Pag-decipher ng pagsusuri sa pamamagitan ng pamamaraang IF. pagsusuri sa dugo ng ELISA. Ano ang immune response at paano tinutukoy ang antigen recognition?

Paminsan-minsan, inireseta ng mga doktor ang mga pagsusuri sa ELISA, hindi alam ng lahat kung ano ito. Ang ELISA decoding ay may sumusunod - enzyme immunoassay. Ang ganitong pagsusuri sa dugo ay nakakatulong upang maunawaan kung paano nilalabanan ng katawan ang mga sakit ng nakakahawang spectrum at ipakita ang yugto ng sakit. Ang enzyme immunoassay ay tumutulong sa pagtatasa ng proteksiyon na aktibidad ng dugo, pagtukoy ng immunodeficiency sa mga pathologies na nauugnay sa mga impeksyon, mga problema sa hormonal, at higit pa.

Ang isang pagsusuri sa dugo ng ELISA ay gumagana sa materyal na kinuha mula sa isang ugat. Bilang karagdagan, ang mga nilalaman ng vitreous body, fluid mula sa spinal cord, smears mula sa urethra o cervical canal ay magagamit para sa pagsusuri. Para sa enzyme immunoassay, ang ELISA sa mga buntis na kababaihan ay maaaring kumuha ng likido na nakapaligid sa fetus.

Sa kasong ito, maaaring direktang masuri ang dugo para sa ELISA gamit ang iba't ibang pamamaraan. Mayroong direktang paraan, hindi direktang paraan, kumpetisyon at pagharang. Kapag ang katawan ay nahawaan ng ilang pathogenic agent, na tinatawag na antigen, ang immune system ay nagsisimulang gumawa ng mga partikular na antibodies, halimbawa, para sa hepatitis. Ang mga antibodies na ito ay naglalayong "pakitungo" sa mga dayuhang ahente. Ano ang mga antibodies? Ito ay mga espesyal na protina na maaaring magbigkis sa mga antigen at bumuo ng mga immunologically targeted complex, na tinatawag na antigen-antibody. Ito ay para sa pagtuklas ng mga kumplikadong ito na ang mga diagnostic ng ELISA ay may pananagutan. Upang makita ang isang antigen, ang mga antibodies ay idinagdag sa nagresultang sample ng dugo, o ang reverse procedure ay isinasagawa.

Ang positibong resulta ng ELISA ay batay sa reaksyon ng kaligtasan sa sakit at mga enzyme. Sa ilalim ng pagkilos ng una, ang mga ahente ng impeksyon at mga elemento ng cellular ay nagbubuklod, ang pangalawa ay tumutulong upang mailarawan ang resulta ng una. Ang tugon ng immune ay nagsasangkot ng isang antibody at antigenic ligament. Bilang resulta ng prosesong ito, nabuo ang isang immune-directed complex. Ang lahat ng mga cell ay may isang antigen sa kanilang ibabaw. Kinukuha ng immune cell ang kahina-hinalang isa, at ang antigen, na naayos sa ibabaw, ay sumasailalim sa isang paghahambing na pamamaraan sa impormasyon na "na-load" sa memorya. Kung mayroong isang tugma ng paglalarawan, pagkatapos ay bumalik ang cell sa bahay, kung hindi, pagkatapos ay isang koneksyon ang nangyayari, ang paglikha nito ay responsable para sa antibody na nakakabit sa ibabaw.

Ang reaksyon ng enzymatic, samantala, ay nagpapahintulot sa mga sangkap na mabago sa mga bago. Ang materyal ay nakalantad sa enzyme. Sa kasong ito, ang pagkakaiba ng enzymatic ay ibinibigay ng iba't ibang mga substrate. Ang produkto na nagreresulta mula sa reaksyong ito ay ipinadala sa pagpapasiya ng dami ng pathogen, ang pagpapasiya kung saan ay batay sa density ng kulay ng solusyon.

Mga tampok ng pamamaraan

Ang isang enzyme-linked immunosorbent assay ay inireseta kapag kinakailangan upang masuri ang mga allergy, mga sakit na nagmula sa viral. Mayroon ding pagsusuri sa ELISA para sa syphilis at ilang iba pang mga impeksiyon, na ang paghahatid nito ay nangyayari sa pamamagitan ng hindi protektadong pakikipagtalik. Ang ganitong mga diagnostic ay nagiging mas at mas popular kumpara sa PCR. Ang katotohanan ay ang PCR ay nagsasangkot ng pagtatrabaho sa mga smears. Hindi tulad ng PCR, ang mga resulta ng ELISA ay maaaring makuha mula sa mga pagsusuri sa dugo.

Bilang karagdagan, ang isang pagsusuri sa dugo ng ELISA ay maaaring magreseta kapag kinakailangan upang maitaguyod ang pagkakaroon ng immunodeficiency, masuri ang oncology, suriin kung gaano kabisa ang paggamot, matukoy ang antas ng hormonal at sumailalim sa isang preoperative na pagsusuri sa kumbinasyon.

Kung ihahambing natin ang mga pag-aaral ng ELISA, halimbawa, sa PCR, makakahanap tayo ng ilang mga pakinabang. Ang pangunahing bagay ay ang posibilidad ng isang kumpletong pagsusuri kahit na sa pinakamaagang yugto ng pag-unlad. Bilang karagdagan, ang mga resulta ng ELISA ay tumutulong sa pagtukoy sa tiyak na yugto ng sakit, sa anong antas ang pag-unlad nito.

Ang pagsusuri sa ELISA sa paghahambing sa PCR ay may mas mataas na kahusayan, bilang karagdagan, maaari itong kunin sa panahon ng pagbubuntis upang makita ang mga STD. Maaaring malaman ng sinumang nakapasa sa pagsusulit na ito ang konsentrasyon ng TSH sa serum ng dugo. Ito ay napakahalaga upang suriin ang reaksyon ng thyroid gland, kung may mga malfunctions sa trabaho nito.

