L'étude est réalisée le 19-23ème jour du cycle menstruel (5-7 jours avant la menstruation prévue), sauf indication contraire du médecin traitant. 3 jours avant la prise de sang, exclure l'activité physique. Il est recommandé de donner son sang strictement le matin de 7h à 11h, à jeun (au moins 8 heures après avoir mangé, boire de l'eau comme d'habitude), au repos pendant au moins 30 minutes, avant de prendre des médicaments. Si l'arrêt du médicament n'est pas possible, le médecin traitant doit en être informé. L'utilisation d'analogues synthétiques de la progestérone (duphaston) n'affecte pas le résultat de l'étude.

• Description

"PROGESTERONE-IFA"

La progestérone est une hormone sexuelle féminine, son principal organe cible est l'utérus (prolifération de l'endomètre, facilitant l'implantation d'un ovule fécondé). Il est synthétisé par le corps jaune, pendant la grossesse - par le placenta, une certaine quantité est produite par les testicules et les glandes surrénales. Au cours de la phase folliculaire, sa quantité dans le sang est minime ; après l'ovulation, son niveau augmente, stimulant l'épaississement de l'endomètre et la préparation à l'implantation d'un ovule fécondé. Pendant la grossesse, l'hormone réduit la sensibilité de l'utérus aux substances qui provoquent sa contraction, sa concentration augmente progressivement de la 5e à la 40e semaine de grossesse, augmentant de 10 à 40 fois. L'étude est prescrite pour le diagnostic des irrégularités menstruelles, le suivi des patientes présentant une ovulation provoquée et l'évaluation du risque d'avortement à un stade précoce.

Description

Endocrinologie - 17-OH progestérone (ELISA), sang, ng/ml

Délais d'exécution : 7-10 jours ouvrés*.
Biomatériau : sang.

Description:

Le sang pour la recherche est donné de 8h00 à 9h00
Possibilité de réaliser une étude urgente : OUI, en 1 jour
Préparation de l'étude : chez la femme, l'étude est réalisée le 5-6ème jour du cycle menstruel normal, sauf indication contraire du médecin traitant. Assurez-vous d'indiquer le jour du cycle.
Référence : La 17-OH progestérone (17-hydroxyprogestérone) est un stéroïde produit dans les glandes surrénales, les gonades et le placenta, un produit métabolique de la progestérone et de la 17-hydroxyprégnénolone. Dans les glandes surrénales, la progestérone 17-OH est convertie en cortisol, et dans les glandes surrénales et les ovaires, elle est convertie en androstènedione (précurseur de la testostérone et de l'estradiol). Pour la progestérone 17-OH, les fluctuations quotidiennes dépendantes de l'ACTH sont caractéristiques (similaire au cortisol, les valeurs maximales sont détectées le matin, minimales la nuit). Chez la femme, la production de 17-OH progestérone dans les ovaires fluctue au cours du cycle menstruel. La veille du pic de l'hormone lutéinisante (LH), il y a une augmentation significative de la 17-OH progestérone, suivie d'un pic qui coïncide avec le pic de LH au milieu du cycle, après quoi il y a une diminution à court terme, suivie d'une augmentation en corrélation avec le niveau d'estradiol et de progestérone. Les taux de 17-OH-progestérone dépendent de l'âge, avec des valeurs élevées observées pendant la période fœtale et immédiatement après la naissance. Au cours de la première semaine de vie, les niveaux de progestérone 17-OH chutent et restent constamment bas pendant l'enfance, augmentant progressivement pendant la puberté, atteignant les concentrations adultes.
Indications d'utilisation : Diagnostic et suivi des patients atteints d'hyperplasie congénitale des surrénales et d'autres formes de déficit en 21-hydroxylase et autres enzymes impliquées dans la synthèse des stéroïdes. Hirsutisme, troubles du cycle et infertilité chez la femme, tumeurs des glandes surrénales.
Unités : ng/ml
Indicateurs normaux ::
norme de l'indicateur (ng / ml)
nouveau-nés 9,9 – 33,0
enfants (1-12 ans) 0,07 - 1,2
hommes 0,5 – 2,4
femmes
phase folliculaire 0,2 – 1,2
phase lutéale 1.0 - 3.1
ménopause 0,2 – 1,3
grossesse
1 trimestre 1,3 - 3,0
2 trimestre 2,0 - 5,0
3e trimestre 5,0 - 8,3
Interprétation des résultats:
Le niveau de 17-OH progestérone dans le sang augmente avec l'hyperplasie congénitale des surrénales, une maladie autosomique récessive génétiquement déterminée qui se développe dans la plupart des cas en raison d'un déficit en 21-hydroxylase, ainsi qu'en raison d'un déficit d'autres enzymes impliquées dans la synthèse de stéroïdes. Le manque de ces enzymes entraîne une diminution du taux de cortisol et d'aldostérone et l'accumulation de produits intermédiaires, dont la 17-OH progestérone.
Une diminution du niveau de cortisol par des mécanismes de rétroaction provoque une production accrue d'ACTH, ce qui entraîne une augmentation de la production de molécules précurseurs, ainsi que d'androstènedione, qui est convertie en testostérone active dans les tissus, puisque cette voie de synthèse reste débloquée. Le déficit enzymatique peut être de gravité variable. Avec l'hyperplasie surrénale congénitale chez la petite enfance, la virilisation se développe en raison d'une augmentation de la production d'androgènes par les glandes surrénales, et une violation de la synthèse de l'aldostérone peut être partiellement compensée par l'activation de mécanismes de régulation. Dans les cas plus graves, le déficit en 21-hydroxylase entraîne une profonde altération de la synthèse des stéroïdes avec une diminution des taux d'aldostérone et une perte de sels potentiellement mortels.
Le déficit enzymatique partiel observé chez l'adulte peut également être héréditaire, mais initialement latent sans manifestations cliniques. Le défaut de synthèse enzymatique peut évoluer avec l'âge ou sous l'influence de facteurs pathologiques et provoquer des modifications fonctionnelles et morphologiques des glandes surrénales, s'apparentant à un syndrome congénital. Il provoque des troubles du développement sexuel pendant la période prépubère, et peut également être à l'origine d'hirsutisme, de troubles du cycle et d'infertilité chez la femme postpubère.
La teneur en 17-OH-progestérone augmente pendant la grossesse, ce qui est une norme physiologique.
Une diminution du taux de 17-OH-progestérone est observée dans la maladie d'Addison - insuffisance primaire du cortex surrénalien, ainsi que dans le pseudohermaphrodisme chez l'homme, associé à un déficit de l'enzyme 17a-hydroxylase.
Maladies et affections caractérisées par une augmentation du taux de 17-OH progestérone dans le sang :
hyperplasie congénitale des surrénales due à un déficit en 21-hydroxylase ou en 11-b-hydroxylase ;
certains cas de tumeurs surrénales ou ovariennes ;
grossesse.
Maladies et affections caractérisées par une diminution du taux de 17-OH progestérone dans le sang :
la maladie d'Addison ;
pseudohermaphrodisme chez l'homme.

