Mga pamamaraan ng diagnostic. Mga pamamaraan para sa pagsusuri sa laboratoryo ng mga impeksyon sa viral Mga tampok ng pagsusuri ng mga nakakahawang sakit

Ang mga serological diagnostic na batay sa reaksyon ng antigen-antibody ay maaaring gamitin upang matukoy ang pareho, at gumaganap ng isang papel sa pagtukoy ng etiology ng isang impeksyon sa viral kahit na may mga negatibong resulta ng paghihiwalay ng virus.

Ang tagumpay ng serological diagnosis ay nakasalalay sa pagtitiyak ng reaksyon at pagsunod sa mga pansamantalang kondisyon para sa pagkuha ng dugo na kinakailangan para sa synthesis ng mga antibodies ng katawan.

Sa karamihan ng mga kaso, ginagamit ang ipinares na sera ng dugo, na kinukuha sa pagitan ng 2-3 linggo. Ang isang positibong reaksyon ay itinuturing na hindi bababa sa 4 na beses na pagtaas sa titer ng antibody. Alam na ang karamihan sa mga tiyak na antibodies ay nabibilang sa mga klase ng IgG at IgM, na na-synthesize sa iba't ibang oras ng nakakahawang proseso. Kasabay nito, ang mga antibodies ng IgM ay maaga, at ang mga pagsusuri na ginamit upang matukoy ang mga ito ay ginagamit para sa maagang pagsusuri (ito ay sapat na upang suriin ang isang serum). Ang mga antibodies ng klase ng IgG ay na-synthesize sa ibang pagkakataon at nakaimbak nang mahabang panahon.

Para sa pag-type ng virus, ginagamit ang pH, para sa mga diagnostic na partikular sa grupo, halimbawa, ng impeksyon sa adenovirus, ginagamit nila pandagdag fixation reaksyon(RSK). Ang pinaka ginagamit ay hemagglutination inhibition reaksyon(RTGA), RSK, RIF, mga passive na reaksyon At baligtarin ang passive hemagglutination(RPGA, ROPGA), iba't ibang variant ng ELISA, na halos lahat ng dako ay pinalitan ang RIA, na katumbas ng sensitivity dito.

RTGA ginagamit upang masuri ang mga sakit na dulot ng mga virus ng hemagglutinating. Ito ay batay sa pagbubuklod ng mga antibodies sa serum ng pasyente ng idinagdag na karaniwang virus. Ang tagapagpahiwatig ng reaksyon ay ang mga erythrocyte na pinagsama-sama ng virus (pagbuo ng isang katangian na "payong") sa kawalan ng mga tiyak na antibodies at pag-aayos sa ibaba, hindi pinagsama kung naroroon sila.

RSK ay isa sa mga tradisyunal na serological na pagsusuri at ginagamit upang masuri ang maraming mga impeksyon sa viral. Dalawang sistema ang nakikilahok sa reaksyon: mga antibodies ng serum ng pasyente + karaniwang virus at mga erythrocytes ng tupa + mga antibodies sa kanila, pati na rin ang isang titrated na pandagdag. Kung magkatugma ang mga antibodies at ang virus, ang kumplikadong ito ay nagbubuklod ng komplemento at ang lysis ng mga erythrocyte ng tupa ay hindi mangyayari (positibong reaksyon). Sa isang negatibong RSC, ang pandagdag ay nag-aambag sa lysis ng mga erythrocytes. Ang kawalan ng pamamaraan ay ang hindi sapat na mataas na sensitivity at ang kahirapan sa pag-standardize ng mga reagents.

Upang isaalang-alang ang kahalagahan ng RSK, pati na rin ang RTGA, kinakailangan upang titrate ang ipinares na sera, iyon ay, kinuha sa simula ng sakit at sa panahon ng pagbawi.

RPGA- agglutination ng mga erythrocytes (o polystyrene beads) na sensitized ng viral antigens sa pagkakaroon ng mga antibodies. Ang anumang mga virus ay maaaring ma-sorbed sa mga erythrocytes, anuman ang pagkakaroon o kawalan ng aktibidad ng hemagglutinating sa kanila. Dahil sa pagkakaroon ng mga di-tiyak na reaksyon, ang sera ay nasubok sa isang dilution na 1:10 o higit pa.

RNGA- agglutination ng mga erythrocytes na sensitized ng mga tiyak na antibodies sa pagkakaroon ng mga viral antigens. Natanggap ng ROPHA ang pinakamalaking pamamahagi sa pagtuklas ng HBs antigen kapwa sa mga pasyente at sa mga donor ng dugo.

KUNG paraan din ELISA ginagamit upang makita ang mga antibodies sa serum. Ang ELISA para sa mga layuning diagnostic ay lalong nagiging mahalaga at laganap. Ang viral antigen ay na-sorbed papunta sa solid phase (sa ilalim ng mga balon ng polystyrene plates o polystyrene beads). Kapag ang kaukulang antibodies sa suwero ay idinagdag, sila ay nagbubuklod sa mga adsorbed antigens. Ang pagkakaroon ng nais na antibodies ay nakita gamit ang mga anti-antibodies (halimbawa, tao) na pinagsama sa isang enzyme (peroxidase). Ang pagdaragdag ng substrate at reaksyon ng substrate-enzyme ay nagbibigay ng kulay. Ang ELISA ay maaari ding gamitin upang matukoy ang mga antigen. Sa kasong ito, ang mga antibodies ay na-adsorbed sa solid phase.

monoclonal antibodies. Ang mahusay na pag-unlad sa diagnosis ng mga impeksyon sa viral ay ginawa sa huling dekada, nang, sa pagbuo ng genetic engineering research, isang sistema para sa pagkuha ng mga monoclonal antibodies ay binuo. Kaya, ang pagtitiyak at pagiging sensitibo ng mga pamamaraan ng diagnostic para sa pagtukoy ng mga antigen ng viral ay tumaas nang husto. Ang makitid na pagtitiyak ng mga monoclones, na kumakatawan sa isang maliit na proporsyon ng mga viral na protina na maaaring wala sa klinikal na materyal, ay matagumpay na nagtagumpay sa pamamagitan ng paggamit ng ilang mga monoclonal antibodies sa iba't ibang mga determinant ng viral.