Karagdagang mga pakinabang, gayunpaman, ang polymerase chain reaction ay mayroon din sa kanila, ay ang bilis ng pag-aaral, na nangangahulugan na ang mga resulta ay mabilis na nakuha. Pinahahalagahan ng mga doktor ang katumpakan ng mga resulta. Kung pinag-uusapan natin ang tungkol sa mga STD, kung gayon ang antas ay umabot sa 98 porsiyento, tulad ng kaso sa konsentrasyon ng TSH.

Siyempre, hindi ito walang mga kakulangan. Gayunpaman, sa kasong ito pinag-uusapan natin ang tungkol sa hindi direktang mga tampok ng pagsubok. Sa partikular, pinag-uusapan natin ang katotohanan na imposibleng ibukod ang mga posibleng pagkakamali sa kahulugan ng mga pamantayan. Minsan ang isang pagsusuri na kinuha ng isang ganap na malusog na batang babae ay maaaring magpakita ng isang maling positibong resulta, o negatibo sa kabaligtaran na kaso. Gayunpaman, ang pag-uuri ng mga pamamaraan ng sikolohikal na pananaliksik sa karamihan ng mga kaso ay iniuugnay ang gayong mga pagkukulang sa hindi tamang paghahanda o paglabag sa pamamaraan kung saan kinuha ang materyal.

Mga tampok ng pagpapatupad

Sa pagsusuri ng ELISA, sa karamihan ng mga kaso, ang dugo ay naibigay. Bago mag-donate ng dugo, mahalagang mapanatili ang hindi bababa sa walong oras ng pag-aayuno, upang ibukod ang paggamit ng isang bilang ng mga gamot na nakakaapekto sa resulta ng pagsusuri. Pinag-uusapan natin ang tungkol sa mga antihistamine at hormonal na gamot na nakakaapekto sa paggana ng thyroid gland. Bilang karagdagan, ang alkohol ay dapat na hindi kasama ng hindi bababa sa isang araw bago. Tiyaking hindi ka naninigarilyo kahit isang oras bago mag-donate ng dugo. Posible rin ang pagbaluktot ng resulta kapag umiinom ng droga.

Bago magpatuloy sa pag-decryption, ito ay nagkakahalaga ng pagbanggit kung anong mga pamamaraan ng pagsukat ang ginagamit para sa naturang pagsubok. Bilang resulta ng pagsusuri, ipapakita ang mga antibodies o Ig immunoglobulin. Sa pamamagitan ng mga ito ay sinadya ang napaka tiyak na mga protina na dati nang tinalakay. Ang mga B-lymphocytes ay may pananagutan sa kanilang produksyon sa sandaling makapasok ang mga virus, bacteria o fungi sa katawan. Limang uri ng mga immunoglobulin ang nakikilala, na ipinahiwatig ng alpabetong Latin.

Ang kanilang mga pagkakaiba ay nauugnay sa iba't ibang molekular na hugis at timbang. Mayroon silang iba't ibang kalahating buhay, kasangkot o hindi nakikibahagi sa mga nakakahawang proseso sa iba't ibang paraan. Ang tagal ng panahon kung saan maaari silang matukoy mula sa sandaling naganap ang impeksyon ay nag-iiba din.

Kung ang mga immunoglobulin ay inuri gamit ang molecular weight bilang batayan, ang IgM ang may pinakamataas na rate. Ang isang tampok ng ganitong uri ng immunoglobulins ay ang kawalan ng kakayahan na dumaan sa placental barrier. Kung ang IgM ay napansin sa pagsusuri sa isang bagong panganak na bata, pinag-uusapan natin ang pagkakaroon ng impeksyon sa fetus.

Ang karamihan sa dugo ng tao ay naglalaman ng mga immunoglobulin ng IgG, hindi bababa sa lahat ng IgE. Sa pagsasalita tungkol sa trabaho sa loob ng balangkas ng mga nakakahawang proseso, ang partikular na kahalagahan ay dapat ibigay sa mga opsyon A, M, G. Ang IgE ay gumaganap bilang isang marker ng isang reaksiyong alerdyi. Ang IgD ay matatagpuan lamang sa mga tisyu ng mga lymph node at tonsil. Ito ay mahalaga mula sa punto ng view ng paglikha ng kaligtasan sa sakit sa lokal na antas.

Bilang karagdagan, ang mga antigen ay tinutukoy sa pagsusuri. Ang mga ito ay nauunawaan bilang mga sangkap na may mataas na uri ng molekular, na kilala sa kanilang organikong pinagmulan. Sa partikular, pinag-uusapan natin ang tungkol sa mga pathogens ng mga nakakahawang sakit at iba pang spectrum na sakit. Bilang karagdagan, ang ibig naming sabihin ay mga sangkap na nagpapahiwatig ng iba't ibang mga pagbabago sa cell na hindi maiiwasan sa maraming sakit. Ang immune complex ay ipinahiwatig din, na nagpapakita ng antigen-antibody complex na kasangkot sa proseso ng immune.

Karaniwan, ang oras ng produksyon ay nakasalalay sa partikular na laboratoryo kung saan ka nag-apply. Ang isang bilang ng mga laboratoryo ay makakapagbigay ng mga resulta sa loob ng isang araw o dalawa, ang iba ay nangangailangan ng isang linggo. Ang mga pagkaantala ay maaaring dahil sa pangangailangan na makaipon ng isang tiyak na halaga ng suwero.

Epekto sa mga resulta at interpretasyon

Sa kabila ng katotohanan na ang ELISA ay itinuturing na isa sa mga pinakatumpak na pamamaraan ng pagsubok, nangyayari pa rin ang mga error. Ang pamamaraan para sa pagkuha ng materyal, ang hindi wastong transportasyon at pag-iimbak ng materyal ay maaaring makaapekto sa kawastuhan ng mga resulta. Ang pag-inom ng gamot, tulad ng nabanggit sa itaas, ang pagkakaroon ng mga nakatagong sakit. Ang mga metabolic disorder o immunodeficiency ay hindi rin papayag na makuha mo ang mga tamang indicator. Sa panahon ng buhay hanggang sa isang taon, ang mga bagong silang ay maaaring walang ganap na tamang mga tagapagpahiwatig. Ito ay dahil sa ang katunayan na ang maternal antibodies ay naroroon sa katawan.

