Ispitivanje se provodi 19.-23. dana menstrualnog ciklusa (5-7 dana prije očekivane menstruacije), osim ako ljekar koji prisustvuje ne odredi druge datume. Izbjegavajte fizičku aktivnost 3 dana prije uzimanja krvi. Preporučuje se davanje krvi striktno ujutru od 7 do 11 sati, na prazan želudac (najmanje 8 sati nakon jela, piti vodu kao i obično), u mirovanju najmanje 30 minuta, prije uzimanja lijekova. Ako prekid uzimanja lijekova nije moguć, morate obavijestiti svog ljekara. Uzimanje sintetičkih analoga progesterona (duphaston) ne utječe na rezultate studije.

• Opis

"PROGESTERON-ELISA"

Progesteron je ženski polni hormon, njegov glavni ciljni organ je materica (proliferacija endometrijuma, olakšava implantaciju oplođenog jajeta). Sintetiše ga žuto telo, tokom trudnoće posteljica, a određenu količinu proizvode testisi i nadbubrežne žlezde. Tokom folikularne faze, njegova količina u krvi je minimalna, a nakon ovulacije se povećava, stimulirajući zadebljanje endometrija i spremnost za implantaciju oplođene jajne stanice. U trudnoći hormon smanjuje osjetljivost maternice na tvari koje uzrokuju njenu kontrakciju; njegova koncentracija se postepeno povećava od 5. do 40. tjedna trudnoće, povećavajući se 10-40 puta. Studija je propisana za dijagnosticiranje menstrualnih nepravilnosti, praćenje pacijentica s induciranom ovulacijom i procjenu rizika od ranog gubitka trudnoće.

Opis

Endokrinologija - 17-OH progesteron (ELISA), krv, ng/ml

Vrijeme izrade: 7-10 radnih dana*.
Biomaterijal: krv.

Opis:

Krv se daje na testiranje od 8:00 do 9:00
Mogućnost hitnog istraživanja: DA, u roku od 1 dana
Priprema za studiju: kod žena se studija izvodi 5-6. dana normalnog menstrualnog ciklusa, osim ako ljekar koji prisustvuje drugačije odredi. Obavezno naznačite dan vašeg ciklusa.
Referenca: 17-OH progesteron (17-hidroksiprogesteron) je steroid koji se proizvodi u nadbubrežnim žlijezdama, gonadama i placenti, produkt metaboličkih transformacija progesterona i 17-hidroksipregnenolona. U nadbubrežnim žlijezdama 17-OH progesteron se pretvara u kortizol, a u nadbubrežnim žlijezdama i jajnicima u androstendion (prekursor testosterona i estradiola). 17-OH progesteron karakteriziraju dnevne fluktuacije zavisne od ACTH (slično kortizolu, maksimalne vrijednosti se detektuju ujutro, minimalne vrijednosti noću). Kod žena, proizvodnja 17-OH progesterona u jajnicima fluktuira tokom menstrualnog ciklusa. Dan prije vrhunca luteinizirajućeg hormona (LH) dolazi do značajnog porasta 17-OH progesterona, nakon čega slijedi vrhunac koji se poklapa sa maksimumom LH u sredini ciklusa, nakon čega dolazi do kratkotrajnog smanjenja, praćeno porastom koji je u korelaciji sa nivoima estradiola i progesterona. Nivoi 17-OH-progesterona zavise od starosti, sa visokim nivoima uočenim tokom fetalnog perioda i neposredno nakon rođenja. Tokom prve sedmice života, nivoi 17-OH progesterona opadaju i ostaju uporno niski tokom djetinjstva i progresivno rastu tokom puberteta, dostižući koncentraciju odraslih.
Indikacije za upotrebu: Dijagnostika i praćenje pacijenata sa kongenitalnom adrenalnom hiperplazijom i drugim oblicima nedostatka 21-hidroksilaze i drugih enzima uključenih u sintezu steroida. Hirzutizam, poremećaji ciklusa i neplodnost kod žena, tumori nadbubrežne žlijezde.
Jedinice: ng/ml
Normalni indikatori::
normalna vrijednost (ng/ml)
novorođenčad 9,9 – 33,0
djeca (1-12 godina) 0,07 – 1,2
muškarci 0,5 – 2,4
zene
folikularna faza 0,2 – 1,2
lutealna faza 1.0 – 3.1
menopauza 0,2 – 1,3
trudnoća
1. trimestar 1,3 – 3,0
2. trimestar 2.0 – 5.0
3. trimestar 5.0 – 8.3
Interpretacija rezultata:
Nivo 17-OH progesterona u krvi raste s kongenitalnom adrenalnom hiperplazijom, genetski uslovljenom autosomno recesivnom bolešću koja se u većini slučajeva razvija zbog nedostatka 21-hidroksilaze, kao i zbog nedostatka drugih enzima uključenih u sintezu steroida. . Nedostatak ovih enzima uzrokuje smanjenje nivoa kortizola i aldosterona i nakupljanje intermedijarnih proizvoda, koji uključuju 17-OH progesteron.
Smanjenje nivoa kortizola putem mehanizama povratne sprege uzrokuje povećanu proizvodnju ACTH, što dovodi do povećane proizvodnje molekula prekursora, kao i androstendiona, koji se u tkivima pretvara u aktivni testosteron, budući da ovaj put sinteze ostaje neblokiran. Nedostatak enzima može varirati po težini. Kod kongenitalne adrenalne hiperplazije u dojenačkoj dobi, virilizacija se razvija zbog povećane proizvodnje androgena u nadbubrežnim žlijezdama; poremećena sinteza aldosterona može se djelomično nadoknaditi aktivacijom regulatornih mehanizama. U težim slučajevima, nedostatak 21-hidroksilaze uzrokuje duboko oštećenje sinteze steroida sa smanjenim razinama aldosterona i gubitkom soli, što je potencijalno opasno po život.
Djelomični nedostatak enzima uočen kod odraslih može također biti nasljedan, ali u početku biti skriven bez kliničkih manifestacija. Defekt u sintezi enzima može napredovati sa godinama ili pod uticajem patoloških faktora i izazvati funkcionalne i morfološke promene u nadbubrežnim žlezdama, slično kongenitalnom sindromu. To uzrokuje smetnje u seksualnom razvoju u prepubertetskom periodu, a može biti i uzrok hirzutizma, poremećaja ciklusa i neplodnosti kod žena u postpubertetu.
Sadržaj 17-OH-progesterona se povećava tokom trudnoće, što je fiziološka norma.
Smanjenje nivoa 17-OH-progesterona opaženo je kod Addisonove bolesti - primarne insuficijencije kore nadbubrežne žlijezde, kao i kod pseudohermafroditizma kod muškaraca, koji je povezan s nedostatkom enzima 17a-hidroksilaze.
Bolesti i stanja u kojima se povećava nivo 17-OH progesterona u krvi:
kongenitalna adrenalna hiperplazija uzrokovana nedostatkom 21-hidroksilaze ili 11-b-hidroksilaze;
neki slučajevi tumora nadbubrežne žlijezde ili jajnika;
trudnoća.
Bolesti i stanja u kojima se smanjuje nivo 17-OH progesterona u krvi:
Addisonova bolest;
pseudohermafroditizam kod muškaraca.

