Длительность кровотечения и время свертывания крови. Методы определения длительности кровотечения Время кровотечения по дьюку

В противном случае даже незначительный порез способен нанести серьезный ущерб организму.

Кровь является важнейшим компонентом, который участвует во всех жизненных процессах. С помощью образования сгустков организм регулирует кровопотери. Поэтому так важно следить за уровнем тромбоцитов и других параметров, отвечающих за период кровотечения.

Почему крови необходимо сворачиваться?

Рисунок 1. Преобразование фибриногена в фибрин.

Процесс сворачивания крови очень важен. Он предотвращает значительные кровопотери и способствует заживлению ран. Образование тромбов происходит под действием белка (фибрина), который объединяет тромбоциты в сгустки, меняя консистенцию с жидкой на более густую, творожистую. Такая метаморфоза называется гемостазом.

В обычном состоянии кровь сохраняет текучесть, доставляя во все ткани кислород и питательные вещества, но в случае повреждения сосуда тромб предотвращает потери, сокращая время на восстановление. Этот процесс регулируется эндокринной системой.

При повреждении сосуда происходит образование веществ, способствующих формированию тромбов. Под их воздействием образуется тромбин и тромбопластин и распадаются тромбоциты. Тромбин преобразует фибриноген в фибрин (подобный сети из нитей), составляющий основу тромба. В ячейки этой сеточки попадают кровяные тельца, и тромб уплотняется. Через некоторое время кровотечение полностью прекращается (рис. 1).

Каковы методы исследования свертываемости крови?

В медицине существует множество тестов и анализов, позволяющих определить состояние здоровья человека. Это касается и свертываемости крови. Для исследований забор материала производят из пальца (капиллярная) или из вены (венозная кровь). Вот основные анализы (рис. 2):

Рисунок 2. Забор материала из пальца для анализа крови.

1. Уровень тромбоцитов. Определяется по капиллярной крови. Нормальные значения для взрослых составляют 150 – 400 г/л, у ребенка – 150 – 350 г/л.
2. Определение времени свертывания крови по Сухареву. По капиллярной крови из пальца. Начало процесса происходит между 30 и 150 секундами, а полное прекращение кровотечения занимает 180 – 300 секунд.
3. Определение свертываемости по Ли-Уайту. Предполагает изучение венозной крови. Полная остановка кровотечения в норме занимает от 5 до 10 минут.
4. Время кровотечения по Дуке определяется по капиллярной крови, оно должно прекращаться в течение 4 минут.
5. Определение тромбинового времени. Изучают венозную кровь. Нормативное значение – от 15 до 20 секунд.
6. Определение протромбинового индекса. Норма для венозной крови составляет 90 – 105%, а для капиллярной – 93 – 107%.
7. Расчет активированного частичного тромбопластинового времени (АЧТВ). Нормальное значение для венозной крови людей любого возраста и пола составляет от 35 до 50 секунд.
8. Уровень фибриногена. Определяется по венозной крови. В первые дни после рождения у детей он должен составлять 1,25 – 3 г/л, а по мере взросления достигает 2 – 4 г/л.

Эти и другие тесты составляют коагулограмму. Ее назначают в период беременности, при варикозе, болезнях печени и некоторых аутоиммунных заболеваниях.

Следует помнить, что свертываемость крови женщины изменяется во время менструального цикла или при приеме некоторых оральных контрацептивов.

Как проводится анализ крови на скорость образования тромбов?

Показаний для составления коагулограммы много. Практически каждому человеку приходилось сталкиваться с таким исследованием в течение жизни. Вот основные поводы для определения показателей свертывания крови:

Рисунок 3. Агрегация тромбоцитов образование белого тромба.

• перед и после проведения операции;
• при наличии подозрения на ДВС-синдром;
• при диагностировании гемофилии, тромбоэмболии и других болезней крови;
• при длительном кровотечении для определения причин такового;
• перед назначением препаратов, которые влияют на состав крови (Гепарин, Лепирудин, Этамзилат);

В лабораторных условиях полученный материал помещают в стерильную пробирку и ставят на водяную баню с температурой в 37°C. Пробирку наклоняют под углом в 45° и оставляют на 30 секунд, затем переворачивают на другую сторону. Лаборант замечает время, за которое кровь полностью загустела.

В результатах анализов фигурируют следующие показатели:

1. Агрегация. Свойство тромбоцитов объединяться между собой для формирования сгустка, который препятствует вытеканию крови из раны.
2. Адгезия. Способность тромбоцитов прилипать к поврежденным тканям, образуя препятствие на пути кровотока. Если этот показатель понижен, следует дополнительно обследоваться на наличие лейкоза или почечной недостаточности.
3. Уровень фибриногена. Белок, вырабатываемый печенью, который превращается в фибрин. Снижение этого показателя происходит при болезнях печени, токсикозе, недостатке витамина B12.
4. Тромбиновое время. Отрезок времени, необходимый фибриногену для преобразования в фибрин.

В зависимости от проводимого исследования определяют и другие значения свертываемости крови. Все они направлены на определение скорости образования сгустка и прекращения кровопотери при повреждении тканей (рис.3).

Как подготовиться к проведению анализов?

Чтобы получить достоверные результаты исследования, к анализу крови нужно готовиться:

• забор производят утром, натощак;
• алкоголь нельзя принимать в течение суток до анализа;
• курение прекращают за 4 часа;
• нужно сохранять спокойное состояние, избегать нервного напряжения.

При заборе венозной крови материал подлежит изучению в течение первых двух часов. В это время образец помещают в центрифугу и отделяют плазму, которая и проходит исследование.

Капиллярную кровь анализируют сразу после забора ее из пальца в лаборатории. Некоторые тесты предполагают анализ сразу после прокола пальца специальной иглой.

При расшифровке результатов и назначении лечения врач должен учитывать общее состояние пациента. На результат анализа способны повлиять такие обстоятельства:

• обезвоживание организма (повышение свертываемости);
• период менструации у женщин (снижение);
• период беременности (повышается);
• прием гормональных контрацептивов и других препаратов (повышение);
• прием лекарств для разжижения крови (антикоагулянтов) понижает свертываемость;
• значительные травмы и переливание крови.

Исказить результаты способно употребление жирной пищи накануне анализа или значительные физические нагрузки. Даже подъем по лестнице на 5 этаж повлияет на результат исследования. Не стоит ограничиваться в питье, особенно в жаркую погоду, но и сильно увеличивать суточную норму нельзя. Отдавать предпочтение лучше очищенной воде.

Как определяют период кровотечения?

Чтобы определить состояние кровеносной системы человека и время, которое необходимо для прекращения выделения крови, проводят тестирование по Дуке. Оно предполагает нанесение укола и определение длительности кровотечения.

Чтобы сделать укол необходимой глубины, используют иглу Франка. Это приспособление состоит из пружинного механизма, иглы и курка. Врач может регулировать нажатие на курок и введение иглы с точностью до миллиметра. Прокол делают на подушечке пальца или мочке уха глубиной в 3 – 4 мм.

На месте прокола начинает образовываться капля крови. Через равные промежутки времени (от 10 до 30 секунд в зависимости от интенсивности кровотечения) каплю промакивают бумагой. При этом к самой ране прикасаться нельзя. Уже через минуту капля начинает уменьшаться, а через 2 – 3 минуты бумага перестает окрашиваться кровью.

Норма составляет не более 4 минут при таком незначительном повреждении тканей.

Если кровотечение продолжается дольше, то это свидетельствует о снижении числа тромбоцитов в крови (тромбоцитопении).

Образование рыхлой пробки, которая препятствует вытеканию крови, с последующим ее уплотнением характеризуются адгезией и агрегацией. Эти показатели влияют на продолжительность кровотечения.

Важно отмечать отклонения от нормальных показателей в обе стороны. Если кровотечение продолжается слишком долго, то организм несет значительные потери. Но и слишком быстрое образование тромба плохо. Если в крови содержится много тромбоцитов, это может спровоцировать инфаркт, тромбоз или инсульт.

Свертываемость крови – норма

• беременность;
• заболевания печени;
• патологии сосудистой системы;
• варикозное расширение вен;
• склонность к тромбозам;
• аутоиммунные болезни.

Отклонения полученных значений лабораторных исследований в ту или другую сторону говорят о наличии заболеваний сосудов и сосудистых стенок, венозных болезнях, гепатитах, приобретенных или врожденных патологиях гемостаза, лейкозах, гемофилии.

Какой должна быть в норме длительность кровотечения по Дуке

Нормальной свертываемости крови мы обязаны фибрину, который входит в ее состав. Большие кровопотери чреваты анемией, слабостью, общим недомоганием, обморочным состоянием. Люди с плохой свертываемостью вынуждены следить за целостностью кожных покровов и опасаться травм.

Анализ на длительность кровотечения по Дуке сдают перед операцией или при склонности к кровотечениям. Если свертываемость плохая, проблему решают применением лекарств и народных средств.

Зачем проверяют свойство свертываемости крови

Исследования относительно характеристики свертываемости крови проводят перед некоторыми важными процедурами и манипуляциями:

• если предстоят роды;
• плановая операция;
• беспокоит варикозное расширение вен;
• аутоиммунные недуги;
• хронический геморрой;
• кровотечения стали регулярными.

Ежемесячно женщины переживают менструацию, если свертываемость оставляет желать лучшего, нужно пить кровоостанавливающие препараты. У мужчин на фоне этой особенности развивается гемофилия наследственного типа. Гемофилия – болезнь, при которой фибрин отсутствует полностью или частично. Люди, страдающие от гемофилии, редко доживают до 50 лет. Настороже нужно быть больным сахарным диабетом, длительность кровотечений у них может увеличиваться из-за применения антикоагулянтов.

Пару слов нужно сказать о слишком густой крови. Этот симптом не менее тревожный. Вязкая субстанция плохо циркулирует по сосудам, что может вызвать инсульт. Застойные явления не позволяют мозгу и внутренним органам получать достаточный объем кислорода и других полезных компонентов.

Когда кровь сворачивается моментально, неприятными последствиями становятся варикозное расширение вен, геморрой. Вот почему врачи не рекомендуют женщинам применять контрацептивы в виде таблеток, они делают кровь гуще.

