Genetski modifikovane vakcine sadrže antigene patogena dobivene korištenjem metoda genetski inženjering, i uključuju samo visoko imunogene komponente koje doprinose formiranju zaštitnog imuniteta.
Postoji nekoliko opcija za stvaranje genetski modifikovanih vakcina:
Uvođenje gena virulencije u avirulentne ili slabo virulentne mikroorganizme.
Uvođenje gena virulencije u nepovezane mikroorganizme sa naknadnom izolacijom Ag i njegovom upotrebom kao imunogenom.
Umjetno uklanjanje gena virulencije i korištenje modificiranih organizama u obliku korpuskularnih vakcina.
Imunobiotehnologija se zasniva na reakciji antigen (AG)-antitijelo (AT). IN
Primjer imunobiotehnološkog genskog procesa je proizvodnja polio virusa iz kulture tkiva žive osobe.
da primi vakcinu. Bioproizvodi (vakcine) moraju biti podvrgnuti rigoroznom testiranju sigurnosti i efikasnosti. Ova faza testiranja vakcine obično zauzima oko dve trećine (2/3) cene vakcine.
Pogledajmo bliže vakcine.
Vakcine su preparati napravljeni od ubijenih ili oslabljenih patogena ili njihovih toksina. Kao što je poznato, vakcine
koristi se u svrhu prevencije ili liječenja. Uvođenje vakcina uzrokuje imunološka reakcija, nakon čega slijedi stjecanje otpornosti ljudskog ili životinjskog organizma na patogene mikroorganizme.
Ako uzmemo u obzir sastav vakcine, oni uključuju:
Aktivni sastojak, koji predstavljaju specifične antigene,
Konzervans koji produžava rok trajanja vakcine
Stabilizator, koji određuje stabilnost vakcine tokom skladištenja,
Polimerni nosač koji povećava imunogenost antigena (AG).
Ispod imunogenost razumjeti svojstvo antigena da izazove imuni odgovor
U ulozi antigen može biti korišteno:
1. živi oslabljeni mikroorganizmi
2. nežive, ubijene mikrobne ćelije ili virusne čestice
3. antigenske strukture, ekstrahovan iz mikroorganizma
4. otpadni proizvodi mikroorganizama, koji koriste toksine kao sekundarne metabolite.
Klasifikacija vakcina prema prirodi specifičnog antigena:
Neživi
Kombinovano.
Pogledajmo pobliže svaki od njih.
Primljene su žive vakcine
a) od prirodnih sojeva mikroorganizama sa oslabljenom virulentnošću za ljude, ali koji sadrže puni set antigena (primjer je virus malih boginja).
b) od vještačkih oslabljenih sojeva.
c) neke vakcine su dobijene genetskim inženjeringom. Za dobivanje takvih vakcina koristi se soj koji nosi gen za strani antigen, na primjer, virus malih boginja s integriranim antigenom hepatitisa B.
2. Nežive vakcine su:
a) molekularne i hemijske vakcine. U ovom slučaju, molekularne vakcine se konstruišu na bazi specifičnog antigena, koji je u molekularnom obliku. Ove vakcine se takođe mogu nabaviti hemijska sinteza ili biosinteza. Primjeri molekularne vakcine su toksoidi. Anatoksini su egzotoksini bakterija koji su izgubili svoju toksičnost kao rezultat dugotrajna izloženost formalin, ali zadržava antigena svojstva. Ovo toksin difterije, toksin tetanusa, butulinski toksin.
b) korpuskularne vakcine, koje se dobijaju iz cele mikrobne ćelije koja je inaktivirana temperaturom, ultraljubičasto zračenje ili hemijske metode, na primjer, alkohol.
3. Kombinovane vakcine. Kombinuju se iz pojedinačnih vakcina,
pretvarajući se u polivakcine koji su sposobni za imunizaciju
od nekoliko infekcija odjednom. Primjer je DTP polivakcina koja sadrži toksoide difterije i tetanusa i korpuskularne antigene pertusisa. Poznato je da se ova vakcina široko koristi u pedijatrijskoj praksi.
Pogledajmo izbliza toksini sa stanovišta njih kao proizvoda vitalne aktivnosti mikroorganizama.
1 grupa toksina je egzotoksini:
egzotoksini su proteinske supstance luče bakterijske ćelije tokom spoljašnje okruženje. Oni u velikoj mjeri određuju patogenost mikroorganizama. Egzotoksini imaju dva centra u svojoj strukturi. Jedan od
Oni fiksiraju molekul toksina na odgovarajući ćelijski receptor, drugi - toksični fragment - prodire u ćeliju, gdje blokira vitalne metaboličke reakcije. Egzotoksini mogu biti toplotno labilni ili toplotno stabilni. Poznato je da pod utjecajem formaldehida gube svoju toksičnost, ali zadržavaju svoja imunogena svojstva - takvi se toksini nazivaju toksoidi.