Etudes ELISA :

Diagnostic en laboratoire des troubles de l'appareil reproducteur (partie 2)

Nechaev VN, Ph.D.

Détermination du niveau de prolactine

La première étape de l'examen en laboratoire des personnes des deux sexes souffrant de troubles de la reproduction, sur recommandation de l'OMS, est la mesure de la concentration prolactine(hormone du lait) dans le sérum (plasma) du sang. La prolactine n'affecte pas directement l'activité fonctionnelle des gonades, tandis que le niveau de prolactine dans le sang est clairement en corrélation avec l'état hypothalamus Et adénohypophyse. La prolactine régule la sécrétion de lait pendant la lactation. Prolactine est un antagoniste hormonal FSH Et LG, et avec une augmentation de la production de prolactine, la fonction hormonale des ovaires est perturbée et une forme hyperprolactinémique d'infertilité se produit. Une hyperprolactinémie physiologique est observée chez la femme qui allaite. Chez les femmes qui n'allaitent pas, des taux élevés de prolactine peuvent être dus à certains médicaments, à une tumeur hypophysaire ou à un dysfonctionnement de l'hypophyse. L'une des manifestations de l'hyperprolactinémie est la libération de colostrum ou de lait par les glandes mammaires, notamment chez les femmes nullipares. Les changements pathologiques dans le corps, avec une augmentation ou une diminution des taux de prolactine, sont présentés dans le tableau 1.

Tableau 1. Modifications pathologiques dans le corps avec augmentation ou diminution des taux de prolactine

La prolactine se trouve dans le sérum sanguin sous trois formes différentes. La forme monomérique biologiquement et immunologiquement active prédomine (environ 80%), 5-20% est présente sous forme dimère inactive et 0,5-5% sous forme tétramérique, également inactive. Le tableau 2 montre les concentrations de référence de la forme monomérique (biologiquement active) de la prolactine.

Tableau 2. Valeurs de référence de la concentration sérique de prolactine

Indications de détermination :

Femmes en période de procréation :

• Irrégularités menstruelles et aménorrhée
• Infertilité
• troubles de la lactation
• Galactorrhée
• Syndrome d'hyperfonctionnement de l'hypophyse
• Insuffisance hypophysaire

• insuffisance testiculaire
• Azoospermie, oligospermie
• Galactorrhée
• Syndrome d'hyperfonctionnement de l'hypophyse
• Insuffisance hypophysaire
• Thérapie de remplacement après l'ablation de la tumeur hypophysaire

Préparation des échantillons pour analyse

La prolactine a un rythme circadien assez prononcé avec une libération maximale de l'hormone pendant le sommeil nocturne. Le prélèvement sanguin est recommandé le matin (8-10 heures), au début de la phase de folliculine du cycle (chez les femmes ayant un cycle régulier) et dans un environnement calme. Pour exclure une augmentation accidentelle du taux de prolactine en réponse au stress (prélèvement sanguin), une étude de 2 à 3 fois est souhaitable.

Matériel de recherche :

• sérum sanguin

La FSH et la LH sont les hormones de reproduction "maîtres"

Si la détermination du taux de prolactine dans le sang fournit des informations sur l'état fonctionnel du complexe hypothalamo-hypophysaire dans son ensemble, alors pour évaluer l'activité du système reproducteur, la mesure de la teneur sanguine en hormones gonadotropes - FSH et LH est utilisé.

