ng translucent, na bumubuo ng mga cyst.
Ang cyst (resting stage) ay may hugis-itlog na hugis. Ang isang mature cyst ay naglalaman ng 4 na nuclei. Ang translucent na anyo ay hindi aktibo, nabubuhay sa lumen ng itaas na colon bilang isang hindi nakakapinsalang commensal, kumakain ng bakterya at detritus.
Ang isang malaking vegetative form ay nabuo, sa ilalim ng ilang mga kundisyon, mula sa isang maliit na vegetative form. Ito ang pinakamalaki, bumubuo ng pseudopodia at may paggalaw. Maaari phagocytose erythrocytes. Natagpuan sa sariwang dumi sa amoebiasis.
paglilinang: sa nutrient-rich media.
Paglaban: Sa labas ng katawan, ang mga vegetative form ng pathogen ay mabilis na namamatay (sa loob ng 30 minuto). Ang mga cyst ay matatag sa kapaligiran, nananatili sa mga dumi at tubig. Sa mga pagkain, sa mga gulay at prutas, ang mga cyst ay nananatili sa loob ng ilang araw. Namamatay sila kapag pinakuluan.
Epidemiology: Amebiasis - sakit na anthroponotic; ang pinagmulan ng pagsalakay ay tao. Ang mekanismo ng paghahatid ay fecal-oral. Ang impeksyon ay nangyayari kapag ang mga cyst ay ipinakilala sa pagkain, tubig, sa pamamagitan ng mga gamit sa bahay.
Pathogenesis at klinika: Ang mga cyst na pumasok sa bituka, at pagkatapos ay nabuo mula sa kanila, ang mga luminal na anyo ng amoebae ay maaaring mabuhay sa malaking bituka nang hindi nagdudulot ng sakit. Sa pagbaba ng resistensya ng katawan, ang amoeba ay tumagos sa dingding ng bituka at dumami. Ang bituka amebiasis ay bubuo.
Ang mga trophozoites ng tissue form ay mobile dahil sa pagbuo ng pseudopodia. Tumagos sila sa dingding ng colon, na nagiging sanhi ng nekrosis; magagawang phagocytose erythrocytes; ay matatagpuan sa dumi ng tao. Sa nekrosis, nabuo ang mga ulser. Sa klinika, ang bituka na amebiasis ay nagpapakita ng sarili sa anyo ng mga madalas na likidong dumi na may dugo, na sinamahan ng lagnat at pag-aalis ng tubig. Sa mga dumi, matatagpuan ang nana at uhog, kung minsan ay may dugo.
Ang amoeba na may daloy ng dugo ay maaaring pumasok sa atay, baga, utak, na nagreresulta sa pag-unlad ng extraintestinal amoebiasis.
Immunity: Hindi matatag, pangunahin ang cellular link ay isinaaktibo.
Microbiological diagnostics. Ang pangunahing paraan ay isang mikroskopikong pagsusuri ng mga dumi ng pasyente, pati na rin ang mga nilalaman ng mga abscesses ng mga panloob na organo. Ang mga pahid ay nabahiran ng Lugol's solution o hematoxylin. Serological studies (RNGA, ELISA, RSK): ang pinakamataas na titer ng antibodies sa serum ng dugo ay nakita na may extraintestinal amoebiasis.
Paggamot: Ilapat ang metronidazole, furamid.
Pag-iwas: pagkakakilanlan at paggamot ng mga cystic excretor at amoeba carrier, pangkalahatang sanitary measures.
Hindi. 2 Interferon. Kalikasan, mga paraan ng pagkuha. Aplikasyon.
Ang mga interferon ay mga glycoprotein na ginawa ng mga selula bilang tugon sa impeksyon sa viral at iba pang stimuli. Hinaharang nila ang pagpaparami ng virus sa ibang mga selula at nakikilahok sa pakikipag-ugnayan ng mga selula ng immune system. Mayroong dalawang serological na grupo ng mga interferon: uri I - IFN-? at IFN -?; II uri - IFN-.? Ang Type I interferon ay may antiviral at antitumor effect, habang ang type II interferon ay kinokontrol ang tiyak na immune response at nonspecific na resistensya.
Ang interferon (leukocytic) ay ginawa ng mga leukocyte na ginagamot sa mga virus at iba pang mga ahente. Ang α-interferon (fibroblast) ay ginawa ng mga fibroblast na ginagamot sa virus.
Ang Type I IFN ay nagbubuklod sa malusog na mga selula at pinoprotektahan ang mga ito mula sa mga virus. Ang antiviral effect ng type I IFN ay maaaring dahil din sa katotohanang nagagawa nitong pigilan ang paglaganap ng cell sa pamamagitan ng panghihimasok sa synthesis ng mga amino acid.
IFN-? ginawa ng T-lymphocytes at NK. Pinasisigla ang aktibidad ng T- at B-lymphocytes, monocytes / macrophage at neutrophils. Nagdudulot ito ng apoptosis ng mga activated macrophage, keratinocytes, hepatocytes, bone marrow cells, endotheliocytes at pinipigilan ang apoptosis ng peripheral monocytes at herpes-infected neurons.
