Ορολογικές μέθοδοι εργαστηριακής διάγνωσης της σύφιλης. Ορολογία RSC ανοσολογία

Σε αντίθεση με τον Trichomonas ή τον γονόκοκκο, το Treponema pallidum δεν μπορεί να ανιχνευθεί στα επιχρίσματα. Εάν ένα άτομο δεν έχει εμφανή σημάδια της νόσου, τότε το καλύτερο βιολογικό υλικό για εξέταση για τη διάγνωση της σύφιλης είναι το αίμα. Μια εξέταση αίματος για σύφιλη είναι αρκετά αξιόπιστη ακόμη και όταν ο ασθενής έχει σύφιλη.

Μην εκπλαγείτε εάν, κατά τη διάρκεια μιας ιατρικής εξέτασης πριν από την απασχόληση, τη χειρουργική επέμβαση ή κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης, σας ζητηθεί να υποβληθείτε σε εξέταση αίματος για σύφιλη. Αυτή είναι μια κοινή διαδικασία που έχει σχεδιαστεί για τον έλεγχο του πληθυσμού. Με αυτόν τον τρόπο, οι φορείς μόλυνσης και οι ασθενείς εντοπίζονται στα αρχικά στάδια.

Όποιος είχε σεξουαλική επαφή χωρίς προστασία ή υποπτεύεται ότι ο σύντροφός του είναι φορέας μπορεί να θέλει να κάνει μια γρήγορη διάγνωση. Σήμερα είναι δυνατό να κάνετε τεστ στον εαυτό σας στο σπίτι.

Μια εξέταση αίματος για σύφιλη έχει ιδιαίτερη σημασία στη διαδικασία θεραπείας μιας λοίμωξης: με βάση τα αποτελέσματα, κρίνεται η αποτελεσματικότητα της επιλεγμένης μεθόδου θεραπείας και εξάγονται συμπεράσματα σχετικά με την ανάρρωση του ασθενούς.

Μια παραπομπή για ανάλυση μπορεί να ληφθεί όχι μόνο από αφροδισιολόγο-δερματολόγο, αλλά και από θεραπευτή, γυναικολόγο ή ουρολόγο. Η ανάλυση γίνεται με δική σας πρωτοβουλία αγοράζοντας ένα κιτ ταχείας εξέτασης σε φαρμακείο.

Πώς να προετοιμαστείτε για τη διαδικασία

Για τον έλεγχο αίματος για σύφιλη, σε διαφορετικές περιπτώσεις, μπορεί να ληφθεί τριχοειδές ή φλεβικό αίμα. Τα ταχεία τεστ στο σπίτι δίνουν την απάντηση με μια σταγόνα αίματος από το δάχτυλο. Σε αυτή την περίπτωση δεν απαιτείται ειδική προετοιμασία. Γενική σύσταση: αποχή από το κάπνισμα αμέσως πριν τη λήψη δείγματος και από το αλκοόλ για 24 ώρες.

Παρόμοιες απαιτήσεις προβάλλονται κατά τη συλλογή φλεβικού αίματος. Για ασθενείς με προβλήματα ανοσίας, επιπλέον δεν συνιστάται η βαριά σωματική εργασία την παραμονή των εξετάσεων. Την ημέρα πριν από τη λήψη δειγμάτων, είναι προτιμότερο να τρώτε ελαφρύ φαγητό και να κοιμάστε καλά.

Η φλεβική αιμοδοσία πραγματοποιείται το πρωί με άδειο στομάχι.

Μέθοδοι αναζήτησης για τρεπόνεμα ή ίχνη του

Οι εργαστηριακές μέθοδοι για τη διάγνωση της σύφιλης με αίμα βασίζονται στην ικανότητα του σώματος να παρέχει μια ανοσολογική απόκριση στην εμφάνιση του παθογόνου. Εφόσον μελετάται το πλάσμα ή ο ορός του αίματος, ολόκληρη η ομάδα των αντιδράσεων ονομάστηκε ορολογική.

Η ορολογική διάγνωση της σύφιλης περιλαμβάνει μη τρεπονεμικές και τρεπονεμικές εξετάσεις αντισωμάτων. Τα πρώτα χρησιμοποιούνται συχνότερα για τον έλεγχο και την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας της θεραπείας και τα δεύτερα για τη διάγνωση.

Η πρώτη οροδιάγνωση της σύφιλης έγινε από τον August Wasserman το 1906. Μέχρι σήμερα, δεν έχει χάσει τη συνάφειά του και ονομάζεται προς τιμήν του προγραμματιστή - η αντίδραση Wasserman (RW, RW) ή η αντίδραση σταθεροποίησης συμπληρώματος (RSK).