Показатели длительности кровотечения по Дуке

Длительность кровотечения по Дуке – самый простой способ определить свертываемость. Проводят его следующим образом:

1. Вооружившись специальной иглой, медработник делает прокол кожи пациента. Игла Франка состоит из полого корпуса и курка, пружины. Последняя позволяет лаборанту контролировать глубину прокола.
2. Для пробы Дуке необходимо сделать минимально заглубленный прокол.
3. Проба Буке предполагает использование капиллярной крови, поэтому ее берут из пальца или мочки уха.
4. Каждые 15 секунд к участку прокола прикладывают бумагу. Цель – изучить, когда бумага станет незапятнанной.
5. Минимально отведенное для свертываемости крови время – 60 секунд, максимальное – 180 секунд.

В таблице ниже указаны основные показатели, которые дают понять, какая у больного свертываемость крови.

Какой должна быть норма длительности кровотечения, и как лечить патологию?

Продолжительность свертываемости крови – это один из важных показателей, который помогает определить ее качественный состав и оценить здоровье сосудов. Выяснять длительность свертывания крови рекомендуют людям с болезнями кровеносной системы, женщинам перед родами, пациентам при подготовке к хирургическим операциям. Врач должен знать, насколько организм пациента сможет препятствовать кровопотере. Норму времени кровотечения определяют методом Панченкова, Ли-Уайта, но одним из самых эффективных можно назвать метод Дуке.

Зачем проверять длительность свертываемости крови?

Интенсивность кровотечения – особенно важный параметр, так как он показывает состояние сосудов, их эластичность и целостность. Этот анализ помогает оценить уровень самозащиты организма от сильной кровопотери.

Процесс свертываемости крови проходит за счет специфического белка – фибрина. Его целью является образование тромбов и быстрое сгущение крови в месте повреждения. Без этого организм не может нормально функционировать. Именно фибрин обеспечивает своевременный «ремонт» сосуда, целостность которого нарушена.

Если параметр свертываемости у больного выше или ниже нормы, то такое состояние ведет за собой серьезные последствия. Если длительность кровотечения (норма 2-3 минуты) выше указанных границ, то человек имеет все шансы потерять большое количество крови вследствие сильной травмы, глубокого пореза или при хирургическом вмешательстве.

Делать анализ на скорость свертывания требуется в следующих случаях:

• В подготовительный период перед родами;
• Перед хирургической операцией;
• При развитии аутоиммунных заболеваний;
• При геморрое;
• При варикозном расширении вен;
• При тромбозе сосудов (тромбоцитопения);
• При часто повторяющихся кровотечениях.

Особую важность этот показатель имеет для женщин. В период беременности на раннем сроке высок риск выкидыша, если этот показатель выше нормы. Аборт или выкидыш ведут за собой кровопотерю, что в отдельных случаях приводит к летальному исходу. Если женщина имеет пониженную свертываемость, то остановить кровотечение достаточно сложно. Этот фактор важен и в момент критических дней.

Для мужчин такая особенность крови может быть признаком генетической болезни – гемофилии. Это заболевание напрямую связано со свертываемостью крови, так как при гемофилии у человека полностью или частично отсутствует белок фибрин. Такой характер болезни приводит к высокой смертности детей. Современная медицина способна диагностировать гемофилию даже у новорожденных.

Чем опасна высокая свертываемость?

Важно на регулярной основе проверять скорость свертывания, норма у женщин и мужчин не должна быть меньше 2-3 минут. Если эта скорость, наоборот, повышена, то у больной растет риск развития инсульта или инфаркта миокарда.

Густой крови трудно циркулировать по сосудам, что и приводит к развитию сердечно-сосудистых заболеваний, появлению геморроидальных узлов, варикозного расширения вен. Зачастую данная патология приводит к нарушению функционированию печени и мочевой системы.

В возрасте старше 40 лет и женщинам, и мужчинам важно следить за уровнем свертываемости, потому что в старшем возрасте кровь имеет свойство сгущаться из-за нехватки воды в организме, медленного обмена веществ. На этот показатель влияют вредные привычки, неправильное питание и обезвоживание.

Если говорить о методике, определяющей скорость свертывания по Дуке, то норма у детей не должна быть выше 4 минут. Заметить проблемы с кровеносной системой можно, если у ребенка частые кровотечения из носа, раны долго кровоточат, у девочек подросткового возраста могут быть обильные менструации.

Время кровотечения по Сухареву

Забор материала проводят только натощак. Для исследования берут капиллярную кровь. После прокалывания пальца первую каплю крови удаляют. Остальной объем крови собирают в капилляр, который далее специально раскачивается в стороны. С помощью секундомера замеряется время, которое занимает образование сгустка.

Время кровотечения по Дуке: особенности методики

Длительность кровотечения по Дуке тоже определяют по капиллярной крови, пациенту прокалывают мочки уха или безымянный палец. Эта процедура проводится специальной иглой Франка. На место прокола через каждыесекунд прикладывают специальную бумагу, которая впитывает выделившуюся кровь. Методика достаточно эффективная и быстро проводимая. Исследование считается завершенным, когда на бумаге не остаются пятна.

Часто методику Дьюка используют для оценки состояния тромбоцитов. Именно эти клетки крови первыми начинают работать, если стенка сосуда повреждена. Если сосуды эластичны, то они сжимаются при повреждении и закупоривают поврежденный участок.

Если оценивать время кровотечения по Дуке, норма у детей колеблется в пределах 2-4 минут. Кроме нормы времени кровотечения по Дуке, лаборанты определяют несколько показателей, которые показывают тромбоцитарную активность. Для того процесса проводят:

• Подсчет количества тромбоцитов;
• Оценку агрегации АДФ и тромбоцитов;
• Оценку способности тромбоцитов вступать в реакцию с коллагеном и адреналином;
• Оценку активности фактора Виллебрандта.

Этот метод исследования крови разработал американский ученый Вильям Дьюк. Открытие пришлось на начало XX века, но в те времена кровь исследовали только из мочки уха.

Проводить оценку свертываемости можно по Уайту, Дуке или Панченкову. Все указанные методы способны характеризовать уровень коагуляции, но лаборатории, где проводятся анализы, могут иметь разные нормативы. Важно сдавать анализ в одной лаборатории, чтобы правильно составлять или сравнивать таблицы с результатами.

Решать, уменьшить высокую свертываемость или, наоборот, ее повысить – это задача врача. Самостоятельно принимать, назначать или отменять прием лекарственных средств запрещается.

Время длительности кровотечения норма. Время и длительность кровотечения: норма и проведение анализа по Дюке

В профилактических целях или при выяснении причин каких-либо симптомов заболеваний обычно назначается ряд лабораторных исследований. При этом часто определяют свертываемость крови – норма данного показателя свидетельствует о нормальном функционировании печени, проходимости сосудов и токе биологической жидкости в венах. Любые отклонения говорят о стойких нарушениях гемостаза, которые необходимо лечить.

Показатели свертываемости крови – норма

• беременность;
• предоперационные исследования и период после хирургических вмешательств;
• заболевания печени;
• патологии сосудистой системы;
• склонность к тромбозам;
• аутоиммунные болезни.

Определить, какая норма показателей свертываемости крови нарушена и характеризует каждое из перечисленных состояний, можно по следующим значениям:

1. Время, за которое кровь сворачивается. Оно рассчитывается с того момента, как биологическая жидкость была взята для анализа, до начала свертывания. В здоровом организме это время составляет от 5 до 7 минут. Данный показатель свидетельствует об активности тромбоцитов, плазменных факторов, а также функционировании стенок сосудов.
2. Длительность кровотечения. Замеряется с момента повреждения кожного покрова до прекращения выделения крови из ранки. В норме это значение составляет не более 5 минут, оно характеризует состояние сосудистых стенок, балансе тромбоцитов и фактора VII.
3. Частичное активное тромбопластиновое время. Данный показатель предназначен для исследования концентрации фибриногена, а также уровня активации кровяных факторов. Значение не зависит от количества тромбоцитов, норма составляет от 35 до 45 секунд.
4. Протромбиновое время. Этот пункт позволяет выяснить, насколько соответствует норме содержание белков, отвечающих за свертываемость крови (тромбина и протромбина). Помимо концентрации, в результатах анализа обязательно указывается химический состав и процентное соотношение измеренных значений. В идеале это время от 11 до 18 секунд.

Стоит заметить, что норма свертываемости крови у беременных женщин несколько отличается от общепринятых показателей, так как в организме будущей матери появляется дополнительный круг кровообращения – маточно-плацентарный.

Свертываемость крови по Сухареву – норма

Данный анализ проводится либо через 3 часа после последнего приема пищи, либо на голодный желудок с утра. Кровь берут из пальца руки и наполняют ею специальную емкость, называемую капилляр, до отметки 30 мм. Затем посредством секундомера вычисляется время, через которое жидкость начинает медленнее наполнять сосуд, а значит, сворачиваться. Начало данного процесса в норме составляет от 30 до 120 секунд, окончание – от 3-х до 5 минут.

Свертываемость крови по Дуке – норма

Рассматриваемое исследование выполняется посредством иглы Франка, которой прокалывается мочка уха на глубину 4 мм. С момента прокола засекается время и каждыесекунд к ранке прикладывается полоска фильтровальной бумаги. Когда на ней перестают оставаться красные следы, анализ считается оконченным и вычисляется время свертываемости крови. Нормальный показатель составляет 1-3 минуты.

Свертываемость крови выше или ниже нормы

Отклонения полученных значений лабораторных исследований в ту или другую сторону говорят о наличии заболеваний сосудов и сосудистых стенок, венозных болезнях, приобретенных или врожденных патологиях гемостаза, лейкозах, гемофилии.

Время свертываемости крови у детей: норма и причины отклонений. Кровь – это важный компонент организма любого человека, благодаря которому он способен полноценно функционировать. В ней содержится информация о работе органов и тканей, которую она передает при помочи проведения анализа. Благодаря этому человек может легко адаптироваться к изменениям погоды, а также собственного организма. Одно из важных мест занимает свертываемость крови, способная обеспечивать органы полезными элементами, а также снабжать их информацией, касающейся состояния всего организма.