Sa pagsasalita tungkol sa pag-decode, ang mga form ng pagsusuri ay gumagamit ng isang positibo o negatibong tanda, na nagpapahiwatig ng mga resulta ng pagkalkula para sa bawat isa sa mga klase ng immunoglobulin. Ang mga posibleng pagpipilian ay ang mga sumusunod.

Ang kawalan ng nakitang IgG, IgA at IgM ay nagpapahiwatig ng kumpletong pagbawi. Ang isang negatibong resulta para sa mga sangkap tulad ng IgM, IgA, IgG ay ang kakulangan ng kaligtasan sa sakit sa impeksyon.

Ang kumbinasyon ng isang positibo at negatibong resulta para sa IgG, IgA sa kumbinasyon ng isang positibong IgM ay nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng isang matinding impeksiyon sa katawan. Ang isang positibong resulta ng IgG na sinamahan ng mga negatibong halaga ng IgA at IgM ay tumutugma sa panahon pagkatapos ng pagbabakuna o ang pagkakaroon ng kaligtasan sa sakit bilang resulta ng isang impeksiyon.

Ang kumbinasyon ng isang positibo o negatibong IgG, resulta ng IgA at isang negatibong resulta ng IgM ay nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng impeksiyon sa talamak na kurso nito. Ang isang positibong resulta para sa tatlong bahagi: IgG, IgM, IgA ay nagpapahiwatig ng isang paglala ng impeksiyon, na nasa talamak na anyo ng kurso. Bilang karagdagan sa direktang paglilinaw sa mga klase ng antibody, bilang bahagi ng pag-decode ng pagsusuri ng ELISA, ang doktor ay tumatanggap ng impormasyon tungkol sa kanilang mga quantitative indicator. Mahalagang bigyang-diin na ang dumadating na manggagamot ay dapat na responsable para sa pag-decode. Ang katotohanan ay ang kumbinasyon ng ilang mga sangkap ay maaaring humantong sa kanya sa ideya ng isang maling resulta, na hahantong sa isang muling pagsuko. Ang self-decryption sa kasong ito ay walang silbi.

ELISA analysis - ano ito? Ang buong pangalan ng pamamaraang diagnostic na ito ay tinatawag na enzyme immunoassay, at ito ay batay sa pagpapasiya sa peripheral blood ng mga antibodies ng iba't ibang klase, o mga immunoglobulin, na ginagawa ng katawan ng tao.

Sa pagsasanay ng isang manggagamot, ang pagsusuri ng ELISA ay tumatagal ng isang napakahalagang lugar kapag kinakailangan upang masuri ang anumang nakakahawang patolohiya. Ipinapakita ng pagsusuri na ito hindi lamang ang katotohanan ng pagkakaroon ng isang nakakahawang sakit, kundi pati na rin ang yugto ng proseso ng pathological. Gayundin, hindi lamang may kaugnayan sa pathogen, ang pamamaraan ng ELISA ay ipinahiwatig para sa paggamit: ginagamit ito upang masuri ang mga kondisyon ng allergy. Ang pagsusulit na ito ay nagpapahintulot sa iyo na makilala ang mga problema sa immune system, na may maraming mga sakit ng hematopoietic system, autoimmune at iba pang mga karamdaman.

Bakit kailangan ang ELISA?

Ang lahat ng mga mananaliksik ay may hilig na maniwala na ang pangalang "antibody" ay napili nang hindi maganda. Ngunit gayon pa man, sinasalamin nito ang isang mahalagang katangian ng mga immunoglobulin: nagagawa nilang magbigkis at mag-neutralize ng mga nakakapinsalang sangkap, na lumalapit sa kanila tulad ng isang "susi" sa isang "lock". Ang dami ng antibodies sa dugo ay sumasalamin hindi lamang sa pangkalahatang kakayahan ng katawan na ipagtanggol laban sa mga impeksyon, kundi pati na rin ang kakayahang bumuo ng mga nagpapalipat-lipat na immune complex, na maaaring mangyari sa iba't ibang mga sakit na autoimmune, tulad ng rheumatoid arthritis o ankylosing spondylitis.

Ang mga complex ng antibodies na may antigen (isang nakakapinsalang kadahilanan ng isang nakakahawang kalikasan) ay ang resulta ng tugon ng katawan sa pagpapakilala ng "mga estranghero". Samakatuwid, natututo ang immune system na kilalanin ang mga ito, sa tulong ng mga lymphocytes, sinasanay nito ang mga immunocompetent na selula, at nakakagawa sila ng mga partikular na antibodies. Kaya, iba ang pagkakaayos ng mga antibodies sa Epstein virus kaysa sa mga antibodies sa viral hepatitis C, o sa E. coli, at anti-HAV, o mga antibodies sa hepatitis A virus, na naiiba kaysa sa mga autoantibodies sa cartilage tissue. Ito ay ang mataas na pagtitiyak at pagsusulatan ng mga immunoglobulin sa isang nakakahawang pathogen na gumagawa ng naturang pag-aaral sa laboratoryo bilang isang enzyme immunoassay ng dugo na may mataas na halaga.

Matapos ang isang malakas na koneksyon ng mga antibodies at antigens sa isang solong complex (antigen-antibody), ang mga nakakapinsalang salik ay nawawala ang kanilang kakayahang makapinsala sa mga tisyu ng katawan, at pagkatapos ang mga complex na ito ay alinman sa neutralisado o lysed ng phagocytosis ng mga neutrophil, at, "natutunaw", umalis sa katawan.

