Crtež mikroskopa i njegovih komponenti. Optički dijelovi mikroskopa. Pravila za rukovanje i njegu mikroskopa

Mikroskop je optički uređaj koji vam omogućava da dobijete inverznu sliku predmeta koji se proučava i ispita male detalje njegove strukture, čije dimenzije leže izvan rezolucije oka.

Rezolucija mikroskop daje zasebnu sliku dvije linije blizu jedna drugoj. Golo ljudsko oko ima rezoluciju od oko 1/10 mm ili 100 mikrona. Najbolji svjetlosni mikroskop poboljšava sposobnost za oko 500 puta ljudsko oko, odnosno njegova rezolucija je oko 0,2 µm ili 200 nm.

Rezolucija i uvećanje nisu ista stvar. Ako koristite svjetlosni mikroskop da snimite dvije linije koje se nalaze na udaljenosti manjoj od 0,2 mikrona, tada će se, bez obzira na to kako uvećate sliku, linije spojiti u jednu. Možete dobiti veliko uvećanje, ali ne i poboljšati njegovu rezoluciju.

Razlikovati korisno I beskorisno povećanje. Pod korisnim podrazumijevamo takvo povećanje posmatranog objekta da je moguće otkriti nove detalje njegove strukture. Beskorisno je povećanje u kojem je povećanjem objekta stotinama ili više puta nemoguće otkriti nove strukturne detalje. Na primjer, ako se slika dobivena mikroskopom višestruko uvećava projiciranjem na ekran, tada se neće otkriti novi, finiji detalji strukture, već će se u skladu s tim povećati samo veličina postojećih struktura.

Obično se koristi u nastavnim laboratorijama svjetlosni mikroskopi , u kojem se mikroslajdovi pregledavaju prirodnim ili veštačko svetlo. Najčešće svjetlosni biološki mikroskopi: BIOLAM, MIKMED, MBR (biološki radni mikroskop), MBI (biološki istraživački mikroskop) i MBS (biološki stereoskopski mikroskop). Oni pružaju uvećanje u rasponu od 56 do 1350 puta. Stereomikroskop(MBS) pruža istinski trodimenzionalnu percepciju mikro-objekta i povećava od 3,5 do 88 puta.

Postoje dva sistema u mikroskopu: optički I mehanički. TO optički sistem uključuju sočiva, okulare i rasvjetni uređaj (kondenzator s dijafragmom i svjetlosnim filterom, ogledalo ili električno svjetlo).

Struktura svjetlosnih mikroskopa prikazana je na sl. 1.

Rice. 1. Dizajn svetlosnih mikroskopa:

A - MIKMED-1; B - BIOLAM.

1 - okular, 2 - cijev, 3 - držač cijevi, 4 - vijak za grubo ciljanje, 5 - mikrometarski vijak, 6 - postolje, 7 - ogledalo, 8 - kondenzator, iris dijafragma i svjetlosni filter, 9 - stepen, 10 - rotirajući uređaj , 11 - sočivo, 12 - tijelo kolektorskog sočiva, 13 - utičnica sa lampom, 14 - napajanje.

Objektiv - jedan od najvažnijih delova mikroskopa, budući da određuje korisno uvećanje objekta. Objektiv se sastoji od metalnog cilindra sa ugrađenim sočivima, čiji broj može varirati. Uvećanje sočiva je označeno brojevima na njemu. IN obrazovne svrhe Obično se koriste x8 i x40 objektivi. Kvaliteta sočiva je određena njegovom rezolucijom.

Okular mnogo jednostavnije od sočiva. Sastoji se od 2-3 sočiva postavljena u metalni cilindar. Između sočiva postoji konstantan otvor blende koji definiše granice vidnog polja. Donja leća fokusira sliku objekta koji je sočivo konstruisala u ravni dijafragme, a gornja služi direktno za posmatranje. Na njima je povećanje okulara označeno brojevima: x7, x10, x15. Okulari ne otkrivaju nove strukturne detalje, a u tom smislu i njihovo povećanje beskorisno. Dakle, okular, poput povećala, daje direktnu, virtuelnu, uvećanu sliku posmatranog objekta, koju konstruiše sočivo.

Za utvrđivanje opšte mikroskopsko uvećanje Uvećanje objektiva treba pomnožiti sa povećanjem okulara.

Rasvjetni uređaj sastoji se od ogledala ili električnog iluminatora, kondenzatora sa iris dijafragmom i svjetlosnog filtera, smještenog ispod pozornice objekta. Namijenjeni su za osvjetljavanje objekta snopom svjetlosti.

Ogledalo služi za usmjeravanje svjetlosti kroz kondenzator i otvor pozornice na predmet. Ima dvije površine: ravnu i konkavnu. U laboratorijama za difuzno svjetlo koristi se konkavno ogledalo.

Električna rasvjeta ugrađuje se ispod kondenzatora u utičnicu postolja.

Kondenzator sastoji se od 2-3 sočiva umetnuta u metalni cilindar. Kada se podiže ili spušta pomoću posebnog zavrtnja, svjetlost koja pada iz ogledala na predmet se kondenzira, odnosno raspršuje.