ELISA studije:

Laboratorijska dijagnostika poremećaja reproduktivnog sistema (2. dio)

Nechaev V.N., Ph.D.

Određivanje nivoa prolaktina

Prva faza laboratorijskog pregleda osoba oba spola oboljelih od reproduktivnih poremećaja, prema preporukama SZO, je mjerenje koncentracije. prolaktin(mliječni hormon) u krvnom serumu (plazmi). Prolaktin ne utiče direktno na funkcionalnu aktivnost spolnih žlijezda; u isto vrijeme, nivo prolaktina u krvi jasno korelira sa stanjem hipotalamus I adenohipofiza. Prolaktin reguliše lučenje mleka tokom dojenja. Prolaktin je hormonski antagonist FSH I LH, a povećanjem proizvodnje prolaktina dolazi do poremećaja hormonske funkcije jajnika i javlja se hiperprolaktinemični oblik neplodnosti. Fiziološka hiperprolaktinemija se opaža kod žena koje doje. Kod žena koje ne doje, povišene razine prolaktina mogu biti povezane s određenim lijekovima, tumorom hipofize ili kvarom hipofize. Jedna od manifestacija hiperprolaktinemije je oslobađanje kolostruma ili mlijeka iz mliječnih žlijezda, posebno kod nerođenih žena. Patološke promene u organizmu, sa povišenim ili sniženim nivoom prolaktina, prikazane su u tabeli 1.

Tabela 1. Patološke promjene u tijelu s povećanim ili smanjenim razinama prolaktina

Prolaktin se nalazi u krvnom serumu u tri različita oblika. Preovlađuje biološki i imunološki aktivan monomerni oblik (otprilike 80%), 5-20% je prisutno kao dimerni neaktivni oblik i 0,5-5% je prisutno kao tetramerni, također neaktivan oblik. U tabeli 2 prikazane su referentne vrijednosti za koncentracije monomernog oblika (biološki aktivnog) prolaktina.

Tabela 2. Referentne vrijednosti za koncentraciju prolaktina u serumu

Indikacije za određivanje:

Žene u reproduktivnom periodu:

• Menstrualne nepravilnosti i amenoreja
• Neplodnost
• Poremećaji laktacije
• Galaktoreja
• Sindrom hiperfunkcije hipofize
• Insuficijencija hipofize

• Zatajenje testisa
• Azoospermija, oligospermija
• Galaktoreja
• Sindrom hiperfunkcije hipofize
• Insuficijencija hipofize
• Nadomjesna terapija nakon uklanjanja tumora hipofize

Priprema uzoraka za analizu

Prolaktin ima prilično izražen cirkadijalni ritam sa maksimalnim oslobađanjem hormona tokom noćnog sna. Preporučuje se vađenje krvi ujutro (8-10 sati), u ranoj folikularnoj fazi ciklusa (kod žena sa redovnim ciklusom) iu mirnom okruženju. Da bi se isključilo slučajno povećanje nivoa prolaktina kao odgovor na stres (vađenje krvi), poželjna je 2-3 puta studija.