Ito ay batay sa pagpapasiya ng mga antiviral antibodies sa dugo ng pasyente sa mga serological na reaksyon gamit ang mga partikular na viral antigens - diagnosticum o mga espesyal na sistema ng pagsubok. Ang mga serological na reaksyon sa mga impeksyon sa viral ay isinasagawa sa isang likidong daluyan (RSK, RTGA, RNGA, RONGA, RTONGA, RIA), sa isang gel (RPG, RRG, RVIEF) o sa isang solid-phase carrier (halimbawa, sa mga dingding ng isang balon ng polystyrene plate na may pagkakabit sa kanila ng isa sa mga bahagi ng immune reaction - antigen o antibody). Ang ganitong mga solid-phase na pamamaraan tulad ng ELISA, IEM, RGadsTO, RIF, RGads, RTGads ay kilala.

Kadalasan, dahil sa pagkakaroon ng natural na antiviral antibodies sa dugo ng karamihan sa malulusog na tao, ang serological diagnosis ng mga impeksyon sa viral ay batay sa pag-aaral. ipinares na mga serum, kinuha sa simula at sa kasagsagan ng sakit o sa panahon ng convalescence upang matukoy ang pagtaas ng antibody titer. Ang pagtaas ng titer ng antibody ng apat na beses o higit pa ay itinuturing na makabuluhang diagnostic.

Ang pagtaas ng sensitivity ng mga serological na pamamaraan ay nakakamit sa pamamagitan ng adsorption ng antigens o antibodies sa erythrocytes (RNGA, RONGA, RTONGA, RGadsTO, RRG), na may label na enzymes (ELISA), radioactive isotopes (RIA, RPG) o fluorochromes (RIF). ang pagkakaroon ng pandagdag (RSK, RRG).

Complement fixation reaction (CFR) sa anyo ng pandagdag fixation sa malamig (sa panahon ng gabi sa isang temperatura ng +4 0 C) ay madalas na ginagamit sa virology para sa retrospective diagnosis ng isang bilang ng mga viral impeksyon at para sa pagpapasiya ng virus-specific antigens sa mga materyales mula sa mga pasyente.

Radial hemolysis reaction (RRH) sa agarose gel ay batay sa hindi pangkaraniwang bagay ng hemolysis ng mga erythrocytes na sensitized ng isang antigen sa ilalim ng impluwensya ng mga antibodies na partikular sa virus sa pagkakaroon ng pandagdag at ginagamit para sa serological diagnosis ng influenza, SARS, rubella, beke, at mga impeksyon sa togavirus.

Upang i-set up ang reaksyon, 0.1 ml ng undiluted viral antigen ay idinagdag sa mga erythrocytes ng tupa (0.3 ml ng isang 10% na suspensyon), at ang pinaghalong ito ay incubated sa loob ng 10 minuto sa temperatura ng silid. Ang 0.3 ml ng sensitized erythrocytes at 0.1 ml ng pandagdag ay idinagdag sa 1.2% agarose sa temperatura na 42 0 C, ang halo ay ibinuhos sa mga slide ng salamin o sa mga balon ng polystyrene plate, ang mga butas ay pinutol sa frozen na agarose gel na may suntok at puno ng pagsubok at kontrol na sera. Ang mga baso o mga panel ay sarado na may takip at inilagay sa isang basang silid sa loob ng 16-18 na oras sa isang termostat. Ang accounting para sa reaksyon ay isinasagawa ayon sa diameter ng hemolysis zone sa paligid ng mga butas na puno ng suwero. Walang hemolysis sa kontrol.

Karamihan sa mga impeksyon sa viral ay nagkakaroon ng mga immune response na ginagamit para sa diagnosis. Karaniwang sinusuri ang mga tugon sa cellular sa mga pagsusuri ng cytotoxicity ng lymphocyte laban sa mga nakakahawang ahente o target na mga cell na nahawahan nila, o ang kakayahan ng mga lymphocyte na tumugon sa iba't ibang antigen at mitogens.

Sa gawain ng mga praktikal na laboratoryo, ang kalubhaan ng mga reaksyon ng cellular ay bihirang tinutukoy. Ang mga pamamaraan para sa pagtukoy ng mga antiviral na AT ay naging mas laganap.

RN batay sa pagsugpo ng cytopathogenic effect pagkatapos ng paghahalo ng virus sa mga tiyak na antibodies. Ang hindi kilalang virus ay nahahalo sa kilalang komersyal na antisera at, pagkatapos ng naaangkop na pagpapapisa ng itlog, ipinakilala sa cell monolayer. Ang kawalan ng pagkamatay ng cell ay nagpapahiwatig ng hindi pagkakatugma sa pagitan ng nakakahawang ahente at mga kilalang antibodies.

Pagbabawal ng hemagglutination RTGA ginagamit upang matukoy ang mga virus na may kakayahang pagsama-samahin ang iba't ibang mga erythrocytes. Upang gawin ito, ang medium ng kultura na naglalaman ng pathogen ay hinahalo sa isang kilalang komersyal na antiserum at ipinakilala sa kultura ng cell. Pagkatapos ng pagpapapisa ng itlog, ang kakayahan ng kultura sa hemagglutination ay tinutukoy at, sa kawalan nito, ang isang konklusyon ay ginawa tungkol sa mismatch ng virus na may antiserum. Ang pagsugpo sa cytopathic effect sa pamamagitan ng viral interference Ang reaksyon ng inhibition ng cytopathic effect dahil sa interference ng mga virus ay ginagamit upang makilala ang isang pathogen na nakakasagabal sa isang kilalang cytopathogenic virus sa isang kultura ng mga sensitibong selula. Upang gawin ito, ang isang komersyal na serum (halimbawa, sa rubella virus kung ito ay pinaghihinalaang) ay ipinakilala sa medium ng kultura na naglalaman ng virus sa ilalim ng pag-aaral, incubated at infect ang pangalawang kultura; pagkalipas ng 1-2 araw, isang kilalang cytopathogenic virus (halimbawa, anumang ECHO virus) ay ipinapasok dito. Kung mayroong isang cytopathogenic effect, napagpasyahan na ang unang kultura ay nahawahan ng virus na naaayon sa inilapat na AT.

Direktang immunofluorescence.