Iris dijafragma koji se nalazi između ogledala i kondenzatora. Koristi se za promjenu prečnika svjetlosni tok, usmjeren ogledalom kroz kondenzator na predmet, u skladu sa prečnikom prednjeg sočiva objektiva i sastoji se od tankih metalnih ploča. Koristeći polugu, možete ih spojiti, potpuno prekrivajući donje kondenzatorsko sočivo, ili ih razdvojiti, povećavajući protok svjetlosti.

Prsten sa mat staklom ili svjetlosni filter smanjuje osvetljenost objekta. Nalazi se ispod dijafragme i kreće se u horizontalnoj ravni.

Mehanički sistem Mikroskop se sastoji od postolja, kutije s mikrometarskim mehanizmom i mikrometarskim vijkom, cijevi, držača cijevi, zavrtnja za grubo nišanje, nosača kondenzatora, vijka za kretanje kondenzatora, revolvera i uzorka.

Stani- Ovo je osnova mikroskopa.

Kutija sa mikrometarskim mehanizmom, izgrađen na principu međusobnog djelovanja zupčanika, fiksno je pričvršćen za postolje. Mikrometarski vijak služi za lagano pomicanje držača cijevi, a time i sočiva na udaljenosti mjerene u mikrometrima. Puni okret mikrometarskog vijka pomiče držač cijevi za 100 mikrona, a okret za jednu podjelu spušta ili podiže držač cijevi za 2 mikrona. Da bi se izbjeglo oštećenje mehanizma mikrometra, dopušteno je okretati vijak mikrometra u jednom smjeru ne više od pola okreta.

Tube ili cijev- cilindar u koji se odozgo ubacuju okulari. Cev je pokretno povezana sa glavom držača cevi, pričvršćena je vijkom za zaključavanje u određeni položaj. Otpuštanjem zavrtnja za zaključavanje, cijev se može ukloniti.

Revolver dizajniran za brzo mijenjanje sočiva koja se ušrafljuju u njegove utičnice. Centrirani položaj sočiva osigurava zasun smješten unutar revolvera.

Vijak za grubo nišanjenje koristi se za značajno pomeranje držača cevi, a samim tim i sočiva kako bi se objekat fokusirao pri malom uvećanju.

Tabela predmeta namijenjeno stavljanju lijeka na njega. Na sredini stola nalazi se okrugla rupa u koju se uklapa prednja leća kondenzatora. Na stolu se nalaze dva opružna terminala - stezaljke koje pričvršćuju lijek.

Nosač kondenzatora pokretno povezan sa kutijom mikrometarskog mehanizma. Može se podići ili spustiti pomoću zavrtnja koji rotira zupčanik koji se uklapa u žljebove češljastog reza.

Laboratorijski čas iz botanike br.1

Tema: „Struktura mikroskopa. Priprema privremenih preparata. Struktura biljna ćelija. Plazmoliza i deplazmoliza."

Svrha: 1. Proučavanje strukture mikroskopa (marke - MBR, MBI, Biolam), namjene njegovih dijelova. Naučite pravila rada sa mikroskopom.

2. Naučite tehniku pripreme privremenih preparata.
3. Proučite strukturne glavne komponente biljne ćelije: membranu, citoplazmu, jezgro, plastide.
4. Upoznajte se sa fenomenom plazmolize i deplazmolize.
5. Naučite međusobno upoređivati ćelije različitih tkiva, pronaći identične i različite karakteristike u njima.

Oprema: mikroskop, komplet za mikrokopiranje, rastvor natrijum hlorida ili saharoze, rastvor joda u kalijum jodid, trake filter papira, glicerin, metilensko plavo, kriške lubenice, paradajz, crni luk sa antocijaninom. ćelija za pripremu mikroskopa

1. Upoznajte se sa dizajnom biološkog mikroskopa MBR-1 ili Biolam. Zapišite svrhu glavnih dijelova.
2. Upoznajte se sa dizajnom stereoskopskih mikroskopa MBS - 1.
3. Zapišite pravila za rad sa mikroskopom.
4. Naučite tehniku izrade privremenih preparata.
5. Napravite preparat epiderme od sočnih ljuskica luka i pri malom uvećanju pregledajte deo epiderme koji se sastoji od jednog sloja ćelija sa jasno vidljivim jezgrama.
6. Proučite strukturu ćelije pri velikom povećanju, prvo u kapi vode, zatim u rastvoru joda u kalijum jodidu.
7. Indukujte plazmolizu u ćelijama ljuske luka tretiranjem rastvorom natrijum hlorida. Zatim pređite u stanje deplazmolize. Skica.

Opće napomene

Biološki mikroskop je instrument koji se može koristiti za ispitivanje razne ćelije i biljnih tkiva. Dizajn ovog uređaja je prilično jednostavan, ali nestručno korištenje mikroskopa dovodi do njegovog oštećenja. Zato je potrebno razumjeti strukturu mikroskopa i osnovna pravila za rad s njim. U mikroskopu bilo koje marke razlikuju se sljedeći dijelovi: optički, svjetlosni i mehanički. Optički dio uključuje: sočiva i okulare.

