- μια δοκιμή αντισφαιρίνης που στοχεύει στην ανίχνευση στο Rh-αρνητικό αίμα ατελών αντι-ερυθροκυτταρικών αντισωμάτων στον παράγοντα Rh - μια ειδική πρωτεΐνη που βρίσκεται στην επιφάνεια των ερυθροκυττάρων του Rh-θετικού αίματος. Υπάρχουν δύο τύποι αυτής της εξέτασης: άμεση - ανίχνευση αντισωμάτων στην επιφάνεια των ερυθρών αιμοσφαιρίων, έμμεση - ανίχνευση αντισωμάτων στον ορό του αίματος. Πραγματοποιείται άμεση δοκιμή στη διάγνωση και παρακολούθηση της θεραπείας ασθενειών του αίματος: αιμολυτική αναιμία, αιμολυτική νόσος του νεογνού και άλλα. Πραγματοποιείται έμμεση εξέταση για την αξιολόγηση της συμβατότητας του αίματος του δότη και του λήπτη κατά τη μετάγγιση, καθώς και για τον προσδιορισμό της παρουσίας και του κινδύνου σύγκρουσης Rh κατά τον σχεδιασμό και τη διαχείριση της εγκυμοσύνης. Το υλικό για τη δοκιμή Coombs είναι το φλεβικό αίμα, η μελέτη πραγματοποιείται με μεθόδους που βασίζονται στην αντίδραση συγκόλλησης. Κανονικά, και οι δύο εξετάσεις δίνουν αρνητικό αποτέλεσμα. Η ανάλυση πραγματοποιείται εντός μιας ημέρας.
Το τεστ Coombs είναι μια κλινική εξέταση του Rh-αρνητικού αίματος, με στόχο την ανίχνευση αντισωμάτων στον παράγοντα Rh. Το τεστ χρησιμοποιείται για τον εντοπισμό του κινδύνου ανάπτυξης σύγκρουσης Rhesus και αιμολυτικών αντιδράσεων. Σε κάθε άτομο, η επιφάνεια των ερυθροκυττάρων περιέχει ένα ορισμένο σύνολο αντιγόνων ή συγκολλητογόνων - ενώσεις ποικίλης φύσης, η παρουσία ή η απουσία των οποίων χρησιμοποιείται για να κριθεί ο τύπος αίματος και ο παράγοντας Rh. Υπάρχουν πολλοί τύποι αντιγόνων, στην ιατρική πρακτική, τα συγκολλητογόνα Α και Β, που καθορίζουν την ομάδα αίματος, και το συγκολλητογόνο D, ο παράγοντας Rh, έχουν τη μεγαλύτερη πρακτική σημασία. Με θετικό παράγοντα Rh, τα αντιγόνα D ανιχνεύονται στην εξωτερική μεμβράνη των ερυθροκυττάρων, με αρνητικό - όχι.
Το τεστ Coombs, το οποίο ονομάζεται επίσης τεστ αντισφαιρίνης, στοχεύει στην ανίχνευση ατελών αντισωμάτων κατά των ερυθροκυττάρων στο σύστημα του παράγοντα Rh στο αίμα. Τα αντισώματα έναντι του παράγοντα Rh είναι ειδικές ανοσοσφαιρίνες που παράγονται στο Rh-αρνητικό αίμα όταν εισέρχονται ερυθροκύτταρα με συγκολλητογόνα D. Αυτό μπορεί να συμβεί όταν το αίμα του εμβρύου και της εγκύου αναμειγνύεται, με μεταγγίσεις αίματος που πραγματοποιούνται χωρίς προηγούμενη ομαδοποίηση αίματος. Το τεστ Coombs υπάρχει σε δύο εκδόσεις - άμεση και έμμεση. Κατά την εκτέλεση μιας άμεσης δοκιμής Coombs, ανιχνεύονται αντισώματα προσκολλημένα στην επιφάνεια των ερυθρών αιμοσφαιρίων. Η μελέτη χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό της αιτίας της αιμολυτικής αντίδρασης. Η έμμεση δοκιμή Coombs στοχεύει στην ανίχνευση αντισωμάτων κατά των ερυθροκυττάρων στο πλάσμα του αίματος. Είναι απαραίτητο να προσδιοριστεί η συμβατότητα του αίματος του δότη και του λήπτη ή της μητέρας και του εμβρύου, βοηθά στην πρόληψη της ανάπτυξης της σύγκρουσης Rhesus και της επακόλουθης αιμόλυσης των ερυθρών αιμοσφαιρίων.
Το αίμα και για τις δύο παραλλαγές του τεστ Coombs λαμβάνεται από φλέβα. Η ανάλυση πραγματοποιείται με τη μέθοδο της συγκόλλησης χρησιμοποιώντας ορό αντισφαιρίνης. Τα αποτελέσματα της μελέτης χρησιμοποιούνται στην αιματολογία για τον εντοπισμό των αιτιών των αιμολυτικών αντιδράσεων, στη χειρουργική επέμβαση και την ανάνηψη κατά τη διάρκεια μεταγγίσεων αίματος, στη μαιευτική και γυναικολογία στην παρακολούθηση της εγκυμοσύνης σε γυναίκες με Rh-αρνητικό αίμα.
