S vremena na vrijeme liječnici propisuju ELISA testove; ne znaju svi šta je to. ELISA ima sljedeće dekodiranje - enzimski imunotest krvi. Takav test krvi pomaže razumjeti kako se tijelo bori protiv zaraznih bolesti i pokazuje fazu bolesti. Enzimski imunotest pomaže u procjeni zaštitne aktivnosti krvi, identifikaciji imunodeficijencije kod patologija povezanih s infekcijama, hormonskim problemima itd.
ELISA test krvi radi sa materijalom koji se uzima iz vene. Osim toga, za pregled je dostupan sadržaj staklastog tijela, tekućina iz kičmene moždine i bris iz uretre ili cervikalnog kanala. Za enzimski imunotest ELISA, tečnost koja okružuje fetus može se uzeti od trudnica.
U ovom slučaju, krv se može direktno testirati na ELISA pomoću različitih tehnika. Postoji direktna, indirektna, konkurencija i blokiranje. Kada se tijelo inficira nekim patogenim agensom, koji se zove antigen, imunološki sistem počinje proizvoditi specifična antitijela, na primjer, na hepatitis. Ova antitijela su usmjerena na "bavljenje" stranim agensima. Šta su antitela? To su posebni proteini koji mogu stupiti u interakciju s antigenima i formirati imunološke komplekse zvane antigen-antitijelo. Za otkrivanje ovih kompleksa odgovorna je ELISA dijagnostika. Da bi se otkrio antigen, u dobiveni uzorak krvi se dodaju antitijela ili se izvodi obrnuti postupak.
Pozitivan ELISA rezultat temelji se na reakciji imunog sistema i enzima. Pod uticajem prvog, infektivni agensi i ćelijski elementi se vezuju, drugi pomaže da se vizualizuje rezultat prvog. Imunološka reakcija uključuje kombinaciju antitijela i antigena. Kao rezultat ovog procesa formira se imuni kompleks. Sve ćelije imaju antigen na svojoj površini. Imunološka ćelija hvata sumnjivu, a antigen, koji je fiksiran na površini, prolazi proceduru poređenja sa informacijama koje se „učitavaju“ u memoriju. Ako postoji podudaranje u opisu, tada se ćelija vraća kući, ali ako ne, onda dolazi do veze, za čije je stvaranje odgovorno antitijelo koje se pričvršćuje na površinu.
U međuvremenu, enzimska reakcija omogućava da se supstance transformišu u nove. Materijal je izložen enzimu. U ovom slučaju, enzimsku razliku osiguravaju različiti supstrati. Proizvod koji nastaje ovom reakcijom šalje se na određivanje količine patogena, čije se određivanje zasniva na gustini boje rastvora.
Karakteristike metode
Enzimski imunološki test krvi propisuje se kada je potrebno dijagnosticirati alergije i bolesti virusnog porijekla. Postoji i ELISA test za sifilis i niz drugih infekcija koje se prenose nezaštićenim seksualnim kontaktom. Ova dijagnoza postaje sve popularnija u odnosu na PCR. Činjenica je da PCR uključuje rad sa brisima. Za razliku od PCR-a, rezultati ELISA-e se mogu dobiti iz krvnih testova.
Osim toga, može se propisati analiza krvi metodom ELISA kada je potrebno utvrditi prisutnost imunodeficijencije, dijagnosticirati onkologiju, procijeniti koliko je učinkovito liječenje, odrediti nivo hormona i podvrgnuti preoperativnom pregledu u cjelini.
Ako uporedite ELISA studije, na primjer, s PCR-om, možete pronaći brojne prednosti. Glavna stvar je mogućnost potpune dijagnoze čak iu najranijim fazama razvoja. Pored toga, rezultati ELISA-e pomažu u određivanju specifičnog stadijuma bolesti i stepena njenog razvoja.
ELISA test ima veću efikasnost u odnosu na PCR; osim toga, može se koristiti tokom trudnoće za otkrivanje spolno prenosivih bolesti. Svako ko je radio ovaj test može saznati koncentraciju TSH u krvnom serumu. Ovo je vrlo važno da se provjeri kakva je reakcija štitne žlijezde, ima li kvarova u njenom radu.
Dodatne prednosti, međutim, ima i lančana reakcija polimeraze, je brzina istraživanja, što znači brze rezultate. Doktori također cijene tačnost rezultata. Ako govorimo o spolno prenosivim bolestima, tada nivo dostiže 98 posto, kao što je slučaj sa koncentracijom TSH.