Leće služe za uvećanje slike predmeta i sastoje se od sistema sočiva. Stepen uvećanja sočiva direktno zavisi od broja sočiva. Objektiv sa velikim uvećanjem ima 8 - 10 sočiva. Prvo sočivo okrenuto prema preparatu naziva se frontalno sočivo. Mikroskop MBR - 1 je opremljen sa tri sočiva. Uvećanje sočiva je na njemu označeno brojevima: 8x, 40x, 90x. Razlikuje se radno stanje sočiva, odnosno udaljenost od pokrivnog stakla do prednjeg sočiva. Radna udaljenost sa sočivom 8x je 13,8 mm, sa sočivom 40x - 0,6 mm, sa sočivom 90x - 0,12 mm. Sa sočivima sa većim uvećanjem potrebno je rukovati vrlo pažljivo i pažljivo kako ne bi na bilo koji način oštetili prednje sočivo. Korištenjem sočiva u cijevi dobija se uvećana, stvarna, ali inverzna slika objekta i otkrivaju se detalji njegove strukture. Okular služi za uvećanje slike koja dolazi iz sočiva i sastoji se od 2 - 3 sočiva postavljena u metalni cilindar. Na njemu je povećanje okulara označeno brojevima 7x, 10x, 15x.

Da biste odredili ukupno povećanje, pomnožite povećanje objektiva sa povećanjem okulara.

Rasvjetni uređaj se sastoji od ogledala, kondenzatora sa iris dijafragmom i namijenjen je za osvjetljavanje objekta snopom svjetlosti.

Ogledalo služi za prikupljanje i usmjeravanje zraka svjetlosti koje padaju iz ogledala na predmet. Iris dijafragma se nalazi između ogledala i kondenzatora i sastoji se od tankih metalnih ploča. Dijafragma služi za regulaciju prečnika svjetlosnog toka koji ogledalo usmjerava kroz kondenzator do objekta.

Mehanički sistem mikroskopa sastoji se od postolja za mikro- i makrozavrtnje, držača cijevi, revolvera i pozornice. Mikrometarski vijak služi za lagano pomicanje držača cijevi i sočiva na udaljenosti mjerene u mikrometrima (μm). Potpuni okret mikrozavrtnja pomiče držač cijevi za 100 mikrona, a okret za jedan dio za 2 mikrona. Kako bi se izbjeglo oštećenje mehanizma mikrometra, dopušteno je okretati vijak mikrometra u stranu ne više od pola okreta.

Makrovijak se koristi za značajno pomicanje držača cijevi. Obično se koristi pri fokusiranju objekta pri malom uvećanju. Okulari se ubacuju u cilindar cijevi odozgo. Revolver je dizajniran za brzo mijenjanje sočiva koja se ušrafljuju u njegove utičnice. Centrirani položaj sočiva osigurava zasun smješten unutar revolvera.

Stol za objekte je dizajniran tako da se na njega stavi lijek, koji se na njega fiksira pomoću dvije brave.

Pravila za rad sa mikroskopom

1. Obrišite optički dio mikroskopa mekom krpom.
2. Postavite mikroskop na ivicu stola tako da okular bude nasuprot levog oka eksperimentatora i ne pomerajte mikroskop tokom rada. Sveska i svi predmeti potrebni za rad nalaze se desno od mikroskopa.
3. potpuno otvorite otvor blende. Kondenzator se postavlja u poluspušten položaj.
4. Koristeći ogledalo, podesite sunčevu „zraku“, gledajući u otvor na stolu za predmete. Da biste to učinili, kondenzatorsko sočivo koje se nalazi ispod otvora pozornice mora biti jako osvijetljeno.
5. Pomerite mikroskop pri malom uvećanju (8x) u radni položaj - postavite sočivo na udaljenosti od 1 cm od pozornice i, gledajući kroz okular, proverite osvetljenost vidnog polja. Trebao bi biti jako osvijetljen.
6. Predmet koji se proučava postavlja se na pozornicu i cijev mikroskopa se polako podiže dok se ne pojavi jasna slika. Pregledajte cijeli lijek.
7. Da biste proučavali bilo koji dio objekta pri velikom uvećanju, prvo postavite ovu oblast u centar vidnog polja malog sočiva. Nakon toga okrenite revolver tako da 40x objektiv zauzme radni položaj (ne podižite sočivo!). Uz pomoć mikroskopa postiže se jasna slika objekta.
8. Po završetku rada prebaciti revolver sa velikog na malo uvećanje. Predmet se uklanja sa radnog stola, a mikroskop se stavlja u neradno stanje.

Način pripreme mikroslajda

1. Nanesite kap tečnosti (voda, alkohol, glicerin) na staklo.
2. Iglom za seciranje uzmite dio predmeta i stavite ga u kap tečnosti. Ponekad se brijačom napravi dio organa koji se proučava. Zatim, nakon odabira najtanjeg dijela, stavite ga na staklo u kap tečnosti.
3. pokrijte predmet pokrovnim staklom da ispod njega ne uđe zrak. Da biste to učinili, uzmite pokrovno staklo za rubove s dva prsta, povucite donju ivicu do ruba kapljice tekućine i glatko je spustite, držeći je iglom za seciranje.
4. Uzorak se postavlja na pozornicu i ispituje.