Toksini grupe 2 su endotoksini.
Endotoksini su strukturne komponente bakterije, koje predstavljaju lipopolisaharide ćelijski zid gram-negativne bakterije. Endotoksini su manje toksični i uništavaju se kada se zagrijavaju na 60-80 0 C tokom 20 minuta. Endotoksini se oslobađaju iz bakterijske ćelije tokom njenog raspadanja. Kada se unesu u organizam, endotoksini pokreću imuni odgovor. Serum se dobija imunizacijom životinja čistim endotoksinom. Međutim, endotoksini su relativno slab imunogen i serum možda nema visoku antitoksičnu aktivnost.
Dobijanje vakcina
1. žive vakcine
1.1.žive bakterijske vakcine. Ovu vrstu vakcine je najlakše nabaviti. U fermentoru se uzgajaju čiste oslabljene kulture.
Postoje 4 glavne faze u dobijanju živih bakterijskih vakcina:
Raste
Stabilizacija
Standardizacija
Sušenje zamrzavanjem.
U tim slučajevima sojevi proizvođači se uzgajaju na tečnom hranljivom mediju u fermentoru kapaciteta do 1-2 m3.
1.2. žive virusne vakcine. U ovom slučaju, vakcine se dobijaju kultivacijom soja u pilećem embrionu ili u kulturama životinjskih ćelija.
2. molekularne vakcine. Da biste imali ideju o ovoj vrsti cjepiva, morate znati da se u ovom slučaju iz mikrobne mase izoluje specifični antigen ili egzotoksini. Pročišćeni su i koncentrirani. Toksini se tada neutraliziraju i toksoidi. Veoma je važno da se specifični antigen može dobiti i hemijskom ili biohemijskom sintezom.
3. korpuskularne vakcine. Mogu se dobiti iz mikrobnih ćelija koje su prethodno kultivisane u fermentoru. Mikrobne ćelije se zatim inaktiviraju temperaturom, ultraljubičastim zračenjem (UV) ili hemikalijama (fenoli ili alkohol).
Serumi
Primjena seruma
1. Serumi se široko koriste u slučajevima prevencije i liječenja
zarazne bolesti.
2. Serumi se koriste i kod trovanja mikrobnim ili životinjskim otrovima - za tetanus, botulizam, difteriju (za inaktivaciju egzotoksina), serumi se koriste i za otrov kobre, poskoka itd.
3. Serumi se mogu koristiti i u dijagnostičke svrhe, za izradu različitih dijagnostičkih kompleta (na primjer, u testovima za trudnoću). U ovom slučaju, antitela se koriste u reakcijama koje formiraju komplekse sa antigenima (antigen (AG) - antitelo (AT), kada se potvrdi prisustvo odgovarajućih antigena, koji se mogu koristiti u različitim reakcijama.
Preventivno ili terapeutski efekat serum je baziran na antitijelima (Ab) sadržanim u serumu
Za masovnu proizvodnju seruma vakcinišu se magarci i konji. Uvod
takav serum daje formiranje pasivnog imuniteta, odnosno organizma
prima gotova antitela. Serumi dobijeni imunizacijom životinja moraju se pratiti prema indikatorima kao što su titar antitela kod životinja za uzimanje krvi od njih u periodu maksimalnog sadržaja antitijela. Iz krvi životinja se izoluje krvna plazma, zatim se iz plazme odstranjuje fibrin i dobija serum. Ovo je jedan od načina da se dobije surutka.
Drugi način za dobivanje seruma je iz uzgojenih životinjskih stanica.