Maaaring ipakita ng pagsusuri sa dugo ng ELISA kung anong partikular na pathogenic factor ang kinakaharap ng ating katawan, sa anong yugto ang pakikipag-ugnayan ng katawan sa impeksyon. Pagkatapos ng pag-aaral, ang doktor ay maaaring gumawa ng isang pagbabala na may mataas na antas ng katiyakan, magreseta ng ilang mga uri ng paggamot, at sa ilang mga kaso ay maaaring matukoy ang pag-asa sa buhay ng pasyente, lalo na sa mga talamak na impeksyon sa viral, tulad ng viral hepatitis C.

Ngunit sa ilang mga kaso, walang mga nakakahawang ahente sa katawan, at ang mga antibodies ay "nang hindi sinasadya" ay sumasalakay sa kanilang sariling mga organo at tisyu, dahil ang mga immunocompetent na mga cell ay nakatanggap ng maling impormasyon. Ang ganitong mga sakit ay tinatawag na autoimmune, at ang enzyme immunoassay ay tumutulong din na makilala ang talamak na patolohiya na ito at tumulong sa pagsusuri.

Higit pa tungkol sa mga immunoglobulin

Sa kabuuan, ang katawan ng tao ay gumagawa ng 5 kilalang klase ng mga antibodies, na itinalaga Ig(na nangangahulugang immunoglobulins), na nabibilang sa mga klase A, M, G, E, at D. Lahat ng mga ito ay may malaking kahalagahan sa interpretasyon ng mga resulta ng ELISA - pagsusuri. Siyempre, marami pang mga kumplikado, at hindi pa lahat ay bukas. Ngunit sa pagsusuri ng iba't ibang sakit, ang unang tatlong uri ng antibodies ay pinakamahalaga. Ang pagsusuri sa dugo ng ELISA ay gumagamit ng maximum na impormasyon: ang sandali kung kailan lumitaw ang mga antibodies sa dugo, ang pagbabago sa kanilang konsentrasyon depende sa oras, oras ng pagkawala, at ang uri ng mga partikular na antibodies.

Kaya, ang mga kalahok sa pangunahing, talamak na nakakahawang proseso ay mga immunoglobulin ng klase M, na palaging nagpapahiwatig ng isang talamak na yugto, kahit na ang klinikal na kurso ng sakit ay nabura. Ang karaniwang halimbawa ay ang anicteric form ng acute viral hepatitis B o C. Ang isang enzyme-linked immunosorbent assay para sa hepatitis ay magpapakita na ang isang tao ay may talamak na hepatitis, at mga sintomas tulad ng pananakit sa hypochondrium, tuyong bibig, pananakit ng mga kasukasuan at iba pang hindi- ang mga tiyak na sintomas ay madaling maunawaan.

Pagkalipas ng ilang linggo, ang mga antibodies na ito ay matatagpuan sa lalong nawawalang mga konsentrasyon, na nagbubunga sa mga immunoglobulin ng klase G. Natutukoy ang mga ito sa dugo sa loob ng maraming buwan, at kahit na taon, at nagpapahiwatig ng alinman sa isang pagbawi, at pagkatapos ay maaari silang manatili habang buhay, na bumubuo ng isang malakas na kaligtasan sa sakit. Ito ay nagpapahiwatig ng isang malakas na depensa laban sa mga antigen ng mga pathogen. Kaya, ang mga antibodies ng klase na ito ang gumagawa ng isang tao na immune sa paulit-ulit na mga kaso ng anthrax at salot. Ngunit may mga kaso kapag ang mga antibodies na ito ay hindi nakakasagabal sa kanilang mga nakakapinsalang epekto sa pagkakaroon ng mga antigens. Sa kasong ito, maaari nating pag-usapan ang isang pagtaas sa aktibidad ng isang talamak na proseso.

Una sa lahat, kailangan mong maunawaan na walang ganoong pagsusuri - "dugo lamang para sa ELISA". Mayroong pagsusuri para sa hepatitis, minsan para sa ureaplasma, o para sa syphilis. Kaya, ang pag-donate ng dugo para sa ELISA ay maaari lamang i-target, "pag-order" sa paghahanap para sa nais na impeksyon. Napaka hindi maintindihan kung bakit mag-donate ng dugo mula sa isang ugat, hindi alam kung ano ang hahanapin. Kaya naman ang paraan ng enzyme immunoassay ay isang makapangyarihang tool na mahalaga sa diagnostic search. Ang isang doktor lamang ang maaaring magreseta ng pagsusuri na ito, dahil sinasadya niyang naghahanap ng isang impeksyon na nailalarawan sa mga sintomas na ito. Ang isang ordinaryong tao, siyempre, ay maaaring mag-order ng 150 mga pagsusuri sa dugo ng ELISA para sa "lahat ng mga impeksyon", ngunit ito ay magiging isang hindi makatwiran at magastos na diskarte sa diagnosis, pagkuha ng mga pagsusuri para sa lahat.

Ang appointment ng mga pagsusuring ito ay pinaka-in demand para sa mga sumusunod na sakit at kundisyon:

Iba't ibang microbial at viral infection, sintomas ng mga nakakahawang sakit - pantal, lagnat, paninilaw ng balat, namamagang lymph node, diarrhea syndrome, pinaghihinalaang mga sakit na nakukuha sa pakikipagtalik.

Ang ELISA technique ay tumutulong sa pagtukoy ng ureaplasma at mycoplasma, syphilis at chlamydia, tuberculosis at cytomegalovirus infection, herpes, viral hepatitis at Epstein-Barr virus. Sa kasalukuyan, humigit-kumulang 500 iba't ibang mga impeksyon ang maaaring ma-verify gamit ang paraan ng enzyme immunoassay,

Kung pinaghihinalaan mo ang helminthic invasion, at ang pagkakaroon ng mga sintomas tulad ng allergy, eosinophilia sa dugo, pangangati, dyspepsia at pagbaba ng timbang,

Kapag natukoy ang mga allergens na nagdudulot ng edema ni Quincke, urticaria, igsi ng paghinga at pag-atake ng asthmatic suffocation.