Ang genetically engineered leukocyte interferon ay ginawa sa prokaryotic system (E. coli). Biotechnology para sa paggawa ng leukocyte interferon kasama ang mga sumusunod na hakbang: 1) paggamot ng leukocyte mass na may interferon inducers; 2) paghihiwalay ng pinaghalong mRNA mula sa ginagamot na mga cell; 3) pagkuha ng kabuuang komplementaryong DNA gamit ang reverse transcriptase; 4) pagpasok ng cDNA sa Escherichia coli plasmid at pag-clone nito; 5) pagpili ng mga clone na naglalaman ng mga interferon genes; 6) pagsasama sa plasmid ng isang malakas na tagataguyod para sa matagumpay na transkripsyon ng gene; 7) pagpapahayag ng interferon gene, i.e. synthesis ng kaukulang protina; 8) pagkasira ng mga prokaryotic cells at paglilinis ng interferon gamit ang affinity chromatography.
Mga interferon mag-apply para sa pag-iwas at paggamot ng isang bilang ng mga impeksyon sa viral. Ang kanilang epekto ay tinutukoy ng dosis ng gamot, ngunit ang mataas na dosis ng interferon ay may nakakalason na epekto. Ang mga interferon ay malawakang ginagamit para sa trangkaso at iba pang mga talamak na sakit sa paghinga. Ang gamot ay epektibo sa mga unang yugto ng sakit, na inilapat nang topically. Ang mga interferon ay may therapeutic effect sa hepatitis B, herpes, at gayundin sa malignant neoplasms.
11621 0
Ang mga reaksyon ng serological ay itinalaga alinsunod sa mga phenomena na kasama ng pagbuo ng isang antigen-antibody complex sa panahon ng pakikipag-ugnayan ng mga sangkap na may iba't ibang mga katangian. May mga reaksyon ng agglutination, precipitation at lysis.
Agglutination reaction (RA)
Ang agglutination reaction (RA) ay batay sa paggamit ng corpuscular antigen (suspension ng bacteria, sensitized erythrocytes, latex particles, atbp.) na nakikipag-ugnayan sa mga partikular na antibodies, bilang resulta kung saan ang nagreresultang antigen-antibody complex ay namuo. Ang reaksyong ito ay malawakang ginagamit sa laboratory practice para sa serological diagnosis ng bacterial infections at para sa pagkilala ng mga nakahiwalay na microorganism.
Ang RA ay ginagamit upang masuri ang maraming mga nakakahawang sakit: brucellosis (Wright, Heddleson reaction), tularemia, leptospirosis (RAL - leptospira agglutination at lysis reaction), listeriosis, typhus (RAP - rickettsia agglutination reaction), shigellosis, yersiniosis, pseudotuberculosis, atbp.
Ang reaksyon ng hindi direkta, o passive, agglutination (RIGA o RPGA).
Upang i-set up ang reaksyong ito, ginagamit ang mga erythrocytes ng mga hayop (tupa, unggoy, guinea pig, ilang ibon) na sensitibo sa mga antibodies o antigen, na nakakamit sa pamamagitan ng pagpapapisa ng suspensyon ng mga erythrocytes at solusyon ng antigen o immune serum.
Ang mga diagnostic na nakuha batay sa mga erythrocytes na na-sensitize sa mga antigen ay tinatawag antigenic erythrocyte diagnosticums. Idinisenyo ang mga ito upang makita ang mga antibodies sa mga serial dilution ng blood sera, tulad ng erythrocyte shigellosis diagnosticums, erythrocyte salmonella O-diagnosticums.
Alinsunod dito, tinatawag ang mga diagnosticum batay sa mga erythrocytes na na-sensitize sa mga partikular na immunoglobulin antibody(immunoglobulin) diagnosticums at nagsisilbi silang pagtuklas ng mga antigens sa iba't ibang materyal, halimbawa, isang erythrocyte immunoglobulin diphtheria diagnosticum para sa RIGA, na ginagamit upang makita ang diphtheria exotoxin ng corynebacteria sa isang likidong nutrient medium kapag ang materyal mula sa ilong at oropharynx ay na-inoculate dito.
Ang reaksyon ng hemagglutination ay ginagamit upang masuri ang parehong bacterial (typhoid fever, paratyphoid, dysentery, brucellosis, plague, cholera, atbp.) at viral (influenza, adenovirus infections, measles, atbp.) na impeksyon. Ang RIGA ay higit na mataas sa sensitivity at specificity sa RA.
Hemagglutination inhibition reaction (HITA)
Ang hemagglutination inhibition test (HITA) ay ginagamit upang i-titrate ang mga antiviral antibodies sa sera ng dugo, gayundin upang maitatag ang uri ng kaakibat ng mga nakahiwalay na kulturang viral. Maaaring gamitin ang RTHA upang masuri ang mga impeksyon sa viral na ang mga pathogen ay may mga katangian ng hemagglutinating.