Sa iba pang mga pagsubok, ang direktang reaksyon ng immunofluorescence (ang pinakamabilis, pinakasensitibo at nagagawang muli) ay natagpuan ang pinakamalaking distribusyon. Halimbawa, ang pagkakakilanlan ng CMV sa pamamagitan ng cytopathogenic effect nito ay nangangailangan ng hindi bababa sa 2-3 linggo, at kapag gumagamit ng may label na monoclonal antibodies, ang pagkakakilanlan ay posible pagkatapos ng 24 na oras. Ang pagkakaroon ng isang set ng mga naturang reagents, maaari silang maipasok sa mga kulturang nahawaan ng virus, incubated, hugasan ang hindi nakatali na reagent, at masuri gamit ang pagkakaroon ng luminescence ng microfluous na mga cell).



Immunoelectron microscopy (katulad ng naunang pamamaraan) ay nagbibigay-daan sa iyo na matukoy ang iba't ibang uri ng mga virus na nakita ng electron microscopy (halimbawa, iba't ibang uri ng herpesviruses), na hindi maaaring gawin batay sa mga morphological features. Sa halip na antisera, ang AT na may label sa iba't ibang paraan ay ginagamit para sa pagkakakilanlan, ngunit ang pagiging kumplikado at mataas na halaga ng pamamaraan ay nililimitahan ang aplikasyon nito.

Ang pagtuklas ng mga antiviral antibodies (AT) sa serum ng dugo. RTGA. RSK. REEF.

Mga pamamaraan ng immunosorptive para sa pagtuklas ng mga antiviral antibodies.

Ang isang mas simple at mas madaling paraan ay ang pagtuklas ng mga antiviral antibodies (AT) sa serum. Ang mga sample ng dugo ay dapat kunin ng dalawang beses: kaagad pagkatapos ng simula ng mga klinikal na palatandaan at pagkatapos ng 2~3 linggo. Napakahalaga na suriin ang eksaktong dalawang sample ng serum. Ang mga resulta ng isang pag-aaral ay hindi maituturing na konklusibo dahil sa kawalan ng kakayahang maiugnay ang hitsura ng AT sa kasalukuyang kaso. Posible na ang mga antibodies na ito ay umiikot pagkatapos ng isang nakaraang impeksiyon. Sa ganoong sitwasyon, ang papel na ginagampanan ng pag-aaral ng suwero na nakuha sa panahon ng convalescence ay halos hindi ma-overestimated. Ang pagkakaroon ng sakit sa panahon ng pagkuha ng unang sample ay ipinahiwatig ng hindi bababa sa isang apat na beses na pagtaas sa AT titer, na nakita sa panahon ng pag-aaral ng pangalawang sample.

Ang mga pamamaraan na nakalista sa ibaba ay hindi pinapayagan ang pagkakaiba-iba ng mga antibodies (AT) na nabuo sa panahon ng sakit at umiikot pagkatapos ng paggaling (ang tagal ng panahong ito ay nagbabago para sa iba't ibang mga impeksyon). Dahil para sa sapat na pagsusuri, kinakailangan upang kumpirmahin ang isang makabuluhang pagtaas sa mga titer ng AT sa dalawang sample, ang unang sample ay sinusuri sa talamak na yugto, at ang pangalawa - sa panahon ng pagbawi (pagkatapos ng 2-3 na linggo). Ang mga resultang nakuha ay retrospective at mas angkop para sa epidemiological survey. Nakikita ng RTGA ang mga antibodies na na-synthesize laban sa mga hemagglutinin ng mga virus (halimbawa, ang influenza virus).



Pinapadali ng pamamaraan ang pagtuklas ng mga naturang antibodies (AT) sa serum ng pasyente. Ang RSK ay ang pangunahing paraan ng serodiagnosis ng mga impeksyon sa viral (kabilang sa mga magagamit). Ang reaksyon ay nagpapakita ng complement-fixing IgM at IgG, ngunit hindi ito pinagkaiba; upang ma-optimize ang mga resulta na nakuha, ang pagbabalangkas ng reaksyon ay nangangailangan ng ilang mga kasanayan ng mga tauhan.

REEF. Kung ang isang biopsy ng nahawaang tissue ay magagamit at ang komersyal na fluorescein-labeled AT kit ay magagamit, direktang immunofluorescence ay maaaring kumpirmahin ang diagnosis.

Ang pagbabalangkas ng reaksyon ay kinabibilangan ng pagpapapisa ng itlog ng pinag-aralan na tissue na may AT, ang kanilang kasunod na pag-alis at fluorescent microscopy ng sample. Ang mga immunosorptive na pamamaraan para sa pag-detect ng mga antiviral antibodies Ang mga immunosorptive na pamamaraan (halimbawa, ELISA at RIA) ay higit na nagbibigay-kaalaman, dahil hiwalay silang nakakakita ng IgM at IgG, na ginagawang posible na gumawa ng ilang mga konklusyon tungkol sa dinamika ng nakakahawang proseso o ang estado ng paggaling. Upang makita ang AT, ang isang kilalang antigen ay na-adsorbed sa isang solidong substrate (halimbawa, sa mga dingding ng mga test tube, plastic microplate, Petri dishes) at iba't ibang dilution ng serum ng pasyente ay idinagdag. Pagkatapos ng naaangkop na incubation, ang mga hindi nakatali na AT ay aalisin, ang antiserum na may label na enzyme laban sa Ig ng tao ay idinagdag, ang pamamaraan para sa pagpapapisa ng itlog at paghuhugas ng mga hindi nakatali na AT ay paulit-ulit, at anumang chromogenic substrate (sensitibo sa pagkilos ng enzyme) ay idinagdag. Dahil ang pagbabago ng kulay ay proporsyonal sa nilalaman ng mga tiyak na antibodies, posible na matukoy ang kanilang titer sa pamamagitan ng spectrophotometric na pamamaraan. Sa pagsusuri ng impeksyon sa HIV, natagpuan ng paraan ng immunoblotting ang pinakamalaking pamamahagi.