Ce sont ces hormones qui assurent la croissance et le développement des follicules (FSH) et stimulent la synthèse des hormones sexuelles au niveau des gonades (LH). La sécrétion de LH et de FSH est, quant à elle, sous le contrôle des hormones sexuelles des gonades (mécanisme de rétroaction négative). Une augmentation du taux d'hormones sexuelles, principalement d'estradiol, dans le sang s'accompagne d'une inhibition de la sécrétion de gonadotrophines (et vice versa). La sécrétion de FSH est en outre régulée par l'inhibine, un polypeptide synthétisé par les gonades. Au cours de la période préovulatoire, le follicule dominant mature sécrète de grandes quantités d'estradiol dans le sang, sous l'influence de laquelle se produit la libération ovulatoire de LH et de FSH (phénomène de rétroaction positive). Cette montée (pic ovulatoire) ne dure pas très longtemps, 1 à 2 jours. L'intensité de la sécrétion des gonadotrophines au cours de la période périovulatoire détermine l'activité fonctionnelle future du corps jaune. Le rythme quotidien (circadien) de sécrétion de LH et de FSH chez l'adulte n'est pas prononcé, contrairement aux adolescents, en même temps, le rythme de sécrétion circoral (horaire) est très caractéristique des gonadotrophines.

Les systèmes de test ELISA modernes pour la détermination de la FSH et de la LH sont basés sur l'utilisation d'anticorps monoclonaux qui ne réagissent pas de manière croisée avec les hormones étroitement apparentées TSH et hCG.

Tableau 3 Valeurs de référence de la concentration de FSH et de LH dans le sérum sanguin.

Préparation des échantillons pour analyse

Les niveaux de gonadotrophines n'ont pas de rythme circadien, il n'est pas nécessaire de prélever du sang à jeun. Il convient de garder à l'esprit qu'avec un cycle menstruel préservé, un seul dosage des gonadotrophines ne peut être effectué qu'au début de la phase de folliculine (6-8 jours du cycle). Des résultats plus précis sont obtenus en prélevant 2 à 3 échantillons de sang à un intervalle de 30 à 40 minutes, puis en combinant les sérums obtenus. Il est impossible de déterminer la LH et la FSH une seule fois dans un échantillon de sang prélevé au milieu du cycle pour détecter l'ovulation. Le moment de l'ovulation pour les cycles de différentes longueurs est différent (environ 14 jours avant le début des menstruations attendues) et peut être décalé de 1 à 2 jours par rapport aux jours attendus. À cet égard, les résultats d'une seule détermination des gonadotrophines au 13-14e jour du cycle donnent dans la plupart des cas de fausses informations sur la nature du cycle. La nature pulsatile de la sécrétion à des intervalles de 1 à 2 heures est particulièrement caractéristique du PH, de sorte que les résultats d'analyses individuelles doivent être considérés comme approximatifs. Les échantillons de sérum ou de plasma après formation de caillot et/ou séparation des globules rouges sont stables pendant une durée suffisante pour l'envoi des échantillons. Les échantillons congelés peuvent être conservés pendant une longue période.

Le sang doit être prélevé avec une aiguille à gros calibre alimentée par gravité ou avec une légère pression négative du piston de la seringue.

Matériel de recherche :

• sérum sanguin
• plasma sanguin hépariné

Détermination des hormones sexuelles

Sans aucun doute, pour un examen complet de l'état du système reproducteur, il est nécessaire de disposer de systèmes de test ELISA pour déterminer les hormones sexuelles (estradiol, testostérone, progestérone) dans le sérum sanguin. Si la synthèse des hormones sexuelles dans les gonades est fortement réduite, alors par le mécanisme de rétroaction négative, la sécrétion de gonadotrophines augmente fortement, de sorte que le diagnostic d'absence de fonction ovarienne ne pose pas de difficultés.

Dans l'algorithme de diagnostic pour l'examen d'une suspicion d'infertilité endocrinienne, la clé est de déterminer les concentrations de LH, FSH, œstradiol et testostérone.

Les méthodes de détermination de ces hormones reposent aujourd'hui principalement sur la technologie immuno-enzymatique ou immunofluorescente, ce qui garantit leur utilisation généralisée.

Estradiol

Estradiol- la principale hormone stéroïde oestrogénique. Le catabolisme au niveau du foie entraîne la transformation de l'estradiol en estriol ou en glucuronides et sulfates excrétés dans les urines.

Chez les femmes estradiol synthétisé et sécrété dans les ovaires, dans les cellules de la gaine et de la granulosa des follicules. Il stimule le développement de la première phase du cycle ovarien, provoquant une augmentation de la protéine musculaire de l'utérus et une hyperplasie de l'endomètre. Au niveau hypophysaire, il agit également sur la sécrétion LH, FSH. Durant la première phase du cycle, l'augmentation progressive de la concentration estradiol conduit à une sécrétion massive LG, qui « démarre l’ovulation ». Pendant la grossesse, la concentration estradiol augmente. Analyse estradiol dans le plasma sanguin est le paramètre principal de la surveillance déclenchement de l'ovulation Et stimulation ovarienne. Augmenter la vitesse de synthèse estradiol et sa concentration à la fin de la stimulation reflète le nombre et la qualité des follicules en maturation.