Materijal za istraživanje:

• krvni serum

FSH i LH su "glavni" hormoni reprodukcije

Ako određivanje nivoa prolaktina u krvi daje informacije o funkcionalnom stanju kompleksa hipotalamus-hipofiza u cjelini, onda je za procjenu aktivnosti reproduktivnog sistema mjerenjem sadržaja gonadotropnih hormona u krvi - FSH i LH - potrebno korišteno.

Upravo ti hormoni osiguravaju rast i razvoj folikula (FSH) i stimulišu sintezu polnih hormona u gonadama (LH). Lučenje LH i FSH je, pak, pod kontrolom polnih hormona gonada (mehanizam negativne povratne sprege). Povećanje nivoa polnih hormona, prvenstveno estradiola, u krvi je praćeno inhibicijom lučenja gonadotropina (i obrnuto). Sekreciju FSH dodatno reguliše inhibin, polipeptid koji sintetiziraju gonade. Tokom preovulatornog perioda, zreli dominantni folikul luči velike količine estradiola u krv, pod čijim uticajem dolazi do ovulatornog oslobađanja LH i FSH (fenomen pozitivne povratne sprege). Ovaj porast (vrhunac ovulacije) traje vrlo kratko, 1-2 dana. Intenzitet sekrecije gonadotropina tokom periovulatornog perioda određuje buduću funkcionalnu aktivnost žutog tela. Dnevni (cirkadijalni) ritam lučenja LH i FSH kod odraslih nije izražen, za razliku od adolescenata, dok je cirhoralni (satni) ritam lučenja vrlo karakterističan za gonadotropine.

Savremeni ELISA test sistemi za određivanje FSH i LH zasnovani su na upotrebi monoklonskih antitela koja ne reaguju unakrsno sa blisko srodnim hormonima TSH i hCG.

Tabela 3. Referentne vrijednosti za koncentracije FSH i LH u krvnom serumu.

Priprema uzoraka za analizu

Nivo gonadotropina ne prati cirkadijalni ritam i nema potrebe za vađenjem krvi natašte. Treba imati na umu da se sa očuvanim menstrualnim ciklusom može izvršiti jedno određivanje gonadotropina samo u ranoj folikularnoj fazi (6-8 dana ciklusa). Jasniji rezultati se dobijaju uzimanjem 2-3 uzorka krvi u intervalu od 30-40 minuta, a zatim kombinovanjem dobijenih seruma. LH i FSH se ne mogu odrediti jednom u uzorku krvi uzetom u sredini ciklusa za otkrivanje ovulacije. Vrijeme ovulacije za cikluse različite dužine je različito (oko 14 dana prije početka očekivane menstruacije) i može se pomjeriti za 1-2 dana od očekivanih. S tim u vezi, rezultati jednokratnog određivanja gonadotropina 13-14 dana ciklusa u većini slučajeva daju lažne informacije o prirodi ciklusa. Pulsirajuća priroda sekrecije u intervalima od 1-2 sata posebno je karakteristična za PH, pa rezultate pojedinačnih testova treba smatrati približnim. Uzorci seruma ili plazme nakon zgrušavanja i/ili odvajanja crvenih krvnih zrnaca stabilni su dovoljno vremena da se uzorci pošalju poštom. Zamrznuti uzorci mogu se čuvati na duži vremenski period.

Krv se mora sakupljati iglom sa širokim otvorom, gravitacijskim protokom ili blagim negativnim pritiskom iz klipa šprica.

Materijal za istraživanje:

• krvni serum
• heparinizirana krvna plazma

Određivanje polnih hormona

Nema sumnje da je za kompletno ispitivanje stanja reproduktivnog sistema neophodno imati ELISA test sisteme za određivanje polnih hormona (estradiol, testosteron, progesteron) u krvnom serumu. Ako je sinteza polnih hormona u gonadama naglo smanjena, tada se putem mehanizma negativne povratne sprege naglo povećava lučenje gonadotropina tako da dijagnoza nedostatka funkcije jajnika ne uzrokuje poteškoće.

U dijagnostičkom algoritmu pregleda kod sumnje na endokrinu neplodnost ključno je određivanje koncentracija LH, FSH, estradiola i testosterona.

Metode za određivanje ovih hormona danas se pretežno baziraju na enzimsko-vezanim imunosorbentima ili imunofluorescentnoj tehnologiji, što osigurava njihovu široku primjenu.

Estradiol

Estradiol- glavni estrogeni steroidni hormon. Katabolizam u jetri dovodi do transformacije estradiola u estriol ili u glukuronide i sulfate koji se izlučuju urinom.