Pagtuklas ng mga viral antigens (AH). ELISA. Sa kasalukuyan, ang mga komersyal na kit ay lumitaw na para sa pagtuklas ng AH ng ilang mga pathogen, na nagpapahintulot sa kanila na makilala sa loob ng 5-10 minuto. Upang makita ang AG sa solid phase, ang kilalang AT ay adsorbed at serum na naglalaman ng AG ay idinagdag; pagkatapos ng pagpapapisa ng itlog, ang hindi nakatali na AG ay decanted, ang sistema ay hinuhugasan, at may label na mga antibodies na tiyak sa mga adsorbed antibodies. Ang pamamaraan ng pagpapapisa ng itlog at paghuhugas ay paulit-ulit, ang isang chromogenic substrate ay ipinakilala, ang isang positibong resulta ay naitala kapag ang kulay ng system ay nagbabago. Ang hybridization ng DNA ay isang napaka-espesipikong pamamaraan na nagbibigay-daan sa pagkilala sa genome ng virus pagkatapos ng hybridization nito sa mga pantulong na molekula ng DNA. Ang mga enzyme at isotopes ay ginagamit bilang mga marker.

Tinutukoy ng pamamaraan ang kakayahan ng viral DNA na mag-hybrid sa may label na complementary DNA; ang pagtitiyak ng pamamaraan ay direktang proporsyonal sa haba ng komplementaryong kadena. Isang promising na paraan para sa in situ hybridization ng mga nucleic acid. Upang i-set up ang reaksyon, inilalapat ang may label na DNA sa mga biopsy ng tissue (kabilang ang mga naayos na may formalin o nakapaloob sa mga bloke ng paraffin) at ang pakikipag-ugnayan sa komplementaryong DNA ay naitala. Ang pamamaraan ay ginagamit upang makita ang herpes simplex virus, human papilloma, Epstein-Barr, atbp.

PCR. Ang pamamaraan ay makabuluhang pinatataas ang sensitivity ng paraan ng hybridization, pinatataas ang nilalaman ng viral DNA sa materyal na nakuha mula sa pasyente, at pinapabilis din ang oras upang makuha ang resulta.

  • 3. Ang causative agent ng anthrax. Taxonomy at katangian. Microbiological diagnostics. Tukoy na pag-iwas at paggamot.
  • 1. Morphological properties ng bacteria.
  • 3. Ang causative agent ng borreliosis. Taxonomy. Katangian. Microbiological diagnostics.
  • 1. Mga prinsipyo ng pag-uuri ng protozoa.
  • 2) Sa bilang ng mga mutated genes:
  • 3) Sa pamamagitan ng phenotypic na mga kahihinatnan:
  • 1. Mga tampok ng morpolohiya ng mga virus.
  • 2. Di-tiyak na mga kadahilanan ng proteksyon ng katawan.
  • 2. Immunoglobulins, istraktura at mga function.
  • 3. Pathogens orvi. Taxonomy. Katangian. Mga diagnostic sa laboratoryo. Tukoy na pag-iwas at paggamot.
  • 2. Antigens: kahulugan, pangunahing katangian. Mga antigen ng bacterial cell.
  • 3. Pseudomonas aeruginosa. Taxonomy. Katangian. Microbiological diagnostics at paggamot.
  • 1. Tinctorial properties ng bacteria. Mga pamamaraan ng pangkulay.
  • 1. Mga paraan ng microscopy (fluorescent, dark-field, phase-contrast, electron).
  • 2. Passive hemagglutination reaksyon. Mga bahagi. Aplikasyon.
  • 1. Paglago at pagpaparami ng bacteria. Mga yugto ng pag-aanak:
  • 1. Mga pangunahing prinsipyo ng paglilinang ng bacterial:
  • 1. Artipisyal na nutrient media, ang kanilang pag-uuri. Mga kinakailangan sa nutrisyon.
  • 3. Mga pathogen ng Chlamydia. Taxonomy. Katangian. Microbiological diagnostics. Paggamot.
  • 1. Dysbiosis. Dysbacteriosis. Mga paghahanda para sa pagpapanumbalik ng normal na microflora: probiotics, eubiotics.
  • 1. Ang epekto ng pisikal at kemikal na mga salik sa mga mikroorganismo. Ang konsepto ng isterilisasyon, pagdidisimpekta, asepsis at antisepsis. Impluwensya ng mga pisikal na salik.
  • 2. Serological test na ginagamit upang masuri ang mga impeksyon sa viral.
  • 1. Ang konsepto ng impeksyon. Mga kondisyon para sa paglitaw ng isang nakakahawang proseso.
  • 3. Ang causative agent ng tetanus. Taxonomy at katangian. Microbiological diagnostics at paggamot.
  • 3. Ang causative agent ng typhus. Taxonomy. Katangian. Sakit na Brill-Zinsser. Microbiological diagnostics. Tukoy na pag-iwas at paggamot.
  • 3. Ang causative agent ng tick-borne typhus.
  • 1.Katangian ng bacterial toxins.
  • 3. Ang causative agent ng bulutong. Taxonomy. Katangian. Mga diagnostic sa laboratoryo. Tukoy na prophylaxis ng bulutong.
  • 3. Pag-uuri ng mycoses (fungi). Katangian. papel sa patolohiya ng tao. Mga diagnostic sa laboratoryo. Paggamot.
  • 1. Air microflora at mga pamamaraan ng pananaliksik nito. Sanitary-indicative air microorganisms.
  • 2. Serological test na ginagamit upang masuri ang mga impeksyon sa viral.

    Mga pamamaraan ng serological, ibig sabihin, mga pamamaraan para sa pag-aaral ng mga antibodies at antigens gamit ang mga reaksyon ng antigen-antibody na tinutukoy sa serum ng dugo at iba pang mga likido, pati na rin sa mga tisyu ng katawan. Ang pagtuklas ng mga antibodies laban sa mga antigen ng pathogen sa serum ng dugo ng pasyente ay ginagawang posible upang masuri ang sakit. Ginagamit din ang mga serological na pag-aaral upang matukoy ang mga microbial antigens, iba't ibang biologically active substances, blood groups, tissue at tumor antigens, immune complexes, cell receptors, atbp. Kapag ang isang microbe ay nahiwalay sa isang pasyente, ang pathogen ay nakikilala sa pamamagitan ng pag-aaral ng mga antigenic properties nito gamit ang immune diagnostic sera, ibig sabihin, blood sera ng hyperimmunized na mga hayop na naglalaman ng mga partikular na antibodies. Ito ang tinatawag na serological identification ng mga microorganism. Ang mga tampok ng pakikipag-ugnayan ng isang antibody na may isang antigen ay ang batayan ng mga diagnostic na reaksyon sa mga laboratoryo. Ang in vitro reaksyon sa pagitan ng isang antigen at isang antibody ay binubuo ng isang tiyak at isang di-tiyak na yugto. Sa tiyak na yugto, mayroong isang mabilis na tiyak na pagbubuklod ng aktibong site ng antibody sa determinant ng antigen. Pagkatapos ay dumating ang di-tiyak na yugto - mas mabagal, na ipinakita sa pamamagitan ng nakikitang pisikal na mga phenomena, tulad ng pagbuo ng mga natuklap (agglutination phenomenon) o namuo sa anyo ng labo. Ang yugtong ito ay nangangailangan ng ilang mga kundisyon (electrolytes, pinakamainam na pH ng daluyan). Ang pagbubuklod ng isang antigen determinant (epitope) sa aktibong site ng isang antibody Fab fragment ay dahil sa mga puwersa ng van der Waals, hydrogen bond, at hydrophobic na pakikipag-ugnayan. Ang lakas at dami ng antigen na nakagapos ng mga antibodies ay nakadepende sa affinity, avidity ng antibodies at kanilang valency.