Tableau 4 Valeurs de référence de la concentration d'estradiol dans le sérum sanguin.

Indications de détermination :

• contrôle de l'ovulation stimulée,
• évaluation de la fonction ovarienne,
• Irrégularités menstruelles,
• aménorrhée d'origine hypothalamique,
• tumeurs produisant des œstrogènes
• contrôle du traitement de l'infertilité,
• l'ostéoporose;

Hommes:

• gynécomastie,

enfants:

• surveiller l'évolution de la puberté.

Tableau 5 Maladies et affections dans lesquelles la concentration d'estradiol dans le sérum sanguin peut changer

Progestérone

Progestérone- une des principales hormones stéroïdes. Il est sécrété en petites quantités par les cellules du corps jaune des ovaires pendant la phase lutéale du cycle menstruel. Il agit sur l'endomètre avec estradiol, à la suite de quoi le cycle menstruel passe de la phase proliférative à la phase sécrétoire. Niveau progestérone atteint son maximum le 5ème - 7ème jour après l'ovulation. Si la fécondation n'a pas eu lieu, le niveau de progestérone diminue, et vice versa, si la fécondation a eu lieu, le corps jaune continue d'en sécréter une grande quantité. progestérone avant enceinte de 12 semaines. Passe alors à l'action placenta, qui devient le principal site de production de l’hormone. Progestéroneégalement sécrétée en petites quantités cortex surrénalien Et testicules et est un intermédiaire dans la synthèse des androgènes.

En sang progestérone situé comme dans gratuit, Aussi bien que dedans en rapport avec des états de protéines porteuses (albumine et transcortine). La demi-vie de l'hormone est de plusieurs minutes, les deux tiers de la progestérone sont métabolisés dans le foie et sécrétés dans l'urine sous forme de prégnandiol libre, de glucuronide de prégnandiol et de sulfate de prégnandiol.

Tableau 6 Valeurs de référence de la concentration sérique de progestérone

Indications de détermination :

femmes:

• troubles de l'ovulation,
• absence d'ovulation avec ou sans oligoménorrhée,
• insuffisance de la fonction du corps jaune;
• détermination précise de l'ovulation
• induction de l'ovulation avec de la gonadotrophine humaine ménopausique ou du clomifène (avec et sans hCG) ;
• confirmation de l'ovulation (détermination dans la seconde moitié du cycle);
• surveiller l'évolution de l'ovulation chez les femmes ayant subi un avortement spontané ;

hommes et enfants :

• défaut dans la biosynthèse des stéroïdes.

La progestérone provoque une augmentation de la température basale du corps. En cas de diagnostic d'insuffisance du corps jaune, des échantillons sont prélevés 3 fois (chacun après 3-4 jours du prélèvement précédent). Dans au moins 2 cas, la concentration de progestérone doit dépasser 10 mcg/ml.

Testostérone

Chez les femmes testostérone formé dans cortex surrénalien Et les ovaires dans un rapport 1:1 et servent de substrat pour la formation d'œstrogènes, et stimulent également la libération pré-ovulatoire de LH. Les niveaux de testostérone chez les femmes ne changent pas avec l’âge. Les niveaux normaux de testostérone chez les femmes sont de 0 à 0,9 ng/ml.

Indications de détermination :

• Le syndrome de Klinefelter et d'autres maladies chromosomiques ;
• hypopituitarisme;
• troubles enzymatiques de la synthèse des androgènes ;
• l'hirsutisme et la virilisation des femmes ;
• la plupart des tumeurs productrices d'androgènes des ovaires et des reins.

Chez les femmes, il est également nécessaire de déterminer le niveau de DHEA - sulfate, qui a un effet similaire à celui de la testostérone (chez les hommes, c'est un adjuvant dans l'étude de la testostérone).

Matériel de recherche :

• sérum des femmes le 3-7ème jour du cycle menstruel, de préférence entre 8 et 10 heures du matin.

Globuline liant les stéroïdes sériques (SHB)

SSH est une protéine qui lie et transporte la testostérone et l'estradiol. En plus de sa fonction de transport, la SSH protège la testostérone et l'estradiol de l'activité métabolique depuis la glande qui les sécrète jusqu'à l'organe cible et forme une sorte de dépôt d'hormones dans l'organisme. La SSG est une glycoprotéine acide d'un poids moléculaire de 45 000 daltons. La violation de la synthèse de SSH entraîne une violation de l'apport d'hormones aux organes cibles et de l'exercice de leur activité fonctionnelle. La concentration de DES dans le sérum sanguin est augmentée par les œstrogènes, les contraceptifs oraux, réduite par les androgènes, T4, TSH.

Tableau 7 Valeurs de référence pour la concentration de sérum sanguin sec

Précurseurs de la biosynthèse des androgènes et des œstrogènes

17α-Hydroxyprogestérone

La 17a-hydroxyprogestérone (17OH-P) est un stéroïde intermédiaire dans la biosynthèse des glucocorticoïdes, des androgènes et des œstrogènes, synthétisé à partir de la progestérone et de la 17a-hydroxyprégnénolone. Sécrétée par le cortex surrénalien, les ovaires et les testicules, elle circule dans le sang, à la fois libre et liée, comme la progestérone, avec deux protéines - l'albumine et la transcortine. La demi-vie du 17OH-P est de plusieurs minutes. Il est métabolisé par le foie et excrété dans les urines sous forme de enceinteriol.