Među ženama estradiol sintetiziraju i izlučuju u jajnika, u membranama i granuloznim ćelijama folikula. Stimulira razvoj prve faze ciklusa jajnika, uzrokujući povećanje proteina mišića maternice i hiperplaziju endometrijuma. Na nivou hipofize djeluje i na sekret LH, FSH. Tokom prve faze ciklusa, sve veći porast koncentracije estradiol dovodi do masivnog lučenja LH, što „pokreće ovulaciju“. Koncentracija tokom trudnoće estradiol povećava. Analiza estradiol u krvnoj plazmi je glavni parametar u praćenju indukcija ovulacije I stimulacija jajnika. Povećana stopa sinteze estradiol a njegova koncentracija na kraju stimulacije odražava broj i kvalitet sazrijevanja folikula.

Tabela 4. Referentne vrijednosti za koncentraciju estradiola u krvnom serumu.

Indikacije za određivanje:

• kontrola stimulisane ovulacije,
• procjena funkcije jajnika,
• menstrualne nepravilnosti,
• amenoreja hipotalamičkog porekla,
• tumori koji proizvode estrogen
• praćenje tretmana neplodnosti,
• osteoporoza;

muškarci:

• ginekomastija,

djeca:

• praćenje napretka puberteta.

Tabela 5. Bolesti i stanja u kojima se koncentracija estradiola u krvnom serumu može promijeniti

Progesteron

Progesteron- jedan od glavnih steroidnih hormona. U malim količinama ga luče ćelije žutog tela jajnika u lutealnoj fazi menstrualnog ciklusa. Deluje na endometrijum zajedno sa estradiol, zbog čega menstrualni ciklus prelazi iz proliferativne faze u sekretornu fazu. Nivo progesteron postiže svoj cilj maksimum 5. - 7. dana nakon ovulacije. Ako do oplodnje ne dođe, nivo progesterona se smanjuje, i obrnuto, ako je došlo do oplodnje, žuto tijelo nastavlja lučiti velike količine progesteron prije 12 nedelja trudnoće. Onda stupa u akciju placenta, koji postaje glavno mjesto proizvodnje hormona. Progesteron takođe luči u malim količinama kore nadbubrežne žlijezde I testisi i predstavlja intermedijer u sintezi androgena.

U krvi progesteron se nalazi u besplatno, i u povezane sa stanjima proteina transportera (albumin i transkortin). Poluvrijeme eliminacije hormona je nekoliko minuta, dvije trećine progesterona se metabolizira u jetri i izlučuje u urinu kao slobodni pregnandiol, pregnandiol glukuronid i pregnandiol sulfat.

Tabela 6. Referentne vrijednosti za koncentraciju progesterona u krvnom serumu

Indikacije za određivanje:

zene:

• poremećaji ovulacije,
• izostanak ovulacije sa ili bez oligomenoreje,
• insuficijencija funkcije žutog tijela;
• precizno određivanje ovulacije
• indukcija ovulacije humanim gonadotropinom ili klomifenom u menopauzi (u prisustvu hCG-a i bez njega);
• potvrda ovulacije (određivanje u drugoj polovini ciklusa);
• praćenje napretka ovulacije kod žena koje su imale spontani pobačaj;

muškarci i djeca:

• defekt u biosintezi steroida.

Progesteron uzrokuje povećanje bazalne tjelesne temperature. U slučaju dijagnoze insuficijencije funkcije žutog tela, uzorci se uzimaju 3 puta (svaki nakon 3-4 dana prethodnog uzimanja). U najmanje 2 slučaja koncentracija progesterona bi trebala prelaziti 10 μg/ml.

Testosteron

Među ženama testosteron formira se u kore nadbubrežne žlijezde I jajnika u omjeru 1:1 i služe kao supstrat za stvaranje estrogena, a stimuliše i preovulatorno oslobađanje LH. Nivo testosterona se ne mijenja sa godinama kod žena. Normalni nivoi testosterona kod žena su 0 - 0,9 ng/ml.

Indikacije za određivanje:

• Klinefelterov sindrom i druge hromozomske bolesti;
• hipopituitarizam;
• enzimski poremećaji sinteze androgena;
• hirzutizam i virilizacija žena;
• većina tumora jajnika i bubrega koji proizvode androgene.

Kod žena je potrebno odrediti i nivo DHEA – sulfata, koji ima učinak sličan testosteronu (kod muškaraca je pomoćno sredstvo u proučavanju testosterona).

Materijal za istraživanje:

• krvni serum žena 3-7 dana menstrualnog ciklusa, najbolje između 8 i 10 sati ujutro.

Steroid binding globulin (SBG) u krvnom serumu

SSG je protein koji veže i prenosi testosteron i estradiol. Osim svoje transportne funkcije, DES štiti testosteron i estradiol od metaboličke aktivnosti na putu od žlijezde koja ih luči do ciljanog organa, te formira svojevrsni depo hormona u tijelu. SSG je kiseli glikoprotein sa molekulskom težinom od 45.000 daltona. Kršenje sinteze suhih hormona dovodi do poremećaja isporuke hormona u ciljne organe i obavljanja njihove funkcionalne aktivnosti. Koncentraciju suhih hormona u krvnom serumu povećavaju estrogeni i oralni kontraceptivi, a smanjuju androgeni, T4 i TSH.