Основы свертывания

Чтобы организм мог работать без сбоев, кровь должна постоянно быть в одной структурной форме.

• она должна быть наделена нормальной густотой, чтобы не просачиваться через сосуды;
• но также она не должна быть очень густой, ведь тогда ее ток не сможет нормально проходить по капиллярам и иным сосудам.

Именно поэтому кровь должна иметь оптимальный баланс, способный контролироваться при помощи системы свертывания – коагуляция и антикоагуляция. Их совокупность называется коагуляционным гемостазом, и пока он работает без сбоев, организм способен нормально функционировать.

Нужно помнить, что нарушение свертываемости нередко становится причиной развития разных патологий, которые чаще всего связаны с сосудами или работой сердца. Также стоит знать, что кровь изменяет собственный состав при развитии серьезных заболеваний, благодаря чему можно диагностировать различные заболевания.

При проведении коагулограммы оценивается преобразование фракции крови, наделенной жидким состоянием, в эластичный и плотный сгусток. Такое явление носит название – время свертывания крови. Это делается при переходе белка из крови в состояние фибрина, который невозможно растворить.

Показаниями к проведению этой процедуры являются:

• склонность к тромбозу;
• расширение вен;
• наличие аутоиммунных болезней;
• частое, а также необоснованное появление на поверхности кожи гематом, даже при незначительных повреждениях;
• кровотечения любой формы;
• инфекционные патологии;
• травмы или ожоги;
• генетическая предрасположенность к нарушению свёртываемости;
• патологии сосудов и сердца;

• нарушения работы печени;
• длительный прием антикоагулянтов – лекарств, увеличивающих время свёртывания;
• поступление в больницу;
• беременность;
• пожилой возраст;
• курение;
• долгое употребление гормональных лекарств.

Кроме этого, коагулограмма является основным анализом, который проводится при проведении подготовки к операции у детей и взрослых, а также в иных случаях. При проведении данного исследования кровь берется из вены.

Показатели исследования

Определить наличие свертывающих свойств крови у ребенка можно при проведении ее анализа.

Для этого потребуется венозная кровь или из пальца:

• Время кровотечения – это отрезок времени, за который в месте повреждения кожного покрова образуется сгусток. При проведении такого исследования врачам удается понять степень развития тромбоцитов при серьезном повреждении, а также состояние стенок сосудов. Стоит знать, что у здоровых людей венозная кровь сворачивается на протяжении 5-10 минут, а пальцевая – не дольше 2 минут.

• Фибриноген – это белок плазмы, отвечающий за образование сгустка. Если у новорожденных детей его нормальный уровень составляет 1,25-3 г/л, то у взрослого человека – 2-4 г/л.
• Антитромбин – это своеобразный белок, обеспечивающий быстрое рассасывание сгустка.
• – это промежуток времени, за которое происходит сворачивание – норма составляет 11-17,8 с.
• АЧТВ – активированное тромбопластиновое время – его уровень независимо от возраста составляетс.
• Протромбин – это белок, являющийся основным компонентом тромбина. Норма этого элемента составляет%.

Существует большое количество показателей свертывания, входящие в состав коагулограммы. Однако диагностика основных проблем постоянно должна начинаться с вышеуказанных показателей. Дополнительные и специфические анализы берутся лишь по показаниям, чтобы получить более подробную и правильную информацию о функционировании системы гемостаза.

Правила подготовки и проведения анализа

Во время проведения коагулограммы у ребенка взятая проба крови выливается в колбу, в которой содержится определенный препарат, способный прекратить свертывание.

Чтобы получить достоверные результаты, доктору необходимо перед сдачей крови отменить больному некоторые лекарственные препараты, которые могут повлиять на коагулограмму.

Перед проведением исследования пациенту стоит соблюдать определенные правила:

• накануне сдачи не употреблять в пищу спиртные напитки и жирные блюда;
• необходимо постараться не перенапрягаться физически;
• следует оградиться от психических неурядиц;
• кровь стоит брать только утром;
• отказаться от курения нужно за 3-4 часа;
• прямо перед забором крови, взрослый и ребенок, несколько минут должны побыть в спокойном состоянии.

Если для проведения исследования у ребенка требуется кровь из пальца, то на коже делается маленький прокол при помощи скарификатора. Кровь из вены в количестве 20 мл берется по строгим правилам. После ее взятия ее следует доставить в лабораторию на протяжении 2 часов, где ее центрифугируют для получения плазмы. Именно этот компонент крови исследуется при проведении анализов коагулограммы и определения ее показателей.

Высокая и низкая свертываемость

Одним из важных показателей коагулограммы является время свертываемости крови. У детей норма будет несколько отличаться от взрослых, но при небольшом повреждении кожного покрова оптимальным временем образования сгустка является период 3-5 минут.

Если это время у детей значительно превышено, это является свидетельством того, что кровь не может быстро сворачиваться, а значит, в организме наблюдается развитие серьезных болезней, провоцирующих возникновение кровотечения.

Основными причинами низкой свертываемости являются:

• повышенный дефицит факторов, влияющих на свертывание;
• нарушения функций печени;
• применение гепарина и коагулянтов;
• ДВС-синдром (диссеминированное внутрисосудистое свертывание) в гипокоагуляционной стадии.

Если же анализы ребенка показали значительное уменьшение временного отрезка, во время которого происходит закупорка поврежденного кровеносного сосуда, это значительно повышает риск возникновения тромбов. Данное отклонение нередко можно заметить при тромбозе и тромбофилии – это патологические состояния, которые отличаются повышенным риском развития тромбообразования. Также причиной повышенной свертываемости крови является ДВС-синдром, а также частый прием гормональных составов.

Чтобы оградить себя от проблем со здоровьем, стоит регулярно проводить анализ крови, при помощи которого можно понять – нормально ли сворачивается кровь, а также есть ли в организме скрытые болезни.

Свертываемость крови происходит благодаря белку, который называется фибрин. Он создает тромбы и сгущает кровь. Этот процесс важен для полноценного функционирования всего организма. Он помогает избежать большой кровопотери в результате различных травм. Если показатели анализа крови далеки от нормы, это может повлечь за собой серьезные последствия, вплоть до летального исхода. Поэтому важно контролировать состояние крови, а также следить за целостностью стенок сосудов. Норма свертывания крови у здорового человека – 2-3 минуты после забора анализа.

Для чего проверяют свертываемость крови

Лабораторное исследование крови проводится при разных обстоятельствах, например:

• подготовка к родам;
• предоперационный период;
• варикоз;
• тромбоз;
• аутоиммунные болезни;
• геморрой;
• хронические кровотечения.

Пониженная свертываемость создает риск длительных кровотечений во время операции или в результате других травм. Большая кровопотеря опасна для организма. Для женщин возникает угроза во время родов или менструации. У мужчин может развиться наследственная болезнь – гемофилия. Это полное или частичное отсутствие белков, отвечающих за свертываемость крови. Женщины являются лишь носителями болезни. Почти половина детей, страдающих гемофилией, не доживают до зрелого возраста. Пониженное свертывание крови бывает на фоне сахарного диабета или из-за приема антикоагулянтов.

Может показаться, что отклонение свертываемости от нормы в сторону увеличения – это хорошо. Но это совсем не так. Подобная патология чревата опасными последствиями. У больного появляется угроза возникновения инсульта, так как слишком густая кровь плохо циркулирует по организму. Она не доносит до мозга достаточное количество кислорода и других необходимых веществ. В результате высокой свертываемости развивается варикозное расширение вен, геморрой и другие отклонения. Развивается эта патология из-за обезвоживания, при нарушениях работы печени, почек и мочевого пузыря. У женщин высокая коагуляция замечена во время приема контрацептивов.

Время коагуляции крови по Сухареву

Забор анализа по методу Сухарева проводится на голодный желудок или не менее трех часов после еды. Кровь берется из пальца. Особая подготовка к анализу не нужна. Одна особенность этого метода в том, что кровь исследуется только капиллярная.

Первую каплю крови пациента удаляют тампоном. Остальную порцию помещают в специальную колбу, которая раскачивается в обе стороны. То время, когда кровь перестает быть жидкой, и есть время свертываемости. По методу Сухарева оно должно составлять от 30 до 120 секунд. Период с начала образования фибрина до конца процесса свертывания не должен превышать пяти минут.

Время свертываемости крови по методу Сухарева – это возможность определить этап, когда фибриноген, растворимый в обычной среде, переходит в нерастворимую форму.

Метод Моравица

Данный метод по сей день широко используется в медицине. Это один из простейших способов, который определяет время свертывания крови. Рассмотрим, как выполняется анализ по Моравицу.

Перед сдачей анализа нельзя принимать пищу. За два-три дня до коагулограммы необходимо исключить алкоголь. Нельзя курить и пить кофе непосредственно перед забором крови. Специалисты рекомендуют натощак выпить стакан обычной воды. Это повысит эффективность исследования.

На лабораторное стекло наносится кровь больного, взятая из пальца или мочки уха. Секундомером засекают время. Каждые полминуты в кровь опускают специальную тонкую стеклянную трубку. Как только за ней потянется первая нить фибрина, время останавливают. Это и есть время свертывания крови по методу Моравица. Норма составляет от трех до пяти минут.

Метод свертываемости крови по Дуке

Подобную процедуру по упомянутому методу, как и по двум предыдущим, следует проводить утром на пустой желудок.

Пациенту делают прокол мочки уха так называемой иглой Франка. Каждыесекунд к месту прокола прикладывают специальную бумагу. Когда на ней перестают оставаться пятна крови, исследование считается завершенным. Нижняя граница нормального времени свертывания составляет 60 секунд, верхняя – 180 секунд.

Помимо этих двух способов, существует еще 30 для определения коагуляции. В зависимости от метода, время колеблется от двух минут до получаса.

Каждый человек порой получает какие-либо травмы – от малейших порезов до крупных ран. И в основном такие травмы сопровождаются кровотечением. Но не каждый раз приходится накладывать жгут или просто перематывать рану – при небольших кровотечениях оно останавливается само собой через некоторое время.