Napredak laboratorijske lekcije

Skalpelom izrežite mali komad (oko 1 cm2) od mesnatih ljuski luka. WITH unutra(konkavno) uklonite pincetom transparentan film(epidermis). Stavite u pripremljenu kap i nanesite pokrovno staklo.

Sa malim uvećanjem pronađite najosvijetljenije mjesto (najmanje oštećeno, bez nabora ili mjehurića). Prebacite na veliko uvećanje. Pregledajte i skicirajte jednu ćeliju. Označite membranu sa porama, zidni sloj citoplazme, jezgro sa nukleolima, vakuolu sa ćelijskim sokom. Zatim se rastvor natrijum hlorida (plazmolitik) nakapa na jednu stranu pokrivnog stakla. Na suprotnoj strani, bez pomicanja preparata, počinju isisavati vodu komadićima filter papira, dok treba gledati kroz mikroskop i pratiti šta se dešava u ćelijama. Uočava se postepeno odstupanje protoplasta od stanične membrane, zbog oslobađanja vode iz ćelijskog soka. Dođe trenutak kada se protoplast unutar ćelije potpuno odvoji od membrane i podvrgne potpunoj plazmolizi ćelije. Zatim zamijenite plazmolitik vodom. Da biste to učinili, pažljivo stavite kap vode na ivicu pokrivnog stakla sa stakalcem i polako isperite lijek iz plazmolitika. Uočava se da ćelijski sok postepeno ispunjava cijeli volumen vakuole, citoplazma se nanosi na ćelijsku membranu, tj. dolazi do deplazmolize.

Potrebno je skicirati ćeliju u plazmoliranom i deplazmoliranom stanju, označiti sve dijelove ćelije: jezgro, membranu, citoplazmu.

Koristeći tabele, nacrtajte dijagram submikroskopske strukture biljne ćelije i identifikujte sve komponente.

Koža luka

Školjka jezgra citoplazme

Koža luka. Ćelijske organele.

Citoplazma je neophodna komponentaćelije u kojima se odvijaju složeni i raznoliki procesi sinteze, disanja i rasta.

Jezgro je jedna od najvažnijih organela ćelije.

Ljuska je nepropusni površinski sloj koji nešto prekriva.

Plazmoliza dodavanjem rastvora natrijum hlora

Plazmoliza je odvajanje citoplazme od ćelijske membrane, što nastaje kao rezultat gubitka vode iz vakuole.

Deplazmoliza

Deplazmoliza je fenomen u kojem se protoplast vraća u obrnuto stanje.

Plazmoliza nakon dodavanja saharoze

Deplazmoliza nakon dodavanja saharoze

Zaključak: Danas smo se upoznali sa strukturom biološkog mikroskopa, a naučili smo i tehniku pripreme privremenih preparata. Proučili smo osnovne strukturne komponente biljna ćelija: membrana, citoplazma, jezgro na primjeru ljuske luka. I upoznali smo se sa fenomenom plazmolize i deplazmolize.

Pitanja za samokontrolu

1. Koje dijelove ćelije možemo vidjeti optičkim mikroskopom?
2. Submikroskopska struktura biljne ćelije.
3. Koje organele čine submikroskopsku strukturu jezgra?
4. Kakva je struktura citoplazmatske membrane?
5. Razlike između biljne i životinjske ćelije?
6. Kako dokazati propusnost ćelijske membrane?
7. Važnost plazmolize i deplazmolize za biljnu ćeliju?
8. Kako se ostvaruje veza između jezgra i citoplazme?
9. Mjesto izučavanja teme “Ćelija” u predmetu opšta biologija srednja škola.

Književnost

1. A.E. Vasiljev i dr. Botanika (anatomija i morfologija biljaka), „Prosvetljenje”, M, 1978, str. 5-9, str. 20-35
2. Kiseleva N.S. Anatomija i morfologija biljaka. M. "Viša škola", 1980, str. 3-21
3. Kiseleva N.S., Shelukhin N.V. Atlas biljne anatomije. . "Viša škola", 1976
4. Khrzhanovsky V.G. i dr. Atlas o anatomiji i morfologiji biljaka. "Viša škola", M., 1979, str. 19-21
5. Voronin N.S. Vodič za laboratorijske nastave o anatomiji i morfologiji biljaka. M., 1981, str.27-30
6. Tutayuk V.Kh. Anatomija i morfologija biljaka. M. "Viša škola", 1980, str. 3-21
7. D.T. Konysbaeva PRAKTIKUM IZ ANATOMIJE I MORFOLOGIJE BILJAKA

→

Dizajn mikroskopa direktno ovisi o njegovoj namjeni. Kao što ste vjerovatno već pretpostavili, postoje različiti mikroskopi, a optički mikroskop će se značajno razlikovati od elektronskog ili rendgenskog mikroskopa. Ovaj članak će detaljno ispitati strukturu optički svetlosni mikroskop, koji je uključen ovog trenutka je najpopularniji izbor amatera i profesionalaca, a sa kojim možete riješiti mnoge istraživačke probleme.

Optički mikroskopi također imaju svoju klasifikaciju i mogu se razlikovati po svojoj strukturi. Međutim, postoji osnovni set dijelova koji idu u bilo koji optički mikroskop. Pogledajmo svaki od ovih detalja.

