Антитела к циклическому цитруллинсодержащему пептиду IgG (АЦЦП) - показатель ревматоидного артрита. Ревматоидный артрит (РА) - системное аутоиммунное заболевание, основным признаком которого является воспаление синовиальных оболочек суставов, характеризующееся прогрессирующим течением (при отсутствии лечения), приводящего к деградации суставного хряща, с последующей эрозией кости, со значительным разрушению сустава и потерей его функции.

У больных с ревматоидным артритом в крови появляются антитела, которые образуются на белковые молекулы, содержащие в составе аминокислоту - цитруллин.

В процессе жизненного цикла клетки ряд белков модифицируются (например, фибриноген, виментин и филаггрин, образующийся из профилаггрина, содержащегося в кератогиалиновых гранулах). Цитруллинирование – процесс, в котором формируются цитруллинсодержащие белки. Считается, что процесс цитруллирования - показатель воспаления соединительной ткани. Цитруллин является аминокислотой, представленной широко в органах и тканях, но в то же время является "нестандартной" аминокислотой, поскольку не включается в белок при его синтезе. Цитруллинсодержащие белки образуются в процессе посттрансляционной модификации аргининовых остатков в реакции, катализируемой ферментом пептидил-аргининдеиминазой. Этот фермент в синовиальной жидкости при воспалении катализирует превращение аргинина в цитруллин. При ревматоидном артрите фермент пептидил-аргининдеиминаза вызывает локальное цитруллинирование белков синовиальной оболочки, что является одним из основных факторов, запускающих продукцию аутоантител.

У больных с РА было выявлено несколько аутоантител, направленных против белков, содержащих цитруллин. Первым таким аутоантителом стал антиперинуклеарный фактор - АПФ (Nienhuis R.L., et.al. 1964). Этот антиген представлен в кератогиалиновых гранулах, окружающих ядро клеток слизистой оболочки полости рта человека. Позднее в сыворотке больных с РА были обнаружены антикератиновые антитела (см. "Антикератиновые антитела (АКА)" и установлено, что антиперинуклеарный фактор (см."Антиперинуклеарный фактор") и антикератиновые антитела специфически связывают филаггрин, в котором главной антигенной детерминантой (мишенью) для этих антител является цитруллин. Но, поскольку, в суставе филаггрина нет, то скорее всего аутоантитела, реагирующие с ним, только отражают перекрестную иммунологическую реакцию. Наиболее вероятными иммуногенами являются цитруллинированные α- и β-цепи фибрина в синовиальной ткани. Наряду с АЦЦП семейство антител к цитруллинсодержащим белкам включает антиперинуклеарный фактор (АПФ), антикератиновые антитела (АКА), антифиллагриновые антитела (АФА), антитела к цитруллинированному фибриногену (АЦФ) и антитела к модифицированному цитруллинированному виментину (Sa-антигену) (АМЦВ).
В 1998 г. G.A. Schellekens и соавт. обнаружили, что антитела, взаимодействующие с синтетическими пептидами, содержащими аминокислоту цитруллин, выявляются в сыворотке крови у 76 % больных ревматоидным артритом. Для эффективной диагностики РА был разработан метод иммуноферментного определения антител к цитруллинсодержащим белкам – производным филаггрина, в котором в качестве антигенной субстанции используется синтетический циклический цитруллинированный пептид.
В организме цитруллин, непосредственно, образуется из орнитина в цикле мочевины (Аргинин → Орнитин → Цитруллин → Аргининосукцинат → Аргинин). Процесс цитруллирования можно расценивать как признак воспаления соединительной ткани. Группа антител, образующаяся к цитруллированным белкам человека, высокоспецифична при ревматоидном артрите.

В норме такие антитела не определяются. Показано, что антитела к цитруллин содержащему пептиду IgG появляются у 75-79% больных. Специфичность может достигать 96%. Частота обнаружения этого маркера выше, по сравнению с другими широко известными маркерами ревматоидного артрита - например, ревматоидного фактора (РФ), особенно в начальных стадиях заболевания. Считается, что увеличение титра РФ при ревматоидном артрите выявляется только через 1,5 месяца после его клинической манифестации. К тому же, АЦЦП обнаруживаются (в 30%) при серонегативном течении заболевания, т.е. когда в крови не удается обнаружить ревматоидный фактор и постановка диагноза бывает затруднена.