Ενδείξεις
Το άμεσο τεστ Coombs, το οποίο ανιχνεύει αντισώματα προσκολλημένα στην επιφάνεια των ερυθρών αιμοσφαιρίων, συνταγογραφείται για αιμολυτικές αντιδράσεις (καταστροφή ερυθρών αιμοσφαιρίων) ποικίλης προέλευσης. Η μελέτη ενδείκνυται για πρωτοπαθή αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία, αιμολυτική αναιμία μετά τη μετάγγιση, αιμολυτική νόσο του νεογνού, αιμόλυση ερυθρών αιμοσφαιρίων που προκαλείται από αυτοάνοσα, νεοπλασματικά ή λοιμώδη νοσήματα, καθώς και λήψη φαρμάκων, για παράδειγμα, κινιδίνη, μεθυλντόπα, προκαϊναμίδη . Το έμμεσο τεστ Coombs, το οποίο ανιχνεύει αντισώματα στο πλάσμα του αίματος, χρησιμοποιείται για την πρόληψη της ανάπτυξης της σύγκρουσης Rhesus. Ενδείκνυται για ασθενείς που προετοιμάζονται για μεταγγίσεις αίματος, καθώς και για εγκύους με αρνητικό παράγοντα Rh, υπό την προϋπόθεση ότι ο μελλοντικός πατέρας του παιδιού έχει θετικό παράγοντα Rh.
Προκειμένου να προσδιοριστεί η συμβατότητα Rh, το τεστ Coombs δεν χορηγείται σε ασθενείς με Rh θετικό αίμα. Σε αυτές τις περιπτώσεις, υπάρχουν ήδη αντιγόνα στην επιφάνεια των ερυθρών αιμοσφαιρίων, η παραγωγή αντισωμάτων δεν μπορεί να πυροδοτηθεί με μετάγγιση αίματος ή με την είσοδο εμβρυϊκού αίματος στην κυκλοφορία του αίματος της εγκύου. Επίσης, η μελέτη δεν ενδείκνυται για έγκυες γυναίκες εάν και οι δύο γονείς έχουν αρνητικό παράγοντα Rh, ένα κληρονομικό υπολειπόμενο χαρακτηριστικό. Ένα παιδί σε τέτοια ζευγάρια έχει πάντα αίμα Rh-αρνητικό, μια ανοσολογική σύγκρουση με τη μητέρα είναι αδύνατη. Σε αιμολυτικές παθολογίες, το τεστ αντισφαιρίνης δεν χρησιμοποιείται για την παρακολούθηση της επιτυχίας της θεραπείας, καθώς τα αποτελέσματα δεν αντικατοπτρίζουν τη δραστηριότητα της διαδικασίας καταστροφής των ερυθροκυττάρων.
Ο περιορισμός της δοκιμής Coombs είναι η πολυπλοκότητα της ερευνητικής διαδικασίας - για να ληφθούν αξιόπιστα αποτελέσματα, είναι απαραίτητο να τηρούνται οι συνθήκες θερμοκρασίας και χρόνου, οι κανόνες παρασκευής αντιδραστηρίων και βιοϋλικών. Το πλεονέκτημα του τεστ Coombs είναι η υψηλή ευαισθησία του. Στην αιμολυτική αναιμία, τα αποτελέσματα αυτής της εξέτασης παραμένουν θετικά, ακόμη και αν η αιμοσφαιρίνη, η χολερυθρίνη και τα δικτυοερυθρά κύτταρα επανέλθουν στο φυσιολογικό.
Προετοιμασία για ανάλυση και συλλογή υλικού
Το υλικό για τη διενέργεια της εξέτασης Coombs είναι το φλεβικό αίμα. Δεν υπάρχουν ειδικές απαιτήσεις για το χρόνο της διαδικασίας αιμοληψίας και για την προετοιμασία του ασθενούς. Όπως σε κάθε μελέτη, συνιστάται να κάνετε ένα διάλειμμα μετά το φαγητό για τουλάχιστον 4 ώρες και τα τελευταία 30 λεπτά να σταματήσετε το κάπνισμα, να ασκηθείτε και να αποφύγετε το συναισθηματικό στρες. Αξίζει επίσης να συζητήσετε με το γιατρό σας εκ των προτέρων την ανάγκη διακοπής της λήψης φαρμάκων - ορισμένα φάρμακα μπορεί να αλλοιώσουν τα αποτελέσματα της δοκιμής Coombs. Το αίμα λαμβάνεται με μια σύριγγα από την κυλινδρική φλέβα, λιγότερο συχνά από μια φλέβα στο πίσω μέρος του χεριού. Μέσα σε λίγες ώρες, το υλικό παραδίδεται στο εργαστήριο.
Κατά την εκτέλεση μιας άμεσης δοκιμής Coombs, ορός αντισφαιρίνης προστίθεται στον ορό αίματος του ασθενούς. Μετά από κάποιο χρονικό διάστημα, το μείγμα εξετάζεται για την παρουσία συσσωματωμάτων - σχηματίζονται εάν υπάρχουν αντισώματα στα ερυθρά αιμοσφαίρια. Με θετικό αποτέλεσμα, προσδιορίζεται ένας συγκολλητικός τίτλος. Η έμμεση δοκιμή Coombs αποτελείται από περισσότερα βήματα. Πρώτον, τα αντισώματα που υπάρχουν στον ορό στερεώνονται στα εγχυόμενα ερυθροκύτταρα κατά τη διάρκεια της επώασης. Στη συνέχεια προστίθεται ορός αντισφαιρίνης στο δείγμα, μετά από λίγο προσδιορίζεται η παρουσία και ο τίτλος των συγκολλητικών. Η περίοδος ανάλυσης είναι 1 ημέρα.