70-ih godina našeg veka, uspesi genetike ćelijski inženjering dao priliku za razvoj nova tehnologija primanje protiv virusne vakcine, koje se nazivaju genetski modifikovane vakcine. Potreba za takvim razvojem bila je diktirana iz sljedećih razloga: 1) nedostatak prirodni izvori sirovine/prikladne životinje; 2) nemogućnost reprodukcije virusa u klasičnim predmetima/kulturi tkiva i sl. Princip stvaranja genetski modifikovanih vakcina obuhvata: a) izolaciju prirodnih antigenskih gena ili njihovih aktivnih fragmenata; b) integracija ovih gena u jednostavne biološke objekte - bakterije, kvasac; c) primanje potreban proizvod u procesu uzgoja biološkog objekta - proizvođača antigena. Genomi virusa su zanemarljivo male veličine u poređenju sa genomom ćelije (prokariotske ili eukariotske). Geni koji kodiraju zaštitne proteine mogu se klonirati direktno iz virusa koji sadrže DNK, ili iz virusa koji sadrže RNK nakon reverzne transkripcije njihovog genoma (za viruse s kontinuiranim genomom) ili čak pojedinačnih gena (za viruse s fragmentiranim genomom). U prvoj fazi razvoja nove biotehnologije, naučnici su se prvenstveno bavili kloniranjem virusnih gena koji kodiraju sintezu proteina koji nose glavne antigene determinante. Ubrzo su dobijeni rekombinantni bakterijski plazmidi koji nose gene ili genome virusa hepatitisa B, gripa i polimiolitisa. Sljedeći korak je bio dobivanje antigena. Pitanje se pokazalo teškim, jer je ekspresija virusnih gena u prokariotskom sistemu bila zanemarljiva. To se može objasniti činjenicom da su se virusi tokom evolucije prilagodili da parazitiraju u ljudskom tijelu. Međutim, vremenom su dobijene ekspresije antigena. A jedan od najtipičnijih primjera koji pokazuje potrebu za stvaranjem genetski modificiranih vakcina je hepatitis B. Problem je u tome što kulture stanica ili životinja osjetljive na virus još nisu pronađene. Stoga je razvoj metode genetskog inženjeringa za proizvodnju vakcina postao neophodnost. Metoda je da se genom klonira u ćelije E. coli pomoću vektora plazmida i faga. Bakterije koje nose rekombinantne plazmide proizvode proteine koji specifično reagiraju s antitijelima protiv samog virusa. Godine 1982. proizvedena je prva eksperimentalna vakcina protiv hepatitisa B u SAD-u za proizvodnju proteina (antigena) specifičnih za virus. eukariotske ćelije(kvasac, životinje). Intenzivno se radi na stvaranju drugih genetski modifikovanih vakcina, posebno protiv gripe, herpesa, slinavke i šapa, krpeljni encefalitis i druge virusne infekcije. Najnoviji pristup stvaranju virusnih vakcina je uključivanje gena odgovornih za sintezu virusnih proteina u genom drugog virusa. Na taj način nastaju rekombinantni virusi koji daju kombinovani imunitet.
- Novi proizvodi u prevenciji zaraznih bolesti. Primjer takve vakcine je vakcina protiv hepatitisa B (17).
Kao bilo šta novo, posebno genetski modifikovan lek za koji je namenjen parenteralna primena(opet kod nas, i to tri sata nakon rođenja deteta!), ova vakcina zahteva dugotrajna posmatranja – tj. mi pričamo o tome o istim „velikim suđenjima... nad djecom“ (18, str. 9; 19; 20, str. 3). Iz ovih publikacija proizilazi: „Zapažanja postaju tačnija i vrednija ako se sprovode tokom masovnih kampanja imunizacije. U takvim kampanjama, veliki broj djeca. Pojava grupe u ovom periodu određeni patološki sindromi obično ukazuje na njihovu uzročnost sa vakcinacijom” (19, str.3).
Kod ovakvih eksperimenata i provođenja „promatranja patoloških sindroma kod djece“ treba žaliti samo za jedno: što djeca i unuci ovog GNIISK kontrolora ne sudjeluju u takvim eksperimentima.
Pored Engerix vakcine protiv hepatitisa B (17), južnokorejska vakcina protiv hepatitisa proglašena je „jednako bezbednom i efikasnom“, koju našoj zemlji aktivno nameće ista francuska kompanija i kupljena za masovne vakcinacije Moskovljana, budući da je „mnogo jeftiniji od Engerixa... ušteđeno, troškovi su prepolovljeni“, kaže L. II, predsjedavajući Moskovskog komiteta za zdravstvo. Selcovsky na televiziji (TVC, 24. maja 2000.)
Vrlo ukratko o fazama pripreme sličnih našoj za kloniranje gena virusa (in u ovom slučaju hepatitis B), obezbeđujući sintezu antigena; uvođenje ovih gena u ćelije koje proizvode vektore (ovde su to ćelije kvasca). A ćelije proizvođači se već koriste za proizvodnju mase vakcine.
VAKCINE POVEZANE S KOMPLEKSOM
Najpoznatiji, prvi - AKDS i njegove druge modifikacije - ADS-M i drugi.
Drugi je protiv malih boginja, zaušnjaka i rubeole.
Treći je protiv velikog kašlja, difterije, tetanusa i dječje paralize (ovo uključuje isključivo inaktiviranu polio vakcinu!) Jedna od varijanti ove vakcine ne sadrži frakciju hripavca.
Četvrta - potpuno nova multikomponentna - HEXAVAC 6-valentna vakcina za primarnu vakcinaciju djece protiv teških dječjih infekcija: velikog kašlja, difterije, tetanusa, dječje paralize (inaktivirana), hepatitisa B i hemofilusa influenca. Sadrži vakcinu protiv hripavca nove generacije, koja se razlikuje od one koja se proizvodi u našoj zemlji. Sada nam se isporučuje vrlo aktivno u različite opcije stranih "dobročinika".
Ova šestokomponentna vakcina je nedavno preporučena za upotrebu u zemljama EEZ (20). Citirani časopis, naravno, navodi da je novorazvijeni ( novo dizajnirano!) vakcina je i dalje skupa i, po svemu sudeći, imaćemo veliku sreću ako vakcinacija počne u... Rusiji.