Причиной этого является продуманность человеческого тела. При кровотечении организм сам начинает «залатывать» место, откуда вытекает кровь. Такая система – одна из сложнейших в организме человека, направленная на защиту гомеостаза (внутреннего состояния) и жизни.

– процесс, затрагивающий много физиологических веществ и преобразований. Главную роль исполняют тромбоциты – это форменные элементы крови, одни из 4 главных ее компонентов, обладающие специфической способностью – изменять свои форму и свойства при наличии повреждения стенки сосуда.

Но для того, чтобы тромбоциты активировались, нужны еще многие факторы. Они носят название Факторы свертывания крови, содержащиеся преимущественно в тромбоцитах и плазме крови, а также и других клетках организма. Их количество составляет более 35, по сути большинство их - это белки, реже – низкомолекулярные вещества. Важную роль имеет белок, он образуется из фибрина и благодаря сети ниток, в состоянии которых он содержится в крови, он задерживает, чем способствует закупорку раны.

Или свертывание крови, проявляется сужением сосудов и прилипанием (адгезией) тромбоцитов к краям раны.

Таким образом кровоток на этом участке снижен, что дает возможность тромбоцитарному сгустку закрепиться, и когда он уже он образован, диаметр сосудов начинает увеличиваться, но к этому времени активируется сеть фибриногена, которая задерживает как тромбоциты, так и другие элементы крови, в том числе и эритроциты, через что цвет кровяного сгустка – красный.

Но иногда эти процессы нарушаются, ведь нестабильность даже одного из факторов может привести к усилению или, наоборот, уменьшению гемостаза. Поэтому, если человека беспокоит длительное время остановки малейшего кровотечения, ему следует обратиться к врачу и сдать анализ на свертывание крови.

Кому назначают анализ на свертываемость крови?

Данный анализ назначают далеко не всем пациентам, в отличие от общего и. Для этого нужны показания, которые ищет врач во время консультации или лечения.

В основном этот анализ сдают такие группы пациентов:

• пациенты, вызывающие подозрение на заболевания системы свертывания крови
• при болезнях сосудов
• при патологиях, требующих постоянного употребления разжижающих лекарственных препаратов
• при беременности, особенно в случае имеющихся в анамнезе выкидышей или с угрозой прерывания беременности
• в группе риска также являются пациенты с аутоиммунными заболеваниями
• при подготовке к оперативным вмешательствам и другим инвазивным процедурам

Подготовка и проведение процедуры анализа

Подготовительный этап, зависящий от пациента, при сдаче данного анализа играет очень важную роль, ведь несоблюдение простейших правил может сказаться на результатах, вследствие чего можно либо пропустить серьезное заболевание, либо, наоборот, лечить болезнь, которой у человека нет.

Во-первых, анализ на свертываемость крови сдается натощак. Натощак – это значит, что за некоторое время перед анализом (в среднем это 8 часов) нужно избежать приема пищи и различных напитков (кофе и даже чай). При этом не стоит ограничивать себя в количестве воды, но и не переусердствовать – лишняя жидкость тоже может нехорошо сказаться на результатах.

Употребление жирной, острой и жареной еды и алкоголя нужно ограничить еще дня за 3 до сдачи анализа. Курить сигареты нежелательно, нужно воздержаться от данной вредной привычки хотя-бы за пару часов до процедуры.

Важно также не прибегать к сильным физическим нагрузкам, ведь они могут повлиять на некоторые показатели свертывания крови.

Если пациент принимает какие-либо препараты, то нужно об этом сообщить врачу. Сама процедура включает в себя забор крови из вены, после чего кровь помещается в специальную пробирку с содержанием антикоагулянта цитрата натрия, разжижающего кровь. Потом данную кровь используют для определения основных параметров свертывания крови.

1. (ВК) – проверяется только при анализе с пальца, это время, за которое кровь после прокола останавливает течение
2. агрегация – свойство тромбоцитов склеиваться между собой и прилипать к стенке сосуда
3. адгезия – процесс изменения формы тромбоцитов на округлую с шипами
4. протромбиновый индекс – соотношение длительности свертывания плазмы пациента к такому же показателю здорового человека
5. тромбиновое время – интервал времени, за который из фибриногена образуется фибрин
6. фибриноген – белок, являющийся I фактором свертывания крови, образуется в печени. При активации превращается в фибрин, сеть которого задерживает тромбоциты, чем способствует остановке кровотечения
7. антитромбин III – фактор, отвечающий за антикоагуляцию
8. активированное частичное тромбопластиновое время – отрезок времени, за который под воздействием ионов Кальция (IV фактор) формируется кровяной сгусток (с)

Помимо основных показателей, в анализ могут входить также:

• время рекальцификации плазмы
• ретракция кровяного сгустка

Длительность кровотечения является скрининговым тестом для выявления нарушений первичного гемостаза. Метод основан на определении времени кровотечения из нанесённой на поверхности кожных покровов небольшой ранки стандартного размера. Это время зависит от способности сосудисто-тромбоцитарных гемостатических механизмов останавливать кровотечение из повреждённых мелких сосудов и капилляров и поэтому его продолжительность может характеризовать состояние первичного гемостаза. Оно может быть нарушено вследствие дефектов сосудистого звена, неполноценности функциональных свойств кровяных пластинок или дефицита/дефекта плазменных кофакторов тромбоцитарных реакций (фибриногена, фактора Виллебранда), выраженной тромбоцитопении.

При снижении числа тромбоцитов менее 100х109/л имеется прямая связь между степенью тромбоцитопении и удлинением времени кровотечения. Длительность кровотечения коррелирует также с геморрагическими тенденциями при тромбоцитопатиях и болезни Виллебранда. Увеличение времени кровотечения наблюдается и при тяжёлой анемии (Ht

Помимо решения диагностических задач тест рекомендуется проводить для контроля за эффективностью применяемой гемостатической терапии, для своевременного выявления угрозы геморрагических осложнений при проведении дезагрегационной терапии. Длительность кровотечения должна быть определена у больного в период предоперационной подготовки, т.к. значительная часть больных с патологией тромбоцитарного звена гемостаза имеет скрытую форму заболевания, которая тем не менее дает тяжёлые кровотечения в ходе операции и после неё.

В настоящее время используют в основном два принципа при определении длительности кровотечения: проведение теста в условиях, не затрудняющих течение первичного гемостаза, и в условиях, препятствующих его осуществлению. К первым методам относится тест Duke, при выполнении которого колотую ранку глубиной 3,5 мм наносят скарификатором в нижней части мочки уха; выступающие капли крови осторожно, не прикасаясь к раневой поверхности, снимают фильтровальной бумагой через 15-30 с. Регистрируют время от момента нанесения укола до прекращения кровотечения, которое в норме не превышает 3 мин. Тест малочувствителен и не позволяет выявить нарушения при тромбоцитопатиях лёгкой и средней тяжести. Тем не менее этот метод должен применяться при первичном обследовании больного с неустановленной причиной первичного геморрагического диатеза. Только при неизмененных результатах теста Duke могут использоваться методы определения длительности кровотечения с применением воздействий, затрудняющих течение первичного гемостаза. При патологических исходных значениях метод Duke в дальнейшем может быть применён для оценки эффективности проводимой гемостатической терапии.

Наиболее распространёнными за рубежом методами определения длительности кровотечения второй группы являются различные модификации метода Ivy, который предложил проводить исследование на верхней конечности в условиях веностаза, затрудняющего сосудистые реакции. Веностаз достигается наложением на плечо обследуемого манжетки тонометра под давлением 40 мм рт.ст. В тесте Borchgrevink и Waaler на внутренней поверхности предплечья делают два разреза по 13 мм длиной и 1 мм глубиной. Существуют специальные приспособления, обеспечивающие стандартность наносимого повреждения. В норме длительность кровотечения из такой ранки менее 9 мин 37 с и менее 12 мин 4 с у мужчин и женщин, соответственно). После выполнения этого исследования на предплечье остаются небольшие рубцы, что затрудняет его применение с целью мониторинга.

А.С.Шитиковой предложена модификация метода Ivy (А.С.Шитикова. //Лаб. дело.-1975. - No10. - с. 597-602).

Определение длительности кровотечения проводится в условиях веностаза, но с нанесением колотой ранки в области концевой фаланги III-IV пальца. Кроме венозного застоя, повышению чувствительности метода служит второй, затрудняющий гемостаз фактор - погружение кончика пальца с нанесённой ранкой в жидкость, что позволяет оценить не только длительность кровотечения, но и объем кровопотери. Чувствительность метода значительно выше, чем теста Duke.

Техника исследования. В две пластиковых бакпечатки разового пользования наливают по 5 мл стерильного физиологического раствора пипеткой, предназначенной только для этой цели. Предплечье обследуемого свободно лежит на столе. На плечо накладываю манжетку тонометра и нагнетают воздух до 40 мм рт.ст. Это давление сохраняется в течение всего времени исследования. Обрабатывают спиртом концевую фалангу III или IV пальца и общепринятым способом с помощью скарификатора разового пользования производят укол в подушечку концевой фаланги точно на глубину 3,5 мм и одновременно включают секундомер.

Кончик пальца с нанесённой ранкой погружают в верхнюю часть раствора, наблюдают в проходящем свете за вытекающим столбиком крови, и в момент полного прекращения кровотечения выключают секундомер. В случае большой кровопотери и сильного окрашивания кровью раствора палец перед концом кровотечения переносят в другой стаканчик для точного установления момента его завершения.

С помощью пипеток на 5 и 0,2 мл (маркированных «для крови» и не используемых для другой цели) оценивают интенсивность кровотечения путём измерения добавочного объёма жидкости сверх налитых 5 мл. Определение времени кровотечения необходимо повторить два раза, но одномоментно не более двух раз, т.к. после третьего укола длительность начинает увеличиваться. Диагностическое значение имеет наибольшая из установленных величин. При значительном увеличении времени кровотечения исследование следует прекратить на 10-15 минуте, а при большой кровопотере - и раньше. В случае отрицательных результатов исследования у больных с клиническими признаками геморрагического диатеза необходимо проводить повторные определения в разные сезонные периоды и особенно во время обострения заболевания, поскольку для болезни Виллебранда и многих тромбоцитопатий характерна волнообразность в изменении показателей.

