Δοκιμή Coombs
Η άμεση δοκιμή Coombs είναι μια δοκιμή αντισφαιρίνης (συγκόλληση σε γέλη που επιτρέπει την ανίχνευση πλήρων δισθενών αντισωμάτων), η οποία ανιχνεύει αντισώματα κατηγορίας IgG και το συστατικό C3 του συμπληρώματος στην επιφάνεια των ερυθρών αιμοσφαιρίων. Τυπικά, τα αντισώματα που ανιχνεύονται με την άμεση δοκιμή Coombs έχουν ευρεία ειδικότητα που δεν σχετίζεται με ένα καλά εδραιωμένο αντιγόνο. Μια θετική άμεση δοκιμή Coombs δείχνει ξεκάθαρα ότι ο ασθενής έχει αιμολυτική αναιμία, αν και δεν πάσχουν όλοι οι ασθενείς με θετική άμεση δοκιμασία αντισφαιρίνης από αυτή τη νόσο. Στο 10% περίπου των ασθενών, τα αντισώματα ή τα συστατικά του συμπληρώματος στη μεμβράνη των ερυθρών αιμοσφαιρίων δεν μπορούν να προσδιοριστούν με απευθείας τεστ Coombs (το τεστ είναι αρνητικό), αλλά, παρόλα αυτά, πάσχουν από αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία. Για να διευκρινιστεί η ειδικότητα των αντισωμάτων σε τέτοιες περιπτώσεις, χρησιμοποιούνται δοκιμές με την έκλουσή τους. Ένα άμεσο τεστ Coombs, θετικό μόνο για συμπλήρωμα, συνήθως αναφέρεται σε κρύα αντισώματα τύπου IgM. Σε αυτή την περίπτωση, τα αντισώματα IgM δεν υπάρχουν στα ερυθρά αιμοσφαίρια στη βασική θερμοκρασία του σώματος. Ωστόσο, λόγω του γεγονότος ότι τα αντισώματα IgM σταθεροποιούν ενεργά το συμπλήρωμα και το συμπλήρωμα παραμένει στα ερυθρά αιμοσφαίρια, με αυτή τη μορφή αυτοάνοσης αιμολυτικής αναιμίας (νόσος της κρύας αγγουτινίνης), η δοκιμή Coombs θα είναι θετική μόνο για συμπλήρωμα.
Το άμεσο τεστ Coombs είναι θετικό για αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία που προκαλείται από θερμά αντισώματα, αυτοάνοση αναιμία που προκαλείται από φάρμακα (όταν λαμβάνουν μεθυλντόπα, έως και 20% των ασθενών έχουν θετική αντίδραση), τύπος αιμολυτικής αναιμίας με προσρόφηση φαρμάκου, τύπος αιμολυτικού ανοσοσύνθετου αναιμία (το τεστ είναι θετικό μόνο για C3), με αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία που προκαλείται από αντισώματα κρύου - νόσος ψυχρής συγκολλητίνης (η εξέταση είναι θετική μόνο για C3). Στην παροξυσμική ψυχρή αιμοσφαιρινουρία, το άμεσο τεστ Coombs είναι αρνητικό.
Στην οξεία περίοδο της νόσου, λόγω της καταστροφής των ερυθρών αιμοσφαιρίων στα οποία καταγράφηκε μεγάλος αριθμός αντισωμάτων, κατά τη διάρκεια αιμολυτικής κρίσης, καθώς και με ανεπαρκή αριθμό αντισωμάτων κατά τη χρόνια πορεία της νόσου, ένα αρνητικό μπορεί να παρατηρηθεί άμεση δοκιμή Coombs.
| : | ||
|---|---|---|
- Σημαντική προϋπόθεση για τη διασφάλιση της ποιότητας των εργαστηριακών εξετάσεων αίματος είναι η λήψη του υλικού με άδειο στομάχι, το πρωί (πριν τις 12:00).
- 12 ώρες πριν από τη δοκιμή, θα πρέπει να αποφύγετε την κατανάλωση αλκοόλ, το κάπνισμα, το φαγητό και τον περιορισμό της σωματικής δραστηριότητας.
- Το πρωί της εξέτασης αίματος, μπορείτε να πιείτε νερό.
- Αποφύγετε τη λήψη φαρμάκων. Εάν δεν είναι δυνατή η διακοπή της λήψης του φαρμάκου, πρέπει να ενημερώσετε το εργαστήριο.
- Συνιστάται η λήψη του υλικού πριν από τη διενέργεια οποιωνδήποτε ιατρικών διαγνωστικών διαδικασιών.
- Κατά την αξιολόγηση των επιπέδων ορμονών στις γυναίκες, είναι σημαντικό να λάβετε υπόψη την ημέρα του εμμηνορροϊκού κύκλου κατά την οποία είναι βέλτιστη η μέτρηση ορισμένων ορμονών. Μπορείτε να λάβετε αυτές τις πληροφορίες από το γιατρό σας.