Κανονικά αποτελέσματα
Κανονικά, το αποτέλεσμα της άμεσης δοκιμής Coombs είναι αρνητικό (-). Αυτό σημαίνει ότι δεν υπάρχουν αντισώματα που να σχετίζονται με τα ερυθρά αιμοσφαίρια στο αίμα και δεν μπορούν να είναι η αιτία της αιμόλυσης. Το φυσιολογικό αποτέλεσμα της έμμεσης δοκιμής Coombs είναι επίσης αρνητικό (-), δηλαδή δεν υπάρχουν αντισώματα στον παράγοντα Rh στο πλάσμα του αίματος. Κατά την προετοιμασία για μετάγγιση αίματος για τη λήπτρια, αυτό σημαίνει συμβατότητα με το αίμα του δότη, ενώ παρακολουθείται η εγκυμοσύνη - απουσία ευαισθητοποίησης Rh της μητέρας, χαμηλός κίνδυνος ανάπτυξης ανοσολογικής σύγκρουσης. Φυσιολογικοί παράγοντες, όπως οι διατροφικές συνήθειες ή η σωματική δραστηριότητα, δεν μπορούν να επηρεάσουν το αποτέλεσμα της εξέτασης. Επομένως, εάν το αποτέλεσμα είναι θετικό, είναι απαραίτητη η συμβουλή γιατρού.
Διαγνωστική αξία της ανάλυσης
Ένα θετικό αποτέλεσμα δοκιμής Coombs εκφράζεται ποιοτικά, από (+) έως (++++), ή ποσοτικά, σε τίτλους από 1:16 έως 1:256. Ο προσδιορισμός της συγκέντρωσης των αντισωμάτων στα ερυθροκύτταρα και στον ορό του αίματος πραγματοποιείται και στους δύο τύπους δειγμάτων. Με θετικό αποτέλεσμα της άμεσης δοκιμής Coombs, ανιχνεύονται αντισώματα στην εξωτερική μεμβράνη των ερυθρών αιμοσφαιρίων, τα οποία οδηγούν στην καταστροφή αυτών των αιμοσφαιρίων. Η αιτία μπορεί να είναι μετάγγιση αίματος χωρίς προηγούμενη τυποποίηση - αιμολυτική αντίδραση μετά τη μετάγγιση, καθώς και νεογνική ερυθροβλάστωση, αιμολυτική αντίδραση λόγω χρήσης φαρμάκων, πρωτοπαθής ή δευτερογενής αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία. Η δευτερογενής καταστροφή των ερυθροκυττάρων μπορεί να προκληθεί από συστηματικό ερυθηματώδη λύκο, σύνδρομο Evans, μακροσφαιριναιμία Waldenström, παροξυσμική ψυχρή αιμοσφαιρινουρία, χρόνια λεμφοκυτταρική λευχαιμία, λέμφωμα, λοιμώδη μονοπυρήνωση, σύφιλη, μυκοπλασματική πνευμονία.
Ένα θετικό αποτέλεσμα της έμμεσης δοκιμής Coombs υποδεικνύει την παρουσία αντισωμάτων στον παράγοντα Rh στο πλάσμα. Στην πράξη, αυτό σημαίνει ότι έχει συμβεί ευαισθητοποίηση Rh, υπάρχει πιθανότητα να αναπτυχθεί σύγκρουση Rh μετά από έγχυση αίματος δότη κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης. Για την πρόληψη των επιπλοκών της εγκυμοσύνης, οι γυναίκες με θετικό αποτέλεσμα του τεστ Coombs τοποθετούνται σε ειδικά αρχεία.
Θεραπεία αποκλίσεων από τον κανόνα
Το τεστ Coombs αναφέρεται σε ισοορολογικές μελέτες. Τα αποτελέσματά του καθιστούν δυνατό τον εντοπισμό μιας αιμολυτικής αντίδρασης, καθώς και τον προσδιορισμό της συμβατότητας του αίματος του δότη και του λήπτη, της μητέρας και του εμβρύου, προκειμένου να αποφευχθεί η ανάπτυξη της σύγκρουσης Rhesus. Εάν το αποτέλεσμα της εξέτασης είναι θετικό, τότε είναι απαραίτητο να ζητήσετε συμβουλές από τον θεράποντα ιατρό - μαιευτήρα-γυναικολόγο, αιματολόγο, χειρουργό.
Δοκιμή αντισφαιρίνης ή αντίδραση Coombsπραγματοποιείται με σκοπό τον εντοπισμό ορισμένων αντισωμάτων που επιτίθενται στα ερυθρά αιμοσφαίρια (ερυθροκύτταρα).
Τα αντισώματα είναι πρωτεΐνες που παράγονται από το ανοσοποιητικό σύστημα. Τυπικά, τα αντισώματα συνδέονται με ξένες ουσίες όπως βακτήρια και ιούς και τα καταστρέφουν.
2. Γιατί χρειάζομαι τεστ αντισωμάτων;
Μια δοκιμή αντισωμάτων μπορεί να πραγματοποιηθεί στις ακόλουθες περιπτώσεις:
Πριν από τη μετάγγιση αίματος
Πιθανότατα γνωρίζετε ότι ένα άτομο μπορεί να έχει έναν από τους τέσσερις τύπους αίματος. Και μια εξέταση αντισφαιρίνης μπορεί να γίνει για να διαπιστωθεί εάν είναι δυνατή η μετάγγιση αίματος. Εάν λαμβάνετε μετάγγιση, το αίμα του δότη πρέπει να ταιριάζει με τον τύπο σας (να έχει τα ίδια αντιγόνα). Εάν τα αντιγόνα διαφέρουν κατά τη διάρκεια της μετάγγισης, το ανοσοποιητικό σύστημα θα καταστρέψει τα μεταγγιζόμενα κύτταρα. Αυτό μπορεί να οδηγήσει σε σοβαρή ασθένεια και ακόμη και θάνατο. Αυτός είναι ο λόγος για τον οποίο η εύρεση της σωστής ομάδας αίματος είναι τόσο σημαντική.