Naravno, postoje i neki nedostaci. Međutim, u ovom slučaju govorimo o indirektnim karakteristikama testa. Konkretno, govorimo o tome da je nemoguće isključiti moguće greške u određivanju standarda. Ponekad test koji je napravila apsolutno zdrava djevojka može pokazati lažno pozitivan rezultat, ili negativan u suprotnom slučaju. Međutim, klasifikacija psiholoških istraživačkih metoda u većini slučajeva takve nedostatke povezuje s nepravilnom pripremom ili kršenjem tehnike kojom je materijal prikupljen.
Izvršne karakteristike
Za ELISA analizu u većini slučajeva daje se krv. Prije davanja krvi važno je postiti najmanje osam sati i izbjegavati uzimanje niza lijekova koji utiču na rezultat testa. Riječ je o antihistaminicima i hormonskim lijekovima koji utiču na rad štitne žlijezde. Osim toga, alkohol treba isključiti najmanje 24 sata. Osigurajte da ne pušite najmanje jedan sat prije davanja krvi. Iskrivljavanje rezultata je moguće i kod uzimanja opojnih supstanci.
Prije nego što pređemo na transkript, vrijedi spomenuti koje se metode mjerenja koriste za takav test. Rezultat testa će ukazati na antitijela ili imunoglobuline Ig. Oni misle na vrlo specifične proteine o kojima smo ranije govorili. B-limfociti su odgovorni za njihovu proizvodnju čim virusi, bakterije ili gljivice uđu u tijelo. Postoji pet vrsta imunoglobulina, označenih latiničnim pismom.
Njihove razlike su povezane s različitim molekularnim oblicima i masama. Imaju različite poluživote i uključeni su ili ne uključeni u infektivne procese na različite načine. Vremenski okvir unutar kojeg se mogu otkriti od trenutka nastanka infekcije također varira.
Ako klasificirate imunoglobuline koristeći molekularnu težinu kao osnovu, tada IgM ima najviše pokazatelje. Karakteristika ove vrste imunoglobulina je nemogućnost prolaska kroz placentnu barijeru. Ako se IgM otkrije u testu kod novorođenčeta, govorimo o prisutnosti infekcije u fetusu.
Velika većina ljudske krvi sadrži IgG imunoglobuline, od kojih je najmanje IgE. Govoreći o radu u okviru infektivnih procesa, posebnu pažnju treba obratiti na opcije A, M, G. IgE djeluje kao marker alergijske reakcije. IgD se nalazi samo u tkivima limfnih čvorova i krajnika. Ovo je važno sa stanovišta stvaranja lokalnog imuniteta.
Osim toga, analiza određuje antigene. Pod njima se podrazumijevaju tvari visoke molekularne težine, koje su poznate po svom organskom porijeklu. Posebno je riječ o uzročnicima infektivnih i drugih bolesti spektra. Osim toga, mislimo i na tvari koje signaliziraju različite promjene stanica koje su neizbježne kod brojnih bolesti. Indikovan je i imunološki kompleks, koji pokazuje kompleks antigen-antitijelo koji učestvuje u imunološkom procesu.
Obično vrijeme proizvodnje ovisi o specifičnoj laboratoriji koju ste kontaktirali. Neke laboratorije mogu dati rezultate u roku od dan ili dva, drugima je potrebno tjedan dana. Kašnjenja mogu biti posljedica potrebe da se akumulira određena količina seruma.
Utjecaj na rezultate i interpretaciju
Unatoč činjenici da se ELISA smatra jednom od najpreciznijih metoda testiranja, greške se i dalje javljaju. Postupak uzimanja materijala, nepravilan transport i skladištenje materijala mogu uticati na ispravnost rezultata. Uzimanje lijekova, kao što je gore spomenuto, prisutnost skrivenih bolesti. Metabolički poremećaji ili imunodeficijencija također vam neće omogućiti da dobijete ispravne pokazatelje. U periodu života do godinu dana novorođenčad također može imati netačne pokazatelje. To je zbog činjenice da su majčina antitijela prisutna u tijelu.
Govoreći o dekodiranju, obrasci za analizu koriste pozitivan ili negativan predznak da naznače rezultate proračuna za svaku od klasa imunoglobulina. Sledeće su verovatne opcije.
Odsustvo otkrivenih IgG, IgA i IgM ukazuje na potpuni oporavak. Negativan rezultat za komponente kao što su IgM, IgA, IgG znači nedostatak imuniteta na infekcije.