Proces proučavanja efikasnosti i bezbednosti vakcina, kao i svakog drugog leka, veoma je složen i dugotrajan i traje do 5-8 godina samo u pretkliničkim studijama (21). Zatim se provode klinička i epidemiološka ispitivanja na odraslima i djeci. Sudeći po brojnim publikacijama eksperimentatora, završna faza Najlakši način da se to uradi je kod dece u Rusiji (14) posmatranjem „patoloških sindroma“, kako se navodi u publikacijama kontrolora GNIISK-a.
Bektimirova (19, p.Z), budući da to određuje odgovarajuće karakteristike vakcina.
TABELA 11.1.
ANTI-VIRALNE VAKCINE
ANTIBAKTERIJSKA VAKCINA
Napomena: RATING specifičnog imuniteta(postinfektivno ili postvakcinalno), uključujući radne titre zaštitnih antitijela, određuju se različite metode istraživanja. U svakom slučaju, nakon preležane bolesti ili nakon vakcinacije, treba utvrditi stepen zaštite od zaraznih bolesti.
Takve studije provode mikrobiološke dijagnostičke laboratorije.
Genetski modifikovane vakcine su još jedna preventivna vakcina sa mnogo nepoznanica.
"Nepoznato", prije svega, tiče se naše zemlje, jer ne postoje odgovarajuće eksperimentalne baze. Nismo u mogućnosti provjeriti sigurnost ovih proizvoda genetski modificiranih. Testiranje rekombinantnih lijekova je visokotehnološki eksperiment koji zahtijeva ogromne troškove. Jao, u tom pogledu smo jako daleko od nivoa naprednih laboratorija u svijetu i praktično smo potpuno neusmjereni na kontrolu takvih proizvoda. S tim u vezi, u Rusiji se registruje sve što nije prošlo kliničkim ispitivanjima od stranih proizvođača ovih vakcina, ili su obavljena ispitivanja, ali u nedovoljnim količinama...
Očigledno je da su Sjedinjene Države bile spremne da kontrolišu genetski modifikovane lijekovi, jer je već 1986. njihov Komitet za kontrolu droga i prehrambeni proizvodi prvi put izdao licencu za proizvodnju rekombinantno proizvedene vakcine protiv hepatitisa B (Genet. Technol. News, 1986, 6, br. 9). Tako u SAD-u, nakon rekombinantnog alfa-interferona, ljudski hormon rasta, stvoreni su genetski modifikovani insulin i vakcina protiv hepatitisa B.
Ništa manje važna je činjenica da u SAD, Njemačkoj, Japanu i drugim zemljama koje proizvode vakcine, preduzeća osiguran. Stoga, ako dođe do sudskih sporova, sukoba oko komplikacija nakon vakcinacije i kompanije pretrpe štetu, one imaju pravo odbiti proizvodnju određenog lijeka. Upravo to se dogodilo u SAD, kada su dvije od tri kompanije odbile proizvodnju DTP-a: tužbe su dostigle isplatu od 10 miliona dolara (14, 22, 23).
Šta možemo reći o još jednoj novoj vakcini - infekciji Haemophilus influenzae tipa B (Hib infekcija)? To je kapsularni polisaharid tipa B konjugiran s proteinom toksoida tetanusa. Ne sadrži antibiotike ni konzervanse, ali... vakcina je nova. Osim toga, priprema se još nekoliko vrsta takve vakcine u kombinaciji s drugim lijekovima za registraciju u Rusiji:
HEXAVAC - kombinacija Hib sa DPT, inaktivirana polio vakcina - IPV i HBV - protiv hepatitisa B;
PENTAVAC - kombinacija Hib sa DPT i IPV;
HIBERIX - monovakcina - prečišćeni polisaharid H. ifluenza tipa “B”, takođe konjugovan sa tetanus toksoidom.
Jednom riječju, počeo je svojevrsni „bum vakcina“, sličan dugotrajnom „procvatu lijekova“. Istina, u potonjem slučaju oni napreduju farmakoloških agenasa, koje su, za razliku od vakcina, namenjene za lečenje...
Građani bi trebali biti izuzetno oprezni pri odabiru ovih profilaktička sredstva, pristajući da se "profilaksa imunološkog sistema" provodi samo u slučajevima ozbiljne potrebe.
Veoma sam upoznat sa falsifikovanjem studija o bezbednosti vakcina u našoj zemlji. Do sada je sve ostalo na istom nivou: nema kondicioniranih životinja, eksperimenti na njima se odlikuju izuzetno niskim stupnjem pouzdanosti. Najviše iznenađuje to što se čini da je malo ljudi briga.
Zašto se ovo dešava?