Le 17OH-P est produit en faible quantité par les ovaires lors de la phase folliculaire, puis sa concentration augmente et reste constante lors de la phase lutéale. Si la fécondation ne se produit pas, le niveau de 17OH-P diminue. Lors de l'implantation d'un ovule fécondé, le corps jaune continue de sécréter du 17OH-P.

L'analyse du 17OH-P est très importante pour diagnostiquer l'hyperplasie surrénalienne congénitale et détecter le déficit de l'enzyme responsable de l'apparition de cette maladie.

Le taux de 17OH-P dans le sang est particulièrement révélateur et revêt une importance décisive dans le diagnostic du déficit en 21-hydroxylase chez le nouveau-né.

À l'âge adulte, en cas de déficit partiel ou tardif de l'enzyme, le niveau principal d'activité du 17OH-P peut être normal ou augmenté.

Tableau 8 Valeurs de référence de la concentration de 17OH-P dans le sérum sanguin

Indications de détermination :

• déficit enzymatique congénital responsable de la survenue d'une hyperplasie surrénalienne ;
• maladies associées à un déficit en 21-hydroxylase chez les nouveau-nés (taux élevés de 17OH-P) ;
• manque manifesté partiellement ou tardivement de 21-hydroxylase (niveau normal ou élevé de 17OH-P);
• diagnostic différentiel de l'infertilité.

Matériel de recherche :

• sérum sanguin;

Déhydroépiandrostérone

La déhydroépiandrostérone (DHEA) est l'un des androgènes les plus importants (plus précisément leur précurseur), synthétisé par le cortex surrénalien et les gonades à partir du 17OH-P. Il est catabolisé en androgènes virilisants : androstènediol, testostérone et dihydrotestostérone.

La plupart de la DHEA est modifiée en ajoutant du sulfate à la (DHEA-S), qui est biologiquement inactive, mais la suppression du groupe sulfate restaure l'activité de la DHEA. La DHEA est en fait une prohormone, elle a une demi-vie plus courte et un taux métabolique plus élevé, et donc sa concentration dans le sang est 300 fois inférieure au niveau de DHEA-S.

La DHEA se caractérise par un niveau de sécrétion circadien avec une libération maximale de l'hormone le matin. Dans le cycle menstruel, des changements significatifs dans sa concentration ne sont pas observés. Contrairement à la testostérone, la DHEA présente dans le sang circulant n’est pas associée au DES, donc la modification de la concentration des protéines de liaison n’affecte pas son niveau.

Tableau 9 Valeurs de référence pour la concentration sérique de DHEA

Indications de détermination :

• hirsutisme;
• virilisation;
• puberté retardée

Matériel de recherche :

• sérum sanguin;
• plasma sanguin avec addition d'héparine.

Sulfate de déhydroépiandrostérone

La DHEA-S est synthétisée dans les glandes surrénales (95 %) et dans les ovaires (5 %), excrétée dans les urines et constitue la fraction principale des 17a-cétostéroïdes. La détermination de la concentration de DHEA-C dans le sérum sanguin remplace l'étude des 17a-cétostéroïdes dans l'urine.

La DHEA-S est sécrétée à raison de 10 à 20 mg/24 heures (35 à 70 µmol/24 heures) chez l'homme et de 3,5 à 10 mg/24 heures (12 à 35 µmol/24 heures) chez la femme, et sans effet circadien. rythme. Il ne se lie pas à des protéines plasmatiques spécifiques et, par conséquent, leur concentration n'affecte pas les niveaux de DHEA-S. Cependant, la DHEA-S se lie à l'albumine sérique.

En plus de la DHEA-S, la DHEA est présente dans le sang circulant, représentant respectivement ¼ et la moitié du taux de sécrétion de DHEA-S chez les hommes et les femmes. En raison de la concentration sanguine élevée de DHEA-S, de sa longue demi-vie et de sa grande stabilité, et parce qu’elle provient principalement des glandes surrénales, la DHEA-S est un excellent indicateur de la sécrétion d’androgènes.

Si les femmes ont des taux de testostérone élevés, la mesure de la concentration de DHEA-S permet de déterminer si cela est dû à une altération de la fonction surrénalienne ou à une maladie ovarienne.

Tableau 10 Valeurs de référence de la concentration de DHEA-S dans le sérum sanguin

Âge	Concentration (µg/ml)	Concentration (µmol/l)
Nouveau-nés.
Adultes:
Période de grossesse
période de préménopause
période postménopausique

Facteurs de conversion :

• 1 ng/100 ml = 28,8 nmol/l ;
• 1 nmol/l = 2,6 ng/ml
• 1 ng/ml = 368,46 µmol/l

Indications de détermination :

• tumeurs surrénales ;
• diagnostic différentiel des maladies ovariennes;
• l'ostéoporose;
• puberté retardée.