    3. Ang mga sanhi ng malarya. Malaria - anthroponotic infectious disease na dulot ng ilang species ng protozoa ng genus Plasmodium, na ipinadala ng mga lamok (Anopheles), na sinamahan ng lagnat, anemia, pagpapalaki ng atay at pali. Ang mga causative agent ng malaria ay nabibilang sa Protozoa, ang Apicomplexa phylum, ang klase ng Sporozoa, at ang Pl species. vivax, Pl.malariae, Pl.falciparum, Pl.ovale.

    Epidemiology. Ang pinagmumulan ng impeksyon ay isang infested na tao; ang carrier ay isang babaeng lamok ng genus Anopheles. Ang pangunahing mekanismo ng paghahatid ay naililipat, sa pamamagitan ng kagat ng isang infested na babaeng lamok.

    Paggamot at pag-iwas. Ang mga gamot na antimalarial ay may iba't ibang epekto sa asexual, sekswal na yugto ng Plasmodium. Ang mga pangunahing gamot na antimalarial ay kinabibilangan ng quinine, chloroquine, quinacrine, primaquine, quinocide, bigumal, chloridine, atbp. Mga aksyong pang-iwas naglalayong ang pinagmulan ng pathogen (paggamot ng mga pasyente na may malaria at carrier) at ang pagkasira ng mga carrier ng pathogen - lamok. Ang mga pamamaraan ng pagbabakuna batay sa mga antigen na nakuha ng genetic engineering ay ginagawa.

    1. Pag-uuri ng mga antibiotic sa pamamagitan ng kemikal na istraktura, mekanismo, spectrum at uri ng pagkilos.Ayon kay chem. struct. Class 1 - B-lactam - penicillin, cephalosporin. 2 klase - macrolides - erythromycin, azithromycin. Klase 3 - aminoglycosides - streptomycin, kanamycin. Class 4 - tetracyclines - oxytetracycline, doxycycline. 5 mga cell - polypeptides - polymyxin. 6 na mga cell - polyen-nystatin 7kl-anzamycin-rifampicin .

    2. Depende sa mekanismo ng pagkilos, limang grupo ng mga antibiotic ay nakikilala: 1.gr antibiotics na nakakagambala sa synthesis ng cell wall - β-lactam. 2.gr antibiotics na nakakagambala sa molekular na organisasyon at synthesis ng cell membranes - polymyxins, polyenes; 3.gr antibiotics na nakakagambala sa synthesis ng protina - aminoglycosides, tetracyclines, macrolides, chloramphenicol. 4.gr antibiotics - inhibitors ng nucleic acid synthesis synthesis, rRNA at synthesis ng limang pangkat na depende sa synthesis ng nucleic acid, rRNA depende sa synthesis ng DNA kung aling mga mikroorganismo ang kanilang naaapektuhan. Ang bawat isa sa mga pangkat na ito ay may kasamang dalawang subgroup: malawak na spectrum at makitid na spectrum na mga antibiotic. 1gr. Ang mga antibacterial antibiotic ay bumubuo sa pinakamalaking grupo ng mga gamot.

    a) ang malawak na spectrum na antibiotic ay nakakaapekto sa mga kinatawan ng lahat ng tatlong dibisyon ng bakterya - aminoglycosides, tetracyclines, atbp.

    b) Ang mga antibiotic na makitid na spectrum ay epektibo laban sa isang maliit na hanay ng mga bakterya - kumikilos ang mga flight-myxin sa gracilicutes, ang vancomycin ay nakakaapekto sa mga bakteryang positibo sa gramo.

    2gr - anti-tuberculosis, antileprosy, antisyphilitic na gamot.

    3. Antibiotic na antifungal.

    a) Ang amphotericin B ay may malawak na spectrum ng pagkilos, epektibo sa candidiasis, blastomycosis, aspergillosis; sa parehong oras

    b) isang makitid na spectrum na antibiotic - nystatin, na kumikilos sa fungi ng genus Candida, ay

    4. Ang mga antiprotozoal at antiviral na antibiotic ay may maliit na bilang ng mga gamot.

    5. Antitumor antibiotics - mga gamot na may cytotoxic effect. Karamihan sa kanila ay ginagamit sa maraming uri ng mga tumor - mitomycin C. Ang pagkilos ng mga antibiotic sa mga microorganism ay nauugnay sa kanilang kakayahang sugpuin ang ilang mga biochemical na reaksyon na nagaganap sa microbial cell.