Пределы нормальных колебаний длительности кровотечения составляют у взрослых мужчин 70-196 с (Х=118 с), у женщин 87-208 с (Х=135с). Объем кровопотери - 0,01-0,40 мл. При необходимости статистической оценки полученных данных должны обрабатываться Ig значений длительности кровотечения, поскольку они у здоровых лиц имеют характер lg-нормального распределения.

Предотвращение возможных ошибок. Для минимизации нестандартности наносимого повреждения желательно, чтобы в лаборатории метод выполнял один квалифицированный лаборант. Нельзя усиливать гиперемию кожных покровов путём слишком энергичного протирания спиртом. Для устранения влияния на результат исследования спазма периферических сосудов в холодное время года больной, пришедший с улицы, должен находиться в помещении не менее двух часов. При значительном отклонении комнатной температуры от обычной (18-24°С) нужно контролировать температуру физиологического раствора, в который погружается палец, т.к. при его температуре ниже 16° и выше 33° время кровотечения удлиняется.

При первичном обследовании больные не должны принимать ацетилсалициловую кислоту и другие, отрицательно влияющие на функцию тромбоцитов лекарства, по крайней мере за 7-10 дней до исследования.

Метод не применим для оценки функции сосудисто-тромбоцитарного гемостаза при коллаптоидном состоянии, выраженной анемии.

Длительность кровотечения по Дуке в норме составляет 2-3 мин.

Время кровотечения характеризует эластичность кровеносных сосудов и их способность к сокращению при травме, а также состояние тромбоцитарной системы гемостаза (способ­ность к адгезии и агрегации). Практическое значение имеет удлинение времени кровотече­ния. Оно отражает нарушение первичного гемостаза вследствие тромбоцитопений, тромбо-цитопатий, нарушения сосудистой стенки или сочетания этих факторов. Причины патологи­ческих изменений длительности кровотечения по Дуке приведены в табл. 1.33.

Таблица 1.33. Заболевания и состояния, при которых	может меняться время кровотечения
Увеличение времени	Укорочение времени
Тромбопеническая болезнь Верльгофа	Чаще всего бывает следствием техничес-
Атромбопеническая пурпура	кой ошибки при проведении теста или
	свидетельствует о повышенной спасти-
Отравление фосфором	ческой способности капилляров
Геморрагический диатез
Спленомегалический цирроз печени
Длительный прием некоторых лекарств (аспирин)
Кровотечения с гипофибриногенемией
Пороки сосудов с недоразвитием сокращения прекапилляров
(микроангиопатии)
ДВС-синдром

Плазмодии малярии в крови

Плазмодии в мазке крови в норме отсутствуют.

Обнаружение плазмодиев в мазке крови или толстой капле является единственным бес­спорным доказательством наличия малярии. Если при подозрении на малярию при одно­кратном исследовании плазмодиев в крови обнаружить не удается, необходимо через 8-12 ч провести повторное исследование; иногда необходимы многократные исследования.

Различают 4 вида плазмодиев.

P.vivax - Malaria tertiana - возбудитель трехдневной малярии;

P.falciparum - Malaria tropica - возбудитель тропической малярии;

P.malariae - Malaria quartana - возбудитель четырехдневной малярии;

P.ovale - типа Malaria tertiana - возбудитель трехдневной малярии.

При острых приступах малярии имеется определенная закономерность изменений крови. Во время озноба появляется нейтрофильный лейкоцитоз со сдвигом влево. В период лихорад­ки количество лейкоцитов несколько уменьшается. При появлении пота и при апирексии на­растает моноцитоз. В дальнейшем после 2-4 приступов появляется анемия, которая особенно рано и быстро развивается при тропической лихорадке. Анемия в основном гемолитического характера и сопровождается повышением содержания ретикулоцитов. В мазках крови обнару­живают пойкилоцитоз, анизоцитоз, полихроматофилию эритроцитов. При присоединении уг­нетения костного мозга количество ретикулоцитов уменьшается. Иногда отмечается картина пернициозоподобной анемии. СОЭ при малярии значительно повышается.

Значение крови трудно переоценить: она разносит по тканям кислород и питательные вещества, помогает в регулировании работы организма, транспортируя гормоны и другие активные вещества, способствует регуляции температуры и выполняет массу других задач.

Очевидно, что уменьшение объема крови отрицательно сказывается на общем функционировании организма.

Однако природой предусмотрен механизм защиты от чрезмерных кровопотерь – способность крови загустевать и сворачиваться, закрывая поврежденный участок. Уровень свертываемости крови – своего рода показатель выживаемости организма.

Кровь представляет собой не однородную жидкость, а взвесь множества клеток в водно-белковом растворе – плазме.

Различают множество видов кровяных клеток, которые (несколько упрощая) можно разделить на три группы.

• Первая – эритроциты, они же красные кровяные клетки, транспортирующие в ткани кислород.
• Вторая – лейкоциты, белые кровяные клетки, поглощающие и нейтрализующие чужеродные объекты (вирусы, бактерии и т. п.).
• Третья – тромбоциты, клетки, ответственные за способность крови сворачиваться.

При нарушении целостности стенки сосуда из поврежденных тканей выделяются особые вещества, так называемые факторы свертывания (в основном это белки).

Они активизируют тромбоциты и заставляют их прилипать к краям раны и соединяться друг с другом, образуя плотный сгусток, закрывающий поврежденный участок.

В свою очередь тромбоциты тоже выделяют особое вещество, которое активизирует растворенный в плазме белок фибриноген.

Он начинает превращаться в белок фибрин, способный образовывать длинные эластичные тяжи, в которых «застревают» эритроциты и лейкоциты. Благодаря этому сгусток, закрывающий рану, становится плотнее, а ее края начинают стягиваться.

Процесс свертывания крови характеризуется множеством показателей.

1. Уровень тромбоцитов – количество клеток, отвечающих за процесс свертывания крови.
2. Длительность кровотечения – время, проходящее с момента нарушения целостности сосуда до образования кровяного сгустка.
3. Время свертываемости – продолжительность образования кровяного сгустка.
4. Протромбиновое время – скорость активации определенного фактора (а именно фактора VII, проконвертина), участвующего в «запуске» процесса свертывания на ранних стадиях. Этот фактор активизирует образование тромбина – вещества, способствующего превращению фибриногена в фибрин. Иными словами, это скорость образования кровяного сгустка после воздействия веществ из тканей поврежденного сосуда.
5. Тромбиновое время – непосредственно скорость превращения фибриногена в фибрин.
6. Активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ) – длительность образования кровяного сгустка без участия внешних факторов, т. е. без повреждения сосудистых стенок и выделения соответствующих веществ, исключительно за счет факторов, изначально присутствующих в крови в неактивном состоянии.
7. Уровень фибриногена – количество белка фибриногена, способного превращаться в фибрин.
8. Уровень антитромбина III – содержание в крови белка антитромбина III, препятствующего свертываемости крови. Этот белок нужен в крови для того, чтобы процессы свертывания, условно говоря, не запускались без серьезного повода. Повышенная свертываемость крови не менее опасна, чем пониженная – она часто становится причиной образования тромбов и закупорки кровеносных сосудов.

Значения этих показателей для детей в возрасте от 3 до 14 лет практически одинаковы:

• количество тромбоцитов в тысячах на 1 кубический миллилитр крови – 180-320; у девочек в подростковом возрасте при начале менструальных кровотечений количество тромбоцитов может снижаться до 75-220;
• длительность кровотечения – может определяться в соответствии с разными методиками: по Дьюку норма составляет 2-4 мин., по Айви и Ли-Уайту – менее 8 мин., по Сухареву менее 5 мин.;
• время свертываемости – от 2 до 5 мин.;
• протромбиновое время – 11-15 с;
• тромбиновое время – 15-18 с;
• АЧТВ – в пределах 24-35 с; конкретные показатели могут значительно различаться в зависимости от метода определения и используемых реактивов;
• уровень фибриногена – 2-4 г/л;
• уровень антитромбина – 101-131 % – у детей от года до 6 лет, 95-134 % – у детей от 6 до 11 лет, 96-126 % – у подростков до 16 лет.

Важность этих показателей и их роль в процессе свертывания крови стоит рассмотреть отдельно.

Время кровотечения

Существует множество методов исследования длительности кровотечения, различающихся способом забора крови и способом проведения.

В настоящее время особенно широко используются три метода:

• Айви:
• Дьюка;
• Сухарева.

Длительность кровотечения по Айви определяют следующим образом: на плече пациента закрепляется тонометр, с его помощью нагнетается давление 40 мм рт. ст, затем на внутренней стороне предплечья делается небольшой надрез лезвием. После этого на секундомере засекается время, а к разрезу каждые полминуты прикладывается специальный фильтр, поглощающий кровь. Когда на фильтре не остается следов крови, считается, что кровотечение прекратилось.

Данный метод можно применять только с детьми старшего возраста и подростками – он считается достаточно агрессивным.

Метод Дьюка более популярен и считается более щадящим. Для пробы по этому методу не нужно использовать тонометр и делать надрез – достаточно небольшого прокола пальца или мочки уха специальной иглой Франка. К месту прокола также прикладывают бумажный фильтр, но уже не каждые полминуты, а каждые 15 секунд. Норма свертываемости крови при исследовании по Дьюку не превышает 4 минут.

Этот способ используется шире и чаще применяется у детей.

Метод Сухарева выглядит следующим образом: образец крови берется из пальца, затем помещается в пробирку; пробирка наклоняется из стороны в сторону, пока образец крови не начнет густеть. Норма от начала до конца свертывания составляет не более 5 минут.

Протромбин

Протромбин – белок, который в процессе свертывания крови превращается в тромбин; тромбин, в свою очередь, запускает процесс превращения фибриногена в фибрин.

При анализе крови обращают внимание на такой показатель, как протромбиновое время.

Это время, в течение которого кровь под воздействием тканевых факторов образует сгусток.