Sa kasong ito, ang mga tiyak na Ig E ay nakita, at may mga buong panel ng allergo na makakatulong upang tumpak na matukoy ang allergen - pusit o hipon, tuyong pagkain ng isda na naglalaman ng daphnia, alikabok sa bahay. Sa hay fever, ang pamamaraang ito ay nagbibigay-daan sa iyo upang mahanap ang eksaktong cereal, shrub o puno na nagdudulot ng pagbahing at lacrimation sa tagsibol,

Ang pamamaraang ito ay ipinahiwatig para sa mga pinaghihinalaang sakit sa autoimmune na ginagamot ng mga rheumatologist,
Kung pinaghihinalaan ang paglaki at aktibidad ng tumor,
Sa mga kumplikadong diagnostic ng mga estado ng immunodeficiency at impeksyon sa HIV,
Sa mga sakit sa dugo at sa paglipat, para sa isang komprehensibong pagtatasa ng kaligtasan sa sakit, halimbawa, bago ang isang atay o kidney transplant.

Ngayon alam na namin kung bakit kailangan mong mag-donate ng dugo para sa ELISA. Alamin natin kung paano isinasagawa ang pananaliksik na ito.

Paano isinasagawa ang pagsusuri?

Ang klasikong materyal ay ang venous blood ng pasyente. Ngunit kung kinakailangan, maaari mong suriin ang iba't ibang uri ng likido at tissue: mucus, laway, cervical secretion, cerebrospinal fluid, vitreous body ng mata, ang mga nilalaman ng umbilical cord at amniotic fluid. Mahalagang tandaan na ang pag-inom ng iba't ibang mga gamot, labis na pisikal na aktibidad, pag-abuso sa alkohol, ay maaaring lubos na masira ang mga resulta ng mga pagsusuri.

Mayroong ilang mga pamamaraan na nagpapahintulot sa pagsusuri na ito na maisagawa. Kadalasan sa mga klinikal na laboratoryo, ginagamit ang pamamaraang photometric. Sa kasong ito, ginagamit ang mga sangkap na may label na pangulay, pagkatapos ng reaksyon kung saan, at ang pagmamarka ng antigen-antibody complex, ang kanilang kulay ay nagbabago. Bilang resulta, nagbabago rin ang optical density ng solusyon, at ang pagbabagong ito ay direktang proporsyonal sa konsentrasyon ng mga nakitang antibodies. Matagumpay na ginamit ang mga spectrophotometer ng laboratoryo upang sukatin ang mga paglihis na ito.

Gayundin, para sa pagsasagawa ng ELISA, ginagamit ang isang fluorimetric na paraan, ang batayan nito ay fluorescence. Dito, din, ang intensity ng fluorescent substance na naayos sa mga sample sa ilalim ng pag-aaral ay kinakalkula.

Sa wakas, sa mga immunoassay, ginagamit ang mga electrochemical na pamamaraan upang matukoy ang aktibidad ng mga enzyme, na mga tiyak na label para sa mga antigen at antibodies. Ang mismong pamamaraan ng ELISA ay kadalasang nagsasangkot ng paggamit ng mga enzyme tulad ng alkaline phosphatase, malunggay peroxidase at galactosidase. Ang mga enzyme na ito ay maaaring magbigkis sa mga antibodies o antigens at markahan ang mga ito dahil sa kanilang aktibidad.

Kahinaan ng pamamaraan at mga pakinabang nito

Ang halatang "mga kalamangan" ay kinabibilangan ng demokratikong halaga ng pagsusuri, ang posibilidad ng paggamit nito sa screening sa malalaking grupo ng populasyon, halimbawa, kapag sinusuri ang mga buntis na kababaihan para sa HIV. Ang paraan ng enzyme immunoassay ay medyo tiyak at maaaring gamitin upang kontrolin ang kalidad ng paggamot ng maraming sakit. Mahalaga na ang pagsusuri ay inihanda nang mabilis, at ito ay simple at ligtas para sa pasyente.

Gayunpaman, mayroong maraming mga pitfalls. Kaya, kung ang mga immunoglobulin ay hindi napansin, kung gayon hindi ito nangangahulugang isang 100% na kawalan ng sakit. Sa katunayan, laban sa background ng immunodeficiency, ang katawan ay maaaring hindi "malakas" para sa synthesis ng mga antibodies. Kung ang pasyente ay may malubhang pagkabigo sa atay, kung gayon ang atay ay hindi lamang makapag-synthesize ng protina - ang materyal na gusali para sa mga antibodies. Sa kasong ito, ang resulta ay tinatawag na seronegative, at ang kumpirmasyon ng impeksyon ay kinakailangan ng direkta at pinaka-advanced na paraan ng pananaliksik - PCR, o polymerase chain reaction. Hindi tulad ng enzyme-linked immunosorbent assay, ang pamamaraang ito ay hindi nagpapakita ng reaksyon ng katawan sa nakakahawang proseso (na maaaring may depekto, o wala sa kabuuan), direktang tinutukoy ng PCR ang namamana na materyal, o ang pathogen mismo ay natagpuan.

Ang listahan ng mga magagamit na pamamaraan ng diagnostic ay mabilis na lumalawak sa mga nakaraang dekada, sinusubukan ng mga diagnostician na pagsamahin ang mga pakinabang ng lahat ng mga nakaraang pagsusuri sa mga bagong pamamaraan, inaalis ang lahat ng kanilang mga nakaraang pagkukulang.

Kamakailan, mas at mas madalas sa listahan ng mga diagnostic procedure, lumilitaw ang enzyme immunoassay - isang moderno at medyo bagong pagsubok, na hindi gaanong kilala sa isang ordinaryong tao na walang kaugnayan sa gamot. Gayunpaman, ang pamamaraan na ito ay mabilis na nagdaragdag sa hanay ng mga tagasunod nito sa mga kwalipikadong kawani ng medikal. Ano ito at sa anong mga kaso dapat itong gamitin, maaari mong subukang malaman ito sa pamamagitan ng pamilyar sa iyong sarili sa mga tampok at pangunahing katangian nito.