| Δείκτης | Χαρακτηριστικό γνώρισμα |
|---|---|
| Αναλυτής και σύστημα δοκιμής | Κάρτες gel? DiaMed AG (Ελβετία) |
| Τιμές αναφοράς | Αρνητικό αποτέλεσμα / Θετικό αποτέλεσμα |
| Παράγοντες παρεμβολής. Φάρμακα | |
| Ένα θετικό τεστ είναι δυνατό όταν λαμβάνετε τα ακόλουθα φάρμακα: ακεταμινοφαίνη, σαλικυλικό οξύ, αμινοπυρίνη, αντιισταμινικά, καρβρωμικά, κεφαλοσπορίνες, χλωροπρομαζίνη, χλωροπροπαμίδη, σισπλατίνη, κλονιδίνη, διπυρόνη, αιθοσουξιμίδη, φενφλουραμίνη, φουαδαζινεϊνδροζινιδίνη, υδροσουλαμίνη, φουαζινεϊνιδραζιναλοραμίνη, φουαζινεϊνδροζινιδαλορίνη, ιπυδραζινεϊνιδρίνη, ιδρομπουαζιναλορίνη , λεβοντόπα, μεφεναμικό οξύ, μελφαλάνη, μεθαδόνη, μεθυλντόπα, μεθυλσεργίδη, νομιφενσίνη, πενικιλλαμίνη, πενικιλλίνες, φαινακετίνη, φαινυλβουταζόνη, προβενεσίδη, προκαϊναμίδη, κινιδίνη, κινίνη, ριφαμπιίνη, στρεπτομυκίνη, σουλτραμυδρίνη, σουλτραμυδρίνη ιδέα | |
| Ενδείξεις χρήσης | |
|
|
| Ερμηνεία αποτελεσμάτων | |
|
Κανονικά, το άμεσο τεστ Coombs είναι αρνητικό. Θετικό τεστ Coombs για:
|
|
Άμεση δοκιμή Coombs. Αυτό το τεστ χρησιμοποιείται για να αποδείξει την παρουσία ανασταλτικών αντισωμάτων που είναι σταθεροποιημένα στα ερυθρά αιμοσφαίρια του παιδιού. Ένα θετικό άμεσο τεστ υποδηλώνει ευαισθητοποίηση και χρησιμεύει ως πειστικό σημάδι αιμολυτικής νόσου του νεογνού ακόμη και πριν την εμφάνιση άλλων κλινικών σημείων. Κατ' εξαίρεση και μόνο σε πολύ σοβαρές περιπτώσεις, μια άμεση εξέταση Coombs μπορεί να είναι αρνητική λόγω της ήδη εμφανιζόμενης, σχεδόν πλήρους αιμόλυσης των ευαισθητοποιημένων ερυθρών αιμοσφαιρίων.
Ένα άμεσο τεστ Coombs εκτελείται ως εξής: 5 σταγόνες αίματος που λαμβάνονται από τη φτέρνα του παιδιού τοποθετούνται σε δοκιμαστικό σωλήνα και προστίθενται 5 ml φυσιολογικού ορού. Ανακατεύουμε καλά και φυγοκεντρούμε για 10 λεπτά. Το διαυγές υγρό πάνω από το ίζημα των ερυθρών αιμοσφαιρίων διαχωρίζεται. Στη συνέχεια προσθέστε ξανά 5 ml φυσιολογικού ορού, ανακατέψτε και φυγοκεντρήστε. Μετά την ανάμιξη με φυσιολογικό ορό τρεις φορές, τα ερυθρά αιμοσφαίρια πλένονται καλά. Μετά τον τελευταίο διαχωρισμό του υπερκειμένου, το ίζημα των ερυθροκυττάρων σε ποσότητα 0,1 ml αναμιγνύεται με 0,9 ml φυσιολογικού διαλύματος. Εφαρμόστε 2-3 σταγόνες από αυτό το μείγμα σε μια γυάλινη πλάκα και προσθέστε μία σταγόνα ορού Coombs. Η παρουσία συγκόλλησης υποδηλώνει ότι η αντίδραση είναι θετική (θετική άμεση δοκιμή Coombs). Η μελέτη πρέπει να διεξάγεται σε θερμοκρασία δωματίου πάνω από 16° για να αποφευχθεί η επίδραση των ψυχρών συγκολλητινών.
Έμμεση δοκιμή Coombsχρησιμεύει ως ένδειξη της παρουσίας ελεύθερων αντισωμάτων στον μητρικό ορό και πραγματοποιείται με μητρικό ορό.
Η αιμολυτική νόσος σε νεογνό με ασυμβατότητα Rh συνήθως εκδηλώνεται μετά τη δεύτερη εγκυμοσύνη. Το πρώτο παιδί γεννιέται υγιές, το δεύτερο με σημάδια ήπιας αναιμίας και μόνο μετά την τρίτη εγκυμοσύνη γεννιούνται παιδιά με εμφανή σημάδια αιμολυτικής νόσου. Μόνο προ-ευαισθητοποιημένες γυναίκες μπορούν να γεννήσουν παιδί με συμπτώματα αιμολυτικής νόσου κατά την πρώτη τους εγκυμοσύνη. Σε ορισμένες περιπτώσεις, ο εμβολιασμός προκαλεί αμβλώσεις και θνησιγένεια. Για την εμφάνιση και τη σοβαρότητα της νόσου, η κατάσταση του πλακούντα και η διάρκεια έκθεσης των μητρικών συγκολλητινών στο έμβρυο είναι σημαντικές. Όταν οι συγκολλητίνες εμφανίζονται 10-14 εβδομάδες πριν από τη γέννηση, το παιδί συνήθως εμφανίζει υποκλινικές μορφές. Η πρώιμη εμφάνιση συγκολλητινών, 15-26 εβδομάδες πριν από τη γέννηση, προκαλεί σοβαρές μορφές της νόσου. Σε όλες τις μορφές της νόσου, η κύρια διαδικασία είναι η αιμόλυση. Η συνέπεια της αντίδρασης αντιγόνου-αντισώματος είναι η αιμόλυση, η βλάβη στο ήπαρ και τα τριχοειδή αγγεία του εγκεφάλου. Ανάλογα με το ποια βλάβη κυριαρχεί, παρατηρούνται διάφορες μορφές της νόσου. Μερικά αναφυλακτικά φαινόμενα είναι επίσης επικίνδυνα. Οδηγούν στο σχηματισμό ουσιών που μοιάζουν με ισταμίνη, προκαλώντας σοβαρή βλάβη στα ηπατικά κύτταρα και ιδιαίτερα στα γαγγλιακά κύτταρα των βασικών γαγγλίων, του κέρατου της αμμωνίας, του προμήκη μυελού και ακόμη και του εγκεφαλικού φλοιού. Όταν τα ηπατικά κύτταρα είναι κατεστραμμένα, ο ηπατικός ίκτερος προστίθεται στον εξωηπατικό ίκτερο. Τα παιδιά πεθαίνουν λόγω σοβαρών συμπτωμάτων του kernicterus. Εάν επιβιώσουν, παραμένουν συμπτώματα βλάβης στο νευρικό σύστημα (διαταραχές του εξωπυραμιδικού συστήματος με χοροαθητωτικές κινήσεις, ιδιόμορφο χορευτικό βάδισμα, αναγκαστικές κινήσεις του κεφαλιού, μερικές φορές διαταραχή συντονισμού εκούσιων κινήσεων με συχνές πτώσεις, αυξημένος μυϊκός τόνος, ψυχική καθυστέρηση, δηλαδή με σημεία τέτοιας που ονομάζονται εγκεφαλοπάθεια posticteria infantum).