Για τον εντοπισμό του κινδύνου ευαισθητοποίησης Rh
Το Rh είναι ένα αντιγόνο. Το πλήρες όνομά του είναι ο παράγοντας Rh. Το τεστ Coombs χρησιμοποιείται για την ανίχνευση αντισωμάτων στον παράγοντα Rh στο αίμα εγκύων γυναικών. Εάν μια Rh-αρνητική γυναίκα είναι έγκυος με ένα Rh-θετικό παιδί (το οποίο μπορεί να μεταδοθεί από τον πατέρα), υπάρχει κίνδυνος ευαισθητοποίησης Rh. Η ευαισθητοποίηση του Rh συμβαίνει όταν το αίμα του μωρού αναμιγνύεται με το αίμα της μητέρας κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης ή του τοκετού. Εάν η ομάδα αίματος της μητέρας δεν είναι συμβατή με την ομάδα αίματος του παιδιού, τότε το ανοσοποιητικό της σύστημα μπορεί να επιτεθεί στο έμβρυο, εκλαμβάνοντάς το ως ξένο αντικείμενο. Σε αυτή την περίπτωση, μπορεί να αναπτυχθεί μια σοβαρή ασθένεια που ονομάζεται εμβρυϊκή ερυθροβλάστωση. Σε σπάνιες περιπτώσεις, εάν η ασθένεια δεν αντιμετωπιστεί, το έμβρυο ή το νεογέννητο μπορεί να πεθάνει.
Σε μια γυναίκα με αρνητική Rh μπορεί να γίνει ένεση μιας αντι-Rh γ-σφαιρίνης (π.χ. RhoGAM), η οποία χρησιμοποιείται για την πρόληψη της αιμολυτικής νόσου Rh.
Για τη διάγνωση της αυτοάνοσης αιμολυτικής αναιμίας
Η αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία είναι μια σπάνια ασθένεια που σχετίζεται με το σχηματισμό αντισωμάτων σε αυτοαντιγόνα των ερυθροκυττάρων.
3. Τύποι εξέτασης αντισφαιρίνης
Υπάρχουν δύο τύποι εξέτασης αντισφαιρίνης ή Coombs: άμεση και έμμεση.
Άμεση δοκιμή Coombs ή άμεση δοκιμή αντισφαιρίνηςανιχνεύει αντισώματα που σχετίζονται με τα ερυθρά αιμοσφαίρια. Χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό της αναιμίας. Σε αυτή την ασθένεια, τα ερυθρά αιμοσφαίρια καταστρέφονται πιο γρήγορα από ό,τι παράγονται.
Έμμεση δοκιμή Coombs ή έμμεση δοκιμή αντισφαιρίνηςπραγματοποιούνται για την αναζήτηση αντισωμάτων που δεν σχετίζονται με τα ερυθρά αιμοσφαίρια. Για το δείγμα χρησιμοποιείται ορός αίματος, στον οποίο εντοπίζονται αντισώματα. Αυτή η διαδικασία είναι αρκετά σπάνια: εκτελείται κυρίως για τον προσδιορισμό της πιθανότητας μετάγγισης αίματος ή ως στάδιο στην εξέταση εγκύων γυναικών.
4. Αποτελέσματα της αντίδρασης Coombs
Κανόνας:
Αρνητικό αποτέλεσμα δοκιμής - δεν ανιχνεύθηκαν αντισώματα.
- Άμεση δοκιμή Coombs. Ένα αρνητικό άμεσο αποτέλεσμα της δοκιμής αντισφαιρίνης σημαίνει ότι το αίμα σας δεν έχει αντισώματα που σχετίζονται με τα ερυθρά αιμοσφαίρια.
- Έμμεση δοκιμή Coombs. Ένα αρνητικό αποτέλεσμα έμμεσης εξέτασης αντισφαιρίνης σημαίνει ότι το αίμα σας είναι συμβατό με το αίμα του δότη. Για μια έγκυο γυναίκα, αυτό το αποτέλεσμα σημαίνει ότι το σώμα της δεν έχει αναπτύξει αντισώματα κατά του Rh-θετικού τύπου αίματος του παιδιού της (δεν έχει συμβεί Rh-ευαισθητοποίηση).
Απόκλιση από τον κανόνα:
- Άμεση δοκιμή Coombs. Μια θετική άμεση δοκιμή αντισφαιρίνης σημαίνει ότι το αίμα σας έχει αντισώματα που καταπολεμούν τα ερυθρά αιμοσφαίρια. Αυτό μπορεί να προκληθεί από μη συμβατές μεταγγίσεις αίματος ή ασθένειες όπως η αιμολυτική αναιμία ή η αιμολυτική νόσος του νεογνού (HDN).