Kombinacija pozitivnog i negativnog rezultata za IgG, IgA u kombinaciji sa pozitivnim IgM ukazuje na prisustvo akutne infekcije u organizmu. Pozitivan IgG rezultat u kombinaciji s negativnim pokazateljima za IgA i IgM odgovara periodu nakon vakcinacije ili sticanju imuniteta kao rezultat infekcije.
Kombinacija pozitivnog ili negativnog rezultata na IgG, IgA i negativnog nalaza na IgM ukazuje na prisustvo infekcije u njenom hroničnom toku. Pozitivan rezultat za tri komponente: IgG, IgM, IgA ukazuje na pogoršanje infekcije koja je bila u kroničnom obliku. Pored direktnog pojašnjavanja klasa antitijela, u sklopu dešifriranja ELISA analize, doktor dobiva informacije o njihovim kvantitativnim pokazateljima. Važno je naglasiti da za dekodiranje treba biti odgovoran ljekar koji prisustvuje. Činjenica je da ga kombinacija nekih komponenti može navesti na razmišljanje o dobijenom lažnom rezultatu, što će dovesti do ponovnog polaganja testa. Nezavisno dešifriranje u ovom slučaju je beskorisno.
ELISA analiza - šta je to? Puni naziv ove dijagnostičke metode naziva se enzimski imunoesej, a zasniva se na određivanju u perifernoj krvi antitijela različitih klasa, odnosno imunoglobulina, koje proizvodi ljudski organizam.
U liječničkoj praksi ELISA analiza zauzima vrlo važno mjesto kada je potrebno dijagnosticirati bilo koju zaraznu patologiju. Ova analiza pokazuje ne samo prisutnost zarazne bolesti, već i stadij patološkog procesa. Također, ne samo u odnosu na patogen, ELISA metoda je indicirana za upotrebu: koristi se za dijagnosticiranje alergijskih stanja. Ovaj test vam omogućava da identifikujete probleme u imunološkom sistemu, kod mnogih bolesti hematopoetskog sistema, autoimunih i drugih poremećaja.
Zašto je potrebna ELISA?
Svi istraživači su skloni vjerovanju da je naziv "antitijelo" previše loše odabran. Ali ipak, to odražava jednu važnu osobinu imunoglobulina: oni su u stanju da vežu i neutraliziraju štetne tvari, približavajući im se poput „ključa“ od „brave“. Količina antitijela u krvi odražava ne samo opću sposobnost organizma da se zaštiti od infekcija, već i sposobnost formiranja cirkulirajućih imunoloških kompleksa, koji se mogu javiti kod raznih autoimunih bolesti, na primjer, reumatoidnog artritisa ili ankilozirajućeg spondilitisa.
Kompleksi antitijela s antigenom (štetni faktor zarazne prirode) rezultat su odgovora tijela na uvođenje „stranaca“. Zbog toga imuni sistem uči da ih prepozna, uz pomoć limfocita trenira imunokompetentne ćelije, a one su u stanju da proizvode visoko specifična antitela. Dakle, antitijela na Epstein virus su strukturirana drugačije od antitijela na virusni hepatitis C ili E. coli, a anti-HAV, ili antitijela na virus hepatitisa A, strukturirana su drugačije od autoantitijela na tkivo hrskavice. Visoka specifičnost i korespondencija imunoglobulina sa infektivnim patogenom čini takav laboratorijski test kao test na enzimski imunosorbent vrlo vrijedan.
Nakon snažnog vezivanja antitijela i antigena u jedan kompleks (antigen-antitijelo), štetni faktori gube sposobnost da oštete tjelesna tkiva, a zatim se ovi kompleksi ili neutraliziraju ili liziraju fagocitozom neutrofila, i "svareni" napuštaju tijelo. .
ELISA test krvi može pokazati s kojim specifičnim patogenim faktorom se naše tijelo susreće i u kojoj je fazi interakcija tijela sa infekcijom. Nakon studije, liječnik može napraviti prognozu s visokim stupnjem povjerenja, propisati određene vrste liječenja, au nekim slučajevima čak i odrediti životni vijek pacijenta, posebno kod kroničnih virusnih infekcija, na primjer, kod virusnog hepatitisa C.