Tabela 7. Referentne vrijednosti za serumske koncentracije suhog oka

Prekursori za biosintezu androgena i estrogena

17α-Hydroxyprogesterone

17a-Hydroxyprogesteron (17OH-P) je intermedijarni steroid u biosintezi glukokortikoida, androgena i estrogena, koji se sintetizira iz progesterona i 17a-hidroksipregnenolona. Izlučuje ga kora nadbubrežne žlijezde, jajnici i testisi, cirkulira krvlju, kako u slobodnoj tako i vezanoj, poput progesterona, sa dva proteina - albuminom i transkortinom. Poluživot 17OH-P je nekoliko minuta. Metabolizira se u jetri i izlučuje se urinom u obliku pregnanetriola.

17OH-P se proizvodi u malim količinama u jajnicima tokom folikularne faze, a zatim se njegova koncentracija povećava i ostaje konstantna tokom lutealne faze. Ako do oplodnje ne dođe, nivo 17OH-P se smanjuje. Kada se oplođeno jaje implantira, žuto tijelo nastavlja lučiti 17OH-P.

Analiza 17OH-P je veoma važna za dijagnozu kongenitalne adrenalne hiperplazije i otkrivanje nedostatka enzima odgovornog za nastanak ove bolesti.

Nivo 17OH-P u krvi je posebno indikativan i kritičan je u dijagnozi nedostatka 21-hidroksilaze kod novorođenčadi.

U odrasloj dobi, s djelomičnim ili kasnim nedostatkom enzima, osnovni nivo aktivnosti 17OH-P može biti normalan ili povećan

Tabela 8. Referentne vrijednosti za koncentraciju 17OH-P u krvnom serumu

Indikacije za određivanje:

• urođeni nedostatak enzima odgovoran za pojavu adrenalne hiperplazije;
• bolesti povezane s nedostatkom 21-hidroksilaze kod novorođenčadi (visoki nivoi 17OH-P);
• djelomično ili kasno manifestirani nedostatak 21-hidroksilaze (normalan ili visok nivo 17OH-P);
• diferencijalna dijagnoza neplodnosti.

Materijal za istraživanje:

• krvni serum;

Dehidroepiandrosteron

Dehidroepiandrosteron (DHEA) je jedan od najvažnijih androgena (tačnije, njihov prekursor), koji sintetizira kora nadbubrežne žlijezde i gonade iz 17OH-R. Katabolizira se u virilizirajuće androgene: androstendiol, testosteron i dihidrotestosteron.

Većina DHEA se modificira dodavanjem sulfata (DHEA-S), koji je biološki neaktivan, ali uklanjanjem sulfatne grupe vraća se aktivnost DHEA. DHEA je zapravo prohormon, ima kraći poluživot i veću brzinu metabolizma, zbog čega je njegova koncentracija u krvi 300 puta niža od razine DHEA-S.

DHEA karakteriše cirkadijalni nivo sekrecije sa maksimalnim oslobađanjem hormona u jutarnjim satima. Nema značajnih promjena u njegovoj koncentraciji tokom menstrualnog ciklusa. Za razliku od testosterona, DHEA u cirkulaciji nije povezan sa DES-om, pa promjene u koncentraciji vezujućih proteina ne utiču na njegove nivoe.

Tabela 9. Referentne vrijednosti za koncentracije DHEA u krvnom serumu

Indikacije za određivanje:

• hirzutizam;
• virilizacija;
• odloženi pubertet

Materijal za istraživanje:

• krvni serum;
• krvna plazma uz dodatak heparina.

Dehidroepiandrosteron sulfat

DHEA-S se sintetizira u nadbubrežnim žlijezdama (95%) i jajnicima (5%), izlučuje se urinom i čini glavnu frakciju 17a-ketosteroida. Određivanje koncentracije DHEA-S u krvnom serumu zamjenjuje ispitivanje 17a-ketosteroida u urinu.

DHEA-S se luči brzinom od 10-20 mg/24 sata (35-70 µmol/24 sata) kod muškaraca i 3,5-10 mg/24 sata (12-35 µmol/24 sata) kod žena, i bez cirkadijana ritam. Ne vezuje se za specifične proteine ​​plazme i stoga njihova koncentracija ne utiče na nivo DHEA-S. Međutim, DHEA-S se vezuje za serumski albumin.

Osim DHEA-S, DHEA je prisutan u cirkulirajućoj krvi, što čini ¼ odnosno ½ stope lučenja DHEA-S kod muškaraca i žena. Zbog visoke koncentracije DHEA-S u krvi, dugog poluživota i visoke stabilnosti, te zbog toga što je njegov izvor prvenstveno iz nadbubrežnih žlijezda, DHEA-S je odličan pokazatelj lučenja androgena.

Ako žene imaju povišene razine testosterona, tada je određivanjem koncentracije DHEA-S moguće utvrditi da li je to zbog poremećene funkcije nadbubrežne žlijezde ili bolesti jajnika.