Η εργαστηριακή πρακτική έχει εξελιχθεί σημαντικά σε διάστημα 100 ετών και τα αντισώματα IgM και IgG ανιχνεύονται πλέον με τις ακόλουθες μεθόδους (Πίνακας 1).

Μη τρεπονεμικές αντιδράσεις

Ο όρος «μη τρεπόνεμα» συνδυάζει αντιδράσεις που αποκαλύπτουν αντισώματα όχι στο παθογόνο, αλλά στα λιπίδια των κατεστραμμένων μεμβρανών του τρεπονήματος ή των κυττάρων ξενιστή. Κατά τη διάρκεια της αντίδρασης καθίζησης, το αντιδραστήριο (αντιγόνο καρδιολιπίνης) αλληλεπιδρά με αντισώματα (εάν υπάρχουν) και το σύμπλεγμα αντιγόνου-αντισώματος κατακρημνίζεται. Στον δοκιμαστικό σωλήνα σχηματίζονται λευκές νιφάδες. Ο τεχνικός εργαστηρίου αξιολογεί το αποτέλεσμα με γυμνό μάτι σε περιπτώσεις RPR, MPR, RST και TRUST ή κάτω από μικροσκόπιο (VDRL, USR). Η αντίδραση θεωρείται:

  • θετικό όταν εμφανίζονται μεγάλες νιφάδες (4+, 3+).
  • ασθενώς θετικό όταν εμφανίζονται νιφάδες μεσαίου μεγέθους (2+, 1+).
  • αρνητικό – χωρίς νιφάδες (-).

Μπορεί να χρειαστούν έως και 1,5 μήνας από τη στιγμή της μόλυνσης έως τη θετική αντίδραση σε μη τρεπονεμικές εξετάσεις. Το σκληρό chancroid εκδηλώνει σύφιλη πριν από την εξέταση σε 1-4 εβδομάδες.

Ο τίτλος των αντισωμάτων που πέφτουν μετράται κατά τη διάρκεια μιας αντίδρασης ποσοτικής κατακρήμνισης. Για να γίνει αυτό, το πλάσμα ή ο ορός αραιώνεται σύμφωνα με τις οδηγίες. Αυτή η ανάλυση χαρακτηρίζει την αποτελεσματικότητα της θεραπείας. Εάν ο τίτλος πέσει, τότε η ανάκτηση είναι επιτυχής· εάν η κατάσταση δεν αλλάξει, τα φάρμακα πρέπει να αλλάξουν.

Όταν μιλάμε για μικροαντίδραση, εννοούμε ότι απαιτούνται μερικές σταγόνες από το υλικό δοκιμής. Τέτοιες δοκιμές είναι πολύ βολικές για τον έλεγχο μεγάλων πληθυσμών ή για την εκτέλεση στο σπίτι. Τα κιτ δοκιμών είναι φθηνά και διατίθενται σε τυποποιημένη μορφή. Για παράδειγμα, το "Syphilis-AgKL-RMP" που παράγεται από την EKOlab CJSC, το "Profitest" από τη New Vision Diagnostics, SD BIOLINE που παράγεται από την Standard Diagnostics.

Το μειονέκτημα των αντιδράσεων καθίζησης είναι η χαμηλή τους ακρίβεια. Το RPR ανιχνεύει πρωτοπαθή σύφιλη στο εύρος από 70 έως 90%, δευτερογενή - 100% και όψιμη - 30-50%. Τα ψευδώς θετικά αποτελέσματα από μη τρεπονεμικές εξετάσεις είναι σπάνια και εμφανίζονται στο 3% των περιπτώσεων. Εμπόδιο για τη λήψη ακριβών αποτελεσμάτων μπορεί να είναι σφάλματα στη συλλογή ή αποθήκευση δειγμάτων αίματος ή παραβίαση της σειράς ανάλυσης.

Μια θετική αντίδραση κατακρήμνισης δεν θέτει διάγνωση σύφιλης. Για να ληφθεί μια απόφαση, απαιτούνται συγκεκριμένες δοκιμές treponemal.

Δοκιμές Treponemal

Στο αίμα του ασθενούς μπορούν να ανιχνευθούν αντισώματα απευθείας στα αντιγόνα του τρεπονέμματος. Για το σκοπό αυτό έχουν αναπτυχθεί συγκεκριμένες οροδιαγνωστικές μέθοδοι. Τέτοιες δοκιμές χαρακτηρίζονται από υψηλή ευαισθησία.

  1. Αντίδραση Wasserman

Η πιο οικεία και δοκιμασμένη στο χρόνο είναι η αντίδραση Wasserman (WR) στη σύφιλη. Για τη διεξαγωγή του, λαμβάνονται 5 ml αίματος από την ωλένια φλέβα, λαμβάνεται ορός από το δείγμα, απενεργοποιείται το δικό του συμπλήρωμα και, στη συνέχεια, το ένα μέρος υποβάλλεται σε επεξεργασία με αντιγόνο τρεπόνημα και το άλλο με καρδιολιπίνη.