Mikroskop se može podijeliti na optičke i mehaničke dijelove. Optika mikroskopa uključuje objektive, okulare i sistem osvjetljenja. Stativ, cijev, postolje za objekt, nosači kondenzatora i svjetlosnog filtera, mehanizmi za podešavanje stupnja predmeta i držač cijevi mehanički dio mikroskop

Počnimo, možda, sa optički dio .

Okular. Onaj dio optičkog sistema koji je direktno povezan sa očima posmatrača. U najjednostavnijem slučaju, sočivo se sastoji od jednog sočiva. Ponekad, radi veće udobnosti, ili, kako kažu, "ergonomije", sočivo se može opremiti, na primjer, "očnikom" od gume ili meke plastike. Stereoskopski (binokularni) mikroskopi imaju dva okulara.
Objektiv. Možda najvažniji dio mikroskopa, koji daje glavno povećanje. Glavni parametar je otvor blende, što je detaljno opisano u odjeljku “Osnovni parametri mikroskopa”. Objektivi se dijele na "suhe" i "uronjene", akromatske i apokromatske, a čak su i u jeftinim jednostavnim mikroskopima prilično složen sistem sočiva Neki mikroskopi imaju standardizirane elemente za montažu sočiva, što omogućava konfiguraciju uređaja u skladu sa zadacima i budžetom potrošača.
Iluminator. Vrlo često se koristi obično ogledalo koje omogućava usmjeravanje na uzorak koji se proučava. dnevno svjetlo. Trenutno se često koriste posebne halogene žarulje sa spektrom bliskim prirodnom. bijelo svjetlo i ne izazivaju velika izobličenja boje.
Dijafragma. Uglavnom se u mikroskopima koriste takozvane “iris” dijafragme, nazvane tako jer sadrže latice slične laticama cvijeta irisa. Pomicanjem ili širenjem latica možete glatko podesiti jačinu svjetlosnog toka koji ulazi u uzorak koji se proučava.
Kolekcionar. Koristeći kolektor koji se nalazi u blizini izvora svjetlosti, stvara se svjetlosni tok koji ispunjava otvor kondenzatora.
Kondenzator. Ovaj element, koji je konvergentno sočivo, formira svjetlosni konus usmjeren prema objektu. Intenzitet osvjetljenja se reguliše dijafragmom. Najčešće, mikroskopi koriste standardni Abbe kondenzator s dvije leće.

Vrijedi napomenuti, šta u optički mikroskop Može se koristiti jedna od dvije glavne metode osvjetljenja: osvjetljenje propuštenog i reflektovanog svjetla. U prvom slučaju, svjetlosni tok prolazi kroz objekt, što rezultira formiranjem slike. U drugom, svjetlost se odbija od površine objekta.

Što se tiče optičkog sistema u cjelini, u zavisnosti od njegove strukture, uobičajeno je razlikovati direktne mikroskope (leće, dodaci, okulari se nalaze iznad objekta), invertne mikroskope (cijeli optički sistem koji se nalaze ispod objekta), stereoskopski mikroskopi (binokularni mikroskopi, koji se u suštini sastoje od dva mikroskopa koja se nalaze pod uglom jedan prema drugom i formiraju trodimenzionalnu sliku).

Sada idemo na mehanički dio mikroskopa .

Tube. Cijev je cijev koja sadrži okular. Cijev mora biti dovoljno čvrsta i ne smije se deformirati, što će pogoršati optička svojstva, stoga je samo u najjeftinijim modelima cijev izrađena od plastike; češće se koriste aluminij, nehrđajući čelik ili specijalne legure. Da bi se uklonio odsjaj, unutrašnjost cijevi je obično premazana crnom bojom koja upija svjetlost.
Baza. Obično je prilično masivan, napravljen od metalnog liva, kako bi se osigurala stabilnost mikroskopa tokom rada. Na ovoj bazi su pričvršćeni držač cijevi, cijev, držač kondenzatora, dugmad za fokusiranje, rotirajući uređaj i nastavak sa okularima.
Turret za brzu promenu sočiva. Po pravilu, jeftini modeli sa samo jednim objektivom nemaju ovaj element. Prisutnost kupole omogućava vam da brzo prilagodite uvećanje promjenom sočiva jednostavnim okretanjem.
Tabela predmeta, na koji se postavljaju ispitni uzorci. To su ili tanki preseci na staklenim predmetima za mikroskope sa "prolaznom svjetlošću", ili volumetrijski objekti za mikroskope "reflektovane svjetlosti".
Pričvršćivači, kojim se slajdovi fiksiraju na pozornici.
Vijak za podešavanje grubog fokusa. Omogućava postizanje najjasnije slike promjenom udaljenosti od sočiva do uzorka koji se ispituje.
Vijak za fini fokus. Ista stvar, samo sa manjim korakom i manjim "vodenjem" navoja za najpreciznije podešavanje.

ODJELJAK: CITOLOGIJA

TEMA: “UREĐAJ SVJETLOSNOG MIKROSKOPA I MIKROSKOPSKA TEHNIKA.”

Oblik organizacije obrazovni proces: praktična lekcija.

Lokacija: soba za obuku.

Svrha lekcije: Na osnovu poznavanja strukture svjetlosnog mikroskopa ovladati tehnikom mikroskopije i pripreme privremenih preparata.