Δοκιμή Coombs– μια ανάλυση για την ανίχνευση αντισωμάτων προσκολλημένων σε μια επιφάνεια ή διαλυμένων στο πλάσμα. Χρησιμοποιείται για την ανίχνευση ανοσοποίησης και αντισωμάτων στα ερυθρά αιμοσφαίρια. Το δεύτερο όνομα είναι τεστ αντισφαιρίνης. Μπορεί να είναι άμεσο ή έμμεσο.
Στο άμεση εξέταση αντισφαιρίνηςανιχνεύει αντισώματα στερεωμένα στην επιφάνεια των ερυθρών αιμοσφαιρίων. Διενεργείται σε περίπτωση υποψίας, άλλων αυτοάνοσων νοσημάτων, μετά από λήψη φαρμάκων (μεθυλντόπα, πενικιλίνη, κινίνη) κ.λπ.
Τα ερυθρά αιμοσφαίρια έχουν ευαισθητοποιηθεί in vivo - τα αντισώματα είναι ήδη σταθερά συνδεδεμένα με αυτά και η προσθήκη ορού αντισφαιρίνης (anti-IgG) προκαλεί τη συγκόλληση των ευαισθητοποιημένων κυττάρων μεταξύ τους, κάτι που είναι ορατό με γυμνό μάτι.
Έμμεση δοκιμή Coombsανιχνεύει αντισώματα κατά των ερυθροκυττάρων στο πλάσμα του αίματος, πραγματοποιείται πριν από τη μετάγγιση αίματος και κατά τη διάρκεια.
Τα αντισώματα κατά των ερυθροκυττάρων είναι ένας τύπος αυτοαντισωμάτων, δηλ. αντισώματα κατά των δικών σας ιστών. Ένα αυτοαντίσωμα εμφανίζεται όταν το ανοσοποιητικό σύστημα αντιδρά ανώμαλα σε ορισμένα φάρμακα, όπως υψηλές δόσεις πενικιλίνης.
Τα ερυθρά αιμοσφαίρια στην επιφάνειά τους περιέχουν διάφορες χημικές δομές (γλυκολιπίδια, σακχαρίτες, γλυκοπρωτεΐνες και πρωτεΐνες), στην ιατρική που ονομάζονται αντιγόνα. Ένα άτομο κληρονομεί από τους γονείς του έναν συγκεκριμένο χάρτη αντιγόνων σε κάθε ερυθρό αιμοσφαίριο.
Τα αντιγόνα συνδυάζονται σε ομάδες και στη συνέχεια το αίμα χωρίζεται σε διάφορες ομάδες - σύμφωνα με το σύστημα AB0, Rh, Kell, Lewis, Kidd, Duffy. Τα πιο διάσημα και σημαντικά στο έργο ενός γιατρού είναι το AB0 και ο παράγοντας Rh (Rh).
Σύστημα AB0
Η κατάσταση Rh ενός ατόμου καθορίζεται από την παρουσία αυτών των αντιγόνων. Ένα ιδιαίτερα σημαντικό αντιγόνο των ερυθροκυττάρων είναι το αντιγόνο D. Αν υπάρχει, τότε μιλούν για Rh θετικό RhD αίματος, και αν δεν είναι εκεί - ω Rh αρνητικό Rhd.
Εάν το αντίστοιχο αντίσωμα προσκολληθεί στα αντιγόνα των ερυθροκυττάρων, το ερυθροκύτταρο καταστρέφεται - αιμόλυση.
Ενδείξεις
Η κύρια ένδειξη για απευθείαςτεστ αντισφαιρίνης- υποψία αιμολυτικής αναιμίας. Τις περισσότερες φορές πραγματοποιείται για πρωτοπαθή αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία, αιμόλυση σε ρευματικές, όγκους, λοιμώδεις νόσους, αιμόλυση που προκαλείται από φάρμακα.
Εάν η αναιμία εμφανιστεί αρκετές ημέρες ή μήνες μετά από μετάγγιση αίματος ή με παρατεταμένο ίκτερο σε νεογέννητο, γίνεται επίσης μια άμεση εξέταση Coombs.
Εμμεσοςδιενεργείται δοκιμή αντισφαιρίνηςπριν από τη μετάγγιση αίματος και κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης μιας γυναίκας με αρνητική Rh.
Αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία
Αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία (πρωτοπαθής)– ένα κλασικό αυτοάνοσο νόσημα με άγνωστα αίτια. Η αλληλεπίδραση εντός του ανοσοποιητικού συστήματος διαταράσσεται, γεγονός που οδηγεί στην αντίληψη των ερυθρών αιμοσφαιρίων ως ξένα. Στους λεμφαδένες συντίθενται αντισώματα της κατηγορίας IgG (αντιδρούν στους t 37°C) ή/και IgM (στους t 40°C), τα οποία, όταν συνδέονται στην επιφάνεια του ερυθροκυττάρου, ενεργοποιούν έναν αριθμό ενζύμων (το σύστημα συμπληρώματος) και «τρυπούν» το τοίχωμα του ερυθροκυττάρου, γεγονός που οδηγεί στην καταστροφή του – αιμόλυση.
Τα πρώτα συμπτώματα προκαλούνται τόσο από την καταστροφή των ερυθρών αιμοσφαιρίων όσο και από τη μείωση της αιμοσφαιρίνης. Ανάμεσα τους:
- κόπωση, γενική αδυναμία, ευερεθιστότητα
- δύσπνοια
- πόνος στην κοιλιά και στο στήθος, ναυτία
- σκούρο χρώμα ούρων
- πόνος στην πλάτη
- ικτερικός αποχρωματισμός του δέρματος και των βλεννογόνων
- μείωση του αριθμού των ερυθρών αιμοσφαιρίων και
Θετικό αποτέλεσμα άμεσο Δοκιμές Coombs 100% επιβεβαιώνει τη διάγνωση της αυτοάνοσης αιμολυτικής αναιμίας, αποδεικνύοντας την αυτοάνοση προέλευσή της. Ταυτόχρονα, ένα αρνητικό αποτέλεσμα δεν καθιστά δυνατή την αφαίρεση της διάγνωσης.