Для детей до 14 лет это время в норме составляет от 11 до 15 с; у грудных детей этот показатель может быть несколько больше – от 14 до 16 с.

Увеличение протромбинового времени свидетельствует о нарушениях в процессе синтезирования протромбина или фибриногена.

Причиной этому могут стать:

• болезни печени либо повышенная нагрузка на печень в результате интоксикации;
• дефицит витамина К, способствующего выработке протромбина;
• дефицит кальция;
• уменьшение числа тромбоцитов вследствие аллергии, лучевой болезни или иных нарушений;
• анемия;
• гемофилия;
• повышенный уровень гепарина (белка, препятствующего свертыванию крови).

Уменьшение протромбинового времени может быть вызвано:

• избытком витамина К;
• повышенным уровнем тромбоцитов;
• генетическими сбоями, нарушающими выработку определенных факторов свертывания.

Тромбиновое время

Тромбиновое время – это время, за которое фибриноген превращается в фибрин на последних этапах процесса свертывания.

В норме у детей до 14 лет и взрослых тромбиновое время составляет 15-18 с, у грудных младенцев этот показатель может быть несколько выше.

Повышение тромбинового времени может свидетельствовать о серьезных нарушениях, таких как:

• заболевания печени;
• ДВС-синдром (диссеминированное внутрисосудистое свертывание крови);
• острый лейкоз;
• тяжелая интоксикация.

Однако причиной повышения тромбинового времени может стать и сравнительно безобидная нехватка витамина С.

Понижение тромбинового времени может быть вызвано такими причинами, как:

• острая форма инфекционного заболевания (гриппа, туберкулеза, пневмонии);
• ДВС-синдром в начальной стадии.

Также тромбиновое время может понижаться после перенесенных серьезных травм или ожогов.

Фибриноген

Из всего вышеописанного можно понять, что фибриноген – белок, из которого образуется фибрин – крайне важен для нормального процесса свертывания крови. Уровень фибриногена для детей до 14 лет составляет от 2 до 4 граммов на литр крови, у грудных младенцев – от 1,5 до 3 граммов на литр.

Снижение уровня фибриногена могут вызывать:

• ДВС-синдром;
• серьезные нарушения работы печени; тяжелые интоксикации;
• нехватка витаминов С и В;
• генетические нарушения.

Повышение могут вызывать:

• инфекционные заболевания в острой форме;
• наличие злокачественных опухолей;
• сахарный диабет.

Антитромбин

Антитромбин III – крайне важный белок, регулирующий уровень свертываемости крови, препятствующий ее чрезмерному загустению и образованию тромбов. Для оценки общего состояния крови знать уровень антитромбина необходимо.

Повышение уровня антитромбина наблюдается при:

• острых воспалительных процессах в организме;
• остром вирусном гепатите;
• нехватке витамина К.

Понижение уровня антитромбина может сопровождать:

• заболевания печени;
• ДВС-синдром;
• сепсис;
• врожденные нарушения синтеза антитромбина.

Причины отклонения от нормы

Наиболее частыми причинами изменения показателей свертываемости крови являются ДВС-синдром, гемофилия, интоксикации и острые воспалительные процессы. Эти состояния чаще всего диагностируются по результатам коагулограмм. Однако не стоит забывать о том, что изменения в составе крови могут отражать и иные патологические процессы в организме.

На состояние крови влияет множество факторов; в ней так или иначе «отражается» любое нарушение нормального состояния организма. Поэтому необходимо обращать внимание на любые нестандартные результаты анализов, особенно когда дело касается здоровья ребенка.

Принцип. Определяется длительность кровотечения из капилляров после прокола кожи скарификатором.

Ход работы. Определение может проводиться при проколе пальца или мочки уха. Глубина прокола должна быть не менее 3мм – только при этом условии кровь из ранки выделяется самопроизвольно, без нажима. Сразу после прокола включают секундомер. Первую каплю крови не удаляют ватой, как обычно, а прикасаются к ней фильтровальной бумагой, которая впитывает кровь. Далее снимают фильтровальной бумагой выступающие капли крови через каждые 30 секунд. Постепенно капли крови становятся все меньше. Когда следы крови перестанут оставаться, секундомер выключают.

Источники ошибок: недостаточно глубокий прокол, поспешное снятие капель крови, прикосновение фильтровальной бумагой к коже, что способствует остановке кровотечения.

Нормальные величины. Длительность кровотечения по Дуке составляет 2-4 минуты.

Диагностическое значение. Практическое значение имеет удлинение времени кровотечения, что наблюдается при тромбоцитопениях, заболеваниях печени, недостаточности витамина С, злокачественных опухолях и др. При гемофилии этот тест остается в пределах нормы.

Определение времени свертывания капиллярной крови (по Сухареву)

Принцип. Определяется время образования сгустка крови в капилляре Панченкова.

Ход работы. Прокалывают кожу, удаляют первую каплю крови. Набирают самотеком кровь в чистый сухой капилляр Панченкова до метки «70-75» (25-30делений) без пузырьков воздуха и включают секундомер. Наклоном капилляра перемещают кровь на середину трубки. Через каждые 30 секунд наклоняют капилляр поочередно вправо и влево под углом 45 градусов. При этом капилляр необходимо плотно держать в руке, чтобы сохранить более высокую и постоянную температуру свертывающейся крови. В начале исследования кровь свободно перемещается внутри капилляра, а затем ее движение замедляется и появляется «хвостик» из нитей фибрина – это говорит о начале свертывания крови. При полном свертывании кровь перестает двигаться. Моменты начала и конца свертывания крови засекают по секундомеру.

Нормальные величины. Начало свертывания: 30 секунд – 2 минуты;конец свертывания: 3-5 минут.

Диагностическое значение. Удлинение времени свертывания крови наблюдается при тяжелой недостаточности факторов, участвующих во внутреннем пути образования протромбиназы, дефиците протромбина и фибриногена, а также при передозировке гепарина.

8.4. КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ПО ТЕМЕ «ГЕМОРРАГИЧЕСКИЕ ДИАТЕЗЫ»

1. Что обозначает термин «Геморрагические диатезы»?

2. На какие группы делятся геморрагические диатезы?

3. Как проводится лабораторная диагностика тромбоцитопении, тромбоцитопатии, коагулопатии, вазопатии?

4. Морфология тромбоцитов.

5. Функции тромбоцитов.

6. Методы подсчета количества тромбоцитов в крови.

7. Нормальное количество тромбоцитов в крови.

8. Причины тромбоцитопений и тромбоцитозов.

9. Какой механизм гемостаза характеризует длительность кровотечения и время свертывания капиллярной крови?

10. Длительность кровотечения в норме и при различных видах геморрагических диатезов.

11. Время свертывания капиллярной крови в норме и при тромбоцитопении, коагулопатиях, вазопатиях.

ГРУППЫ И РЕЗУС-ПРИНАДЛЕЖНОСТЬ КРОВИ

На поверхности клеток крови человека имеется большое количество структур, которые относятся к антигенам, то есть при попадании в организм другого человека стимулируют выработку антител. Их называют также изоантигенами [от греч. isos одинаковый], так как они встречаются у представителей одного вида, в отличие от гетероантигенов [от греч. heteros иной, другой], которые имеются у других видов млекопитающих.

Основатель науки о группах крови Карл Ландштейнер в 1901г. обнаружил различия в крови людей, которые впоследствии были обозначены как группы крови системы АВ0. Долгое время сведения о групповых различиях относились только к эритроцитам. Позднее стало известно, что такие различия присущи и другим компонентам крови: лейкоцитам, тромбоцитам, белкам плазмы. К настоящему времени открыто 26 систем антигенов эритроцитов (АВ0, Rh-резус, MNS, Kell, Lewis и др.), включающих 270 антигенов, системы антигенов лейкоцитов (HLA, NA, NB, NC), тромбоцитов (HPA) и 10 систем белков плазмы. С позиций современной имуногематологии, каждый человек имеет свою собственную уникальную группу крови - набор антигенов, которые могут явиться причиной иммунологической несовместимости при переливании крови и её компонентов, беременности, трансплантации органов.

Однако в практической медицине под группами крови традиционно понимают сочетания только антигенов эритроцитов системы АВ0, так как именно они в первую очередь определяют совместимость при переливании крови.

9.1. ГРУППЫ КРОВИ СИСТЕМЫ АВ0

Группа крови (в традиционном понимании) – это сочетание антигенов эритроцитов системы АВ0, которое генетически предопределено и не изменяется в течение жизни.

К системе групп крови АВ0 относятся два групповых антигена (агглютиногена) - А и В и два вида антител к ним, которые в настоящее время принято обозначать анти-А и анти-В антитела взамен использовавшихся ранее α- и β- изогемагглютининов.

Уникальность системы АВ0 состоит в том, что в плазме у неиммунных людей имеются естественные антитела к отсутствующему на эритроцитах антигену. Во всех других системах эритроцитарных антигенов антитела не являются врожденными и могут появиться только вследствие антигенной стимуляции (переливания крови, беременности).

Различные сочетания антигенов и антител системы АВ0 образуют 4 группы крови, которые по международной номенклатуре обозначаются буквами по названию имеющихся антигенов: 0, А, В и АВ.

Таблица 35

Группы крови системы АВ0

Чаще у людей бывает первая (35%) и вторая группа крови (35-40%), реже – третья (15-20%) и четвертая (5-10%) группы.

В большинстве случаев антиген А обладает большой антигенной силой, то есть дает с антителами анти-А выраженную реакцию агглютинации. У 3-5% людей со второй группой и у 25-30% людей с четвертой группой крови антиген А имеет слабые антигенные свойства. Его обозначают как антиген А 2 . Слабые виды антигена А дают с антителами анти-А слабую агглютинацию (мелкую, позднюю), что может привести к ошибкам при определении группы крови.

Антитела анти-А так же, как антиген А, могут быть представлены двумя разновидностями, различающимися по времени действия – анти-А 1 и анти-А 2 . Антитела анти-А 1 относятся к антителам быстрого действия, а анти-А 2 - замедленного действия. Поэтому при определении группы крови исследование необходимо проводить в течение 5 минут.