Положительным диагностическим моментом определения АЦЦП является то, что у АЦЦП-положительных пациентов обнаруживается наибольшая степень повреждения хрящевой ткани при ревматоидном артрите, по сравнению с АЦЦП-негативными пациентами.
Рекомендуется проводить определение АЦЦП одновременно с ревматоидным фактором (РФ).

Недавно было показано (Томилова И.К. 2012), что при действии гипоксического фактора метаболическим маркером повреждающего действия NO является концентрация цитруллина, повышение содержания которого отражает активность NO-синтазы как локальной компенсаторно-приспособительной реакции, лимитирующей интенсивность нитритредуктазной компоненты цикла и гиперпродукции оксида азота. Уменьшение концентрации цитруллина при повышении уровня нитритов указывает на дезадаптивный характер изменений и является неблагоприятным признаком развития патогенетических механизмов гиперпродукции NO, обусловливающих нитрозильный стресс.

Общая информация об исследовании

Антитела к циклическому цитруллинсодержащему пептиду, IgG, – в настоящее время один из самых информативных маркеров раннего ревматоидного артрита. АЦЦП относятся преимущественно к классу IgG и обнаруживаются в крови на самых ранних стадиях заболевания ревматоидным артритом (за 1-2 года до появления первых симптомов).

Ревматоидный артрит – наиболее распространенное хроническое аутоиммунное заболевание, характеризующееся поражением периферических суставов с развитием в них эрозивно-деструктивных изменений и широким спектром внесуставных проявлений. Характерным признаком ревматоидного артрита является симметричное поражение суставов кистей, стоп, лучезапястных, локтевых, плечевых, коленных и голеностопных суставов. Отмечается болезненность, припухлость, покраснение кожных покровов над пораженными суставами, ограничение движений и, как следствие, нарушение функции суставов. Одним из важных симптомов ревматоидного артрита является утренняя скованность в суставах длительностью более одного часа. Прогрессирующее воспаление суставов приводит к значительному ограничению их подвижности с развитием суставных отклонений.

Вначале, при поражении суставов в виде артрита, возникает необходимость в дифференциальной диагностике. При этом необходимо обращать внимание на типичные признаки ревматоидного артрита, развитие эрозивного процесса в суставах кистей, ревматоидный фактор и особенно на антитела к ЦЦП. Ревматоидный фактор недостаточно специфичен и может обнаруживаться при других аутоиммунных заболеваниях и хронических инфекциях, в то время как антитела к циклическому цитруллинсодержащему пептиду обладают более высокой специфичностью (98 %) и диагностической значимостью для выявления ревматоидного артрита. Тест также позволяет дифференцировать эрозивную и неэрозивную формы заболевания. У пациентов с повышенным уровнем антител к ЦЦП отмечается большая степень повреждения хряща сустава по сравнению с пациентами, в крови которых данные антитела отсутствуют. Это может быть использовано для прогнозирования скорости разрушения суставов на этапе раннего ревматоидного артрита, что позволяет рассматривать обнаружение АЦЦП в качестве одного из факторов неблагоприятного прогноза данного заболевания. Совместное определение ревматоидного фактора и АЦЦП позволяет диагностировать ревматоидный артрит на ранней стадии, своевременно назначить терапию и предотвратить тяжелые деструктивные изменения в суставах.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики ревматоидного артрита на очень ранней стадии (длительность болезни
• Для диагностики серонегативных форм ревматоидного артрита (когда тест на ревматоидный фактор отрицательный).
• Ддя дифференциальной диагностики ревматоидного артрита и других аутоиммунных заболеваний с суставным синдромом.
• Чтобы оценить риск развития деструкции суставов у пациентов с ранним ревматоидным артритом.

Когда назначается исследование?

• При некоторых ревматических заболеваниях встречается суставной синдром (боль, припухлость в области суставов, утренняя скованность, локальное покраснение кожных покровов), что может усложнить постановку правильного диагноза, особенно на ранних стадиях заболевания. В данном случае анализ помогает провести дифференциальную диагностику, так как он обладает высокой специфичностью (до 98 %) и чувствительностью (до 70 %) для выявления ревматоидного артрита даже на самых ранних стадиях заболевания, когда присутствует только несколько симптомов.
• При планировании терапии ревматоидного артрита. Для пациентов, в крови которых обнаружены АЦЦП, характерно более агрессивное течение болезни с быстрым прогрессированием эрозий в суставах, поэтому на ранних этапах заболевания необходимо назначить адекватную терапию, чтобы предотвратить развитие необратимых изменений в суставах (деформаций, анкилозов).