Δευτεροπαθής αιμολυτική αναιμία
Δευτεροπαθής αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία και θετικό τεστ Coombs μπορεί να εμφανιστούν στις ακόλουθες ασθένειες:
- σύνδρομο Evans
- λοίμωξη από πνευμονία
Ένα θετικό τεστ αντισφαιρίνης για αυτές τις ασθένειες είναι ένα από τα συμπτώματα και όχι κριτήριο διάγνωσης.
Αιμολυτική νόσος του νεογνού
Αιτία αιμολυτική νόσος των νεογνών -ασυμβατότητα της ομάδας αίματος μητέρας και εμβρύου, στις περισσότερες περιπτώσεις σύμφωνα με το σύστημα Rh, σε μεμονωμένες περιπτώσεις - σύμφωνα με το σύστημα AB0, περιστασιακά - σύμφωνα με άλλα αντιγόνα.
Η σύγκρουση Rh αναπτύσσεται εάν το έμβρυο μιας Rh-αρνητικής γυναίκας κληρονομήσει Rh-θετικό αίμα από τον πατέρα.
Η ασθένεια αναπτύσσεται σε ένα νεογέννητο μόνο εάν η μητέρα έχει ήδη αναπτύξει αντισώματα στα αντίστοιχα αντιγόνα, κάτι που συμβαίνει μετά από προηγούμενες εγκυμοσύνες, εκτρώσεις και μη συμβατές μεταγγίσεις αίματος. Ο πιο συνηθισμένος λόγος για την ενεργοποίηση της σύνθεσης αντισωμάτων στα αντιγόνα της μεμβράνης των ερυθροκυττάρων είναι ο τοκετός (αιμορραγία εμβρύου-μητέρας). Ο πρώτος τοκετός γενικά γίνεται χωρίς επιπλοκές, αλλά οι επόμενοι είναι γεμάτοι με αιμολυτική νόσο του νεογνού τις πρώτες ημέρες μετά τη γέννηση.
Συμπτώματα αιμολυτικής νόσου του νεογνού:
- κιτρίνισμα του δέρματος
- και τους βλεννογόνους
- διευρυμένο ήπαρ και σπλήνα
- αναπνευστικά προβλήματα
- οίδημα ολόκληρου του σώματος
- διέγερση και σταδιακή καταστολή του κεντρικού νευρικού συστήματος
Αναιμία μετά από μετάγγιση αίματος
Έμμεση δοκιμή Coombsδιενεργείται πριν από τη μετάγγιση αίματος για την αξιολόγηση της συμβατότητας και μια άμεση εξέταση Coombs - μετά από αυτήν εάν υπάρχει υποψία αιμόλυσης μετά τη μετάγγιση, π.χ. παρουσία συμπτωμάτων όπως πυρετός, πότισμα (διαβάστε παρακάτω). Σκοπός της ανάλυσης είναι ο εντοπισμός αντισωμάτων στα μεταγγιζόμενα ερυθρά αιμοσφαίρια που έχουν συνδεθεί με τα ερυθρά αιμοσφαίρια του λήπτη και είναι η αιτία της αιμόλυσης μετά τη μετάγγιση, καθώς και η πρόωρη απομάκρυνση των ερυθρών αιμοσφαιρίων του δότη από την κυκλοφορία του αίματος του ο παραλήπτης (αυτός που έλαβε το αίμα).
Συμπτώματα:
- αύξηση της θερμοκρασίας του σώματος
- εξάνθημα
- πόνος στην πλάτη
- το κόκκινο
- ναυτία
- ζάλη
Αποκρυπτογράφηση
Αξίζει να υπενθυμίσουμε ότι οι θεμελιώδεις κανόνες για την αποκρυπτογράφηση των άμεσων και έμμεσων δοκιμών αντισφαιρίνης είναι οι ίδιοι. Η μόνη διαφορά είναι η θέση των αντισωμάτων - στο αίμα ή στα ερυθρά αιμοσφαίρια.
- Αν Η άμεση δοκιμή Coombs είναι αρνητική– αυτό σημαίνει ότι το αντίσωμα δεν «κάθεται» στα ερυθρά αιμοσφαίρια και θα πρέπει να αναζητηθεί περαιτέρω η αιτία των συμπτωμάτων και να γίνει έμμεση δοκιμή Coombs
- εάν ανιχνευθεί θετικό αποτέλεσμα της εξέτασης Coombs μετά από μετάγγιση αίματος, λοιμώξεις, φάρμακα - η θετικότητα διαρκεί έως και 3 μήνες (η διάρκεια ζωής των ερυθρών αιμοσφαιρίων είναι 120 ημέρες - 3 μήνες)
- ένα θετικό αποτέλεσμα της εξέτασης αντισφαιρίνης για ένα αυτοάνοσο νόσημα διαρκεί μήνες ή και χρόνια
Κανόνας
- άμεσο τεστ Coombs - αρνητικό
- έμμεση δοκιμή Coombs - αρνητική
Ένα ποιοτικά θετικό αποτέλεσμα μετριέται στον αριθμό των συν από ένα έως τέσσερα (+, ++, +++, ++++), και ποσοτικά σε ψηφιακή μορφή - 1:16, 1:256 κ.λπ.
Ναί. Ο γιατρός σας πρέπει οπωσδήποτε να γνωρίζει ότι έχετε λάβει μετάγγιση αίματος, καθώς επηρεάζει τη σωστή ερμηνεία των αποτελεσμάτων των εξετάσεων τώρα. Όταν λαμβάνετε αίμα κάποιου άλλου (αν και έχει ελεγχθεί πολλές φορές), υπάρχει πάντα η πιθανότητα το σώμα σας να αναπτύξει αντισώματα κατά του μεταγγιζόμενου αίματος. Αυτά τα αντισώματα είναι που θα έχουν αρνητικό αντίκτυπο στην υγεία. Για τις επόμενες μεταγγίσεις αίματος, ο γιατρός πρέπει να γνωρίζει ότι έχετε ήδη λάβει μεταγγίσεις, πράγμα που σημαίνει ότι έχει υπάρξει χρόνος για τη σύνθεση αντισωμάτων. Για τις έγκυες γυναίκες, αυτές οι πληροφορίες είναι ακόμη πιο σχετικές.