Tabela 10. Referentne vrijednosti za koncentracije DHEA-S u krvnom serumu

Dob	Koncentracija (µg/ml)	Koncentracija (µmol/l)
Novorođenčad.
odrasli:
Period trudnoće
Period premenopauze
Postmenopauzalni period

Faktori konverzije:

• 1 ng/100 ml = 28,8 nmol/l;
• 1 nmol/l = 2,6 ng/ml
• 1 ng/ml = 368,46 µmol/l

Indikacije za određivanje:

• tumori nadbubrežne žlijezde;
• diferencijalna dijagnoza bolesti jajnika;
• osteoporoza;
• odloženi pubertet.

Materijal za istraživanje:

• krvni serum;
• krvna plazma uz dodatak heparina.

Autoimune bolesti reproduktivnog sistema

Fiziološko iscrpljivanje folikula jajnika kod žena se javlja u dobi od 45-55 godina. Prestanak funkcije jajnika prije 40. godine života ukazuje na stanje poznato kao prerano zatajenje jajnika. Posljedica ove bolesti je neplodnost. U nekim slučajevima uzrok tome može biti autoimuni proces povezan sa stvaranjem antitijela na polne hormone jajnika.

U nekim slučajevima, razvoj neplodnosti kod muškaraca je posljedica prisustva specifičnih antitijela u serumu ili sjemenoj plazmi.

Antitijela jajnika u krvnom serumu

Normalno, ženski krvni serum ne sadrži antitijela na jajnike. Ovarijalna antitijela (na antigene jajnika) otkrivena su kod žena s prijevremenom menopauzom, neplodnošću i vantjelesnom oplodnjom. Ova antitijela mogu proizvesti Leydigove ćelije, granularne ćelije jajnika i ćelije placente. Za određivanje antitijela na spolne hormone koristi se metoda indirektne imunofluorescencije i ELISA. ELISA metoda vam omogućava da odredite i ukupne i antitijela na različite klase imunoglobulina (IgG, IgM, IgA). Autoimuna antitijela mogu se otkriti u krvi žena mnogo godina prije razvoja kliničkih manifestacija preranog zatajenja jajnika.

Pored antitijela na jajnike, ELISA metoda vam omogućava da otkrijete antitijela na prozirnu membranu oocita - ukupna i antitijela na klase (IgG, IgM, IgA), koje imaju istu dijagnostičku vrijednost kao i antitijela jajnika.

Kod žena, jasna korelacija između koncentracije antitijela u serumu i prognoze plodnosti obično nije moguća.

Antispermalna antitijela u krvnom serumu

Normalno, ženski krvni serum ne sadrži antisperma antitijela. Kod muškaraca, antisperma antitijela nastaju kao rezultat autoimune reakcije na epitel sperme. Razlog za razvoj takve reakcije može biti trauma testisa, bakterijske i virusne infekcije ili kirurške operacije na testisu. Za određivanje antispermalnih antitijela trenutno se koristi ELISA metoda, koja je vrlo osjetljiva i specifična, a omogućava i kvantitativno određivanje antitijela različitih klasa imunoglobulina (IgG, IgM, IgA), što omogućava procjenu težine i težine. autoimunog procesa. Osim toga, kod muškaraca koncentracija antispermalnih antitijela je u korelaciji s obnavljanjem sposobnosti oplodnje.

Žene inače ne proizvode antitijela protiv antitagova spermatozoida, ali različiti etiološki faktori (infekcije, autoimune bolesti) mogu dovesti do gubitka imunološke tolerancije. Ako su antispermalna antitijela prisutna u krvi žene, tada su poremećeni procesi formiranja trofoblasta, rasta i formiranja placente, implantacije. A to dovodi do prekida trudnoće, gestoze, odgođenog razvoja fetusa i fetoplacentarne insuficijencije.

Testiranje na antisperma antitela preporučuje se svim parovima sa neobjašnjivom neplodnošću.

Horionski gonadotropin (hCG) u krvnom serumu

HCG je glikoprotein molekularne težine od približno 46.000, koji se sastoji od dvije podjedinice - alfa i beta. Povišeni nivoi hCG u krvnom serumu otkrivaju se već 8-12 dana nakon začeća. Tokom prvog tromjesečja trudnoće, koncentracija hCG se brzo povećava, udvostručujući se svaka 2-3 dana. Maksimalna koncentracija se javlja u 7-10. sedmici trudnoće, nakon čega koncentracija hCG-a počinje opadati i ostaje manje-više stabilna u drugoj polovini trudnoće.

Tabela 12. Srednje vrijednosti koncentracije hCG-a za skrining kongenitalnih malformacija fetusa u 2. i 3. trimestru

Alfa fetoprotein (AFP) u serumu

AFP je glikoprotein molekularne težine od približno 65.000 kDa, koji luče fetalna jetra i žumančana vreća. AFP u fetusu je glavni protein u serumu, a kod odraslih je sadržaj AFP u krvnom serumu neznatan. U drugom tromjesečju trudnoće, ako fetus ima Downov sindrom, koncentracija AFP-a je smanjena, a koncentracija hCG-a u krvi povećana. Uzimajući to u obzir, ELISA testiranje na AFP i hCG koristi se kao metoda masovnog prenatalnog pregleda trudnica, pomoću koje je moguće identificirati visokorizične grupe na osnovu prisustva malformacija ili Downovog sindroma u fetusa. Srednje vrijednosti koncentracije AFP u krvnom serumu za skrining kongenitalnih malformacija fetusa u drugom tromjesečju prikazane su u Tabeli 13.