В сыворотке у многих новорожденных групповые антитела отсутствуют. Они появляются обычно в течение первых месяцев жизни, и титр их постепенно нарастает, достигая максимума в возрасте 10-20 лет. В старости и при иммунодефицитных состояниях титр антител может снижаться.

Клиническое значение групп крови очень велико, так как дает возможность без осложнений переливать кровь и её компоненты от одного человека (донора) другому человеку (реципиенту).

В настоящее время для переливания используют только компоненты крови. Цельную кровь переливают в исключительных случаях – по жизненным показаниям и при отсутствии необходимых гемокомпонентов. Чаще всего для трансфузий применяют эритроцитную массу и плазму, желательно той же группы крови, к которой относится реципиент. В случае необходимости и в небольших количествах (до 500мл) возможно переливание эритроцитной массы не одногруппной, а совместимой с реципиентом крови.

При переливании крови и эритроцитной массы неукоснительно придерживаются правила: эритроциты донора не должны содержать антигена, соответствующего антителам реципиента, так как в этом случае происходит агглютинация и массивный гемолиз введенных донорских эритроцитов - опасное для жизни гемотрансфузионное осложнение. Небольшое количество эритромассы 0(I) группы крови, эритроциты которой не содержат антигенов А и В, можно перелить реципиенту с любой группой крови, поэтому лиц с I группой крови называют «универсальные доноры». До 500 мл эритроцитной массы А(II) и В(III) групп крови можно перелить, кроме одногруппных, только лицам с АВ(IV) группой крови. Эритроцитная масса АВ(IV) группы крови даже в небольших количествах не может быть перелита ни одной группе, кроме IV, зато в нее можно перелить небольшое количество эритромассы всех групп. Поэтому лиц с АВ(IV) группой крови называют «универсальными реципиентами».

При переливании плазмы крови учитывают антитела донора. Плазма донора не должна содержать антител, направленных против антигенов реципиента. Плазма 0(I) группы крови содержит оба агглютинина – α и β и ее нельзя переливать ни в какую группу крови, кроме I. Небольшое количество плазмы II и III групп крови может быть перелито только в 0(I) и одноименные группы. Плазма АВ(IV) группы не содержит агглютининов и может быть перелита (в небольшом количестве) людям с любой группой крови.

9.1.2. Методы определения группы крови

Определение групп крови проводится в соответствии с приказом МЗ РФ №2 от 9.01.98 «Об утверждении инструкций по иммуносерологии».

В настоящее время для определения группы крови используются 2 группы методов.

1. Методы, в основе которых лежит реакция агглютинации:

Прямая реакция с поликлональными реагентами (стандартными изогемагглютинирующими сыворотками I-III групп) или с моноклональными реагентами (цоликлонами анти-А и анти-В);

Перекрестный метод.

2. Методы гелевой технологии (сочетание реакции агглютинации и гель-

фильтрации).

Определение группы крови системы АВ0 при помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток

Принцип. Выявляют агглютиногены эритроцитов с помощью реакции агглютинации со стандартными сыворотками, содержащими агглютинины. По наличию или отсутствию агглютиногенов в исследуемых эритроцитах судят о групповой принадлежности крови.

Реагенты.

1. Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки 0(I), А(II) и В(III) групп двух разных серий каждой группы.

2. Стандартная изогемагглютинирующая сыворотка АВ(IV) группы.

3. Изотонический раствор хлорида натрия - 0,9% раствор NaCl.

Специальное оснащение:

Подготовительная работа. Определение групп крови должно производиться при хорошем освещении и при температуре 15-25ºС. Флаконы со стандартными сыворотками ставят в специальный штатив в следующем порядке: слева – стандартные сыворотки 0(I) группы (одна сзади другой), в середине – стандартные сыворотки А(II) группы и справа – стандартные сыворотки В(III) группы. Отдельно ставят стандартную сыворотку АВ(IV) группы крови, употребляемую в качестве дополнительного контроля. В каждый флакон со стандартной сывороткой опускают сухую чистую глазную пипетку. Для промывания стеклянных палочек в химический стаканчик наливают воду. В стаканчик с изотоническим раствором опускают глазную пипетку.

Техника определения группы крови при помощи стандартных сывороток. На верхней части пластинки пишут фамилию и инициалы человека, у которого определяют группу крови. Делят стеклографом пластинку на 6 частей: по 3 в 2 ряда. В левом столбце сверху подписывают анти-А+В; в среднем столбце – анти-В; в правом столбце – анти-А. Под соответствующими обозначениями на пластинку с помощью глазной пипетки наносят по одной большой капле (0,1мл) изогемагглютинирующей сыворотки 1-3 групп двух разных серий – всего 6 капель. Каждую пипетку сразу же опускают в тот же флакон с сывороткой, из которого она была взята. Кровь для исследования берут из пальца. Помещают одну каплю крови в лунку предметного стекла или на нижнюю часть пластинки. Наносят чистой сухой стеклянной палочкой маленькие капли крови рядом с каждой каплей стандартной сыворотки. При этом капли крови должны быть примерно в 10 раз меньше капель сывороток. Перемешивают капли стандартных сывороток с находящимися рядом каплями крови стеклянной палочкой. После размешивания каждой капли стеклянную палочку промывают в стаканчике с водой и насухо вытирают ватой или фильтровальной бумагой. Замечают время. В течение 3 минут периодически покачивают пластинку. Через 3 минуты в те капли, где наступила агглютинация, добавляют по 1 капле изотонического раствора NaCl и периодически покачивают пластинку еще в течение 2 минут. Через 5 минут после перемешивания капель оценивают результаты реакции.

Трактовка результатов реакции. Реакция агглютинация в каждой капле может быть положительной или отрицательной. При положительной реакции, то есть при наличии агглютинации, в смеси появляются видимые на глаз красные зерна склеенных эритроцитов. Сыворотка при этом полностью или частично обесцвечивается. При отрицательной реакции, то есть отсутствии агглютинации, жидкость остается равномерно окрашенной в красный цвет. Результаты реакций в каплях с сывороткой одной и той же группы должны совпадать. Если агглютинация наступила во всех каплях, то есть исследуемая кровь относится к АВ(IV) группе, то для исключения неспецифической агглютинации дополнительно проводят контрольное исследование со стандартной сывороткой АВ(IV) группы. Для этого на пластинку наносят 1 большую каплю стандартной сыворотки АВ(IV) группы и рядом с ней – маленькую каплю исследуемой крови. Сыворотку и кровь перемешивают и наблюдают за ходом реакции в течение 5 минут, периодически покачивая пластинку. Отсутствие агглютинации в этой капле подтверждает АВ(IV) группу исследуемой крови. Появление агглютинации с сывороткой АВ(IV) группы говорит о неспецифическом характере наблюдающейся агглютинации.

Таблица 36

Оценка результатов определения группы крови при помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток

(-) отсутствие агглютинации

(+) наличие агглютинации.

Определение группы крови системы АВ0 с помощью цоликлонов анти-А и анти-В

Принцип. Такой же, как при определении групп крови со стандартными сыворотками – то есть выявление агглютиногенов в исследуемых эритроцитах с помощью агглютининов, содержащихся в цоликлонах анти-А и анти-В.

Реагенты: цоликлон анти-А (розового цвета) и цоликлон анти-В (голубого цвета).

Цоликлоны анти-А и анти-В содержат моноклональные антитела анти-А и анти-В (иммуноглобулины класса М) и не содержат антитела иной специфичности. Цоликлоны представляют собой разведенную асцитную жидкость мышей – носителей гибридом анти-А и анти-В.

Техника определения. Определение групп крови должно производиться при хорошем освещении и при температуре 15-25ºС. Определение может производиться в нативной крови с консервантом или в крови без консерванта, в том числе взятой из пальца. Размечают пластинку на 2 части. Левую часть пластинки подписывают «анти – А», правую – «анти – В». Наносят по одной большой (0,1мл) капле цоликлонов анти-А и анти-В под соответствующими обозначениями. Наносят по одной маленькой капле крови (в 10 раз меньшей, чем капли реагентов) рядом с каждой каплей цоликлона. Перемешивают капли крови с реагентом стеклянной палочкой, промывая после перемешивания палочку в воде и вытирая её насухо. Замечают время. Периодически покачивая пластинку, ждут 3 минуты. Агглютинация эритроцитов с цоликлонами обычно наступает в первые 3-6 секунд, но оценку результатов реакции ведут через 3 минуты, чтобы не пропустить позднюю агглютинацию со слабыми разновидностями антигена А или В.

Трактовка результатов. Результат реакции может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации эритроцитов, видной невооруженным глазом в виде мелких красных агрегатов, быстро сливающихся в крупные хлопья. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты не обнаруживаются.

Таблица 37

Оценка результатов определения группы крови системы АВ0

при помощи цоликлонов анти-А и анти-В

(-) – отсутствие агглютинации

(+) – наличие агглютинации.

Определение группы крови системы АВ0 перекрестным методом

Принцип. Одновременное определение агглютиногенов эритроцитов исследуемой крови с помощью стандартных сывороток и агглютининов исследуемой сыворотки с помощью стандартных эритроцитов.

Реагенты.

1. Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки 0(I)αβ, А(II)β и В(III)α групп двух разных серий каждой группы.

2. Стандартные эритроциты групп 0(I), А(II) и В(III).

3. Изотонический раствор хлорида натрия - 0,9% NaCl.

Специальное оснащение: белая пластинка со смачиваемой поверхностью, глазные пипетки, химические стаканчики, стеклянная палочка, вата, спирт, скарификаторы.

Подготовительная работа. Определение групп крови должно производиться при хорошем освещении и при температуре 15-25ºС. Флаконы со стандартными сыворотками ставят в специальный штатив в следующем порядке: слева – стандартные сыворотки 0(I) группы (одна сзади другой), в середине – стандартные сыворотки А(II) группы и справа – стандартные сыворотки В(III) группы. В каждый флакон со стандартной сывороткой опускают сухую чистую глазную пипетку. В штатив устанавливают пробирки или флаконы со стандартными эритроцитами в следующем порядке: слева группы 0(I), в середине – группы А(II) и справа – группы В(III). Для промывания стеклянных палочек в химический стаканчик наливают воду. В стаканчик с изотоническим раствором NaCl опускают глазную пипетку.