    2. Mga teorya ng kaligtasan sa sakit.1. Teorya ng kaligtasan sa sakit Mechnikov - ang phagocytosis ay gumaganap ng isang mapagpasyang papel sa antibacterial immunity. Si I.I. Mechnikov ang unang nag-isip ng pamamaga bilang isang proteksiyon sa halip na isang mapanirang phenomenon. Tinawag ng scientist ang defense cells na kumikilos sa ganitong paraan na "devouring cells." Iminungkahi ng kanyang mga kabataang kasamahan sa Pranses ang paggamit ng mga salitang Griyego na may parehong kahulugan. Tinanggap ng II Mechnikov ang pagpipiliang ito, at lumitaw ang terminong "phagocyte". 2. Teorya ng kaligtasan sa sakit Ang Ehrlich ay isa sa mga unang teorya ng pagbuo ng antibody, ayon sa kung saan ang mga cell ay may mga antigen-specific na receptor na inilabas bilang mga antibodies sa ilalim ng pagkilos ng isang antigen. Tinawag ni Ehrlich ang mga antimicrobial blood substance na "antibody". Napagtanto ni P. Ehrlich na kahit na bago makipag-ugnay sa isang tiyak na mikrobyo, ang katawan ay mayroon nang mga antibodies sa anyo na tinawag niyang "mga side chain" - ito ay mga lymphocyte receptor para sa mga antigens. Pagkatapos ay "nag-apply" si Ehrlich sa pharmacology: sa kanyang teorya ng chemotherapy, ipinapalagay niya ang preexistence ng mga receptor para sa mga nakapagpapagaling na sangkap sa katawan. Noong 1908, si P. Ehrlich ay ginawaran ng Nobel Prize para sa humoral theory of immunity. 3. Ang teorya ng kaligtasan sa sakit ni Bezredka- isang teorya na nagpapaliwanag ng proteksyon ng katawan mula sa isang bilang ng mga nakakahawang sakit sa pamamagitan ng paglitaw ng partikular na lokal na kaligtasan sa cell sa mga pathogen. 4. Mga teoryang nakapagtuturo kaligtasan sa sakit - ang pangkalahatang pangalan ng mga teorya ng pagbuo ng antibody, ayon sa kung saan ang nangungunang papel sa immune response ay ibinibigay sa antigen, na direktang kasangkot bilang isang matrix sa pagbuo ng isang tiyak na pagsasaayos ng antideterminant o kumikilos bilang isang kadahilanan na direktang nagbabago sa biosynthesis ng immunoglobulins ng mga selula ng plasma.

    3. Ang causative agent ng botulism. genus Clostridium species Clostridium botulinum nagiging sanhi ng botulism - pagkalasing sa pagkain, na nailalarawan sa pamamagitan ng pinsala sa central nervous system. Ang sakit ay nangyayari bilang resulta ng pagkain ng mga pagkaing naglalaman ng C. Botulinum toxins - gram-positive rods na may bilugan na dulo. Ito ay hugis ng tennis racket. Huwag bumuo ng isang kapsula. Mobile. obligadong anaerobes. Ayon sa mga katangian ng antigenic na kung saan ay nahahati sa 7 serovar. Ang botulinum exotoxin - ang pinakamalakas sa lahat ng biological na lason - ay may neurotoxic effect (ang nakamamatay na dosis para sa mga tao ay humigit-kumulang 0.3 micrograms). Microbiological diagnostics. Ang pagtuklas at pagkakakilanlan ng botulinum toxin sa test material gamit ang reaksyon ng reverse indirect hemagglutination (RONHA), ang reaksyon ng toxin neutralization na may antitoxin (antitoxic serum) sa mga hayop sa laboratoryo. Bacteriological method para sa pagtuklas ng isang pathogen sa test material. tiyak na prophylaxis. Ang botulinum toxoids A, B, E ay bahagi ng sextanatoxin, na ginagamit ayon sa mga indikasyon. Para sa emergency passive prophylaxis, posibleng gumamit ng anti-botulinum antitoxic sera. Paggamot. Ginagamit ang antitoxic anti-botulinum heterologous sera at homologous immunoglobulins.

    paglilinang. Sa blood agar, ito ay bumubuo ng maliliit na transparent colonies na napapalibutan ng isang zone ng hemolysis. paglaban. Ang mga spores ng C. botulinum ay may napakataas na pagtutol sa mataas na temperatura.

    Epidemiology. Mula sa lupa, ang botulinum bacillus ay pumapasok sa mga produktong pagkain, kung saan ito ay dumarami at naglalabas ng exotoxin. Ang ruta ng paghahatid ng impeksyon ay pagkain. Kadalasan, ang de-latang pagkain (kabute, gulay, karne, isda) ay isang kadahilanan sa paghahatid ng impeksyon. Ang sakit ay hindi naililipat mula sa tao patungo sa tao. Pathogenesis. Ang botulinum toxin ay pumapasok sa digestive tract kasama ng pagkain. Lumalaban sa pagkilos ng digestive enzymes, ang lason ay nasisipsip sa pamamagitan ng bituka na pader sa daluyan ng dugo at nagiging sanhi ng matagal na toxemia. Ang lason ay nagbubuklod sa mga selula ng nerbiyos at hinaharangan ang paghahatid ng mga impulses sa pamamagitan ng neuromuscular synapses. Bilang isang resulta, ang paralisis ng mga kalamnan ng larynx, pharynx, mga kalamnan sa paghinga ay bubuo, na humahantong sa kapansanan sa paglunok at paghinga, ang mga pagbabago sa mga organo ng pangitain ay sinusunod. klinikal na larawan. Ang panahon ng pagpapapisa ng itlog ay tumatagal mula 6-24 na oras hanggang 2-6 na araw. Ang mas maikli ang panahon ng pagpapapisa ng itlog, mas malala ang sakit. Karaniwan ang sakit ay nagsisimula nang talamak, ngunit ang temperatura ng katawan ay nananatiling normal. Ang iba't ibang mga variant ng botulism ay posible - na may nangingibabaw na mga sintomas ng pinsala sa digestive tract, visual disturbances o respiratory function. Sa unang kaso, ang sakit ay nagsisimula sa hitsura ng tuyong bibig, pagduduwal, pagsusuka, at pagtatae. Sa pangalawa, ang mga unang pagpapakita ng sakit ay nauugnay sa kapansanan sa paningin (ang pasyente ay nagreklamo ng "fog" sa harap ng mga mata at double vision). Bilang resulta ng pagkalumpo ng mga kalamnan ng larynx, lumilitaw ang pamamalat, at pagkatapos ay nawala ang boses. Maaaring mamatay ang mga pasyente mula sa respiratory paralysis. Ang sakit ay maaaring kumplikado ng talamak na pneumonia, nakakalason na myocarditis, sepsis. Ang dami ng namamatay sa botulism ay 15-30%. Ang kaligtasan sa sakit. ay hindi nabuo. Ang mga antibodies na ginawa sa panahon ng isang sakit ay nakadirekta laban sa isang partikular na serovar.