S jedne strane, zbog nerazumijevanja i neoprostive ravnodušnosti prema onome što se zove sistem kontrole koji zadovoljava – mora ispunjavati međunarodne standarde. S druge strane, mnogo je „isplativije“ distribuirati čista laž da su vakcine navodno dobro proučene u pogledu sigurnosti. Treće, nejedinstvo specijalista ne dozvoljava nam da se udubimo u detalje kontrolnog sistema koji postoji u GNIISK-u, koji monopolizuje sve faze razvoja i implementacije vakcina u našoj Otadžbini...
Samo sa dubokim znanjem genetske osobine Uzročnici zaraznih bolesti, vakcinalni sojevi se mogu odabrati i kompetentno (!) kontrolisati, garantujući specifičnu I nespecifičnu sigurnost lijeka (3, 4, 8, 14-16, 21).
Uz to, o gustoj zapuštenosti i „dugoročnoj neriješenosti“ svih faza proizvodnje domaće vakcine Sada javljaju isti (!) kustosi Ministarstva zdravlja, koji decenijama obmanjuju javnost, veličaju i hvale „najbolje sovjetske vakcine na svetu“. U stvari, i to je bila laž...
Ispod specifična sigurnost podrazumijeva odsustvo infektivnog agensa koji se koristi u procesu pripreme lijeka.
Ispod nespecifična sigurnost - potpuno odsustvo sve komponente balasta koje nisu povezane s razvojem specifičnog antiinfektivnog imuniteta.
„Proizvodne poteškoće inaktivirane vakcine sastoje se u potrebi za striktnom kontrolom nad potpunošću inaktivacije, a za živim - nad mogućom reverzijom virulencije patogena" - tj. nad povratkom njegove infektivne aktivnosti (31c, str. 105,106).
"Rezidualne" količine patogena (čak i jedna virusna čestica!) mogu dovesti ne do vakcinacije, već do razvoja infektivnog procesa među osetljivom populacijom.
Dakle, prvo, vakcine se moraju sistematski pratiti radi specifične sigurnosti. U ovom slučaju potrebno je koristiti najnaprednije, visokoosjetljive metode – ne samo testove na životinjama!
Drugo, neophodna je kontrola nespecifične sigurnosti. U ovom slučaju govorimo o potpuno uklanjanje iz sastava bioloških proizvoda bilo kakvih agenasa štetnih po zdravlje djece.
Treće, u kompleksnim vakcinama treba provoditi monitoring kako bi se identificirale negativne interakcije antigena koje dovode do smanjenja ili odsustva specifične aktivnosti.
To bi trebao biti. Istovremeno, sve godine njegovog boravka u GNIISK-u, tj. u Institutu za “Standardizaciju” slušao sam “naučne” izvještaje i izvještaje da treba nešto učiniti da vakcine postanu standardne (2,14, 32). I sam sam se susreo sa problemom nestandardizacije vakcina na primjeru proučavanja brojnih serija DTP. Zbog toga je DTP izabran kao naš eksperimentalni model, proučavano korištenjem novih (za DTP) metoda procjene sigurnosti.
“Zamorci i zečevi su modeli koji nisu dovoljno standardni i neprikladni za proizvodnju DTP-a”, pišu i nastavljaju da prate sigurnost, ne menjajući ništa!- sve na isto zamorci, pozivajući se na „nepoboljšane“ sopstvene podatke iz 60-ih godina prošlog veka (36-39)! - Bilješke iz duševne bolnice, mogli biste pomisliti... Nikako. Ovo je hronika dokumenata koje smo veoma detaljno prikazali u Izveštaju-zbirci RNKB RAN (14).
Dakle, na tragediju naše djece, sve dobre namere u odnosu na proučavanje sigurnosti vakcina, obje su bile “relevantne i obećavajuće” prije 150-200 godina, i ostale su u obliku dobrih želja i deklaracija... do 2000. godine (1-6, 27-32), a jesu vaši razlozi. Glavna je da Stručni komitet SZO, koji distribuira EPI, smatra dovoljnim zahtevima kada je vakcina efikasna u antibakterijskom ili antivirusnom delovanju... i to je sve! Ali vakcina droga, a ako ne ispunjava i svoju svrhu - specifičnu aktivnost, onda, izvinite, kakav je to "antiinfektiv"? profilaktički»?
Nedavni sertifikati zvaničnika, programi za parlamentarna saslušanja, materijali koje je direktor GNIISK predstavio na kongresu "ČOVJEK I LIJEK" 1999. godine ukazuju da materijalno-tehnička baza za proizvodnju i kontrolu vakcina nije pogodna za proizvodnju sigurnih vakcina.
“Dugotrajna neriješena priroda niza problema, posebno u preduzećima pod stalnom kontrolom Ministarstva zdravlja Ruska Federacija, sa niskom radnom kulturom...„(28) [kurziv moj – G. Č.] – sve to, naravno, ne možete preko noći da date garancije bezbednosti domaćih vakcina – o svom radu pišu sami službenici Ministarstva zdravlja!