Ang enzyme immunoassay ay isang instrumental na pamamaraan sa laboratoryo batay sa antigen-antibody molecular reaction, na ginagawang posible na makakita ng mga partikular na protina sa mga biological na materyales (mga sample para sa pananaliksik). Ang ganitong mga protina ay maaaring mga enzyme, iba't ibang mga microorganism (mga virus, bakterya, fungi), protozoa, atbp.

Matapos ang pagtuklas ng pamamaraan, binigyan ito ng pangalang ELISA test, na hindi nauugnay sa pangalan ng mga natuklasan, ngunit isang pagdadaglat ng buong pangalan sa Ingles na bersyon - enzyme-linked immunosorbent assay. Ginagamit ng mga doktor sa buong mundo ang pangalang ito, ang ilang mga doktor sa mga bansang nagsasalita ng Ruso ay tinatawag din ang ganitong uri ng pag-aaral.

Ang pangunahing prinsipyo ng pamamaraan ay ang molekular na reaksyon na "antigen-antibody".

Ang antigen ay anumang dayuhang molekula na pumapasok sa katawan ng tao bilang bahagi ng isang pathogenic microbe. Ang mga antigen ay karaniwang mga molekula ng protina. Bilang karagdagan sa mga microorganism, ang gayong "stranger" ay maaaring mga selula ng dugo ng ibang tao na hindi tumutugma sa grupo o Rh factor.

Bilang tugon sa pagpasok ng naturang antigen sa katawan, inilunsad ang isang immune reaction, na naglalayong protektahan laban sa anumang mga dayuhang molekula. Nangyayari ito dahil sa synthesis ng mga espesyal na ahente ng immune system - mga antibodies (immunoglobulins). Ang bawat antibody ay lumalapit lamang sa isang tiyak na antigen, at neutralisahin ang pathogenic na "tagalabas", na nagbubuklod dito sa isang solong kumplikado. Ito ay ang proseso ng naturang pagbubuklod na tinatawag na antigen-antibody reaction.

Mga uri ng antibodies

Ang lahat ng antibodies (immunoglobulins) ay nahahati sa 5 uri depende sa kung anong yugto ng immune response ang lalabas ng mga ito:

Para sa mga diagnostic ng ELISA, ang mga antas ng immunoglobulin na IgG, IgM at IgA ay pinakamadalas na mahalaga. Sa pamamagitan ng kanilang mga kredito, maaari mong malaman kung ang isang tao ay nagkaroon ng sakit bago o nahawahan kamakailan, kung siya ay nakabuo ng kaligtasan sa sakit o ang kanyang katawan ay walang pagtatanggol laban sa patolohiya.

Mga kalamangan at kawalan ng enzyme immunoassay

Sa ngayon, ang ELISA ay isa sa mga pinakatumpak at sensitibong pamamaraan. Ito ay pinagtibay ng mga espesyalista sa iba't ibang larangan ng medisina at patuloy na pinapalawak ang saklaw nito.

Mga kalamangan ng pamamaraan

Mataas na katumpakan ng natanggap na data.
Sensitivity (pinapayagan kang makita ang kinakailangang sangkap kahit na may kaunting presensya ng pathogen sa sample).
Ang posibilidad ng diagnosis sa mga unang araw ng sakit o sa panahon ng pagpapapisa ng itlog.
Ang bilis ng pagkuha ng data kumpara sa iba pang mga paraan ng katulad na katumpakan.
Mataas na automation ng proseso at minimal na partisipasyon ng tao, na binabawasan ang error ng tagapalabas.
Pagkuha ng data sa yugto ng proseso ng pathological at ang pagiging epektibo ng napiling therapy.
Walang sakit at mababang invasiveness sa pagpili ng materyal.

Mga disadvantages ng pamamaraan

Sa karamihan ng mga kaso, pinapayagan ka nitong matukoy ang tugon ng katawan sa isang pathogenic agent, at hindi ang pathogen mismo.
Bago ang pag-aaral, ang pinaghihinalaang sakit ay dapat na tiyak na kilala, dahil ang pagsusulit ay lubos na tiyak.
Ang posibilidad ng mga maling tagapagpahiwatig na sanhi ng mga teknikal na isyu, pagkuha ng mga gamot, ang sabay-sabay na pagkakaroon ng ilang mga malalang sakit o metabolic disorder sa katawan ng pasyente.
Ang interpretasyon ng mga resulta ay dapat gawin lamang ng isang mataas na kwalipikadong espesyalista, dahil upang mabigyang-kahulugan ang data na nakuha, kinakailangan na magkaroon ng espesyal na pagsasanay at isang malaking stock ng medikal na kaalaman sa isang partikular na lugar.
Ang ELISA ay isang medyo bihirang pagsusuri, samakatuwid, hindi ito ginagawa sa lahat ng diagnostic laboratories.
Ang pamamaraan ay medyo mahal, dahil bilang karagdagan sa mga reagents, ang laboratoryo ay dapat magkaroon ng maraming mamahaling kagamitan at mga sample ng antigens na ginawa sa mga espesyal na institusyon.

Kailan ginagamit ang enzyme immunoassay?

Ang buong listahan ng mga indikasyon para sa appointment ng enzyme immunoassay ay napakalawak, kabilang dito ang halos lahat ng mga sangay ng gamot.

Kadalasan, ang ELISA ay ginagamit para sa mga naturang layunin:

pagtuklas ng mga nakakahawang sakit;
diagnosis ng mga sakit sa venereal;
pagpapasiya ng immune status o mga indibidwal na autoimmune na sakit;
pagkakakilanlan ng mga marker ng tumor;
kahulugan ng mga hormone.