    1. Mga pamamaraan para sa pagtukoy sa pagiging sensitibo ng bakterya sa mga antibiotic. 1) Paraan ng pagsasabog ng agar. Ang pinag-aralan na microbe ay inoculated sa agar nutrient medium, at pagkatapos ay idinagdag ang mga antibiotic. Ang mga paghahanda ay ipinakilala alinman sa mga espesyal na balon sa agar, o ang mga disc na may mga antibiotic ay inilatag sa ibabaw ng buto (ang "paraan ng disc"). Ang mga resulta ay naitala sa isang araw sa pamamagitan ng pagkakaroon o kawalan ng paglaki ng microbial sa paligid ng mga butas (mga disc). 2) Mga paraan ng pagpapasiya. minimum na antas ng antibyotiko, na nagpapahintulot sa in vitro na pigilan ang nakikitang paglaki ng mga mikrobyo sa nutrient medium o ganap na isterilisado ito. A) Pagpapasiya ng sensitivity ng bacteria sa antibiotics gamit ang disk method. Ang pinag-aralan na bacterial culture ay inoculated na may damuhan sa nutrient agar o AGV medium sa isang Petri dish. B) AGV medium: dry nutrient fish broth, agar-agar, disubstituted sodium phosphate. C) Ang mga papel na disc na naglalaman ng ilang partikular na dosis ng iba't ibang antibiotic ay inilalagay sa may binhing ibabaw na may mga sipit sa parehong distansya mula sa isa't isa. Ang mga kultura ay incubated sa 37°C hanggang sa susunod na araw. Ayon sa diameter ng growth inhibition zones ng pinag-aralan na bacterial culture, hinuhusgahan ang sensitivity nito sa antibiotics.

    D) Pagpapasiya ng sensitivity ng bakterya sa antibiotics sa pamamagitan ng paraan ng serial dilutions. matukoy ang pinakamababang konsentrasyon ng antibyotiko na pumipigil sa paglaki ng pinag-aralan na kultura ng bakterya.

    E) Ang pagsusuri ng mga resulta ng pagtukoy ng pagiging sensitibo ng mga mikroorganismo sa mga antibiotic ay isinasagawa ayon sa isang espesyal na inihandang talahanayan, na naglalaman ng mga halaga ng hangganan ng mga diameter ng mga zone ng pagpigil sa paglago para sa mga lumalaban, katamtamang lumalaban at sensitibong mga strain, pati na rin ang mga halaga ng MIC para sa mga strain at sensitive. 3) Pagtukoy ng isang antibiotic sa dugo, ihi at iba pang likido ng katawan ng tao. Dalawang hanay ng mga test tube ang inilalagay sa isang rack. Sa isa sa kanila, ang mga dilution ng reference na antibiotic ay inihanda, sa kabilang banda, ang test liquid. Pagkatapos, isang suspensyon ng test bacteria na inihanda sa Hiss medium na may glucose ay idinagdag sa bawat test tube. Kapag tinutukoy ang penicillin, tetracyclines, erythromycin sa test liquid, isang karaniwang strain ng S. aureus ang ginagamit bilang test bacteria, at kapag tinutukoy ang streptomycin, E. coli ang ginagamit. Pagkatapos ng incubation ng mga inoculations sa 37 °C sa loob ng 18-20 na oras, ang mga resulta ng eksperimento sa cloudiness ng medium at ang paglamlam nito sa isang indicator dahil sa pagkasira ng glucose sa pamamagitan ng test bacteria ay nabanggit. Natutukoy ang konsentrasyon ng antibiotic sa pamamagitan ng pagpaparami ng pinakamataas na dilution ng test fluid na pumipigil sa paglaki ng test bacteria sa pinakamababang konsentrasyon ng reference na antibiotic na pumipigil sa paglaki ng parehong test bacteria. Halimbawa, kung ang maximum dilution ng test liquid, na pumipigil sa paglaki ng test bacteria, ay 1:1024, at ang minimum na konsentrasyon ng reference na antibiotic, na pumipigil sa paglaki ng parehong test bacteria, ay 0.313 µg/ml, ang produkto ng 1024-0.313=320 µg/ml ay ang antibiotic na konsentrasyon sa 1 ml.

    4) Pagpapasiya ng kakayahan ng S. aureus na makagawa ng beta-lactamase. Sa isang prasko na may 0.5 ml ng pang-araw-araw na kultura ng sabaw ng isang karaniwang strain ng staphylococcus na sensitibo sa penicillin, magdagdag ng 20 ml ng tinunaw at pinalamig sa 45 ° C nutrient agar, ihalo at ibuhos sa isang Petri dish. Matapos matigas ang agar, isang disk na naglalaman ng penicillin ay inilalagay sa gitna ng pinggan sa ibabaw ng daluyan. Ang mga pinag-aralan na kultura ay nahasik sa kahabaan ng disk radii na may isang loop. Ang mga inoculation ay incubated sa 37 °C hanggang sa susunod na araw, pagkatapos ay mapapansin ang mga resulta ng eksperimento. Ang kakayahan ng pinag-aralan na bakterya na gumawa ng beta-lactamase ay hinuhusgahan ng pagkakaroon ng paglaki ng isang karaniwang strain ng staphylococcus sa paligid ng isa o isa pa sa mga pinag-aralan na kultura (sa paligid ng disk).

    2. Mga karamdaman ng immune system: pangunahin at pangalawang immunodeficiencies.Mga immunodeficiencies - ito ay mga paglabag sa normal na immune status na sanhi ng isang depekto sa isa o higit pang immune response mechanism. Pangunahin o congenital immunodeficiencies. Ang mga sakit sa immune system ay maaaring makaapekto sa parehong pangunahing partikular na link sa paggana ng immune system at ang mga salik na tumutukoy sa nonspecific na resistensya. Posible ang pinagsama at piling mga variant ng immune disorder. Depende sa antas at likas na katangian ng mga karamdaman, ang humoral, cellular at pinagsamang immunodeficiencies ay nakikilala.