Ne možemo pravilno kontrolisati vakcine, stvarati uslove za pripremu bezbednih vakcina... Otuda i lavinski broj vakcina raznih dobronamernika koji „pokušavaju da pomognu Rusiji“ i donose nam ne sutrašnje ili današnje tehnologije, već one dana. dojučerašnji dan - u suštini, otpad od njihovog moderna proizvodnja, ili one vakcine koje treba proučavati u “velikim eksperimentima na djeci”. Češće se to naziva "velikim zapažanjima", ali zadatak je jedan - eksperimenti na našoj djeci!
Stoga, kada naiđete na izjavu: “cjepivo ispunjava sve zahtjeve SZO”, nemojte se zavaravati, jer to znači da ne ispunjava visoke međunarodne zahtjeve za standardizaciju i sigurnost koji važe za sve lijekovi i prehrambenih proizvoda. odnosno striktno sprovođenje programa za laboratorijsku (GLP), industrijsku (GMP) i kliničku (GCP) praksu.
U našim publikacijama riječi „biološki proizvodi“ ili DTP-„cjepivo“ često stavljamo pod navodnike, iako se u raznim domaćim referentnim knjigama predstavljaju kao „medicinski imunobiološki preparati“ – MIBP. Međutim, među inaktiviranim vakcinama nema pravih bioloških proizvoda; hemijske supstance, preostali nakon inaktivacije i dodatni aditivi. Prema regulatornoj i tehničkoj dokumentaciji, ovakva situacija je ostala do 2001. godine.
Možda se biološka suština odnosi na visoko pročišćene biološke proizvode - imunoglobuline (ne sadrže konzervanse, ali to se ne odnosi na sve imunoglobuline), interferon, neke žive vakcine, ali ne i na DPT i njegove druge „oslabljene“ modifikacije.
Činjenica je da su naše dugogodišnje eksperimentalne i kontrolne studije utvrdile (2, 14, 32): inaktivirane vakcine, a prije svega DTP, nisu ni biološki ni imunološki. Sa žaljenjem moram priznati odsustvo druge karakteristike u odnosu na domaće antivirusne vakcine... Ni one nisu proučavane zbog njihovog djelovanja na imunokompetentne ćelije. Teško je bilo sa imunološkim metodama 50-60-ih godina 20. vijeka, ali ko je spriječio naše “zdravstvo” da to učini prije trideset godina?! Planine objavljene i odobrene (!)
metodološke preporuke za ovu sekciju. Ali ovdje je uobičajeno: autor-programer metode objavljuje smjernice preko nekog resora Ministarstva zdravlja (!), što je „uvođenje u praksu“, iako do realizacije zapravo i ne dolazi, ma koliko autor tome težio (2, 14, 32).
Podaci koje smo dobili više puta su potvrđivali i drugi specijalisti, pa čak i službenici i kontrolori (1-4, 28-32, 40).
Međutim, u ruskoj pedijatrijskoj zdravstvenoj praksi i dalje se koristi globalna upotreba hemijskih i bioloških konglomerata zvanih vakcine, koje, osim toga, sadrže mnogo više balastnih supstanci. biokomponente koje nemaju nikakve veze sa ciljanim procesom imunogeneze.
I Jennerova pravila i upozorenja starih potpuno su zaboravljena ruski doktori da je vakcina uvek "neizbežno nesigurno". Ovo je opšte prihvaćeno ne samo u SAD (33), već je prihvaćeno i u naše vreme u Rusiji, ali iu bivši SSSR- među našim divnim specijalistima (1-6, 34), ali ne i među službenicima i vakcinatorima opsjednutim željom da vakcinišu "sve po redu"...
Pola veka „zdravstvene prevencije“ ovakvim vakcinama neminovno dovodi do rasta imuno oslabljenih generacija i dovodi do AIDS-a – sindroma stečene imunodeficijencije. O AIDS-u i KVID-u – sindromu kongenitalne imunodeficijencije detaljnije ćemo govoriti u dijelu predavanja o komplikacije nakon vakcinacije, o kontraindikacijama
Što sam šire analizirao proceduru “standardizacije” vakcina, što sam dublje ulazio u dokumente GNIISK-a, Ministarstva zdravlja (što je ista stvar) i u naučne i praktične preporuke, to se jasnije isticala naša zločinačka nemoć. - nedostatak materijalno-tehničke baze za proizvodnju vakcina i njihovu naknadnu kontrolu.
Nerazumijevanje ove situacije od strane kontrolora vakcina govori o najdubljem neznanju u oblasti imunologije, potpunom neinformisanosti u oblasti napretka nauke i tehnologije, kao i o zdravstvenom stanju savremene djece, adolescenata i mladih. odrasli - mladi roditelji! U ovoj oblasti medicine dominira SISTEM (!) koji je potpuno neprobojan i beznadežno zastario.