Matériel de recherche :

• sérum sanguin;
• plasma sanguin avec addition d'héparine.

Maladies auto-immunes du système reproducteur

L'épuisement physiologique des follicules ovariens chez la femme survient entre 45 et 55 ans. L’arrêt de la fonction ovarienne avant 40 ans est révélateur d’une maladie connue sous le nom d’insuffisance ovarienne prématurée. La conséquence de cette maladie est l'infertilité. Dans certains cas, cela peut être dû à un processus auto-immun associé à la formation d'anticorps dirigés contre les hormones sexuelles des ovaires.

Dans certains cas, le développement de l'infertilité chez l'homme est dû à la présence d'anticorps spécifiques dans le sérum sanguin ou le plasma séminal.

Anticorps ovariens dans le sérum sanguin

Normalement, il n'y a pas d'anticorps ovariens dans le sérum sanguin d'une femme. Des anticorps ovariens (contre les antigènes ovariens) ont été trouvés chez des femmes atteintes de ménopause prématurée, d'infertilité et de fécondation in vitro. Ces anticorps peuvent être produits par les cellules de Leydig, les cellules granulocytaires ovariennes et les cellules placentaires. Pour déterminer les anticorps anti-hormones sexuelles, la méthode d'immunofluorescence indirecte et ELISA est utilisée. La méthode ELISA vous permet de déterminer à la fois le total et les anticorps dirigés contre différentes classes d'immunoglobulines (IgG, IgM, IgA). Les anticorps auto-immuns peuvent être détectés dans le sang des femmes plusieurs années avant le développement des manifestations cliniques de l'insuffisance ovarienne prématurée.

En plus des anticorps ovariens, la méthode ELISA permet de détecter les anticorps contre la membrane transparente de l'ovocyte - total et les anticorps contre les classes (IgG, IgM, IgA), qui ont la même valeur diagnostique que les anticorps ovariens.

Chez les femmes, une corrélation claire entre la concentration d'anticorps dans le sérum sanguin et le pronostic de fertilité n'est généralement pas possible.

Anticorps antispermatozoïdes dans le sérum sanguin

Normalement, il n'y a pas d'anticorps antispermatozoïdes dans le sérum sanguin d'une femme. Chez les hommes, les anticorps anti-spermatozoïdes se forment à la suite d'une réaction auto-immune à l'épithélium des spermatozoïdes. La raison du développement d'une telle réaction peut être un traumatisme testiculaire, des infections bactériennes et virales et des opérations chirurgicales sur le testicule. Pour déterminer les anticorps anti-spermatozoïdes, la méthode ELISA est actuellement utilisée, qui est très sensible et spécifique, et permet également de quantifier les anticorps de différentes classes d'immunoglobulines (IgG, IgM, IgA), ce qui permet d'évaluer la gravité et la sévérité de la processus auto-immun. De plus, chez l'homme, la concentration d'anticorps anti-spermatozoïdes est corrélée en ce qui concerne la restauration de la fertilité.

Chez la femme normale, les anticorps contre les antitags des spermatozoïdes ne sont pas produits, cependant divers facteurs étiologiques (infections, maladies auto-immunes) peuvent entraîner une perte de tolérance immunologique. Si des anticorps anti-spermatozoïdes sont présents dans le sang d'une femme, les processus de formation des trophoblastes, de croissance et de formation du placenta et d'implantation sont perturbés. Et cela conduit à l'avortement, à la prééclampsie, au retard de croissance fœtale, à l'insuffisance placentaire.

Le dépistage des anticorps anti-spermatozoïdes est recommandé pour tous les couples présentant une infertilité inexpliquée.

Gonadotrophine chorionique (hCG) dans le sérum sanguin

HCG est une glycoprotéine d'un poids moléculaire d'environ 46 000, composée de deux sous-unités, alpha et bêta. Un taux élevé d'hCG dans le sérum sanguin est déjà détecté le 8e au 12e jour après la conception. Au cours du premier trimestre de la grossesse, la concentration d'hCG augmente rapidement, doublant tous les 2-3 jours. La concentration maximale tombe entre la 7e et la 10e semaine de grossesse, après quoi la concentration d'hCG commence à diminuer et pendant la seconde moitié de la grossesse, elle reste plus ou moins stable.

Tableau 12 Valeurs médianes de la concentration en hCG pour le dépistage des malformations congénitales du fœtus au cours des trimestres II et III

Alpha-fœtoprotéine (AFP) dans le sérum sanguin

L'AFP est une glycoprotéine d'un poids moléculaire d'environ 65 000 kDa, sécrétée par le foie fœtal et le sac vitellin. L'AFP chez le fœtus est la principale protéine sérique; chez l'adulte, la teneur en AFP dans le sérum sanguin est négligeable. Au cours du deuxième trimestre de la grossesse, si le fœtus est atteint du syndrome de Down, la concentration d'AFP diminue et la concentration d'hCG dans le sang augmente. Dans cette optique, l'étude ELISA pour l'AFP et l'hCG est utilisée comme méthode d'examen prénatal de masse des femmes enceintes, avec laquelle il est possible d'identifier un groupe à haut risque par la présence de malformations fœtales ou du syndrome de Down. Les valeurs des concentrations médianes d'AFP dans le sérum sanguin pour le dépistage des malformations congénitales du fœtus au deuxième trimestre sont présentées dans le tableau 13.