3. Εάν υπάρχει αναντιστοιχία στον παράγοντα Rh μεταξύ μητέρας και παιδιού, θα είναι όλα τα παιδιά άρρωστα;
Εξαρτάται από το αν το παιδί είναι Rh θετικό ή αρνητικό (RhD). Οι φορείς των ομάδων αίματος I, II, III και IV μπορεί να είναι είτε θετικοί είτε αρνητικοί Rh. Σε μια κατάσταση όπου η μητέρα είναι Rh αρνητική και το παιδί είναι Rh θετικό, αντισώματα θα παράγονται ήδη με την πρώτη εγκυμοσύνη, αλλά μόνο μετά την πρώτη γέννηση (ή τη λήξη της εγκυμοσύνης) θα υπάρξει άμεση επαφή μεταξύ του αίματος της μητέρας και το παιδί. Η αιμολυτική δράση των αντισωμάτων θα πραγματοποιηθεί μόνο κατά τη διάρκεια του δεύτερου και των επόμενων τοκετών, γεγονός που θα οδηγήσει σε αιμολυτική νόσο στο νεογνό.
Κάθε γυναίκα με αρνητικό παράγοντα Rh θα πρέπει να εξετάζεται προσεκτικά κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης και μετά τον τοκετό, πραγματοποιείται προληπτική θεραπεία για την πρόληψη της εμφάνισης αντισωμάτων και περαιτέρω επιπλοκών.
4. Κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης, είναι απαραίτητο να γνωρίζω την ομάδα αίματος του συζύγου μου πριν κάνω μια εξέταση Coombs;
Πρέπει όχι μόνο να γνωρίζετε, αλλά και να ελέγχετε τον τύπο αίματος του βιολογικού πατέρα του παιδιού κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης.
Δεδομένα
- προτάθηκε για πρώτη φορά στο Cambridge το 1945
- κατώφλι ευαισθησίας - τουλάχιστον 300 σταθερά μόρια αντισωμάτων σε ένα ερυθρό αιμοσφαίριο
- ο αριθμός των αντισωμάτων που προκαλούν αιμόλυση - ξεχωριστά για κάθε άτομο (από 16-30 έως 300)
- η δυναμική άλλων εργαστηριακών δεικτών αιμολυτικής αναιμίας (αιμοσφαιρίνη, χολερυθρίνη, δικτυοερυθρά αιμοσφαίρια) μπορεί να ομαλοποιηθεί και η δοκιμή Coombs θα παραμείνει στο ίδιο επίπεδο
Η δοκιμή Coombs τροποποιήθηκε τελευταία: 16 Μαρτίου 2018 από Μαρία Μποντιάν
Δοκιμή Coombs
Δοκιμή Coombs– μια δοκιμή αντισφαιρίνης που στοχεύει στον εντοπισμό στο Rh-αρνητικό αίμα ατελών αντι-ερυθροκυτταρικών αντισωμάτων στον παράγοντα Rh - μια ειδική πρωτεΐνη που βρίσκεται στην επιφάνεια των ερυθροκυττάρων του Rh-θετικού αίματος. Υπάρχουν δύο τύποι αυτής της εξέτασης: άμεση - ανίχνευση αντισωμάτων στην επιφάνεια των ερυθρών αιμοσφαιρίων, έμμεση - ανίχνευση αντισωμάτων στον ορό του αίματος. Ο άμεσος έλεγχος διεξάγεται στη διάγνωση και παρακολούθηση της θεραπείας ασθενειών του αίματος: αιμολυτική αναιμία, αιμολυτική νόσος νεογνών και άλλα. Πραγματοποιείται έμμεση εξέταση για την αξιολόγηση της συμβατότητας του αίματος του δότη και του λήπτη κατά τη μετάγγιση, καθώς και για τον προσδιορισμό της παρουσίας και του κινδύνου σύγκρουσης Rh κατά τον σχεδιασμό και τη διαχείριση της εγκυμοσύνης. Το υλικό για τη δοκιμή Coombs είναι το φλεβικό αίμα· η μελέτη πραγματοποιείται με μεθόδους που βασίζονται στην αντίδραση συγκόλλησης. Κανονικά, και οι δύο εξετάσεις δίνουν αρνητικό αποτέλεσμα. Η ανάλυση ολοκληρώνεται εντός μιας ημέρας.
Το τεστ Coombs είναι μια κλινική εξέταση Rh-αρνητικού αίματος που στοχεύει στην ανίχνευση αντισωμάτων στον παράγοντα Rh. Το τεστ χρησιμοποιείται για τον εντοπισμό του κινδύνου ανάπτυξης σύγκρουσης Rh και αιμολυτικών αντιδράσεων. Σε κάθε άτομο, η επιφάνεια των ερυθρών αιμοσφαιρίων περιέχει ένα ορισμένο σύνολο αντιγόνων ή συγκολλητογόνων - ενώσεις διαφόρων φύσεων, η παρουσία ή η απουσία των οποίων χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό του τύπου αίματος και του παράγοντα Rh. Υπάρχουν πολλοί τύποι αντιγόνων· στην ιατρική πρακτική, τα συγκολλητογόνα Α και Β, που καθορίζουν την ομάδα αίματος, και το συγκολλητογόνο D, ο παράγοντας Rh, έχουν μεγαλύτερη πρακτική σημασία. Με έναν θετικό παράγοντα Rh, τα αντιγόνα D ανιχνεύονται στην εξωτερική μεμβράνη των ερυθροκυττάρων, αλλά με έναν αρνητικό παράγοντα, δεν ανιχνεύονται.