- Έμμεση δοκιμή Coombs. Ένα θετικό αποτέλεσμα έμμεσης εξέτασης αντισφαιρίνης σημαίνει ότι το αίμα σας δεν είναι συμβατό με το αίμα του δότη. Σε μια έγκυο, τέτοια αποτελέσματα σημαίνουν την παρουσία αντισωμάτων κατά του θετικού παράγοντα Rh του αίματος του μωρού (Rh ευαισθητοποίηση). Εάν το μωρό έχει θετικό παράγοντα αίματος Rh, η μητέρα θα παρακολουθείται στενά από γιατρό καθ' όλη τη διάρκεια της εγκυμοσύνης.
Κανονικά, δεν υπάρχουν αντισώματα στα ερυθροκύτταρα στο αίμα.
Η άμεση δοκιμή Coombs είναι μια δοκιμή αντισφαιρίνης (συγκόλληση γέλης, η οποία επιτρέπει την ανίχνευση πλήρων δισθενών αντισωμάτων), η οποία προσδιορίζει τα αντισώματα της κατηγορίας IgG και το συστατικό C3 του συμπληρώματος στην επιφάνεια των ερυθροκυττάρων. Τυπικά, τα αντισώματα που ανιχνεύονται με απευθείας τεστ Coombs έχουν ευρεία ειδικότητα που δεν σχετίζεται με ένα καλά εδραιωμένο αντιγόνο. Μια θετική άμεση δοκιμή Coombs υποδεικνύει ξεκάθαρα την παρουσία αιμολυτικής αναιμίας σε έναν ασθενή, αν και δεν έχουν όλοι οι ασθενείς με θετική άμεση δοκιμή αντισφαιρίνης αυτή τη νόσο. Περίπου το 10% των ασθενών με αντισώματα ή συστατικά του συμπληρώματος στη μεμβράνη των ερυθροκυττάρων δεν μπορούν να ανιχνευθούν με απευθείας τεστ Coombs (αρνητικό τεστ), αλλά παρόλα αυτά πάσχουν από αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία. Για να διευκρινιστεί η ειδικότητα των αντισωμάτων σε τέτοιες περιπτώσεις, χρησιμοποιούνται δοκιμές με την έκλουσή τους. Το άμεσο τεστ Coombs, θετικό μόνο για συμπλήρωμα, συνήθως σχετίζεται με αντισώματα IgM ψυχρού τύπου. Σε αυτή την περίπτωση, τα αντισώματα IgM δεν υπάρχουν στα ερυθροκύτταρα στη βασική θερμοκρασία του σώματος. Ωστόσο, λόγω του γεγονότος ότι τα αντισώματα IgM σταθεροποιούν ενεργά το συμπλήρωμα και το συμπλήρωμα παραμένει στα ερυθροκύτταρα, σε αυτή τη μορφή αυτοάνοσης αιμολυτικής αναιμίας (νόσος ψυχρής συγκολλητίνης), η δοκιμή Coombs θα είναι θετική μόνο για συμπλήρωμα.
Το άμεσο τεστ Coombs είναι θετικό στην αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία που προκαλείται από θερμά αντισώματα, στην αυτοάνοση φαρμακευτική αναιμία (όταν λαμβάνουν μεθυλντόπα, έως και το 20% των ασθενών έχουν θετική αντίδραση), στον τύπο αιμολυτικής αναιμίας με προσρόφηση φαρμάκου, στον ανοσοσύνθετο τύπο αιμολυτικής αναιμίας (το η εξέταση είναι θετική μόνο για C3), με αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία που προκαλείται από αντισώματα κρύου - νόσος ψυχρής συγκολλητίνης (η εξέταση είναι θετική μόνο για C3). Με την παροξυσμική ψυχρή αιμοσφαιρινουρία, η άμεση εξέταση Coombs είναι αρνητική.
Έμμεση δοκιμή Coombs - μια έμμεση δοκιμή αντισφαιρίνης (ανιχνεύει ημιτελή αντισώματα) σας επιτρέπει να ανιχνεύσετε άτυπα αντισώματα στο αίμα, συμπεριλαμβανομένων αλλοαντισωμάτων, σε ξένα αντιγόνα ερυθροκυττάρων. Πήρε το όνομά του (έμμεσο) λόγω του ότι προχωρά σε 2 στάδια. Αρχικά, ο ορός αίματος του ασθενούς, που περιέχει ημιτελή αντισώματα, αλληλεπιδρά με το προστιθέμενο σωματιδιακό Ag diagnosticum χωρίς ορατές εκδηλώσεις. Στο δεύτερο στάδιο, ο εισαγόμενος ορός αντισφαιρίνης αλληλεπιδρά με ατελή αντισώματα προσροφημένα στα αντιγόνα, με την εμφάνιση ενός ορατού ιζήματος. Η μετάγγιση ομόλογων (αλλογενών) ερυθρών αιμοσφαιρίων ή η εγκυμοσύνη είναι οι πιο κοινές αιτίες αυτών των αντι-ερυθροκυττάρων αντισωμάτων. Ο συνδυασμός μιας θετικής έμμεσης δοκιμής Coombs με μια αρνητική άμεση δοκιμή δεν κάνει τίποτα για τη διάγνωση της αυτοάνοσης αιμολυτικής αναιμίας. Ένα θετικό έμμεσο τεστ Coombs προκαλεί ορισμένες δυσκολίες στην επιλογή αίματος για μετάγγιση και τη διασταύρωση με το συσσωρευμένο αίμα, αλλά δεν έχει άλλη διαγνωστική αξία.
Η εξέταση Coombs είναι μια εργαστηριακή εξέταση που πραγματοποιείται επηρεάζοντας την αιμοσυγκόλληση. Βασίζεται στην ευαισθησία των αντισωμάτων σε ανοσοσφαιρίνες και ενζυμικά στοιχεία, καθώς και στην ικανότητά τους να συγκολλούν ερυθροκύτταρα επικαλυμμένα με C3 ή Lg.