Tableau 13 Valeurs médianes de concentration en AFP pour le dépistage des malformations congénitales du fœtus au deuxième trimestre

Estriol libre dans le sérum

L'estriol est la principale hormone stéroïde synthétisée par le placenta. La teneur en estriol dans le sang d'une femme enceinte est en corrélation avec l'activité des glandes surrénales fœtales. L'estriol pénètre dans la circulation sanguine d'une femme enceinte, où vous pouvez déterminer sa concentration à l'état libre. Avec une grossesse se développant normalement, la synthèse d'estriol augmente en fonction de l'augmentation de l'âge gestationnel et de la croissance fœtale (tableau 14).

Tableau 14 Concentrations d'oestriol dans le sérum sanguin d'une femme dans la dynamique de la grossesse physiologique

Période de grossesse, semaine	Concentration médiane d'estriol, nmol/l	Valeurs de référence de l'estriol, nmol/l

En pathologie (malformations prononcées du SNC chez le fœtus, malformations cardiaques congénitales, syndrome de Down, retard de croissance fœtale, hypoplasie surrénalienne fœtale, mort intra-utérine du fœtus), la concentration de stradiol libre dans le sérum sanguin d'une femme enceinte diminue.

Les valeurs des concentrations médianes d'estradiol libre dans le sérum sanguin pour le dépistage des malformations congénitales au cours du deuxième trimestre de la grossesse sont présentées dans le tableau 15.

Tableau 15 Les valeurs des concentrations médianes d'estradiol libre dans le sérum sanguin pour le dépistage des malformations congénitales au deuxième trimestre de la grossesse

Dans le syndrome de Down et Edwards, la concentration d'estradiol libre est généralement de 0,7 MoM.

En conclusion, nous notons que l'introduction généralisée d'un diagnostic ELISA à part entière dans la pratique clinique augmentera considérablement l'efficacité du diagnostic et du traitement des patients présentant des troubles du système reproducteur.

La 17-OH-progestérone est produite par les glandes surrénales et est l'un des régulateurs de la fonction sexuelle et du cycle menstruel, affecte la capacité de concevoir et d'avoir un enfant. Dans des conditions normales, son niveau dans le sang est insignifiant et, dans le corps féminin, il est soumis à des fluctuations importantes dues au cycle menstruel et à la grossesse.

Dans la première phase du cycle, la 17-OH-progestérone est sécrétée en petite quantité par les ovaires ; au milieu du cycle, son niveau augmente légèrement et reste inchangé tout au long de la deuxième phase.

Si la fécondation et l'implantation de l'embryon ont eu lieu, le niveau d'hormone commencera à augmenter progressivement, mais si la conception n'a pas eu lieu, la valeur de 17-OH-progestérone diminuera à nouveau jusqu'au minimum au début d'une nouvelle phase du cycle. .

Quand une analyse est-elle ordonnée ?

Parfois, si vous soupçonnez des perturbations hormonales ou une hyperplasie (croissance) du cortex surrénalien, un test sanguin est prescrit pour le niveau de 17-OH-progestérone.

Cela se produit généralement lorsque :

• l'infertilité chez les femmes présentant des signes d'hirsutisme (augmentation de la pilosité),
• en violation du cycle menstruel,
• avec suspicion de tumeurs surrénales.
• parfois, un test sanguin est prescrit aux enfants chez lesquels on soupçonne une hyperplasie surrénalienne congénitale (syndrome surrénalien).

Comment se déroule l'analyse

Pour les femmes, une étude sur le niveau de 17-OH-progestérone est réalisée dans la première phase du cycle, 3 à 5 jours après le début des règles. Les enfants sont analysés n'importe quel jour, le matin, à jeun.

Valeurs normales du 17-OH-PG

Que signifient les résultats

Il existe trois options d'analyse :

Le niveau de 17-OH-progestérone est normal.

Les anomalies hormonales ne sont donc pas associées au cortex surrénalien ou aux ovaires,

Les niveaux d'hormones sont élevés.

Le niveau de l'hormone peut augmenter en cas de tumeurs de l'ovaire ou des glandes surrénales.

Dans les formes légères d'élévation hormonale, des irrégularités menstruelles et une infertilité apparaissent généralement.

Une augmentation du taux de 17-OH-progestérone se produit avec une hyperplasie surrénalienne congénitale chez les enfants et les adultes.

Chez l'enfant, il s'agit généralement d'une pathologie génétiquement déterminée, transmise de manière autosomique récessive par un défaut de l'une des enzymes qui permettent le métabolisme actif des hormones. À la suite d’une défaillance de cette chaîne, il y a une augmentation de la synthèse et de l’accumulation de testostérone. A la naissance, des signes de virilisation sont révélés - renforcement des caractéristiques sexuelles masculines chez les garçons, avec une augmentation du pénis et du scrotum, chez les filles - signes de faux hermaphrodisme - une augmentation du clitoris et des lèvres, pris à tort pour un pénis avec un scrotum . Les enfants des deux sexes développent également des troubles métaboliques avec d’importantes pertes de sels de potassium et de sodium.