Маркер ревматоидного артрита:

Описание характерных для ревматоидного артрита аутоантигенов, содержащих цитруллин, стало одним из наиболее важных открытий ревматологии последнего времени в области серологической диагностики. Цитруллин - обычный метаболит, представленный повсеместно в организме, он является не-стандартной аминокислотой, так как не может быть интегрирован в белок в процессе его синтеза. Цитруллинсодержащие белки могут образовываться только в ходе посттрансляционной модификации аргининовых остатков - реакции, катализируемой пептидил-аргининдеиминазой. Цитруллинирование - это процесс, в котором формируются цитруллинсодержащие белки. Реакция цит-руллинирования привлекла повышенное внимание ревматологов, поскольку у больных с ревмато-идным артритом (РА) выявляются аутоантитела, направленные против белков, содержащих цит-руллин. Основываясь на этих данных, был разработан доступный для клинической практики метод иммунофлуорисцентного определения антител к цитруллинсодержащим белкам, в котором в каче-стве антигенной субстанции используется синтетический циклический цитруллинированный пептид (ЦЦП).

Физиологическая роль:

Процесс цитруллинирования наблюдается в ходе естественных физиологических и патологических процессов в организме человека и играет свою роль в процессах клеточной дифференциации и апоптоза. К цитруллинированным антигенам синовиальных тканей относят: цитруллинирован-ный виментин, цитруллинированный филаггрин, цитруллинированные α-и β-цепи фибрина, цитруллинированные пептиды, входящие в состав коллагенов І и ІІ типа. В ходе разработки методов определения антител к цитруллинированным антигенам было показа-но, что использование синтетических циклических форм цитруллинированных пептидов обеспечивает большую чувствительность теста. Антитела к циклическому цитруллинированному пептиду в настоящее время признаны информативным серологическим маркером РА.

Клиническая значимость:

Ревматоидный артрит - распространённое системное аутоиммунное заболевание, которое затраги-вает около 0,5-1% населения. Эта болезнь вызывает прогрессирующее разрушение и деформацию суставов, может иметь внесуставные проявления. Ранний диагноз и соответствующая терапия ревматоидного артрита имеют решающее значение для исходов заболевания. К числу традиционных тестов серологической диагностики РА относят определение рефматоидного фактора (РФ). Однако, определение РФ имеет два существенных ограничения. Во-первых, специфичность этого теста для РА является достаточно низкой: РФ обнаруживается примерно у 5% здоровых людей, у 5-25% лиц пожилого возраста, а также у значительного числа больных с хроническими заболева-ниями. Так, классический IgM-РФ выявляется у 30-35% больных с системной красной волчанкой и системной склеродермией, 20% больных с дерматомиозитом, узелковым полиартериитом и болез-нью Бехтерева, 10-15% больных с псориатическим артритом, болезнью Рейтера, сифилисом, туберкулезом, саркоидозом, хроническим активным гепатитом. При наличии суставного синдрома IgM-РФ-позитивными оказываются 25-50% больных с инфекционным эндокардитом, 45-70% - с первичным билиарным циррозом печени, 20-75% - с гепатитом В или С, 15-65% - с другими вирусными инфекциями, 5-25% - с опухолями. Во-вторых, наличие РФ не является стабильным. Частота выявления РФ существенно зависит от длительности заболевания: в первые 6 месяцев он выявляется лишь у 15-43% больных РА, в последующем часть РФ-негативных пациентов стано-вятся РФ-позитивными. Под влиянием лечения возможна и обратная трансформация.

В 2007 году Европейской лигой против ревматизма (EULAR) были опубликованы нормативы для диагностики раннего РА и определение аутоантител против ЦЦП было отнесено к серологическому маркеру.