Ali u nekim slučajevima u tijelu uopće nema infektivnih agenasa, a antitijela "greškom" napadaju vlastite organe i tkiva, jer su imunokompetentne stanice dobile lažne informacije. Takve bolesti se nazivaju autoimune, a enzimski imunotest u krvi također pomaže u prepoznavanju ove kronične patologije i pomaže u dijagnozi.
Više o imunoglobulinima
Ukupno, ljudsko tijelo proizvodi 5 poznatih klasa antitijela, koje su označene Ig(što je skraćenica od imunoglobulina), koji pripadaju klasama A, M, G, E i D. Svi su od velikog značaja za tumačenje rezultata ELISA analize. Naravno, kompleksa je mnogo više, a još nisu svi otvoreni. Ali u dijagnosticiranju raznih bolesti, prve tri vrste antitijela su najvrednije. ELISA test krvi koristi najviše informacija: trenutak pojave antitijela u krvi, promjenu njihove koncentracije ovisno o vremenu, period nestanka, kao i vrstu specifičnih antitijela.
Dakle, učesnici primarnog, akutnog infektivnog procesa su imunoglobulini klase M, koji uvek ukazuju na akutnu fazu, čak i kada je klinički tok bolesti izbrisan. Tipičan primjer je anikterični oblik akutnog virusnog hepatitisa B ili C. Enzimski imunološki test krvi na hepatitis će pokazati da osoba ima akutni hepatitis, a simptomi kao što su bol u hipohondrijumu, suha usta, bolovi u zglobovima i drugi nespecifični simptomi postaju lako razumljivo.
Nakon nekoliko sedmica, ova antitijela se nalaze u koncentracijama koje sve više nestaju, inferiorne u odnosu na imunoglobuline klase G. U krvi se otkrivaju mjesecima, pa čak i godinama, i ukazuju na oporavak, a onda mogu ostati doživotno, formirajući trajni imunitet. . Ovo ukazuje na snažnu zaštitu od antigena patogena. Dakle, antitijela ove klase čine osobu imunom na ponovljene slučajeve antraksa i kuge. Ali postoje slučajevi kada ova antitela ne sprečavaju prisustvo antigena od njihovog štetnog dejstva. U ovom slučaju možemo govoriti o povećanju aktivnosti kroničnog procesa.
Prije svega, morate shvatiti da ne postoji takva analiza - "samo krv za ELISA". Postoji analiza na hepatitis, ponekad na ureaplazmu, ili na sifilis. Dakle, davanje krvi za ELISA može biti samo ciljano, „naručujući“ potragu za željenom infekcijom. Tako je nejasno zašto darivati krv iz vene, a da ne znate šta da tražite. Zato je metoda enzimske imunoeseje moćno sredstvo koje je važno u dijagnostičkoj potrazi. Samo ljekar može propisati ovaj test, jer on posebno traži infekciju koju karakterišu ovi simptomi. Obična osoba, naravno, može naručiti 150 krvnih pretraga metodom ELISA za "sve infekcije", ali to bi bio nerazuman i skup pristup dijagnostici, testiranje za sve.
Ovi testovi su najtraženiji za sljedeće bolesti i stanja:
Razne mikrobne i virusne infekcije, simptomi zaraznih bolesti - osip, groznica, žutica, otečeni limfni čvorovi, sindrom dijareje, sumnja na polno prenosive bolesti.
ELISA tehnika pomaže u određivanju ureaplazme i mikoplazme, sifilisa i klamidije, tuberkuloze i citomegalovirusne infekcije, herpesa, virusnog hepatitisa i Epstein-Barr virusa. Trenutno se oko 500 različitih infekcija može potvrditi metodom enzimskog imunotestiranja,
Ako se sumnja na helmintičku infestaciju i postoje simptomi kao što su alergije, eozinofilija u krvi, svrab kože, dispepsija i gubitak težine,
Prilikom identificiranja alergena koji uzrokuju angioedem, urtikariju, kratak dah i napade astmatičnog gušenja.
U ovom slučaju se identificiraju specifični Ig E, a postoje i cijeli paneli alergena koji će pomoći da se precizno odredi alergen - lignje ili škampi, suha hrana za ribe koja sadrži dafnije, kućnu prašinu. Kod peludne groznice, ova metoda vam omogućava da pronađete tačno travu, grm ili drvo koje uzrokuje proljetno kihanje i suzenje,
- Ova metoda je indicirana kod sumnje na autoimune bolesti koje liječe reumatolozi,
- Ako se sumnja na rast i aktivnost tumora,
- U kompleksnoj dijagnostici stanja imunodeficijencije i HIV infekcije,
- Za bolesti krvi i u transplantologiji, za sveobuhvatnu procjenu imuniteta, na primjer, prije transplantacije jetre ili bubrega.