Το τεστ Coombs, που ονομάζεται επίσης τεστ αντισφαιρίνης, στοχεύει στην ανίχνευση ατελών αντισωμάτων κατά των ερυθροκυττάρων στο σύστημα του παράγοντα Rh στο αίμα. Τα αντισώματα στον παράγοντα Rh είναι ειδικές ανοσοσφαιρίνες που παράγονται στο Rh-αρνητικό αίμα όταν εισέρχονται ερυθρά αιμοσφαίρια με συγκολλητογόνα D. Αυτό μπορεί να συμβεί όταν το αίμα του εμβρύου και της εγκύου αναμειγνύεται, κατά τη διάρκεια μεταγγίσεων αίματος που πραγματοποιούνται χωρίς προηγούμενη αίμα πληκτρολόγηση. Το τεστ Coombs υπάρχει σε δύο εκδόσεις - άμεση και έμμεση. Κατά την εκτέλεση μιας άμεσης δοκιμής Coombs, ανιχνεύονται αντισώματα συνδεδεμένα στην επιφάνεια των ερυθρών αιμοσφαιρίων. Η μελέτη χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό της αιτίας της αιμολυτικής αντίδρασης. Η έμμεση δοκιμή Coombs στοχεύει στην ανίχνευση αντισωμάτων κατά των ερυθροκυττάρων στο πλάσμα του αίματος. Είναι απαραίτητο να προσδιοριστεί η συμβατότητα του αίματος μεταξύ δότη και λήπτη ή μητέρας και εμβρύου και βοηθά στην πρόληψη της ανάπτυξης σύγκρουσης Rh και της επακόλουθης αιμόλυσης των ερυθρών αιμοσφαιρίων.
Το αίμα και για τις δύο εκδόσεις του τεστ Coombs λαμβάνεται από φλέβα. Η ανάλυση πραγματοποιείται με συγκόλληση χρησιμοποιώντας ορό αντισφαιρίνης. Τα αποτελέσματα της μελέτης χρησιμοποιούνται στην αιματολογία για τον εντοπισμό των αιτιών των αιμολυτικών αντιδράσεων, στη χειρουργική επέμβαση και την ανάνηψη κατά τη διεξαγωγή μεταγγίσεων αίματος, στη μαιευτική και γυναικολογία κατά την παρακολούθηση της εγκυμοσύνης σε γυναίκες με Rh-αρνητικό αίμα.
Ενδείξεις
Το άμεσο τεστ Coombs, το οποίο ανιχνεύει αντισώματα προσκολλημένα στην επιφάνεια των ερυθρών αιμοσφαιρίων, συνταγογραφείται για αιμολυτικές αντιδράσεις (καταστροφή ερυθρών αιμοσφαιρίων) ποικίλης προέλευσης. Η μελέτη ενδείκνυται για πρωτοπαθή αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία, αιμολυτική αναιμία μετά τη μετάγγιση, αιμολυτική νόσο του νεογνού, αιμόλυση ερυθρών αιμοσφαιρίων που προκαλείται από αυτοάνοσες, όγκους ή μολυσματικές ασθένειες, καθώς και λήψη φαρμάκων, για παράδειγμα, κινιδίνη, μεθυλντόπα, προκαϊναμίδη . Το έμμεσο τεστ Coombs, το οποίο προσδιορίζει τα αντισώματα στο πλάσμα του αίματος, χρησιμοποιείται για την πρόληψη της ανάπτυξης σύγκρουσης Rh. Ενδείκνυται για ασθενείς που προετοιμάζονται για μεταγγίσεις αίματος, καθώς και για εγκύους με αρνητικό παράγοντα Rh, υπό την προϋπόθεση ότι ο μελλοντικός πατέρας του παιδιού έχει θετικό παράγοντα Rh.
Για τον προσδιορισμό της συμβατότητας Rh, το τεστ Coombs δεν συνταγογραφείται σε ασθενείς με Rh θετικό αίμα. Σε αυτές τις περιπτώσεις, υπάρχουν ήδη αντιγόνα στην επιφάνεια των ερυθρών αιμοσφαιρίων· η παραγωγή αντισωμάτων δεν μπορεί να προκληθεί με μετάγγιση αίματος ή είσοδο εμβρυϊκού αίματος στην κυκλοφορία του αίματος της εγκύου. Επίσης, η μελέτη δεν ενδείκνυται για έγκυες γυναίκες εάν και οι δύο γονείς έχουν αρνητικό παράγοντα Rh - ένα κληρονομικό υπολειπόμενο χαρακτηριστικό. Το παιδί σε τέτοια ζευγάρια έχει πάντα αίμα Rh-αρνητικό· μια ανοσολογική σύγκρουση με τη μητέρα είναι αδύνατη. Σε αιμολυτικές παθολογίες, το τεστ αντισφαιρίνης δεν χρησιμοποιείται για την παρακολούθηση της επιτυχίας της θεραπείας, καθώς τα αποτελέσματα δεν αντικατοπτρίζουν τη δραστηριότητα της διαδικασίας καταστροφής των ερυθρών αιμοσφαιρίων.
Ένας περιορισμός της δοκιμής Coombs είναι η επίπονη διαδικασία της έρευνας - για να ληφθούν αξιόπιστα αποτελέσματα, είναι απαραίτητο να τηρούνται οι συνθήκες θερμοκρασίας και χρόνου, οι κανόνες για την παρασκευή αντιδραστηρίων και βιοϋλικών. Τα πλεονεκτήματα του τεστ Coombs περιλαμβάνουν την υψηλή ευαισθησία του. Στην αιμολυτική αναιμία, τα αποτελέσματα αυτής της εξέτασης παραμένουν θετικά, ακόμη και αν τα επίπεδα αιμοσφαιρίνης, χολερυθρίνης και δικτυοερυθροκυττάρων είναι φυσιολογικά.