Tabela 13. Srednje koncentracije AFP-a za skrining kongenitalnih malformacija fetusa u drugom trimestru

Slobodni estriol u krvnom serumu

Estriol je glavni steroidni hormon koji sintetiše placenta. Sadržaj estriola u krvi trudnice korelira s aktivnošću fetalnih nadbubrežnih žlijezda. Estriol prodire u krvotok trudnice, gdje se može odrediti njegova koncentracija u slobodnom stanju. Tokom trudnoće koja se normalno razvija, sinteza estriola se povećava u skladu sa povećanjem gestacijske dobi i rasta fetusa (tabela 14).

Tabela 14. Koncentracije estriola u krvnom serumu žene u dinamici fiziološke trudnoće

Period gestacije, sedmica	Srednja koncentracija estriola, nmol/l	Referentne vrijednosti estriola, nmol/l

U slučaju patologije (teški razvojni defekti centralnog nervnog sistema fetusa, urođene srčane mane, Downov sindrom, ograničenje rasta fetusa, hipoplazija nadbubrežne žlijezde fetusa, intrauterina smrt fetusa), koncentracija slobodnog stradiola u krvnom serumu trudnice smanjuje.

Srednje vrijednosti koncentracije slobodnog estradiola u krvnom serumu za skrining kongenitalnih malformacija u drugom tromjesečju trudnoće prikazane su u tabeli 15.

Tabela 15. Srednje koncentracije slobodnog estradiola u krvnom serumu za skrining kongenitalnih malformacija u drugom tromjesečju trudnoće

Kod Down i Edwardsovog sindroma, koncentracija slobodnog estradiola je obično 0,7 MoM.

Zaključno, napominjemo da će široko uvođenje potpune ELISA dijagnostike u kliničku praksu značajno povećati efikasnost dijagnostike i liječenja pacijenata s poremećajima reproduktivnog sustava.

17-OH-progesteron proizvode nadbubrežne žlijezde i jedan je od regulatora seksualne funkcije i menstrualnog ciklusa, utičući na sposobnost začeća i rađanja djeteta. U normalnim uslovima, njegov nivo u krvi je beznačajan, au ženskom organizmu podložan je značajnim fluktuacijama zbog menstrualnog ciklusa i trudnoće.

U prvoj fazi ciklusa jajnici luče 17-OH-progesteron u maloj količini, do sredine ciklusa, njegov nivo se lagano povećava i ostaje nepromijenjen u toku druge faze.

Ako je došlo do oplodnje i implantacije embrija, nivo hormona će početi postepeno da raste, ali ako nije došlo do začeća, vrednost 17-OH-progesterona će se ponovo smanjiti na minimum na početku nove faze ciklus.

Kada se naručuje test?

Ponekad, ako se sumnja na hormonski disbalans ili hiperplaziju (prekomerni rast) kore nadbubrežne žlijezde, propisuje se krvni test za mjerenje nivoa 17-OH-progesterona.

Ovo se obično dešava kada:

• neplodnost kod žena sa znacima hirzutizma (povećana dlakavost na tijelu),
• za menstrualne nepravilnosti,
• ako se sumnja na tumore nadbubrežne žlijezde.
• Ponekad se propisuje krvni test za djecu sa sumnjom na kongenitalnu hiperplaziju nadbubrežne žlijezde (adrenogenitalni sindrom).

Kako se vrši analiza

Kod žena se test na nivo 17-OH-progesterona radi u prvoj fazi ciklusa, 3-5 dana nakon početka menstruacije. Djeca se testiraju svaki dan, ujutro, na prazan želudac.

Normalne vrijednosti 17-OH-PG

Šta znače rezultati?

Mogu postojati tri opcije analize:

Nivo 17-OH-progesterona je normalan.

To znači da hormonske abnormalnosti nisu povezane sa korteksom nadbubrežne žlijezde ili jajnicima,

Nivo hormona je povećan.

Nivo hormona može porasti kod tumora jajnika ili nadbubrežnih žlijezda.

Blagi oblici povišenja hormona obično dovode do menstrualnih nepravilnosti i neplodnosti.

Povećanje nivoa 17-OH-progesterona javlja se kod kongenitalne adrenalne hiperplazije kod dece i odraslih.

Kod djece je to obično genetski uvjetovana patologija koja se prenosi na autosomno recesivan način kao defekt u jednom od enzima koji omogućava aktivnu metabolizam hormona. Kao rezultat kvara u ovom lancu dolazi do sinteze i akumulacije testosterona. Pri rođenju se otkrivaju znaci virilizacije - povećanje muških polnih karakteristika kod dječaka, s povećanjem penisa i skrotuma; kod djevojčica - znakovi lažnog hermafrdizma - povećanje klitorisa i usana, pogrešno uzeto za penis i skrotum . Djeca oba spola također razvijaju metaboličke poremećaje sa velikim gubitkom soli kalija i natrijuma.