Sada znamo zašto moramo da damo krv za ELISA test. Hajde da saznamo kako se ovo istraživanje provodi.
Kako se vrši analiza?
Klasični materijal je venska krv pacijenta. Ali ako je potrebno, može se ispitati širok spektar tečnosti i tkiva: sluz, pljuvačka, cervikalni sekret, likvor, staklasto telo oka, sadržaj pupčane vrpce i plodova voda. Važno je zapamtiti da uzimanje raznih lijekova, pretjerana fizička aktivnost i zloupotreba alkohola mogu uvelike iskriviti rezultate testa.
Postoji nekoliko metoda koje omogućavaju ovu analizu. Fotometrijska metoda se najčešće koristi u kliničkim laboratorijama. U ovom slučaju koriste se tvari označene bojom, nakon čije reakcije i obilježavanja kompleksa antigen-antitijelo, njihova se boja mijenja. Kao rezultat, mijenja se i optička gustoća otopine, a ta promjena je direktno proporcionalna koncentraciji otkrivenih antitijela. Laboratorijski spektrofotometri se uspješno koriste za mjerenje ovih odstupanja.
Također, za provođenje ELISA-e koristi se fluorimetrijska metoda, čija je osnova fluorescencija. I ovdje se izračunava intenzitet fluorescentnih supstanci taloženih na ispitivanim uzorcima.
Konačno, imunološka analiza koristi elektrohemijske metode za određivanje aktivnosti enzima, koji su posebne oznake za antigene i antitijela. Sama metoda enzimskog imunotestiranja najčešće uključuje korištenje enzima kao što su alkalna fosfataza, peroksidaza hrena i galaktozidaza. Ovi enzimi su sposobni da se vežu za antitela ili antigene i obeležavaju ih zbog svoje aktivnosti.
Nedostaci metode i njene prednosti
Očigledne „prednosti“ uključuju pristupačnu cijenu testa i mogućnost njegovog skrininga među širokim grupama stanovništva, na primjer, pri skriningu trudnica na HIV. Metoda enzimske imunoanalize je prilično specifična i može se koristiti za kontrolu kvalitete liječenja mnogih bolesti. Važno je da se analiza brzo pripremi, da bude jednostavna i sigurna za pacijenta.
Međutim, postoje mnoge zamke. Dakle, ako se imunoglobulini ne otkriju, to ne ukazuje na 100% odsustvo bolesti. Zaista, u pozadini imunodeficijencije, tijelo jednostavno možda „nema snage“ da sintetizira antitijela. Ako pacijent ima ozbiljno zatajenje jetre, tada jetra jednostavno nije u stanju sintetizirati protein - građevinski materijal za antitijela. U ovom slučaju, rezultat se naziva seronegativnim, a potvrda infekcije potrebna je direktnom i najnaprednijom metodom istraživanja - PCR, odnosno lančanom reakcijom polimeraze. Za razliku od enzimskog imunoeseja, ova metoda ne otkriva reakciju tijela na infektivni proces (koji može biti neispravan ili potpuno odsutan); PCR direktno određuje nasljedni materijal, odnosno sam patogen.
Lista dostupnih dijagnostičkih metoda se posljednjih desetljeća ubrzano širi, dijagnostičari pokušavaju spojiti prednosti svih dosadašnjih testova u nove metode, otklanjajući sve njihove prethodne nedostatke.
U posljednje vrijeme na popisu dijagnostičkih procedura sve više se nalazi enzimski imunosorbentni test - moderan i prilično nov test, koji je malo poznat prosječnoj osobi koja se ne bavi medicinom. Ipak, ova tehnika brzo stiče u rangu svojih pristalica među kvalifikovanim medicinskim osobljem. Možete pokušati shvatiti što je to i u kojim slučajevima ga treba koristiti tako što ćete se upoznati s njegovim karakteristikama i glavnim karakteristikama.
Enzimski imunotest je instrumentalna laboratorijska tehnika zasnovana na molekularnoj reakciji „antigen-antitelo“, koja omogućava detekciju specifičnih proteina u biološkim materijalima (uzorci za istraživanje). Takvi proteini mogu biti enzimi, razni mikroorganizmi (virusi, bakterije, gljive), protozoe itd.