Эти аутоантитела могут появляться в сыворотке крови за 1 год до начала заболевания, и их встречаемость в дебюте РА составляет 40-50%, что значительно выше встречаемости РФ, которая не превышает 10-15% в начале заболевания. Именно благодаря высокой встречаемости в дебюте РА, а также специфичности, близкой к 95% (против 70% для РФ), определение анти-ЦЦП стало золотым стандартом диагностики раннего РА. В большинстве случаев иммунологическое подтверждение клинического диагноза дебюта РА становится основой раннего назначения терапии и сохранения функции суставов у пациентов с этим тяжелым заболеванием. Кроме того, тест позво-ляет дифференцировать эрозивную и неэрозивную формы РА. У анти-ЦЦП положительных паци-ентов отмечается большая степень повреждения хряща по сравнению с анти-ЦЦП отрицательными пациентами. Прогностическая ценность метода возрастает, если его используют в комбинации с РФ. Этот тест позволяет дифференцировать РА с другими заболеваниями соединительной ткани. Анти-ЦЦП могут быть обнаружены в 30% случаев серонегативного ревматоидного артрита(отрицательного по РФ). Продемонстрирована целесообразность применения этого теста в ранней диагностике артри-та и в целях прогноза недавно развившегося РА (анти-ЦЦП больше ассоциированы с прогрессией и эрозивными артритами, чем РФ). Использование анти-ЦЦП в целях мониторинга активности процесса не рекомендовано (корреляции с маркёрами активности, в т. ч. СОЭ, СРБ, не выявлено). В крупномасштабных клинических исследованиях установлено, что уровень анти-ЦЦП-антител остается стабильным по меньшей мере в течение первых 3-5 лет ревматоидного артрита. Наличие антител к циклическому цитруллинированному пептиду на момент установления диагно-за предвещает более агрессивное течение заболевания и более выраженное рентгенологическое прогрессирование, несмотря на проводимую терапию. Последующие колебания уровня этих анти-тел не отражают изменения активности заболевания. Ни НПВП, ни глюкокортикостероиды, ни большинство базисных препаратов не влияют на уровень анти-ЦЦП, что позволяет сделать вывод, что для контроля эффективности лечения данный тест не пригоден, так как на фоне применения большинства базисных и симптоматических препаратов не происходит достоверного снижения уровня антител.

Показания к назначению:

• Ранняя диагностика ревматоидного артрита (целесообразно в сочетании с РФ)
• Диагностика серонегативных (по ревматоидному фактору) форм ревматоидного артрита.
• В прогностических целях, при недавно развившемся ревматоидном артрите.

Интерпретация результата:

Повышение значений.

1. ревматоидный артрит (клиническая чувствительность - 70,6%, специфичность общая - 98,2%);
2. в некоторых случаях других заболеваний соединительной ткани, особенно СКВ (системная красная волчанка).

Исследуемый материал: сыворотка крови.

Метод определения: иммунохемилюминисцентный, Abbot Architect 2000i.

Температурный режим хранения и транспортировки:

Специальной подготовки к исследованию не требуется .

Литература:

1. С. В. Лапин, А. А. Тотолян. Антитела к цитруллинированным антигенам.// Лабораторная диагностика аутоиммунных заболеваний. Журнал "Terra Medica nova" № 3 (15) 2007.
2. Лапин С.В., Маслянский А.Л., Иливанова Е.П., Мазуров В.И., Тотолян А.А. Клиническое значение антител к цикли-ческому цитруллированному пептиду при раннем ревматоидном артрите. // Медицинская Иммунология. 2004, Т. 6, №1-2, стр 57-66.
3. О.Б. Яременко, А.М. Микитенко. Диагностика ревматоидного артрита на ранних стадиях. //Кафедра госпитальной терапии № 1 Национального медицинского университета им. А.А. Богомольца, г. Киев.
4. Alessandri C., Bombardieri M., Papa N. et al. Decrease of anti-cyclic citrullinated peptide antibodies and rheuma toid factor following anti-TNFa therapy (infliximab) in rheumatoid arthritis is associated with clinical improvement // Ann. Rheum. Dis. - 2004. - Vol. 63. - P. 1218-1221.
5. American College of Rheumatology Subcommittee on Rheumatoid Arthritis Guidelines. (2002) Guidelines for the manage-ment of rheumatoid arthritis. 2002 Update // Arthritis Rheum. - 2002. - Vol. 46. - P. 328-346.
6. Bobbio-Pallavicini F., Alpini C., Caporali R. et al. Autoantibody profile in rheumatoid arthritis during long-term infliximab treatment // Arthritis Res. Ther. - 2004. - Vol. 6. - P. R264-R272.
7. Chen H.A., Lin K.C., Chen C.H. et al. The effect of etanercept on anti-cyclic citrullinated peptide antibodies and rheumatois factor in patients with rheumatoid arthritis // Ann. Rheum. Dis. - 2006. - Vol. 65. - P. 35-39.
8. De Rycke L., Verhelst X., Kruithof E. et al. Rheumatoid factor, but not anti-citrullinated protein antibodies, is modulated by infliximab treatment in rheumatoid arthritis // Ann. Rheum. Dis. - 2005. - Vol. 64. - P. 299-302.
9. De Vries-Bouwstra J.K., Goekoop-Ruiterman Y.P.M., Van Zeben D. et al. A comparison of clinical and radiological out-comes of four treatment strategies for early rheumatoid arthritis: results of the BEST trial // Ann. Rheum. Dis. - 2004. - Vol. 63 (suppl. 1). - P. 58.
10. Emery P., Breedveld F.C., Dougados M. et al. Early referral recommendation for newly diagnosed rheumatoid arthritis: evidence based development of a clinical guide // Ann. Rheum. Dis. - 2002. - Vol. 61. - P. 290-297.
11. Combe B., Landewe R., Lukas C., et al. EULAR recommendations for the management of early arthritis: report of task force of the European Standing Committee for international Clinical Studies including Therapeutics (ESCISIT).// Ann Rheum Dis 2007; 66; 34-45.