Άμεση διάγνωση του Coombs
Χρησιμοποιείται για την ανίχνευση αντισωμάτων ή συστατικών συμπληρώματος που είναι τοποθετημένα στο εξωτερικό των κυττάρων. Η άμεση δοκιμή Coombs εκτελείται με τα ακόλουθα βήματα.
Η χρήση ενός τέτοιου τεστ
Η διάγνωση του Direct Coombs χρησιμοποιείται σε ορισμένες περιπτώσεις, όπως:
- επιδράσεις μετάγγισης?
- αυτοάνοση αιμόλυση?
- αιμολυτική αναιμία που προκαλείται από φάρμακα.
Έμμεση δοκιμή Coombs
Αυτό το διαγνωστικό καθιστά δυνατή την ανίχνευση αντισωμάτων σε κύτταρα στον ορό, ο οποίος επωάζεται, κατά κανόνα, με ερυθροκύτταρα τύπου 0 δότη και στη συνέχεια πραγματοποιείται απευθείας δοκιμή. Εφαρμόστε έμμεσα διαγνωστικά Coombs στις ακόλουθες περιπτώσεις:
Πώς να προετοιμαστείτε για ανάλυση
Υπάρχουν ορισμένοι κανόνες για την προετοιμασία για την έρευνα.
- Εάν ο ασθενής είναι νεογέννητο, οι γονείς πρέπει να γνωρίζουν ότι η εξέταση θα βοηθήσει στη διάγνωση της ΗΝ (αιμολυτική νόσος του νεογνού).
- Εάν ο ασθενής έχει υποψίες για αιμολυτική αναιμία, θα πρέπει να του εξηγηθεί ότι η ανάλυση θα του επιτρέψει να ανακαλύψει εάν προκαλείται από προστατευτικές διαταραχές, φάρμακα ή άλλους παράγοντες.
- Το τεστ Coombs, άμεσο και έμμεσο, δεν επιβάλλει διατροφικούς ή διατροφικούς περιορισμούς.
- Είναι απαραίτητο να ειδοποιηθεί ο ασθενής ότι θα ληφθεί αίμα από φλέβα για την εξέταση και επίσης να του πει πότε ακριβώς θα γίνει η φλεβοκέντηση.
- Θα πρέπει επίσης να προειδοποιηθείτε για την πιθανότητα ενόχλησης κατά την περίοδο της επίδεσης του βραχίονα και της ίδιας της διαδικασίας.
- Τα φάρμακα που μπορούν να επηρεάσουν το αποτέλεσμα του δείγματος θα πρέπει να διακόπτονται.
Αυτά τα φάρμακα περιλαμβάνουν:
- "Στρεπτομυκίνη";
- "Μεθυλντόπα";
- "Προκαϊναμίδη";
- σουλφοναμίδια;
- "Melphalan";
- "Κινιδίνη";
- "Rifampin";
- "Ισονιαζίδη";
- κεφαλοσπορίνες;
- "Υδραλαζίνη";
- "Χλωροπρομαζίνη";
- "Λεβοντόπα"?
- "Τετρακυκλίνη";
- "Διφαινυλυδαντοΐνη";
- "Εθοσουξιμίδιο";
- "Πενικιλλίνη";
- μεφαιναμικό οξύ.
Η αιμοληψία γίνεται το πρωί με άδειο στομάχι.
Πώς πραγματοποιείται η εκδήλωση
Η δοκιμή Coombs πραγματοποιείται με την ακόλουθη σειρά:
- Όταν εκτελούνται διαγνωστικά σε ενήλικα ασθενή, μετά τη φλεβοκέντηση, το αίμα λαμβάνεται σε σωλήνες με EDTA (αιθυλενοδιαμινοτετραοξικό).
- Από το νεογέννητο, το αίμα λαμβάνεται από τον ομφάλιο λώρο σε ποτήρι ζέσεως με EDTA.
- Η περιοχή παρακέντησης πιέζεται με ένα βαμβάκι μέχρι να σταματήσει η αιμορραγία.
- Όταν εμφανιστεί μώλωπες στο σημείο της φλεβοκέντησης, συνταγογραφούνται ζεστές κομπρέσες.
- Μετά από αιμοληψία, ο ασθενής επιτρέπεται να επιστρέψει στη λήψη των στερητικών φαρμάκων.
- Οι γονείς του νεογνού θα πρέπει να ενημερωθούν ότι μπορεί να απαιτείται δευτερογενής ανάλυση για την παρακολούθηση της δυναμικής της αναιμίας.
Οφέλη από το τεστ Coombs
Μια τέτοια μελέτη έχει ορισμένα πλεονεκτήματα, συγκεκριμένα:
Μειονεκτήματα της ανάλυσης
Το θετικό τεστ Coombs είναι μια μάλλον επίπονη μέθοδος εξέτασης, υποδηλώνοντας μια χαρακτηριστική ακρίβεια εκτέλεσης. Κατά τη χρήση του, μπορεί κανείς να συναντήσει ορισμένες δυσκολίες, ειδικά που σχετίζονται με την ερμηνεία ασθενώς θετικών επιρροών.