Nakon otkrića metode, dobila je naziv ELISA test, koji nema nikakve veze sa imenom otkrivača, već je skraćenica od punog naziva na engleskom - enzyme-linked immunosorbent assay. Doktori širom svijeta koriste ovaj naziv, a neki ljekari u zemljama ruskog govornog područja također nazivaju ovu vrstu istraživanja na ovaj način.
Glavni princip metode je molekularna reakcija "antigen-antitijelo".
Antigen je svaki strani molekul koji ulazi u ljudsko tijelo kao dio mikroba koji uzrokuje bolest. Antigeni su obično proteinski molekuli. Osim mikroorganizama, takav "stranac" mogu biti strane krvne ćelije koje ne odgovaraju grupi ili Rh faktoru.
Kao odgovor na ulazak takvog antigena u tijelo, pokreće se imunološka reakcija koja ima za cilj zaštitu od bilo kakvih stranih molekula. To se događa zbog sinteze posebnih agenasa imunološkog sistema - antitijela (imunoglobulina). Svako antitijelo je pogodno samo za određeni antigen i neutralizira patogenog “stranca” vezujući se za njega u jedan kompleks. To je proces takvog vezivanja koji se naziva reakcija "antigen-antitijelo".
Vrste antitijela
Sva antitela (imunoglobulini) se dele u 5 tipova u zavisnosti od toga u kojoj fazi imunološkog odgovora se pojavljuju:
Za ELISA dijagnostiku najčešće su važni nivoi imunoglobulina IgG, IgM i IgA. Po njihovim titrima možete saznati da li je osoba ranije imala bolest ili se nedavno zarazila, da li je razvila imunitet ili je njegovo tijelo bespomoćno protiv patologije.
Prednosti i nedostaci enzimskog imunoeseja
Trenutno je ELISA jedna od najpreciznijih i najosjetljivijih metoda. Usvojili su ga specijalisti iz različitih oblasti medicine i nastavlja da širi svoj opseg primjene.
Prednosti metode
- Visoka tačnost dobijenih podataka.
- Osjetljivost (omogućava vam da otkrijete potrebnu tvar čak i uz minimalno prisustvo patogena u uzorku).
- Mogućnost dijagnoze u prvim danima bolesti ili u periodu inkubacije.
- Brzina prikupljanja podataka u poređenju sa drugim metodama slične tačnosti.
- Visoka automatizacija procesa i minimalno ljudsko učešće, što smanjuje grešku izvođača.
- Dobivanje podataka o stadijumu patološkog procesa i efikasnosti izabrane terapije.
- Bezbolan i minimalno invazivan pri prikupljanju materijala.
Nedostaci metode
- U većini slučajeva omogućava vam da odredite odgovor tijela na patogeni agens, a ne na sam patogen.
- Prije testa mora se tačno znati na koju se bolest sumnja, jer je test vrlo specifičan.
- Vjerojatnost lažnih pokazatelja uzrokovanih tehničkim problemima, uzimanjem lijekova, istovremenom prisutnošću nekoliko kroničnih bolesti ili metaboličkim poremećajima u tijelu pacijenta.
- Interpretaciju rezultata treba da radi samo visokokvalifikovani specijalista, jer je za interpretaciju dobijenih podataka neophodna posebna obuka i velika zaliha medicinskog znanja iz određene oblasti.
- ELISA je prilično rijedak test, pa se ne radi u svim dijagnostičkim laboratorijama.
- Metoda je prilično skupa, jer pored reagensa laboratorija mora imati brojnu skupu opremu i uzorke antigena proizvedenih u posebnim institutima.
U kojim slučajevima se koristi enzimski imunotest?
Potpuna lista indikacija za enzimsku imunoanalizu je vrlo široka, uključuje gotovo sve grane medicine.
Najčešće se ELISA koristi u sljedeće svrhe:
- otkrivanje zaraznih bolesti;
- dijagnostika spolno prenosivih bolesti;
- utvrđivanje imunološkog statusa ili individualnih autoimunih bolesti;
- identifikacija tumorskih markera;
- određivanje hormona.
U slučaju zaraznih i virusnih bolesti, tehnika nam omogućava da identificiramo sljedeće patologije:
Osim toga, ELISA vam omogućava da brzo i efikasno odredite stanje infarkta, procijenite reproduktivni potencijal tijela, identificirate alergije, njihov izvor itd.
Imunoenzimska tehnika se koristi za sprovođenje kliničkih studija tokom razvoja novih lekova i za procenu njihovog dejstva na ljudski organizam.