Le niveau de 17-OH-progestérone est abaissé.

Cette condition survient avec la maladie d'Addison, une insuffisance surrénalienne congénitale ou acquise. De plus, une diminution du niveau de l'hormone chez les hommes se produit dans un état de faux hermaphrodisme - lorsque la synthèse de la progestérone est perturbée et de ce fait, la formation normale du corps selon le type masculin est perturbée.

Informations générales sur l'hormone

La 17-OH-progestérone ou hydroxyprogestérone est l'un des produits intermédiaires du métabolisme hormonal, appartenant au groupe des stéroïdes.

Il est formé de deux précurseurs - la progestérone et la 17-hydroxyprégnénolone, qui, grâce à des transformations complexes dans les glandes surrénales, se transforment en hormone cortisol.

L'hydroxyprogestérone peut également être produite dans le placenta et les organes génitaux, où elle se transforme également en androstènedione (cette substance est le point de départ de la synthèse soit de l'hormone sexuelle masculine, la testostérone, soit de l'hormone sexuelle féminine -

Progestérone est une hormone sexuelle féminine. Sa tâche principale est de maintenir la grossesse chez le chien.

Quand les niveaux de progestérone sont-ils prescrits ?

• évaluation d'aspects de la fonction ovarienne chez les chiennes et les chattes ;
• détermination du moment de l'ovulation pour déterminer le moment de l'accouplement (chez les chiennes) ;
• prédire la date de naissance;
• confirmation de la présence d'un reste de tissu ovarien ;
• évaluation de la fonction du corps jaune en cas d'avortement ;
• détection d'oestrus asymptomatique;
• détection de la présence de kystes lutéaux, etc.

En pratique vétérinaire, les niveaux de progestérone sont le plus souvent examinés pour déterminer le moment optimal de l'accouplement. Ceci est extrêmement important en cas d'insémination artificielle avec du sperme congelé ou réfrigéré, ou lorsque le mâle se trouve à une grande distance et que vous devez connaître la date exacte de l'accouplement afin d'amener la chienne ou le mâle.

Comment préparer un animal à la recherche ?

Aucune préparation particulière n’est nécessaire. Le prélèvement sanguin est généralement effectué le matin à jeun. La condition principale est que l'animal ne prenne pas de médicaments affectant le niveau de progestérone.

Quand doit-on réaliser le test ?

Une étude du niveau de progestérone peut être réalisée tous les 2-3 jours, à partir de 3 à 5 jours après le début de l'oestrus. Habituellement, l’analyse est prête dans les 24 heures. Le temps d'analyse moyen peut aller jusqu'à 4 heures.

Quelle est la méthode de recherche ?

L'étude est réalisée par dosage immunoenzymatique (ELISA).

Il s'agit d'une méthode quantitative permettant de déterminer le niveau de progestérone dans le sérum sanguin. L'étude est réalisée en laboratoire à l'aide d'un analyseur immunoenzymatique approprié utilisant des réactifs spéciaux.

Le principe du dosage de la progestérone repose sur l'utilisation d'une méthode ELISA compétitive. Des anticorps monoclonaux de souris dirigés contre la progestérone sont immobilisés sur la surface interne des puits du comprimé. La progestérone de l'échantillon à tester entre en compétition avec la progestérone conjuguée pour se lier aux anticorps à la surface du puits. Le résultat est un "sandwich" lié au plastique contenant de la peroxydase. Pendant l'incubation avec la solution de substrat de tétraméthylbenzidine, une coloration des solutions dans les puits se produit. L'intensité de la couleur, déterminée sur l'analyseur, est inversement proportionnelle à la concentration de progestérone dans l'échantillon testé.

Comment interpréter les résultats de l’analyse ?

La valeur quantitative de la progestérone dans le sang est déterminée dans les périodes pré- et postovulatoires. Le niveau de progestérone dans le sérum sanguin, à la fois chez différents chiens et chez le même individu (d'un cycle à l'autre) peut changer assez rapidement.

Les moyennes sont présentées dans tableau.

Les résultats dans différents laboratoires peuvent varier. Cela dépend des réglages de l'appareil et des réactifs. Une interprétation précise des résultats doit être effectuée par un vétérinaire possédant les qualifications et l’expérience appropriées.

Temps d'accouplement optimal :

Lorsque le taux de progestérone atteint 15,9 nmol/l (5 ng/ml), l'accouplement est réalisé au bout de 24 à 48 heures.

L'insémination artificielle avec de la semence réfrigérée est réalisée 4 jours après avoir atteint un taux de progestérone de 7,95 nmol/l (2,5 ng/ml) ou 48 heures après avoir atteint 15,9 nmol/l (5 ng/ml).

L'IA avec sperme congelé est réalisée 5 jours après 7,95 nmol/L (2,5 ng/mL) ou 72 heures après 15,9 nmol/L (5 ng/mL)

Quel est l’intérêt de cette étude ?

Déterminer le moment de l'ovulation vous permet d'augmenter non seulement le pourcentage d'accouplements réussis ou d'insémination artificielle, mais également la fertilité. Et des méthodes de recherche supplémentaires basées sur l'utilisation de frottis vaginaux et