Nivo 17-OH-progesterona je smanjen.

Ovo stanje se javlja kod Addisonove bolesti, kongenitalne ili stečene adrenalne insuficijencije. Osim toga, smanjenje razine hormona kod muškaraca javlja se u stanju lažnog hermafroditizma - kada je poremećena sinteza progesterona i zbog toga se poremeti normalno formiranje tijela prema muškom tipu.

Opće informacije o hormonu

17-OH-progesteron ili hidroksiprogesteron je jedan od međuproizvoda metabolizma hormona koji pripada grupi steroida.

Nastaje od dva prekursora - progesterona i 17-hidroksipregnenolona, ​​složenim transformacijama u nadbubrežnim žlijezdama u hormon kortizol.

Hidroksiprogesteron se također može proizvoditi u placenti i genitalijama, gdje se također pretvara u androstendion (ova supstanca je polazna tačka za sintezu bilo muškog ili ženskog spolnog hormona - testosterona).

Progesteron je ženski polni hormon. Njegov glavni zadatak je održavanje trudnoće kod pasa.

U kojim slučajevima se propisuju analize nivoa progesterona?

• procjena aspekata funkcije jajnika kod kuja i mačaka;
• određivanje vremena ovulacije za određivanje vremena parenja (kod kuja);
• predviđanje datuma rođenja;
• potvrda prisustva preostalog tkiva jajnika;
• procjena funkcije žutog tijela u slučajevima pobačaja;
• otkrivanje asimptomatskog estrusa;
• utvrđivanje prisustva lutealnih cista, itd.

U veterinarskoj praksi, nivoi progesterona se najčešće testiraju kako bi se odredilo optimalno vrijeme parenja. Ovo je izuzetno važno kod vještačke oplodnje smrznutim ili ohlađenim sjemenom, ili kada se mužjak nalazi na velikoj udaljenosti i potrebno je znati tačan datum parenja kako biste doveli ženku ili mužjaka.

Kako pripremiti životinju za istraživanje?

Nema potrebe za posebnom pripremom. Uzimanje krvi se obično radi ujutro na prazan želudac. Glavni uvjet je da životinja ne smije uzimati lijekove koji utiču na nivo progesterona.

Kada studija treba da se sprovede?

Nivo progesterona se može testirati svaka 2-3 dana, počevši od 3-5 dana nakon početka estrusa. Obično je analiza spremna u roku od 24 sata. Prosječno vrijeme analize je do 4 sata.

Koja metoda se koristi za sprovođenje istraživanja?

Studija se provodi pomoću enzimskog imunosorbentnog testa (ELISA).

Ovo je kvantitativna metoda za određivanje nivoa progesterona u serumu. Studija se izvodi u laboratorijskim uslovima korišćenjem odgovarajućeg imunoenzimskog analizatora uz upotrebu posebnih reagensa.

Princip određivanja progesterona zasniva se na upotrebi kompetitivne ELISA metode. Mišja monoklonska antitijela na progesteron su imobilizirana na unutrašnjoj površini jažica ploče. Progesteron iz uzorka za testiranje se takmiči sa konjugovanim progesteronom za vezivanje za antitela na površini jažice. Rezultat je plastični "sendvič" koji sadrži peroksidazu. Tokom inkubacije sa rastvorom tetrametilbenzidinskog supstrata, rastvori u jamicama postaju obojeni. Intenzitet boje, koji se određuje na analizatoru, obrnuto je proporcionalan koncentraciji progesterona u uzorku za testiranje.

Kako interpretirati rezultate analize?

Kvantitativna vrijednost progesterona u krvi određuje se u pre- i postovulatornom periodu. Nivo progesterona u krvnom serumu, kako kod različitih pasa tako i kod iste osobe (iz ciklusa u ciklus), može se prilično brzo promijeniti.

Prosječne brojke su predstavljene u sto.

Rezultati se mogu razlikovati od laboratorije do laboratorije. Ovo zavisi od podešavanja aparata i reagensa. Tačnu interpretaciju rezultata mora obaviti veterinar s odgovarajućim kvalifikacijama i iskustvom.

Optimalno vrijeme parenja:

Kada nivo progesterona dostigne 15,9 nmol/l (5 ng/ml), parenje se dešava nakon 24-48 sati.

Vještačka oplodnja ohlađenom spermom vrši se 4 dana nakon što nivo progesterona dostigne 7,95 nmol/l (2,5 ng/ml) ili 48 sati nakon nivoa od 15,9 nmol/l (5 ng/ml).

Umjetna oplodnja smrznutom sjemenom tekućinom obavlja se 5 dana nakon oznake od 7,95 nmol/l (2,5 ng/ml) ili 72 sata nakon oznake od 15,9 nmol/l (5 ng/ml)

Koja je korist od ovog istraživanja?

Određivanje vremena ovulacije omogućava vam da povećate ne samo postotak uspješnog parenja ili umjetne oplodnje, već i plodnost. I dodatne metode istraživanja temeljene na korištenju vaginalnih razmaza i