Προετοιμασία για ανάλυση και συλλογή υλικού
Το υλικό που χρησιμοποιείται για τη διενέργεια της εξέτασης Coombs είναι το φλεβικό αίμα. Δεν υπάρχουν ειδικές απαιτήσεις για το χρόνο της διαδικασίας αιμοληψίας και για την προετοιμασία του ασθενούς. Όπως με κάθε μελέτη, συνιστάται να κάνετε ένα διάλειμμα μετά το φαγητό για τουλάχιστον 4 ώρες και τα τελευταία 30 λεπτά, να σταματήσετε το κάπνισμα, να ασκηθείτε και να αποφύγετε το συναισθηματικό στρες. Αξίζει επίσης να συζητήσετε με το γιατρό σας εκ των προτέρων την ανάγκη διακοπής της λήψης φαρμάκων - ορισμένα φάρμακα μπορεί να αλλοιώσουν τα αποτελέσματα της δοκιμής Coombs. Το αίμα λαμβάνεται με τη χρήση σύριγγας από την κοιλιακή φλέβα ή λιγότερο συχνά από μια φλέβα στο πίσω μέρος του χεριού. Μέσα σε λίγες ώρες, το υλικό παραδίδεται στο εργαστήριο.
Κατά την εκτέλεση μιας άμεσης δοκιμής Coombs, ορός αντισφαιρίνης προστίθεται στον ορό αίματος του ασθενούς. Μετά από κάποιο χρονικό διάστημα, το μείγμα εξετάζεται για την παρουσία συσσωματωμάτων - σχηματίζονται εάν υπάρχουν αντισώματα στα ερυθρά αιμοσφαίρια. Εάν το αποτέλεσμα είναι θετικό, προσδιορίζεται ο τίτλος συγκόλλησης. Η έμμεση δοκιμή Coombs αποτελείται από περισσότερα βήματα. Πρώτον, τα αντισώματα που υπάρχουν στον ορό στερεώνονται στα εγχυόμενα ερυθρά αιμοσφαίρια κατά τη διάρκεια της επώασης. Στη συνέχεια προστίθεται ορός αντισφαιρίνης στο δείγμα, μετά από κάποιο χρονικό διάστημα προσδιορίζεται η παρουσία και ο τίτλος των συγκολλητικών. Η περίοδος ανάλυσης είναι 1 ημέρα.
Κανονικά αποτελέσματα
Κανονικά, το αποτέλεσμα της άμεσης δοκιμής Coombs είναι αρνητικό (-). Αυτό σημαίνει ότι δεν υπάρχουν αντισώματα που να σχετίζονται με τα ερυθρά αιμοσφαίρια στο αίμα και δεν μπορούν να προκαλέσουν αιμόλυση. Το φυσιολογικό αποτέλεσμα της έμμεσης δοκιμής Coombs είναι επίσης αρνητικό (-), δηλαδή δεν υπάρχουν αντισώματα στον παράγοντα Rh στο πλάσμα του αίματος. Κατά την προετοιμασία για μετάγγιση αίματος για τη λήπτρια, αυτό σημαίνει συμβατότητα με το αίμα του δότη· κατά την παρακολούθηση της εγκυμοσύνης, αυτό σημαίνει απουσία ευαισθητοποίησης Rh της μητέρας, χαμηλό κίνδυνο ανάπτυξης ανοσολογικής σύγκρουσης. Φυσιολογικοί παράγοντες, όπως η διατροφή ή η σωματική δραστηριότητα, δεν μπορούν να επηρεάσουν το αποτέλεσμα της εξέτασης. Επομένως, εάν το αποτέλεσμα είναι θετικό, είναι απαραίτητη η συμβουλή γιατρού.
Διαγνωστική αξία της ανάλυσης
Ένα θετικό αποτέλεσμα δοκιμής Coombs εκφράζεται ποιοτικά, από (+) έως (++++), ή ποσοτικά, με τίτλους από 1:16 έως 1:256. Ο προσδιορισμός της συγκέντρωσης αντισωμάτων στα ερυθρά αιμοσφαίρια και στον ορό αίματος πραγματοποιείται και στους δύο τύπους δειγμάτων. Εάν το άμεσο τεστ Coombs είναι θετικό, ανιχνεύονται αντισώματα στην εξωτερική μεμβράνη των ερυθρών αιμοσφαιρίων, τα οποία οδηγούν στην καταστροφή αυτών των αιμοσφαιρίων. Αιτία μπορεί να είναι μετάγγιση αίματος χωρίς προηγούμενη τυποποίηση - μεταμεταγγιστική αιμολυτική αντίδραση, καθώς και ερυθροβλάστωση του νεογνού, αιμολυτική αντίδραση λόγω χρήσης φαρμάκων, πρωτοπαθής ή δευτεροπαθής αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία. Η δευτερογενής καταστροφή των ερυθρών αιμοσφαιρίων μπορεί να προκληθεί από συστηματικό ερυθηματώδη λύκο, σύνδρομο Evans, μακροσφαιριναιμία Waldenström, παροξυσμική ψυχρή αιμοσφαιρινουρία, χρόνια λεμφοκυτταρική λευχαιμία, λέμφωμα, λοιμώδη μονοπυρήνωση, σύφιλη, πνευμονία από μυκόπλασμα.
Ένα θετικό αποτέλεσμα της έμμεσης δοκιμής Coombs υποδεικνύει την παρουσία αντισωμάτων στον παράγοντα Rh στο πλάσμα. Στην πράξη, αυτό σημαίνει ότι έχει συμβεί ευαισθητοποίηση Rh και υπάρχει πιθανότητα να αναπτυχθεί σύγκρουση Rh μετά από έγχυση αίματος δότη κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης. Για την πρόληψη των επιπλοκών της εγκυμοσύνης, οι γυναίκες με θετικό αποτέλεσμα του τεστ Coombs τοποθετούνται σε ειδικό μητρώο.
Θεραπεία ανωμαλιών
Το τεστ Coombs αναφέρεται σε ισοορολογικές μελέτες. Τα αποτελέσματά του καθιστούν δυνατό τον εντοπισμό μιας αιμολυτικής αντίδρασης, καθώς και τον προσδιορισμό της συμβατότητας του αίματος του δότη και του λήπτη, της μητέρας και του εμβρύου, προκειμένου να αποφευχθεί η ανάπτυξη σύγκρουσης Rh. Εάν το αποτέλεσμα της εξέτασης είναι θετικό, τότε πρέπει να ζητήσετε συμβουλές από τον θεράποντα ιατρό σας - μαιευτήρα-γυναικολόγο, αιματολόγο, χειρουργό.