Sa kaso ng mga nakakahawang sakit at viral, ang pamamaraan ay nagbibigay-daan upang makilala ang mga sumusunod na pathologies:

Bilang karagdagan, pinapayagan ka ng ELISA na mabilis at epektibong matukoy ang isang atake sa puso, masuri ang potensyal ng reproduktibo ng katawan, tukuyin ang mga alerdyi, pinagmulan nito, atbp.

Ang pamamaraan ng ELISA ay ginagamit para sa pagsasagawa ng mga klinikal na pagsubok sa pagbuo ng mga bagong gamot at sa pagtatasa ng epekto nito sa katawan ng tao.

Mga uri ng mga sample at pamamaraan ng kanilang pagpili para sa pananaliksik

Kadalasan, ang test material para sa enzyme immunoassay ay dugo, na kinuha mula sa cubital vein ng pasyente. Ang sampling ay isinasagawa sa walang laman na tiyan, pangunahin sa umaga. Pagkatapos ng pagpili mula sa dugo, ang mga nabuong cell na nakakasagabal sa pag-aaral ay pinaghihiwalay at inalis, na nag-iiwan lamang ng serum.

Kapag nag-diagnose ng mga impeksyon sa genitourinary, ang mga pahid mula sa mauhog na tisyu ng mga genital organ, uhog mula sa urethra o cervix, mga sample mula sa tumbong, mga pag-scrape mula sa mga erosions o mga ulser sa lugar ng singit at mula sa iba pang bahagi ng katawan ay madalas na nagiging materyal. Maaaring kunin ang mga pahid mula sa oral cavity, gayundin mula sa nasopharynx.

Minsan ginagamit ang enzyme immunoassay sa obstetric at gynecological practice sa panahon ng pagbubuntis upang matukoy ang kondisyon ng amniotic fluid. Sa kasong ito, ang amniotic fluid ay nagiging sample. Upang gawin ito, ang isang maliit na halaga ng likido ay kinuha sa pamamagitan ng pagbubutas sa pantog ng pangsanggol na may mahabang karayom. Ang lahat ng mga manipulasyon ay isinasagawa gamit ang isang sterile na instrumento upang mabawasan ang mga posibleng panganib.

Kadalasan ang materyal ay nagiging cerebrospinal o serous fluid. Nangyayari ito sa lokal na kawalan ng pakiramdam, na iniksyon.

Tukuyin kung anong uri ng mga materyales ang kailangan para sa enzyme immunoassay, dapat ang espesyalista na nagpapadala sa pag-aaral. Kadalasan ang mga sample ay kinukuha ng ilang uri nang sabay-sabay o mula sa iba't ibang lokasyon. Ang doktor na nag-isyu ng referral para sa ganitong uri ng pagsusuri ay dapat ding sabihin sa pasyente ang tungkol sa paghahanda para sa paghahatid ng biomaterial.

Paghahanda para sa enzyme immunoassay

Upang madagdagan ang katumpakan ng data na nakuha pagkatapos ng enzyme immunoassay, ang paghahanda para sa pagpili ng materyal ay dapat na ang mga sumusunod:

10 araw bago ang pag-aaral, ibukod ang mga antibiotic, antiviral at antimycotic na gamot;
para sa isang araw kinakailangan na ibukod ang alkohol, paninigarilyo at pag-inom ng droga;
sa parehong panahon, kinakailangan upang maiwasan ang pisikal na labis na pagsisikap;
ipaalam sa tagapagreseta ng lahat ng mga gamot na iniinom ng pasyente;
Ipaalam sa iyong doktor kung ikaw ay buntis o pinaghihinalaang buntis.

Pinakamainam kung ang mga materyales para sa pagsubok ay pinili sa umaga sa isang walang laman na tiyan.

Kung ang diagnosis ay naglalayong matukoy ang estado ng hormonal background, kung gayon mahalaga na matiyak ang isang kalmado na estado sa bisperas at maiwasan ang pag-igting ng nerbiyos. Para sa mga kababaihan, ang donasyon ng dugo para sa mga hormone ay malinaw na tinutukoy ng panahon ng buwanang cycle, na tatalakayin ng doktor sa oras ng appointment.

2-3 araw bago ang pag-sample, ang mga pritong at mataba na pagkain ay dapat na hindi kasama sa menu, at ang mga citrus fruit at anumang iba pang orange at dilaw na prutas at gulay ay hindi dapat kainin bago ang pagsusuri sa hepatitis.

Pag-decipher ng mga resulta ng enzyme immunoassay

Ang resulta ng isang husay na pag-aaral, bilang panuntunan, ay ipinahiwatig ng mga palatandaan na "+" (nahanap) o "-" (hindi natagpuan).

Sa pagkakaroon o kawalan ng ilang grupo ng mga immunoglobulin, ang mga sumusunod na konklusyon ay maaaring makuha:

JgM (-), JgG (-), JgA (-) - ang kaligtasan sa sakit ay ganap na wala (ang katawan ay hindi pa nakatagpo ng ganitong uri ng antigen bago);
JgM (-), JgG (+), JgA (-) - dati ay nagkaroon ng banggaan sa antigen na ito o sa isang bakuna;
JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) - talamak na proseso ng pathological (malamang na pangunahin);
JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) - talamak na kurso;
JgM (+), JgG (+), JgA (+) - relapse;
JgM (-) - yugto ng pagbawi.

Ang dami ng mga halaga ay nagdadala ng isang malaking pag-load ng impormasyon, ngunit tanging ang dumadating na manggagamot lamang ang makakapagbigay-kahulugan sa kanila, batay sa mga nakaraang indikasyon, ang edad ng pasyente, at ang mga pamantayan para sa bawat partikular na sakit. Para sa kadahilanang ito, imposibleng suriin ang mga resulta sa iyong sarili.

Gaano katagal maghintay para sa mga resulta

Ang pamamaraan na ito ay may maraming mga varieties, depende sa kung saan ang termino para sa pagkuha ng data sa kamay ay tinutukoy. Ang average na tagal ng mga diagnostic ng ELISA ay 4-6 na oras, na ginagawang posible na maglabas ng mga resulta sa susunod na araw.