Sve je bilo rutinski mirno dok sam objavljivao u posebnim časopisima, govorio na konferencijama, simpozijumima i naučnim savetima, decenijama raspravljajući o aktuelnosti problema, naivno pretpostavljajući uvođenje novih, informativnijih, visoko ponovljivih, pouzdanih metoda za procenu bezbednosti vakcine. Svi naši napori, nastojanja i nade nisu donijeli opipljive rezultate.
Ali bilo je i „odbačenih“ članaka, ocenjenih kao „diskreditujući sovjetske vakcine i šteti rutinskoj vakcinaciji“...
„IN poslednjih godina u svijetu se odvijaju procesi koji zahtijevaju od svake misleće osobe da odredi svoje mjesto u opštem toku ljudsko razmišljanje. Ako naučnik vidi da su načini rješavanja problema doveli u ćorsokak, on traži drugi put” (41, str. 6-9). Stoga smo pokušali da „probijemo“ publikaciju u MG kako bismo razgovarali o problemima sigurnosti vakcina. Pretvarajući se da će materijali biti objavljeni, urednici Minsk grupe su ih namjerno odugovlačili, a tek krajem 1988. godine, na poticaj novinara V. Umnova, informacije o “najkvalitetnijim vakcinama na svijetu” su “skinute povjerljivu tajnu”. ” (42)
Genetski inženjering je eksperimentalna nauka koja proučava obrasce in vitro konstrukcije i ponašanja funkcionalno aktivnih rekombinantnih molekula DNK u ćeliji primaocu.
Predmet istraživanja genetskog inženjeringa su geni – segmenti DNK koji kodiraju sintezu određenih proteina.
Princip stvaranja genetski modificiranih cjepiva je da se gen koji nas zanima (odgovoran za sintezu imunološkog proteina virusa) „isecuje“ iz DNK virusa pomoću enzima (restrikcionih enzima) i ubacuje, koristeći enzime. (ligaze), u DNK vektora (na primjer, u plazmid E. coli je autonomna kružna DNK od 4-6 hiljada parova nukleotida, sposobna da se razmnožava u ćelijama E. coli). Zatim se ova rekombinantna DNK unosi u ćelije E. coli, u kojoj se rekombinantna DNK umnožava (replicira) i dolazi do ekspresije integrisanog gena, odnosno sinteze odgovarajućeg proteina (kodiranog integrisanim genom virusa).
Bakterijske ćelije E. coli se kultivišu u hranljivom mediju i „proizvode“ imunogeni protein virusa koji se izoluje i nakon odgovarajućeg prečišćavanja koristi kao materijal za vakcinu. Međutim, treba napomenuti da mnogi virusni proteini koji se uspješno sintetiziraju u mikroorganizmima imaju vrlo nisku imunogenu aktivnost. Razlog tome su osobitosti formiranja strukture virusnih proteina. U pravilu su glikozilirani i imaju složenu tercijarnu ili kvarternu strukturu. Tako se hemaglutinin virusa influence nalazi u virionu u obliku trimera, koji se formira od monomernih polipeptida u životinjskim stanicama. Nije moguće dobiti takvu funkcionalno aktivnu strukturu hemaglutinina in vitro. Imunogenost hemaglutinina u virionu je nekoliko hiljada puta veća od one monomernog polipeptida sintetiziranog u bakterijama.
Prilikom proizvodnje genetski modifikovanih vakcina, pored plazmida, kao vektori se koriste fagi, kvasac i životinjski virusi (virus vakcinije, adenovirusi, bakulovirusi i herpesvirusi).
Najveći efekat je postignut sa virusom vakcinije koji se koristi kao vektor. Ovaj virus ima veliki genom (oko 187 hiljada parova baza). Iz njega je moguće ukloniti značajan dio (oko 30 hiljada baznih parova), koji nije od vitalnog značaja za reprodukciju ovog virusa u ćelijama, a na njegovo mjesto ubaciti strane gene virusa protiv kojih se proizvodi vakcina. Rezultirajuća rekombinantna DNK je sposobna da se umnožava u tijelu vakcinisanog i izaziva stvaranje imuniteta ne samo protiv velikih boginja, već i protiv virusa čiji je gen ugrađen u njegov genom. Upotreba virusa vakcinije kao vektora za vakcinaciju ima niz prednosti: sposobnost razmnožavanja u životinjskim ćelijama mnogih vrsta; izražavaju više gena; induciraju humoralni i ćelijskog imuniteta; termička stabilnost; ekonomična proizvodnja i jednostavnost upotrebe. Prethodno identificirani nedostaci virusa vakcinije povezani s reaktogenošću su u velikoj mjeri eliminirani genetskom manipulacijom. Mogućnost uključivanja nekoliko gena koji kodiraju odgovarajuće imunogene omogućavaju simultanu vakcinaciju životinja protiv nekoliko virusnih bolesti. Međutim, mora se imati na umu da za osobe koje su već imune na virus vakcinije, vakcinacija rekombinantnim virusima ne daje efekta zbog nedostatka njegovog preživljavanja.