Značaj teme koja se proučava

Svetlosna mikroskopija je jedna od objektivnih metoda u biološkim, biomedicinskim i medicinskim disciplinama. Sposobnost pravilnog korišćenja mikroskopa, kompetentne procene, interpretacije, dokumentovanja (skiciranja) posmatrane mikroskopske slike su preduslov uspješno savladavanje gradiva na praktičnoj nastavi iz biologije, histologije, patološka anatomija, mikrobiologija.

Kao rezultat rada na praktična lekcija student mora

znati:

· uređaj za svjetlosni mikroskop;

· pravila za rad sa svjetlosnim mikroskopom.

biti u stanju:

· rad sa svetlosnim mikroskopom pri malom i velikom uvećanju;

· pripremiti privremenu pripremu;

· izraditi skice mikroskopskih preparata;

· sastaviti zapisnik sa časa.

Oprema za nastavu:

Computer;

Projektor;

Prezentacija Power Point na ovu temu;

Svetlosni mikroskop;

Binocular;

Mikrouzorci (bilo koji);

Slajdovi;

Pokrivne naočale;

Petrijeve posude;

Skalpel;

Gaze maramice;

Filter papir;

Alkoholna otopina joda;

Sijalica.

PRAKTIČNI DIO ČASA

RAD 1. UREĐAJ SVJETLOSNOG MIKROSKOPA.

Vježba 1:

pažljivo pročitajte sadržaj rada br. 1 i proučite strukturu svjetlosnog mikroskopa.

Razmotrite glavne dijelove mikroskopa: mehanički, optički, svjetlosni.

TO mehanički dio uključuju: tronožac, pozornicu, cijev, revolver, makro i mikrometričke šrafove.

Stativ se sastoji od masivne osnove u obliku potkovice koja mikroskopu daje potrebnu stabilnost. Držač cijevi, savijen gotovo pod pravim kutom, proteže se prema gore od sredine baze, na koju je pričvršćena cijev koja se nalazi koso.

Stol za objekte sa okruglom rupom u sredini postavljen je na tronožac. Predmetni predmet se stavlja na sto (otuda naziv "objekat"). Na stolu se nalaze dvije stezaljke ili stezaljke koje čvrsto fiksiraju lijek. Na bočnim stranama stola nalaze se dva zavrtnja - ekstraktori za lijekove, pri rotaciji stol se pomiče zajedno sa sočivom u horizontalnoj ravni. Snop svjetlosti prolazi kroz rupu na sredini stola, omogućavajući promatranje objekta u prolaznom svjetlu.

Na stranama stativa, ispod bine, pronađite dva zavrtnja koja se koriste za pomeranje cevi. Makrometrijski vijak, ili čegrtaljka, ima veliki disk i, kada se okreće, podiže ili spušta cijev za približno fokusiranje. Mikrometarski vijak, koji ima vanjski disk manjeg promjera, lagano pomiče cijev pri rotaciji i služi za precizno fokusiranje. Mikrometarski vijak se može okrenuti samo za pola okreta u oba smjera.

Optički dio mikroskop je predstavljen okularima i objektivima.

Okular (od latinskog oculus - oko) nalazi se u gornjem dijelu cijevi i okrenut je prema oku. Okular je sistem sočiva zatvorenih u cilindričnom metalnom omotaču. Po broju na gornjoj površini okulara možete suditi o njegovom faktoru uvećanja (X 7, X 10, X 15). Okular se može ukloniti iz cijevi i po potrebi zamijeniti drugim.

Na suprotnoj strani pronađite rotirajuću ploču, ili revolver (od latinskog revolvo - okrećem), koji ima 3 utičnice za sočiva. Poput okulara, sočivo je sistem sočiva zatvorenih u zajednički metalni okvir. Objektiv je uvrnut u otvor revolvera. Objektivi također imaju različite omjere povećanja, koji su označeni brojem na bočnoj površini. Postoje: sočivo sa malim uvećanjem (X 8), sočivo sa velikim uvećanjem (X 40) i imersiono sočivo koje se koristi za proučavanje najmanjih objekata (X 90).

Ukupno povećanje mikroskopa jednako je uvećanju okulara pomnoženom sa povećanjem objektiva. Dakle, svjetlosni mikroskop ima maksimalno povećanje od 15 X 90 ili može povećati maksimalno 1350 puta.

Rasvjetni dio Mikroskop se sastoji od ogledala, kondenzatora i dijafragme.

Ogledalo je postavljeno na stativ ispod pozornice objekta i zahvaljujući pokretnom nosaču može se rotirati u bilo kojem smjeru. Ovo omogućava korištenje izvora svjetlosti koji se nalaze u različitim smjerovima u odnosu na mikroskop i usmjeravanje snopa svjetlosti na objekt kroz otvor na pozornici. Ogledalo ima dvije površine: konkavnu i ravnu. Konkavna površina se više koncentrira svetlosnih zraka te se stoga koristi u slabijem, umjetnom osvjetljenju.