Техника определения. Кровь для исследования берут из вены или пальца в сухую пробирку. Кровь центрифугируют или оставляют стоять на 20-30 минут для отделения сыворотки. Для лучшего отделения сыворотки следует через 3-5 минут отделить сверток от стенок пробирки, обведя его стеклянной палочкой. Делают на пластинке обозначения стеклографом в соответствии с таблицей. В верхней части пластинки у соответствующих обозначений наносят по одной большой капле (0,1мл) стандартных изогемагглютинирующих сывороток I-III групп двух разных серий. В нижней части пластинки у соответствующих обозначений наносят по одной маленькой капле (0,01мл) стандартных эритроцитов I-III групп крови. Из пробирки с исследуемой кровью осторожно, чтобы не взболтать эритроциты, пипеткой отсасывают сыворотку и наносят её по одной большой капле (0,1мл) на капли стандартных эритроцитов. Со дна пробирки этой же пипеткой набирают эритроциты и наносят их по одной маленькой капле (0,01мл) рядом с каждой их 6 капель стандартных сывороток. Перемешивают стеклянной палочкой во всех 9 каплях сыворотку с эритроцитами. После перемешивания каждой капли палочку промывают в воде и насухо вытирают. Замечают время. В течение 3 минут периодически покачивают пластинку. Через 3 минуты в те капли, где наступила агглютинация, добавляют по 1 капле изотонического раствора NaCl и периодически покачивают пластинку еще в течение 2 минут. Через 5 минут после перемешивания капель оценивают результаты реакции.

Таблица 38

Оценка результатов определения групп крови перекрестным методом

Трактовка результатов. Реакция агглютинация в каждой капле может быть положительной или отрицательной. При положительной реакции, то есть при наличии агглютинации, в смеси появляются видимые на глаз красные зернышки склеенных эритроцитов. Сыворотка при этом полностью или частично обесцвечивается. При отрицательной реакции, то есть отсутствии агглютинации, жидкость остается равномерно окрашенной в красный цвет.

Результаты реакций, полученных при помощи стандартных сывороток и стандартных эритроцитов, должны совпадать, то есть указывать на содержание агглютиногенов и агглютининов, соответствующих одной и той же группе крови.

9.2. РЕЗУС-ПРИНАДЛЕЖНОСТЬ КРОВИ

Система антигенов эритроцитов Резус, вторая по активности после системы АВ0, открыта в 1940 году К. Ландштейнером и Винером. Свое название антиген получил от обезьяны Macacus Rhesus, у которой он был обнаружен. Резус-фактор содержится на эритроцитах, лейкоцитах, тромбоцитах, в разных органах и тканях, а также в тканевой жидкости и околоплодных водах человека. Образование антигена резус начинается с 8-10 недели эмбрионального развития.

В настоящее время система Резус насчитывает более 75 антигенов, пять из которых являются клинически значимыми: D, C, Е, е. Отсутствие антигена D обозначают буквой d. Самым сильным антигеном системы Резус является антиген D, который и подразумевается под термином «резус-фактор». Именно по наличию или отсутствию на эритроцитах антигена D кровь делится на резус-положительную (Rh+) и резус-отрицательную (rh-). Различные сочетания антигенов резус в крови отдельных людей составляют 28 групп (фенотипов), которые представляют собой набор антигенов резус – по одному от каждого родителя, (например, СсDеe, ССddЕе). Четырнадцать фенотипов содержат антиген D и являются резус – положительными, а другие 14 не содержат антигена D и их относят к резус – отрицательным. Однако такая оценка резус-принадлежности крови применяется лишь для реципиентов. Доноры же считаются rh(-), если у них на эритроцитах не содержится ни антиген D, ни антиген С, ни антиген Е, то есть при фенотипе ccddee. Это связано с тем, что, хотя антигены С и Е менее активны, чем D, к ним также могут вырабатываться антитела.

Количество резус-положительных и резус–отрицательных людей различается у представителей разных рас. У европеоидов, в том числе и в РФ, доля rh(-) лиц составляет в среднем 14-16%, в то время как среди монголоидов rh(-) фенотип встречается менее чем у 1% населения, и резус-конфликты у них чрезвычайно редки.

У 1-3% резус-положительных лиц на эритроцитах содержится слабый вариант антигена D (D u), который дает мелкую, сомнительную агглютинацию с антителами анти-D. В этих случаях резус-принадлежность крови реципиентов и беременных женщин оценивают как rh(-), а кровь доноров – как Rh (+).

Система Резус в отличие от системы АВ0 не имеет естественных антител. Антитела антирезус появляются только после иммунизации резус-отрицательного организма в результате переливания резус-положительной крови или беременности резус-положительным плодом. Антитела к резус-антигенам сохраняются несколько лет, иногда всю жизнь. В большинстве случаев титр антител со временем постепенно снижается, но при повторном попадании в организм резус-антигена резко (лавинообразно) возрастает.

Резус антитела различаются по специфичности (анти-D, анти-С, анти-Е и др.) и по серологическим свойствам (полные и неполные). Полные антитела вызывают агглютинацию эритроцитов в солевой среде при комнатной температуре, а неполные – при повышенной температуре и в коллоидной среде (при добавлении желатина, полиглюкина, сывороточного белка). Полные антитела (IgM) синтезируются в начале иммунной реакции и вскоре исчезают из крови. Неполные антитела (IgG) появляются позже и являются причиной развития гемолитической болезни новорожденных, так как проходят через плаценту и вызывают гемолиз эритроцитов плода.

Определение резус-принадлежности крови основанона реакции агглютинации эритроцитов исследуемой крови с антителами, содержащимися в реагентах антирезус. Реагенты антирезус делятся на 2 группы: с полными и неполными антителами. Реагенты, содержащие полные антитела класса IgM, дают реакцию агглютинации в солевой среде. К ним относятся цоликлоны анти-D супер, анти-С супер, анти-Е супер, стандартные сыворотки антирезус анти-D с полными антителами и др. Реагенты, содержащие неполные антитела класса IgG (цоликлон анти-D, стандартные универсальные реагенты антирезус анти-D, анти-DС, анти-DСЕ и т.д.), дают реакцию агглютинации только в коллоидной среде. В зависимости от формы содержащихся в реагенте антител определение резус-принадлежности крови проводится в разных условиях (в солевой или коллоидной среде, при комнатной температуре или при нагревании), поэтому к каждому реагенту прилагается инструкция по его использованию. В настоящее время предпочтение отдается моноклональным реагентам антирезус (цоликлонам). Для определения антигенов системы Резус используется также гелевая технология.

Определение резус-принадлежности крови при помощи цоликлона анти-D супер (анти-D IgM моноклонального реагента)

Принцип. А нтиген D исследуемых эритроцитов выявляют реакцией агглютинации в солевой среде с моноклональными антителами анти-D, содержащимися в цоликлоне анти-D супер.

Цоликлон анти-D супер изготовлен на основе культуральной жидкости клеточной гетерогибридомы, полученной в результате слияния человеческой лимфобластоидной линии и миеломной клеточной линией мыши. Реагент содержит моноклональные полные антитела анти-D класса IgM и не содержит антител иной специфичности, поэтому может быть использован для выявления антигена D в эритроцитах любой группы крови.

Реагенты : цоликлон анти-D супер; стандартные Rh(+) и rh(-) эритроциты – для контроля специфичности реакции.

Техника исследования. Определение антигена D с помощью цоликлона анти-D супер можно производить в консервированной крови, в крови, взятой без консерванта, а также в крови из пальца.

На пластину со смачиваемой поверхностью наносят большую каплю (около 0,1мл) цоликлона анти-D супер, а рядом - маленькую каплю (0,01-0,05мл) крови и смешивают кровь с реагентом стеклянной палочкой. Ждут 20-30 секунд, а затем периодически покачивают пластинку. Через 3 минуты оценивают результаты реакции.

Трактовка результатов. При наличии агглютинации кровь оценивается как резус-положительная, а при отсутствии агглютинации – как резус-отрицательная. Для контроля специфичности при каждом исследовании необходимо ставить реакцию со стандартными D-положительными и D-отрицательными эритроцитами. Результаты определения резус-принадлежности исследуемой крови учитывают как истинные только в том случае, если со стандартными резус-положительными эритроцитами реагент дал реакцию агглютинации, а со стандартными резус-отрицательными эритроцитами агглютинации нет.

Образцы крови, которые при исследовании цоликлоном анти-D супер дали отрицательный результат, необходимо дополнительно тестировать с помощью реагентов, содержащих неполные антитела IgG для выявления антигена D u (поликлональной сывороткой или моноклональным анти-D реагентом).

9.3. КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ К ГЛАВЕ «ГРУППЫ И РЕЗУС-ПРИНАДЛЕЖНОСТЬ КРОВИ»

1. Что означает понятие «Группа крови» в практической медицине и с позиций современной иммуногематологии?

2. Дайте характеристику групп крови системы АВ0.

3. Какими методами можно определить группу крови?

4. Какой принцип лежит в основе всех методов определения группы крови?

5. Какие реагенты используются для определения группы крови прямой реакцией?

6. Опишите результаты определения второй группы крови с помощью прямой реакции.

7. Почему перекрестный метод определения группы крови так называется?

8. Реагенты для перекрестного метода определения группы крови.

9. Результаты определения третьей группы крови перекрестным методом.

10. Что такое цоликлоны?

11. Результаты определения четвертой группы крови с цоликлонами.

12. Какие правила необходимо соблюдать при переливании эритроцитной массы и плазмы крови?

13. Какие антигены относятся к системе Резус?

14. В чем заключается различие между системами антигенов АВ0 и Резус?

15. Клиническое значение антигенов системы Резус.

16. По какому принципу кровь доноров и реципиентов относят к резус-положительной или резус-отрицательной?

17. Какие реагенты могут использоваться для определения резус-принадлежности крови?

18. Чем различаются цоликлоны анти-D и анти-D супер?

19. Что такое антиген D u ? Его клиническое значение.

20. Фенотип резус-отрицательного донора.