Έχει διαπιστωθεί ότι λανθασμένες αρνητικές ή ασθενώς θετικές αντιδράσεις στην παραγωγή δειγμάτων Coombs μπορεί να είναι οι συνέπειες της μη ικανοποιητικής ενεργού πλύσης των κυττάρων, η αποδυνάμωση του αντιδραστηρίου αντισφαιρίνης από υπολείμματα ορού, καθώς και ενώσεις με εμφάνιση χωρίς λίπος, στις οποίες η αντισφαιρίνη μπορεί να διορθωθεί, χάνοντας την αποτελεσματικότητά της.
Η δοκιμή Coombs έχει ένα άλλο μειονέκτημα - τη χαμηλή σταθερότητα του αντιδραστηρίου αντισφαιρίνης, η απόκτηση και αποθήκευση του οποίου έχει μεμονωμένα χαρακτηριστικά, γεγονός που καθιστά επίσης δύσκολη την αριθμητική εκτίμηση της επίδρασης του ορού αντισφαιρίνης στην αιμοσυγκόλληση.
Ασθένειες που μπορούν να εντοπιστούν κατά τη διάρκεια της μελέτης
Τα διαγνωστικά του Coombs καθιστούν δυνατό τον εντοπισμό ορισμένων τύπων ασθενειών, όπως:
- αιμολυτική αδιαθεσία νεογνών.
- διάφορες αντιδράσεις μετάγγισης.
- αυτοάνοση αιμόλυση?
- φαρμακευτική αιμολυτική αναιμία.
Μέχρι σήμερα, το τεστ Coombs θεωρείται ένα αρκετά δημοφιλές σύστημα αιματολογικών εξετάσεων τόσο σε ενήλικα όσο και σε νεογέννητα. Καθιστά δυνατό τον εντοπισμό πολλών διαφορετικών ασθενειών.
Αιμολυτική αναιμία, που προκαλούνται από αυτοάνοσα σώματα που στρέφονται εναντίον των ερυθρών αιμοσφαιρίων τους, δεν έχουν αποσαφηνιστεί επακριβώς. Ωστόσο, υποτίθεται ότι ορισμένοι παράγοντες (για παράδειγμα, ένας ιός, μια ανώμαλη πρωτεΐνη) αλλάζουν τα ερυθροκύτταρα με τέτοιο τρόπο ώστε το σώμα να τα αντιλαμβάνεται ήδη ως «κάτι εξωγήινο» και να τα αντιμετωπίζει με τη βοήθεια αντισωμάτων. Σύμφωνα με μια άλλη θεωρία, τα αντισώματα που στρέφονται κατά των ερυθροκυττάρων προκύπτουν σχεδόν τυχαία κατά το σχηματισμό μη φυσιολογικών σωμάτων πρωτεΐνης πλάσματος σε ορισμένες ασθένειες. Τέτοια πρωτεϊνικά σώματα, εξίσου "τυχαία", μπορούν να δώσουν αντιδράσεις που μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τη διάγνωση (για παράδειγμα, η ιογενής πνευμονία είναι γνωστό ότι δίνει μια θετική αντίδραση Wassermann, μια θετική αντίδραση Paul-Bunnel και μια αντίδραση ψυχρής συγκόλλησης).
Υπάρχουν δύο κύριοι τύποι αυτοαντισωμάτωνμε αιμολυτική αναιμία, συγκεκριμένα: θερμά αντισώματα (αντιδρούν στους 37 °) και ψυχρά αντισώματα (η αντιδραστικότητα των οποίων αυξάνεται καθώς η θερμοκρασία πλησιάζει το μηδέν). Τα θερμά αντισώματα είναι πιο κοινά από τα κρύα. Η Dacie διαπίστωσε ότι οι θερμές αιμολυσίνες είναι δύο φορές πιο συχνές από τις ψυχρές αιμολυσίνες. Οι αιμολυσίνες και οι συγκολλητίνες δεν είναι θεμελιωδώς διαφορετικά αντισώματα: διαφέρουν μόνο ως προς τη φύση της δράσης τους. Οι συγκολλητίνες συγκολλούν τα ερυθρά αιμοσφαίρια και οι αιμολυσίνες τα καθιστούν πιο ευαίσθητα στη σύνθετη διαδικασία της αιμόλυσης (συμπλήρωμα!). Τα αυτοαντισώματα, που στερεώνονται στα ερυθροκύτταρα, σχηματίζουν ένα σύμπλεγμα ερυθροκυττάρων-σφαιρίνης. Αυτό το σύμπλεγμα ανιχνεύεται χρησιμοποιώντας το τεστ αντισφαιρίνης Coombs.
Δοκιμή Coombsπραγματοποιείται με ορό Coombs, για την παρασκευή του οποίου το κουνέλι ευαισθητοποιείται με ανθρώπινο ορό, κατά του οποίου σχηματίζονται αντισώματα στον ορό του κουνελιού. Κάτω από τη δράση ενός τέτοιου ευαισθητοποιημένου ορού στα ανθρώπινα ερυθροκύτταρα, η συγκόλληση τους συμβαίνει εάν οι υποδοχείς των ερυθροκυττάρων καταλαμβάνονται από ανασταλτικά αντισώματα. Εφόσον αυτά τα ανασταλτικά αντισώματα προέρχονται από ανθρώπινο ορό, συγκολλούνται με ορό κουνελιού που είναι ευαισθητοποιημένος στο ανθρώπινο πλάσμα και περιέχει ιζηματίνες. Αυτή η αντίδραση ονομάζεται δοκιμή Coombs. για την αιμολυτική αναιμία με βάση τα αυτοάνοσα σώματα (Lo tit) είναι σχεδόν συγκεκριμένη (για λεπτομέρειες, βλέπε Maier).