Kondenzator se nalazi između ogledala i pozornice, sastoji se od dva ili tri sočiva zatvorena u zajednički okvir. Snop svjetlosti koju baca ogledalo prolazi kroz sistem kondenzatorskih sočiva. Promjenom položaja kondenzatora (više, niže) možete promijeniti intenzitet osvjetljenja objekta. Za pomicanje kondenzatora koristite vijak koji se nalazi ispred makro i mikro vijaka. Kada se kondenzator spusti, osvjetljenje se smanjuje, a kada se podigne, povećava se. Ugrađena dijafragma donji dio kondenzator, služi i za regulaciju osvjetljenja. Ova dijafragma se sastoji od niza ploča raspoređenih u krug i djelomično se preklapaju jedna na drugu na način da se u sredini nalazi rupa za prolaz svjetlosnog snopa. Pomoću posebne ručke koja se nalazi na kondenzatoru sa desna strana, možete promijeniti položaj ploča dijafragme jedna u odnosu na drugu i tako smanjiti ili povećati otvor i samim tim prilagoditi osvjetljenje.

Proučavanje mikrobnih ćelija nevidljivih golim okom moguće je samo uz pomoć mikroskopa. Ovi uređaji omogućavaju dobijanje slika posmatranih objekata, uvećanih stotinama puta (svetlosni mikroskopi), desetine i stotine hiljada puta (elektronski mikroskopi).

Biološki mikroskop naziva se svjetlosni mikroskop jer pruža mogućnost proučavanja objekta u propuštenoj svjetlosti u svijetlom i tamnom vidnom polju.

Glavni elementi savremenih svetlosnih mikroskopa su mehanički i optički delovi (slika 1).

Mehanički dio uključuje tronožac, cijev, rotirajući nastavak, kutiju za mikromehanizam, binu za objekte, makrometrijske i mikrometričke šrafove.

Stativ sastoji se od dva dijela: baze i držača cijevi (stupa). Baza Pravokutni mikroskop ima četiri potporne platforme na dnu, što osigurava stabilan položaj mikroskopa na površini radnog stola. Držač cijevi spaja se na bazu i može se pomicati u vertikalnoj ravni pomoću makro i mikrometarskih vijaka. Kada se vijci okreću u smjeru kazaljke na satu, držač epruvete se spušta; kada se okreće suprotno od kazaljke na satu, izdiže se iz lijeka. U gornjem dijelu držača cijevi je ojačan glava sa nastavkom za monokularni (ili binokularni) dodatak i vodilicom za rotirajući dodatak. Glava je pričvršćena vijak.

cijev – Ovo je mikroskopska cijev koja vam omogućuje održavanje određene udaljenosti između glavnih optičkih dijelova - okulara i sočiva. Okular je umetnut u cijev na vrhu. Moderni modeli mikroskopa imaju nagnutu cijev.

Mlaznica kupole je konkavni disk sa nekoliko utora u koje su ušrafljena 3 – 4 sočiva. Rotirajući rotirajući nastavak, možete brzo ugraditi bilo koje sočivo u radni položaj ispod rupe u cijevi.

Rice. 1. Struktura mikroskopa:

1 – baza; 2 – držač cijevi; 3 – cijev; 4 – okular; 5 – rotirajući priključak; 6 – sočivo; 7 – tabela predmeta; 8 – terminali koji pritiskaju lek; 9 – kondenzator; 10 – držač kondenzatora; 11 – ručka za pomeranje kondenzatora; 12 – preklopno sočivo; 13 – ogledalo; 14 – makrovijak; 15 – mikrovijak; 16 – kutija sa mikrometričkim mehanizmom za fokusiranje; 17 – glava za pričvršćivanje cijevi i okretne mlaznice; 18 – vijak za pričvršćivanje glave

Kutija za mikromehanizam sa jedne strane nosi vodilicu za držač kondenzatora, a sa druge vodilicu za držač cijevi. Unutar kutije nalazi se mehanizam za fokusiranje mikroskopa, koji je sistem zupčanika.

Tabela predmeta služi za postavljanje lijeka ili drugog istraživačkog predmeta na njega. Stol može biti kvadratni ili okrugli, pokretni ili fiksni. Pomični stol se pomiče u horizontalnoj ravni pomoću dva bočna zavrtnja, što vam omogućava da vidite lijek u različitim vidnim poljima. Na fiksnom stolu, za ispitivanje predmeta u različitim vidnim poljima, uzorak se pomiče rukom. U centru pozornice nalazi se otvor za osvjetljavanje odozdo svjetlosnim zracima usmjerenim iz iluminatora. Sto ima dvije opruge terminali, namijenjen za fiksiranje lijeka.

Neki mikroskopski sistemi opremljeni su drajverom za drogu, koji je neophodan kada se ispituje površina leka ili kada se broje ćelije. Vozač droge dozvoljava da se droga kreće u dva međusobno okomita smjera. Dozator za lijekove ima sistem ravnala - nonija, uz pomoć kojih možete dodijeliti koordinate bilo kojoj tački predmeta koji se proučava.

Makrometrijski vijak(makrošraf) služi za preliminarnu približnu instalaciju slike predmetnog objekta. Kada se makrovijak okrene u smjeru kazaljke na satu, cijev mikroskopa se spušta; kada se okrene u smjeru suprotnom od kazaljke na satu, podiže se.