Код по бланку: 26.35.

Антитела ССР (Антитела к циклическому цитруллин содержащему пептиду) (кол.)

Наименование на латинском языке

Ibi elementorum ad cyclic citrulline continens peptide

Наименование на английском языке

Antibodies to cyclic citrulline peptide-containing

Информация об исследовании

Ревматоидный артрит (РА) - наиболее распространенное аутоиммунное заболевание. Это заболевание характеризуется воспалением синовиальной оболочки, которое распространяется симметрично от малых к большим суставам. Начальные симптомы заболевания включают болезненное опухание суставов на пальцах с потерей гибкости в суставах по утрам. Ранняя диагностика и безотлагательное начало подходящей терапии необходимы для того, чтобы держать заболевание под контролем.

Ревматоидный артрит (РА) - новый, высокоспецифичный маркер ревматоидного артрита. Выявление заболевания на ранних стадиях.

До недавнего времени наиболее широко используемым серологическим тестом при подозрении на РА было определение ревматоидного фактора (РФ). Это антитела (преимущественно класса IgM), которые реагируют с гаммаглобулинами и обнаруживаются у 60-80% пациентов с РА. РФ - чувствительные, но не очень специфичные маркеры РА, так как они также обнаруживаются у здоровых людей, у пациентов с инфекционными заболеваниями или при других аутоиммунных заболеваниях (системная красная волчанка, синдром Шегрена, склеродерма и др.).

В настоящее время доказано, что новым и высокоспецифичным маркером РА являются антитела к циклическому цитруллин-содержащему пептиду (CCP) . Антитела к циклическому цитруллин содержащему пептиду представляют собой аутоантитела, взаимодействующие с синтетическими пептидами, содержащими атипичную аминокислоту - цитруллин.

Антитела к CCP относятся преимущественно к классу IgG, и их специфичность при РА составляет около 97%. Они обнаруживаются на очень ранних стадиях заболевания. У пациентов с антителами к CCP развивается более выраженное повреждение суставов. Антитела к CCP обладают более высокой специфичностью по сравнению с РФ (анти-CCP - 97%, РФ - 63%). Данный анализ выполняется на закрытом автоматическом анализаторе Cobas 6000 (Roche, Швейцария).

• Антитела к цитруллинированному виментину (анти-MCV);
• С-реактивный белок.

Показания к назначению исследования

1. Ранняя диагностика ревматоидного артрита;
2. Диагностика серонегативных (по ревматоидному фактору) форм ревматоидного артрита;
3. В прогностических целях, при недавно развившемся ревматоидном артрите.

Подготовка к исследованию

Кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 11 часов, натощак (между последним приемом пищи и взятием крови должно пройти не менее 8-ми часов, воду можно пить в обычном режиме), накануне исследования легкий ужин с ограничением приема жирной пищи.
За 1-2 часа до сдачи крови воздержаться от курения, не употреблять сок, чай, кофе, можно пить негазированную воду. Исключить физическое напряжение (бег, быстрый подъем по лестнице), эмоциональное возбуждение. За 15 минут до сдачи крови рекомендуется отдохнуть, успокоиться. Исследование рекомендуется проводить до начала иммуносупрессивной терапии.