Vrste uzoraka i metode njihovog odabira za istraživanje
Najčešće je testni materijal za enzimski imunotest krv, koja se uzima iz antekubitalne vene pacijenta. Uzimanje uzoraka se vrši na prazan želudac, uglavnom ujutro. Nakon uzorkovanja, one formirane ćelije koje ometaju istraživanje se odvajaju i uklanjaju iz krvi, ostavljajući samo serum.
Prilikom dijagnosticiranja genitourinarnih infekcija, materijal često postaje mrlje iz sluznog tkiva genitalnih organa, sluz iz uretre ili cerviksa, uzorci iz rektuma, strugotine od erozija ili čireva u području prepona i iz drugih dijelova tijela. Brisevi se mogu uzeti iz usne duplje, kao i iz nazofarinksa.
Ponekad se enzimski imunotest koristi u akušerskoj i ginekološkoj praksi tokom trudnoće za određivanje stanja amnionske tekućine. U tom slučaju plodna voda postaje uzorak. Da bi se to postiglo, uzima se mala količina tekućine probijanjem amnionske vrećice dugom iglom. Sve manipulacije se izvode sterilnim instrumentima kako bi se minimizirali mogući rizici.
Često materijal postaje cerebrospinalna ili serozna tečnost. To se događa uz lokalnu anesteziju, koja se primjenjuje injekcijom.
Specijalista koji šalje na studiju treba da razjasni koja vrsta materijala je potrebna za enzimski imunotest. Često se uzorci više vrsta ili sa različitih mjesta uzimaju odjednom. Lekar koji izdaje uputnicu za ovu vrstu pregleda takođe treba da obavesti pacijenta o pripremama za doniranje biomaterijala.
Priprema za enzimski imunotest
Da bi se povećala tačnost podataka dobijenih nakon enzimskog imunotestiranja, priprema za odabir materijala trebala bi biti sljedeća:
- 10 dana prije studije isključite antibiotike, antivirusne i antimikotičke lijekove;
- za jedan dan potrebno je isključiti alkohol, pušenje i uzimanje narkotika;
- u istom periodu potrebno je izbjegavati fizičko prenaprezanje;
- Upozoriti lekara na sve lekove koje pacijent uzima;
- Obavijestite svog ljekara ako ste trudni ili sumnjate da ste trudni.
Najbolje je da se materijali za testiranje prikupljaju ujutro na prazan želudac.
Ako dijagnoza ima za cilj utvrđivanje stanja hormona, onda je važno osigurati da ste dan ranije u mirnom stanju i izbjeći nervoznu napetost. Za žene je davanje krvi za hormone jasno određeno periodom mjesečnog ciklusa, o čemu će razgovarati ljekar prilikom zakazivanja.
2-3 dana prije uzorkovanja potrebno je isključiti prženu i masnu hranu iz jelovnika, a prije testiranja na hepatitis ne jesti citrusno voće ili bilo koje drugo narandžasto ili žuto voće i povrće.
Interpretacija rezultata enzimske imunoeseje
Rezultat kvalitativne studije obično je označen znakovima "+" (otkriveno) ili "-" (nije pronađeno).
Na osnovu prisustva ili odsustva određenih grupa imunoglobulina, mogu se izvesti sljedeći zaključci:
- JgM (-), JgG (-), JgA (-) - imunitet na bolest je potpuno odsutan (tijelo se ranije nije susrelo s ovom vrstom antigena);
- JgM (-), JgG (+), JgA (-) - došlo je do prethodne kolizije sa ovim antigenom ili vakcinom;
- JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) - akutni patološki proces (najvjerovatnije primarni);
- JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) - hronični proces;
- JgM (+), JgG (+), JgA (+) - recidiv;
- JgM (-) - faza oporavka.
Kvantitativne vrijednosti nose veliko informacijsko opterećenje, ali samo ih liječnik može protumačiti na osnovu prethodnih indikacija, starosti pacijenta i normi za svaku konkretnu bolest. Iz tog razloga ne možete sami procijeniti rezultate.
Koliko dugo treba da čekate rezultate?
Ova tehnika ima mnogo varijanti, u zavisnosti od kojih se određuje period za dobijanje podataka. Prosječno trajanje ELISA dijagnostike je 4-6 sati, što vam omogućava da dobijete rezultate već sljedeći dan.
Najduže metode traju i do 10 dana, na primjer, u slučaju HIV infekcije.