Ang prinsipyo ng pamamaraan ay ang serum na naglalaman ng mga antibodies sa isang tiyak na uri ng virus ay pinipigilan ang aktibidad ng hemagglutinating nito at ang mga erythrocyte ay nananatiling hindi pinagsama-sama.
Reaksyon ng pagsugpo (pagkaantala) ng passive hemagglutination (RTPGA).
Tatlong sangkap ang kasangkot sa RTGA: immune serum, antigen (test material) at sensitized erythrocytes.
Kung ang materyal ng pagsubok ay naglalaman ng isang antigen na partikular na tumutugon sa mga antibodies ng immune standard na serum, pagkatapos ito ay nagbubuklod sa kanila, at sa kasunod na pagdaragdag ng mga erythrocytes na na-sensitize sa isang antigen na homologous sa serum, ang hemagglutination ay hindi mangyayari.
Ginagamit ang RTPHA upang makita ang mga microbial antigens, upang mabilang ang mga ito, at upang makontrol din ang pagiging tiyak ng TPHA.
Latex agglutination reaction (RLA)
Ang mga latex particle ay ginagamit bilang mga carrier ng antibodies (immunoglobulins). Ang RLA ay isang malinaw na paraan para sa pag-diagnose ng mga nakakahawang sakit, na isinasaalang-alang ang oras na aabutin (hanggang 10 minuto) at ang kakayahang makakita ng isang antigen sa isang maliit na dami ng materyal sa pagsubok.
Ang RLA ay ginagamit upang ipahiwatig ang mga antigen ng Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae type b, Neisseria meningitidis sa cerebrospinal fluid, para makita ang group A streptococci sa throat swabs, para masuri ang salmonellosis, yersiniosis at iba pang sakit. Ang sensitivity ng pamamaraan ay 1-10 ng/ml, o 10³ -10⁶ bacterial cells sa 1 µl.
Coagglutination reaction (RKoA)
Ang reaksyon ng coagglutination (RKoA) ay batay sa kakayahan ng protina A ng staphylococci na mag-attach ng mga tiyak na immunoglobulin. Ang RKA - isang paraan ng express diagnostics - ay ginagamit upang matukoy ang natutunaw na mga thermostable na antigen sa mga lihim ng tao at sa komposisyon ng circulating immune complexes (CIC). Ang pagtuklas ng mga tiyak na antigens sa komposisyon ng CEC ay nangangailangan ng kanilang paunang pag-ulan mula sa suwero ng dugo.
reaksyon ng pag-ulan
Sa reaksyon ng pag-ulan (RP), bilang isang resulta ng pakikipag-ugnayan ng mga antibodies na may mataas na dispersed na natutunaw na antigens (protina, polysaccharides), ang mga complex ay nabuo kasama ang pakikilahok ng pandagdag - precipitates. Ito ay isang sensitibong pagsubok na ginagamit upang makita at makilala ang iba't ibang mga antigen at antibodies. Ang pinakasimpleng halimbawa ng mataas na kalidad na RP ay ang pagbuo ng isang opaque precipitation band sa isang test tube sa hangganan ng antigen layering sa immune serum - isang ring precipitation reaction. Ang iba't ibang uri ng RP ay malawakang ginagamit sa semi-liquid agar o agarose gels (double immunodiffusion method, radial immunodiffusion method, immunoelectrophoresis).
Complement fixation reaction (CFR)
Ang complement fixation reaction (CFR) ay batay sa phenomenon ng hemolysis na kinasasangkutan ng complement, i.e. maaari lamang tuklasin ang mga antibodies sa pag-aayos ng pandagdag.
Ang RSC ay malawakang ginagamit upang masuri ang maraming bacterial at viral infection, rickettsiosis, chlamydia, infectious mononucleosis, protozoal infection, at helminthiases. Ang RSC ay isang komplikadong serological reaction kung saan dalawang sistema ang kasangkot: ang test system (blood serum), na kinakatawan ng antigen-antibody at complement system, at ang hemolytic (sheep erythrocytes + hemolytic serum). Ang hemolytic serum ay isang heat-inactivated blood serum ng isang kuneho na nabakunahan ng ram erythrocytes. Naglalaman ito ng mga antibodies laban sa mga erythrocytes ng tupa.
Ang isang positibong resulta ng RSK - ang kawalan ng hemolysis - ay sinusunod kung ang test serum ay naglalaman ng mga antibodies na homologous sa antigen. Sa kasong ito, ang nagreresultang antigen-antibody complex ay nagbubuklod ng pandagdag, at sa kawalan ng libreng pandagdag, ang pagdaragdag ng hemolytic system ay hindi sinamahan ng hemolysis. Sa kawalan ng mga antibodies na naaayon sa antigen sa suwero, ang pagbuo ng antigen-antibody complex ay hindi nangyayari, ang pandagdag ay nananatiling libre at ang serum ay nagiging sanhi ng hemolysis ng mga erythrocytes, i.e. ang pagkakaroon ng hemolysis ay isang negatibong resulta ng reaksyon.
Yushchuk N.D., Vengerov Yu.Ya.