Posljednjih godina, preventivni lijekovi dobivaju se iz rekombinantnog soja virusa vakcinije koji sadrži gene koji kodiraju površinske glikoproteine virusa gripe, bjesnila, respiratornog trakta, Aujeszkyjeve bolesti, infektivnog goveđeg rinotraheitisa itd.
Ako pronađete grešku, označite dio teksta i kliknite Ctrl+Enter.
Suština metode: geni virulentnog mikroorganizma koji su odgovorni za sintezu zaštitnih antigena ubacuju se u genom bezopasnog mikroorganizma koji, kultivirajući, proizvodi i akumulira odgovarajući antigen. Primjer bi bio rekombinantna vakcina protiv virusnog hepatitisa B, vakcina protiv Rota virusna infekcija. Konačno, postoje pozitivni rezultati upotreba tzv vektorske vakcine, kada se površinski proteini dva virusa nanose na nosač - živi rekombinantni virus vakcinije (vektor): glikoprotein D virusa herpes simplex i hemaglutinin virusa gripe A Dolazi do neograničene replikacije vektora i razvija se adekvatan imuni odgovor protiv oba tipa virusne infekcije.
Rekombinantne vakcine – Ove vakcine koriste rekombinantnu tehnologiju za proizvodnju vakcine umetanjem genetskog materijala mikroorganizma u ćelije kvasca koje proizvode antigen. Nakon kultivacije kvasca, iz njega se izoluje željeni antigen, pročišćava i priprema se vakcina. Primjer takvih vakcina je vakcina protiv hepatitisa B (Euvax B).
Ribosomske vakcine
Za dobijanje ove vrste vakcine koriste se ribozomi koji se nalaze u svakoj ćeliji. Ribosomi su organele koje proizvode protein koristeći matriks - mRNA. Izolovani ribozomi sa matriksom u čistom obliku predstavljaju vakcinu. Primjer su bronhijalne i dizenterijske vakcine (na primjer, IRS - 19, Broncho-munal, Ribomunil).
Još jedno pitanje koje treba imati na umu u bilo kojem programu masovne imunizacije je odnos između sigurnosti i efikasnosti vakcine. U programima imunizacije djece protiv zaraznih bolesti postoji sukob između interesa pojedinca (cjepivo mora biti bezbedno i efikasno) i interesa društva (cjepivo mora izazvati dovoljan zaštitni imunitet). Nažalost, danas, u većini slučajeva, što je veća učestalost komplikacija vakcinacije, to je veća njena efikasnost.
Upotreba novih tehnologija omogućila je stvaranje vakcina druge generacije.
Pogledajmo pobliže neke od njih:
Konjugirano
Neke bakterije koje uzrokuju takve opasne bolesti, poput meningitisa ili upale pluća (hemofilus influenca, pneumokoki), imaju antigene koje je teško prepoznati nezrelim imunološki sistem novorođenčadi i dojenčadi. Konjugirane vakcine koriste princip vezivanja takvih antigena sa proteinima ili toksoidima druge vrste mikroorganizama koje dobro prepoznaje imuni sistem deteta. Razvija se zaštitni imunitet protiv konjugiranih antigena.
Na primjeru vakcina protiv Hemophilus influenzae (Hib-b) prikazana je djelotvornost u smanjenju incidencije Hib meningitisa kod djece mlađe od 5 godina u Sjedinjenim Državama za period od 1989. do 1994. godine. od 35 do 5 slučajeva.
Podjedinične vakcine
Podjedinične vakcine se sastoje od fragmenata antigena koji mogu pružiti adekvatan imuni odgovor. Ove vakcine mogu biti predstavljene ili kao mikrobne čestice ili dobijene u laboratorijskim uslovima korišćenjem tehnologije genetskog inženjeringa.
Primjeri podjediničnih vakcina koje koriste fragmente mikroorganizama su vakcina protiv Streptococcus pneumoniae i vakcina protiv meningokoka tipa A.
Rekombinantne podjedinične vakcine (na primjer, protiv hepatitisa B) se prave unošenjem dijela genetskog materijala virusa hepatitisa B u stanice pekarski kvasac. Kao rezultat ekspresije virusnih gena, proizvodi se antigenski materijal, koji se zatim pročišćava i vezuje za pomoćno sredstvo. Rezultat je efikasna i sigurna vakcina.
Rekombinantne vektorske vakcine
Vektor, ili nosilac, je oslabljeni virus ili bakterija u koju se može ubaciti genetski materijal drugog mikroorganizma koji je uzročno značajan za nastanak bolesti za koju je potrebno stvoriti zaštitni imunitet. Vaccinia virus se koristi za stvaranje rekombinantnih vektorskih vakcina, posebno protiv HIV infekcija. Slična istraživanja se provode sa oslabljenim bakterijama, posebno salmonelom, kao nosiocima čestica virusa hepatitisa B.
Trenutno vektorske vakcine nisu u širokoj upotrebi.