Αρχή αντισφαιρίνης. Αντισώματα κατά των ερυθροκυττάρων ατελούς τύπου και μόρια συμπληρώματος (C) που βρίσκονται στην επιφάνεια των ερυθροκυττάρων ανιχνεύονται - μια άμεση δοκιμή - με τη συγκόλληση τους σε επαφή με ζωικό ορό που περιέχει αντισώματα κατά της ανθρώπινης αντισφαιρίνης (ορός αντισφαιρίνης). Τα ελλιπή αντισώματα ελεύθερα στον ορό ανιχνεύονται - μια έμμεση δοκιμή - με την προσάρτησή τους σε ένα μείγμα ερυθρών αιμοσφαιρίων της φυσιολογικής ομάδας 0, όλα τα αντιγόνα των οποίων ανήκουν στο γνωστό σύστημα Rh και στη συνέχεια συγκολλούνται υπό την επίδραση ορού αντισφαιρίνης.
Υλικά, αντιδραστήρια για τη δοκιμή αντισφαιρίνης Coombs: δοκιμαστικοί σωλήνες 10/100 ml; βαθμονομημένες πιπέτες 1, 2 ml; Πιπέτες Παστέρ; τρίποδα? μη αλεσμένες γυάλινες τσουλήθρες. Διάλυμα NaCl 8,5‰; ερυθρά αιμοσφαίρια. Τα ερυθρά αιμοσφαίρια του ασθενούς, καθώς και αυτά που ανήκουν στην ομάδα 0, θα ληφθούν από πρόσφατα ληφθέν αίμα με τη χρήση αντιπηκτικού παράγοντα (διάλυμα EDTA).
Τα ερυθρά αιμοσφαίρια της ομάδας 0 πρέπει να επιλέγονται με τέτοιο τρόπο ώστε να προέρχονται από φυσιολογικά άτομα και να περιέχουν όλα Αντιγόνα Rh. Μπορούν να φυλαχθούν για έως και 7 ημέρες σε αυτόλογο πλάσμα στους + 4°C. Ελλείψει ερυθρών αιμοσφαιρίων της ομάδας 0, μπορεί να χρησιμοποιηθεί ένα γνωστό αντιγονικό μωσαϊκό, ένα μείγμα ερυθρών αιμοσφαιρίων της ομάδας 0, Rh-θετικά και Rh-αρνητικά ερυθρά αιμοσφαίρια.
Ορρόςο ασθενής πρέπει να είναι πρόσφατα επιλεγμένος.
Ορός αντισφαιρίνηςπου παράγεται από το Ινστιτούτο. Το Dr. I. Cantacuzino, διατίθεται σε λυοφιλοποιημένη μορφή σε αμπούλες του 1 ml. Μετά τη διάλυση, αποθηκεύστε τον ορό στους -20°C.
Τεχνική δοκιμής αντισφαιρίνης Coombs:
ΕΝΑ) Άμεση δοκιμή Coombs: Ξεπλύνετε τα ερυθρά αιμοσφαίρια του ασθενούς 3 φορές με διάλυμα NaCl 8,5‰.
Εφαρμόστε μια μεγάλη σταγόνα αραιώσεων ορού αντισφαιρίνης σε πολλές γυάλινες πλάκες και δίπλα μια μικρή σταγόνα από το ίζημα των ερυθροκυττάρων του ασθενούς. ανακατέψτε τις σταγόνες με τη γωνία του ποτηριού. Αφήστε το παρασκευασμένο υλικό στο τραπέζι για 5 λεπτά και στη συνέχεια εξετάστε για την παρουσία συγκολλητικών. Εάν το αποτέλεσμα είναι θετικό, προσδιορίστε τον μέγιστο τίτλο συγκόλλησης.
σι) Έμμεση δοκιμή Coombs: ερυθροκύτταρα της ομάδας 0, Rh-θετικά και Rh-αρνητικά, ξεπλύνετε 3 φορές με διάλυμα NaCl 8,5‰ και εκτεθείτε στον ορό του ασθενούς με ρυθμό 2 σταγόνων ερυθροκυττάρων ανά 8-10 σταγόνες ορού και στη συνέχεια επωάστε για 60 λεπτά σε θερμοκρασία 37° ΜΕ. Μετά από αυτό, πλύνετε ξανά τα ερυθρά αιμοσφαίρια τρεις φορές και επεξεργαστείτε τα με ορό αντισφαιρίνης, σύμφωνα με τις οδηγίες για την άμεση εξέταση Coombs.
Οταν έρθει σχετικά με τα ενεργά αντισώματα για το κρύοευαισθητοποιήστε τα ερυθρά αιμοσφαίρια της ομάδας 0 για 60 λεπτά. σε θερμοκρασία + 4°C.
Σημείωση 1) Μην πραγματοποιείτε απευθείας δοκιμή Coombs σε ερυθρά αιμοσφαίρια που αποθηκεύονται για μία ή περισσότερες ημέρες στους + 4°C ή σε θερμοκρασία δωματίου, καθώς τα αποτελέσματα μπορεί να είναι ψευδώς θετικά λόγω της στερέωσης ατελών αντισωμάτων που δρουν στο κρύο που υπάρχουν στον φυσιολογικό ορό. 2) Σε περιπτώσεις σοβαρής υπερπρωτεϊναιμίας, πλύνετε τα ερυθρά αιμοσφαίρια 4-5 φορές και ελέγξτε την απουσία πρωτεϊνών ορού στο τελευταίο υγρό πλύσης χρησιμοποιώντας σουλφοσαλικυλικό οξύ.
Ένα πιθανό υπόλειμμα 2 μg IgG/ml στο ίζημα των ερυθροκυττάρων μπορεί εξουδετερώνουν τον ορό αντισφαιρίνης. Η δοκιμή Coombs μπορεί επίσης να πραγματοποιηθεί χρησιμοποιώντας μονοειδικούς ορούς αντι-IgG, -IgM, -IgA -C3 και -C4 προκειμένου να διευκρινιστεί ο τύπος των κυττάρων που βρίσκονται στην επιφάνεια των ερυθρών αιμοσφαιρίων, για παράδειγμα, σε ασθενείς που πάσχουν από αυτοάνοσο αιμολυτικό αναιμία.