    Mga sanhi: pagdodoble ng mga chromosome, point mutations, depekto sa nucleic acid metabolism enzymes, genetically determined membrane disorders, genome damage sa embryonic period, atbp. Ang mga pangunahing immunodeficiencies ay lumilitaw sa mga unang yugto ng postnatal period at minana sa isang autosomal recessive na paraan. Mga pagpapakita- kakulangan ng phagocytosis, complement system, humoral immunity (B-system), cellular immunity (T-system). Pangalawa, o nakuha, immunodeficiencies Ang mga pangalawang immunodeficiencies, hindi tulad ng mga pangunahing, ay nabubuo sa mga indibidwal na may normal na gumaganang immune system mula sa kapanganakan. Ang mga ito ay nabuo sa ilalim ng impluwensya ng kapaligiran sa antas ng phenotype at sanhi ng isang paglabag sa pag-andar ng immune system bilang isang resulta ng iba't ibang mga sakit o masamang epekto sa katawan. T- at B-system ng kaligtasan sa sakit, ang mga kadahilanan ng nonspecific na pagtutol ay apektado, ang kanilang mga kumbinasyon ay posible rin. Ang mga pangalawang immunodeficiencies ay mas karaniwan kaysa sa mga pangunahin. Ang mga pangalawang immunodeficiencies ay pumapayag sa immunocorrection,

    Ang pangalawang immunodeficiencies ay maaaring:

      pagkatapos ng mga impeksyon (lalo na sa viral) at mga invasion (protozoal at helminthiases);

      may sakit na paso;

      may uremia; may mga bukol;

      may mga metabolic disorder at pagkahapo;

      may dysbiosis;

      na may malubhang pinsala, malawak na operasyon ng kirurhiko, lalo na ang mga ginawa sa ilalim ng pangkalahatang kawalan ng pakiramdam; kapag na-irradiated, ang pagkilos ng mga kemikal;

      sa pagtanda,

      mga gamot na nauugnay sa pag-inom ng mga gamot.

    Ayon sa klinikal Ang daloy ay nakikilala: 1) nabayaran, - nadagdagan ang pagkamaramdamin ng katawan sa mga nakakahawang ahente. 2) subcompensated - chronization ng mga nakakahawang proseso.

    3) decompensated - mga pangkalahatang impeksyon na dulot ng mga oportunistikong microbes (OPM) at malignant neoplasms.

    3. Ang causative agent ng amoebiasis. Taxonomy. Katangian. Microbiological diagnostics. tiyak na paggamot. Ang amoebiasis ay isang nakakahawang sakit na dulot ng Entamoeba histolytica, na sinamahan ng ulcerative lesyon ng colon; posibleng pagbuo ng mga abscesses sa iba't ibang organo; tumatakbo nang talamak. Protozoa, phylum Sarcomastidophora, subphylum Sarcodina.

    Morpolohiya at paglilinang. Ang pathogen ay umiiral sa dalawang yugto ng pag-unlad: vegetative at cystic. Ang yugto ng vegetative ay may ilang mga anyo (tissue, malaking vegetative, luminal at pre-cystic). Ang cyst (resting stage) ay may hugis-itlog na hugis, ay nabuo mula sa mga vegetative form sa bituka. Ang impeksyon ay nangyayari kapag ang mga cyst ng pathogen ay pumasok sa bituka, kung saan sila ay bumubuo ng mga bituka na vegetative form.

    paglaban. Sa labas ng katawan, ang tissue at luminal forms ng pathogen ay mabilis na namamatay (pagkatapos ng 30 minuto). Ang mga cyst ay matatag sa kapaligiran, nananatili sa mga dumi at tubig sa temperatura na 20ºС sa loob ng isang buwan. Sa mga pagkain, sa mga gulay at prutas, ang mga cyst ay nananatili sa loob ng ilang araw.

    Mekanismo ng paglipat - fecal-but-oral. Ang impeksyon ay nangyayari kapag ang mga cyst ay ipinakilala sa pagkain, lalo na sa mga gulay at prutas, mas madalas sa tubig, sa pamamagitan ng mga gamit sa bahay. Ang mga langaw at ipis ay nakakatulong sa pagkalat ng mga cyst.

    Pathogenesis at klinikal na larawan. Ang mga cyst na nakapasok sa bituka at mga anyo ng amoebae na nabuo ng lumen ay maaaring mabuhay dito nang hindi nagdudulot ng sakit. Sa pagbaba ng resistensya ng katawan, ang amoeba ay tumagos sa dingding ng bituka at dumami. Ang bituka amebiasis ay bubuo. Ang prosesong ito ay pinadali ng ilang mga kinatawan ng bituka microflora. Ang itaas na colon ay apektado sa pagbuo ng mga ulser, kung minsan ang tumbong. Mayroong madalas na maluwag na dumi. Sa mga dumi, matatagpuan ang mga purulent na elemento at uhog. Ang pagbubutas ng bituka ng dingding ay maaaring mangyari sa pagbuo ng purulent peritonitis. Ang mga amoebas na may daloy ng dugo ay maaaring pumasok sa atay, baga, utak - nabubuo ang extraintestinal amoebiasis. Marahil ang hitsura ng amebiasis ng balat, na bubuo bilang isang resulta ng pangalawang proseso. Ang mga pagguho at walang sakit na ulser ay nabubuo sa balat ng perianal region, perineum at pigi. Ang kaligtasan sa sakit. Sa amoebiasis, ang kaligtasan sa sakit ay hindi matatag. Paggamot at pag-iwas. Ang mga sumusunod na gamot ay ginagamit sa paggamot: kumikilos sa amoebae na matatagpuan sa lumen ng bituka (oxyquinoline derivatives - quiniofon, enteroseptol, mexaform, intestopan, pati na rin ang mga arsenic compound - aminarson, osarsol, atbp.); kumikilos sa mga anyo ng tissue ng amoebae (paghahanda ng emetine); kumikilos sa mga translucent na anyo ng amoebae at amoebae na matatagpuan sa dingding ng bituka (tetracyclines); kumikilos sa amoebas sa alinman sa kanilang lokalisasyon (imidazole derivatives - metronidazole). Pag-iwas Ang amoebiasis ay nauugnay sa pagkilala at paggamot ng mga cystic excretor at amoeba carrier.

    Microbiological diagnostics. Ang pangunahing paraan ay isang mikroskopikong pagsusuri ng mga dumi ng pasyente, pati na rin ang mga nilalaman ng mga abscesses ng mga panloob na organo. Ang mga pahid ay nabahiran ng Lugol's solution o hematoxylin upang makilala ang mga cyst at trophozoites. Serological method: RIGA, ELISA, RSK, atbp. Ang pinakamataas na titer ng antibody ay nakita sa extraintestinal amoebiasis.

    "