U slučaju hitne potrebe moguće je koristiti ekspresne metode, u kojima se odgovor dobija u roku od 1-2 sata.
Gdje mogu dobiti ELISA testiranje?
Budući da je oprema za ovu vrstu dijagnostike prilično skupa, ne mogu je kupiti sve laboratorije. Osim toga, testovi koji sadrže specifične antigene imaju ograničen rok trajanja (obično oko 1 godinu) i stoga zahtijevaju stalno ažuriranje.
Iz ovih razloga javne zdravstvene ustanove nemaju uvijek ELISA laboratorije. Najčešće je potrebno kontaktirati velike privatne medicinske ili velike dijagnostičke centre.
Za provođenje ELISA testa laboratorija mora imati posebnu dozvolu, a osoblje i laboratorijski asistenti moraju proći posebnu obuku.
Najčešće, određeni dijagnostički centar ili laboratorij preporučuje ljekar koji upućuje pacijenta na pregled.
Troškovi enzimskog imunoeseja
Cena ove studije zavisi od regiona zemlje i od nivoa klinike koja pruža uslugu. U Moskvi, minimalna cijena za određivanje jednog antigena počinje od 700 rubalja. Ako je potrebno identificirati nekoliko imunoglobulina odjednom, cijena će se zbrajati.
U slučaju hitne analize, trošak se povećava za 150-200 rubalja. za svaki antigen.
Unatoč prilično visokoj cijeni, enzimski imunotest omogućava da se pregled pacijenta učini što informativnijim i bržim, što skraćuje vrijeme prije početka liječenja i omogućava bržu stabilizaciju stanja osobe.
Ovaj video predstavlja film “Osnove enzimskog imunoeseja”.
ELISA analiza (enzimski imunosorbentni test) je moderna dijagnostička procedura koja ima za cilj identifikaciju specifičnih antitijela u krvi na patogene niza bolesti, utvrđivanje faze razvoja patologije i njene etiologije. Koristi se kao metoda praćenja procesa liječenja i njegove efikasnosti. Tokom procesa istraživanja analiziraju se kvalitativni i kvantitativni pokazatelji.
ELISA metoda je vrlo informativna, tačnost rezultata je više od 96%. Dijagnostika je dostupna u gotovo svakoj laboratoriji i medicinskoj ustanovi.
Glavne indikacije
Enzimski imunološki test je propisan za potvrdu prisutnosti spolno prenosivih zaraznih bolesti:
- trihomonijaza;
- klamidija;
- ureaplazmoza;
- sifilis, itd.
ELISA se također koristi za dijagnosticiranje virusnih bolesti:
- herpes;
- herpes tip 4 (Epstein-Barr virus);
- virusni hepatitis;
- infekcija citomegalovirusom.
Kako se pripremiti za istraživanje
Biološki materijal za istraživanje je krv. Nekoliko dana prije testa ne biste trebali uzimati lijekove. Antibiotici, antihelmintici i antivirusni lijekovi se prekidaju u roku od 14 dana.
Materijal se prikuplja ujutro na prazan želudac. Sat vremena prije zahvata dopušteno je popiti čašu negazirane vode, isključuje se unos hrane.
Karakteristike analize
Za provođenje studije uzima se venska krv u zapremini od najmanje 5 ml. U nekim slučajevima se kao biomaterijal koristi cerebrospinalna tečnost, amnionska tečnost ili sadržaj staklastog tela.
Uzimanje krvi vrši se iglom za injekcije, striktno na prazan želudac, kako bi se izbjegli lažno pozitivni rezultati. Trebalo bi da prestanete da pušite i pijete alkoholna pića 12 sati ranije. Kada se koriste opojne supstance, rezultati analize su iskrivljeni.
Ako zaključak ukazuje na negativne vrijednosti imunoglobulina G, A, M, to ukazuje na početnu fazu razvoja patološkog procesa ili njegovu odsutnost. Ovaj rezultat se bilježi nakon potpunog oporavka nakon terapije.
Negativan rezultat IgM i IgA i pozitivan IgG nalaz ukazuju na formiranje imuniteta nakon zarazne bolesti ili vakcinacije.
Pozitivan rezultat IgM i negativan ili pozitivan rezultat IgG, IgA ukazuje na prisutnost akutne zarazne patologije.
ELISA analiza se provodi prilično brzo, rezultati su gotovi u roku od jednog dana nakon prikupljanja materijala.