Mikrometarski vijak(mikrošraf) se koristi za precizno pozicioniranje slike objekta. Mikrometarski vijak je jedan od dijelova mikroskopa koji se najlakše oštećuje, pa se njime treba pažljivo rukovati – nemojte ga rotirati da biste grubo postavili sliku kako biste izbjegli spontano spuštanje cijevi. Kada se mikrovijak potpuno okrene, cijev se pomiče za 0,1 mm.

Optički dio mikroskopa sastoji se od glavnih optičkih dijelova (sočivo i okular) i pomoćnog sistema osvjetljenja (ogledalo i kondenzator).

Objektivi(od lat. objektum- objekt) je najvažniji, najvredniji i krhki dio mikroskopa. Oni su sistem sočiva zatvorenih u metalni okvir, na kojem je naznačen stepen uvećanja i numerički otvor blende. Spoljno sočivo, sa svojom ravnom stranom okrenutom prema preparatu, naziva se frontalno sočivo. Ona je ta koja obezbeđuje povećanje. Preostala sočiva se nazivaju korekcijska sočiva i služe za otklanjanje nedostataka u optičkoj slici koji nastaju prilikom ispitivanja predmeta koji se proučava.

Objektivi su suvi i potapajući, ili potopni. Suha Sočivo koje ima zrak između prednjeg sočiva i predmeta koji se posmatra naziva se sočivo. Suva sočiva obično imaju veliku žižnu daljinu i uvećanje od 8x ili 40x. Uranjanje(potopno) je sočivo koje ima poseban tekući medij između prednjeg sočiva i uzorka. Zbog razlike između indeksa prelamanja stakla (1,52) i zraka (1,0), neki od svjetlosnih zraka se lome i ne ulaze u oko posmatrača. Kao rezultat toga, slika je nejasna i manje strukture ostaju nevidljive. Rasipanje svjetlosnog toka može se izbjeći popunjavanjem prostora između preparata i prednjeg sočiva sočiva supstancom čiji je indeks loma blizak indeksu prelamanja stakla. Ove supstance uključuju glicerin (1,47), kedar (1,51), ricinus (1,49), laneno seme (1,49), ulje karanfilića (1,53), ulje anisa (1,55) i druge supstance. Imerziona sočiva su označena na okviru: I (uranjanje) – uranjanje, NI (homogena uranjanje) – homogeno uranjanje, OI (uljeuranjanje) ili MI– uranjanje u ulje. Trenutno se sintetički proizvodi koji odgovaraju optičkim svojstvima kedrovog ulja češće koriste kao tekućine za uranjanje.

Objektivi se razlikuju po uvećanju. Vrijednost uvećanja sočiva je naznačena na njihovom okviru (8x, 40x, 60x, 90x). Osim toga, svaki objektiv karakterizira određena radna udaljenost. Za imersiona sočiva ovo rastojanje je 0,12 mm, za suva sočiva sa uvećanjem 8x i 40x - 13,8 i 0,6 mm, respektivno.

Okular(od lat. ocularis- oftalmološka) sastoji se od dva sočiva - oftalmološke (gornje) i poljske (donje), zatvorena u metalni okvir. Okular služi za uvećanje slike koju proizvodi sočivo. Uvećanje okulara je naznačeno na njegovom okviru. Postoje okulari sa radnim uvećanjem od 4x do 15x.

Kada dugo radite s mikroskopom, trebali biste koristiti dvogled. Tijela mlaznica se mogu razmaknuti u rasponu od 55-75 mm, ovisno o udaljenosti između očiju promatrača. Binokularni dodaci često imaju svoje uvećanje (oko 1,5x) i korekcijska sočiva.

Kondenzator(od lat. condenso– kompaktan, deblji) sastoji se od dva ili tri kratkofokusna sočiva. Sakuplja zrake koje dolaze iz ogledala i usmjerava ih na predmet. Koristeći ručku koja se nalazi ispod pozornice, kondenzator se može pomicati u okomitoj ravni, što dovodi do povećanja osvjetljenja vidnog polja kada se kondenzator podigne i njegovog smanjenja kada se kondenzator spusti. Za podešavanje intenziteta svjetlosti, kondenzator ima iris (latica) dijafragmu, koja se sastoji od čeličnih ploča u obliku polumjeseca. Kada je dijafragma potpuno otvorena, preporučuje se razmatranje obojenih preparata, a kada je otvor dijafragme smanjen, preporučuju se neobojeni. Ispod se nalazi kondenzator flip-up objektiv u okviru, koji se koristi pri radu sa sočivima sa malim povećanjem, na primjer, 8x ili 9x.

Ogledalo ima dvije reflektirajuće površine - ravnu i konkavnu. Okačen je na bazi stativa i može se lako rotirati. Kod veštačkog osvetljenja preporučuje se upotreba konkavne strane ogledala, kod prirodnog osvetljenja – ravne strane.

Iluminator djeluje kao vještački izvor svjetlosti. Sastoji se od niskonaponske žarulje sa žarnom niti postavljene na tronožac i opadajućeg transformatora. Na tijelu transformatora nalazi se drška reostata koja reguliše jačinu lampe i prekidač za uključivanje iluminatora.

U mnogim modernim mikroskopima, iluminator je ugrađen u bazu.