Ang pinakamahabang pamamaraan ay tumatagal ng hanggang 10 araw, halimbawa, sa kaso ng pagtuklas ng impeksyon sa HIV.

Sa kaso ng kagyat na pangangailangan, posible na gumamit ng mga express na pamamaraan, kung saan ang sagot ay nakuha sa loob ng 1-2 oras.

Saan ako makakakuha ng pagsusulit sa ELISA?

Dahil ang mga kagamitan para sa ganitong uri ng mga diagnostic ay medyo mahal, hindi lahat ng mga laboratoryo ay maaaring bumili nito. Bilang karagdagan, ang mga pagsubok na naglalaman ng mga partikular na antigen ay may limitadong buhay sa istante (karaniwan ay mga 1 taon), kaya kailangan nilang patuloy na i-update.

Para sa mga kadahilanang ito, ang mga institusyong medikal ng estado ay hindi palaging may mga laboratoryo ng ELISA. Kadalasan, kailangan mong makipag-ugnayan sa malalaking pribadong medikal o malalaking diagnostic center.

Upang magsagawa ng pag-aaral ng ELISA, ang laboratoryo ay dapat magkaroon ng isang espesyal na lisensya, at ang mga kawani at mga katulong sa laboratoryo ay dapat sumailalim sa espesyal na pagsasanay.

Kadalasan, ang isang tiyak na diagnostic center o laboratoryo ay inirerekomenda ng doktor na nagdidirekta sa pasyente para sa pagsusuri.

Ang halaga ng enzyme immunoassay

Ang presyo para sa pag-aaral na ito ay depende sa rehiyon ng bansa at sa antas ng klinika na nagbibigay ng serbisyo. Sa Moscow, ang pinakamababang presyo para sa pagpapasiya ng isang antigen ay nagsisimula mula sa 700 rubles. Kung kinakailangan upang matukoy ang ilang mga immunoglobulin nang sabay-sabay, ang presyo ay ibubuod.

Sa kaso ng isang kagyat na pagsusuri, ang gastos ay tumataas ng 150-200 rubles. para sa bawat antigen.

Sa kabila ng medyo mataas na gastos, ginagawang posible ng enzyme immunoassay na gawin ang pagsusuri ng pasyente bilang nagbibigay-kaalaman at mabilis hangga't maaari, na binabawasan ang oras bago magsimula ang paggamot at nagbibigay-daan sa mabilis mong patatagin ang kondisyon ng tao.

Ipinapakita ng video na ito ang pelikulang "Mga Batayan ng enzyme immunoassay".

Ang pagsusuri sa ELISA (enzymatic immunoassay) ay isang modernong pamamaraan ng diagnostic na naglalayong makita ang mga tiyak na antibodies sa dugo sa mga pathogen ng isang bilang ng mga sakit, na tinutukoy ang yugto ng pag-unlad ng patolohiya at ang etiology nito. Ginagamit ito bilang isang paraan ng pagsubaybay sa proseso ng paggamot at pagiging epektibo nito. Sa kurso ng pag-aaral, sinusuri ang mga tagapagpahiwatig ng husay at dami.

Ang pamamaraan ng ELISA ay lubos na nagbibigay-kaalaman, ang katumpakan ng mga resulta ay higit sa 96%. Available ang mga diagnostic sa halos anumang laboratoryo at institusyong medikal.

Pangunahing indikasyon

Ang isang enzyme immunoassay ay inireseta upang kumpirmahin ang pagkakaroon ng mga nakakahawang sakit na nakukuha sa pakikipagtalik:

trichomoniasis;
chlamydia;
ureaplasmosis;
syphilis, atbp.

Ginagamit din ang ELISA upang masuri ang mga sakit na viral:

buni;
herpes type 4 (Epstein-Barr virus);
viral hepatitis;
impeksyon sa cytomegalovirus.

Paano maghanda para sa pag-aaral

Ang biyolohikal na materyal para sa pag-aaral ay dugo. Ilang araw bago ang paghahatid nito, ang gamot ay hindi kasama. Sa loob ng 14 na araw, ang paggamit ng antibiotics, anthelmintic at antiviral agents ay itinigil.

Ang materyal ay kinuha sa umaga sa isang walang laman na tiyan. Isang oras bago ang pamamaraan, pinapayagan na uminom ng isang baso ng tubig na walang gas, ang paggamit ng pagkain ay hindi kasama.

Mga Tampok ng Pagsusuri

Para sa pag-aaral, ang venous blood ay kinuha, sa dami ng hindi bababa sa 5 ml. Sa ilang mga kaso, ang cerebrospinal fluid, amniotic fluid o ang mga nilalaman ng vitreous body ay ginagamit bilang biomaterial.

Ang pag-sample ng dugo ay isinasagawa gamit ang isang injection needle, mahigpit na walang laman ang tiyan, upang maiwasan ang mga maling positibong resulta. Sa loob ng 12 oras, dapat mong ihinto ang paninigarilyo at pag-inom ng mga inuming nakalalasing. Kapag gumagamit ng mga gamot, ang mga resulta ng pagsusuri ay baluktot.

Kung ang mga negatibong halaga ng immunoglobulin G, A, M ay ipinahiwatig sa konklusyon, ipinapahiwatig nito ang paunang yugto ng pag-unlad ng proseso ng pathological o kawalan nito. Ang ganitong resulta ay naitala na may kumpletong pagbawi sa background ng therapy.

Ang isang negatibong resulta ng IgM at IgA at isang positibong resulta ng IgG ay nagpapahiwatig ng pagbuo ng kaligtasan sa sakit pagkatapos ng isang nakakahawang sakit o pagbabakuna.

Ang isang positibong resulta ng IgM at isang negatibo o positibong resulta ng IgG, IgA ay nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng isang talamak na nakakahawang patolohiya.

Ang pagsusuri sa ELISA ay isinasagawa nang mabilis, ang mga resulta ay handa sa isang araw pagkatapos makuha ang materyal.