Γενικά, με αιμολυτική αναιμίαμε πρωτογενή παραβίαση των ερυθροκυττάρων, το τεστ Coombs είναι αρνητικό και με επίκτητα είναι θετικό. Ωστόσο, υπάρχουν ορισμένες εξαιρέσεις σε αυτόν τον κανόνα: ένα ψευδώς θετικό τεστ Coombs βρέθηκε κατά τη διάρκεια κρίσεων συνταγματικής αιμολυτικής αναιμίας και σε μικρότερο βαθμό - επίσης μερικές φορές μετά από σπληνεκτομή, με ρευματική πολυαρθρίτιδα, σαρκοείδωση, μετά από συχνές μεταγγίσεις αίματος και με συστηματικό λύκο ερυθηματώδης. Φυσικά, με επίκτητη αιμολυτική αναιμία χωρίς σχηματισμό αυτοάνοσων σωμάτων, είναι αρνητικό.
Αιμολυτική αναιμίαπου προκαλούνται από αυτοάνοσα σώματα μπορούν να υποδιαιρεθούν σε:
α) οξείες, υποξείες και χρόνιες μορφές, καθώς και
β) ιδιοπαθής με άγνωστη αιτιολογία και γ) συμπτωματική [ιογενής πνευμονία (μόνο κρύες συγκολλητίνες), χρόνια λεμφική λευχαιμία, δικτυοσάρκωμα, λεμφοσάρκωμα, συστηματικός ερυθηματώδης λύκος (κυρίως θερμός, σπάνια ψυχρός συγκολλητίνες), σύφιλη (ψυχροσυγκολλητίνες) υπαλλήλους)).
γ) συμπτωματική [ιογενής πνευμονία (μόνο ψυχρές συγκολλητίνες), χρόνια λεμφική λευχαιμία, δικτυοσάρκωμα, λεμφοσάρκωμα, συστηματικός ερυθηματώδης λύκος (κυρίως θερμές, λιγότερο συχνά ψυχρές συγκολλητίνες), σύφιλη (ψυχρές συγκολλητίνες), όγκοι ωοθηκών (M).
Κλινική αιμολυτικής αναιμίας, που αναπτύσσεται υπό την επίδραση των αυτοάνοσων σωμάτων, είναι πολύ ποικιλόμορφο, και ως εκ τούτου είναι δύσκολο να σχεδιαστεί η γενική κλινική τους εικόνα. Τα άτομα όλων των ηλικιών και των δύο φύλων προσβάλλονται ομοιόμορφα. Ωστόσο, οι ιδιοπαθείς μορφές φαίνεται να είναι πιο συχνές στις γυναίκες (Sacks και Workman).
Κλινική εικόνα της ιδιοπαθούς μορφήςποικίλλει ανάλογα με τη σοβαρότητα της νόσου. Σε χρόνιες περιπτώσεις η έναρξη είναι σταδιακή, η νόσος διαρκεί πολλά χρόνια με συχνές παροξύνσεις. Η βαρύτητα της αναιμίας ποικίλλει ανάλογα με τον βαθμό της αιμόλυσης. Παρατηρούνται πτώσεις αιμοσφαιρίνης έως και 10%, σε άλλες περιπτώσεις η αιμοσφαιρίνη διατηρείται για μεγάλο χρονικό διάστημα κατά 50-60%. Η ένταση της δικτυοκυττάρωσης και του ικτερικού χρωματισμού του δέρματος και του ορού αντιστοιχεί στον βαθμό αιμόλυσης. Η χολερυθρίνη βρίσκεται πολύ σπάνια στα ούρα, αφού δεν περνά από τα νεφρά, αλλά παρατηρείται αιμοσφαιρινουρία. Η σπλήνα σε χρόνιες περιπτώσεις είναι συχνά διευρυμένη και μπορεί να φτάσει ακόμη και σε πολύ σημαντικά μεγέθη, ενώ σε άλλες περιπτώσεις είναι ακόμα ψηλαφητή. Το συκώτι σπάνια διευρύνεται.
Στο αίμα στις περισσότερες περιπτώσειςπαρατηρείται μακροκυττάρωση, σε οξέα στάδια υπάρχουν επίσης πολλά μικροκύτταρα, η νορμοβλάστωση και η πολυχρωμασία σπάνια απουσιάζουν, η λευκοκυττάρωση μπορεί να φτάσει τις 30.000, τα αιμοπετάλια είναι φυσιολογικά. Σε ορισμένες περιπτώσεις, ωστόσο, υπάρχει έντονη θρομβοπενία. Ο Evans εξηγεί αυτές τις περιπτώσεις με την ταυτόχρονη παρουσία αντισωμάτων κατά των αιμοπεταλίων, ώστε να υπάρχει και αιμολυτική αναιμία και θρομβοπενία λόγω της δράσης αυτοάνοσων σωμάτων - σύνδρομο Evans (Evans). Η ωσμωτική αντίσταση είναι ελαφρώς μειωμένη, αλλά όχι στον ίδιο βαθμό και όχι τόσο μόνιμα όπως στη δομική σφαιρική κυτταρική αναιμία. Η δοκιμή αντοχής στη θερμότητα (Hegglin-Maier) μετά από 6 ώρες μπορεί επίσης να δώσει μια ελαφρά αιμόλυση (ιδία παρατήρηση), αλλά σε μικρότερο βαθμό από ό,τι στην αναιμία της Marchiafava. Η αιμοσιδερίνη βρίσκεται επίσης στα ούρα (ιδία παρατήρηση).