Το αποτέλεσμα αξιολογείται από το ρυθμό αιμόλυσης:

  • πλήρης ή σημαντική καθυστέρηση στην αιμόλυση – θετική αντίδραση (4+, 3+).
  • μερική καθυστέρηση – ασθενώς θετική (2+).
  • μικρή καθυστέρηση – αμφισβητήσιμη αντίδραση (1+);
  • πλήρης αιμόλυση – αρνητικό αποτέλεσμα (-).

Τα θετικά ποιοτικά αποτελέσματα διασταυρώνονται με χρήση ποσοτικής μεθόδου. Ο τίτλος της ρεαγίνης θεωρείται ότι είναι η μέγιστη αραίωση του ορού αίματος μέχρι την πλήρη ή σημαντική καθυστέρηση της αιμόλυσης. Μια ποσοτική δοκιμή RT συνταγογραφείται για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας της θεραπείας.

Είναι λογικό να πραγματοποιηθεί η αντίδραση Wasserman 2-3 εβδομάδες μετά την εμφάνιση του chancre. Θα εμφανίσει δευτερογενή σύφιλη στο 100% των περιπτώσεων, τριτογενή σύφιλη στο 75%.

  1. Αντίδραση παθητικής αιμοσυγκόλλησης (RPHA)

Το υπό εξέταση παρασκεύασμα παρασκευάζεται από ζωικά ερυθροκύτταρα με ευαισθητοποίηση με αντιγόνο Treponema pallidum. Τα κύτταρα προστίθενται στον ορό αίματος του ασθενούς. Ο χρόνος δοκιμής είναι 1 ώρα. Παρουσία αντισωμάτων, εμφανίζεται μια αντίδραση συγκόλλησης και ο βοηθός εργαστηρίου βλέπει συγκεκριμένα μοτίβα στα μικροπηγάδια.

Δοκιμαστικό αντίγραφο:

  • δακτύλιος συγκολλημένων κυττάρων – θετικό αποτέλεσμα (4+, 3+, 2+).
  • χαλαρός δακτύλιος – αμφίβολο αποτέλεσμα (+/-, 1+);
  • η τελεία στο κέντρο είναι αρνητικό αποτέλεσμα (-).

Η παθητική αντίδραση αιμοσυγκόλλησης δίνει θετικά αποτελέσματα πολύ μετά τη θεραπεία. Μια ψευδώς θετική απάντηση μπορεί να επιτευχθεί σε περιπτώσεις μόλυνσης από λέπρα ή μονοπυρήνωση. Η ποσοτική RPGA πραγματοποιείται με αραίωση δειγμάτων.

  1. Ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία (ELISA)

Χρησιμοποιείται για την έγκαιρη διάγνωση της σύφιλης. Προσδιορίζει την παρουσία αντισωμάτων IgM, IgA, IgG στο τρεπόνεμα χρησιμοποιώντας ανθρώπινες ανοσοσφαιρίνες σημασμένες με ένα ένζυμο και ένα ειδικό αντιδραστήριο. Η απάντηση καθορίζεται από την αλλαγή στο χρώμα των δειγμάτων: όσο περισσότερα αντισώματα, τόσο πιο πλούσιο είναι το χρώμα του μείγματος.

Η μέθοδος είναι πολύ ευαίσθητη και συγκεκριμένη. Δεν δίνει ψευδώς θετικά αποτελέσματα όταν οι ασθενείς μολύνονται από άλλες λοιμώξεις. Η υψηλή ευαισθησία στα αντισώματα περιορίζει τη χρήση του ELISA για την παρακολούθηση του βαθμού ίασης.

  1. Δοκιμές ανοσοφθορισμού (RIF)

Οι αναλύσεις σε αυτήν την ομάδα καθιστούν δυνατή την ταχεία ανίχνευση μόλυνσης με τρεπόνεμα πριν από την εμφάνιση τσάνκρας. Δίνει θετικά αποτελέσματα μέχρι το τέλος της πρώτης εβδομάδας από τη στιγμή της μόλυνσης. Η ευαισθησία είναι κοντά στο 100%. Το δραστικό συστατικό της δοκιμής είναι τα αντισώματα φλουορεσκεΐνης στις ανθρώπινες σφαιρίνες. Συνδυάζοντας με αντισώματα ορού δημιουργούν φωτεινά σύμπλοκα. Το αποτέλεσμα της δοκιμής καθορίζεται από την ένταση της λάμψης:

  • κιτρινοπράσινη φωτεινή λάμψη – 4+;
  • πράσινο – 3+;
  • ανοιχτό πράσινο – 2+;
  • ελάχιστα αισθητή λάμψη – 1+.
  • Ο χρωματισμός φόντου ή οι σκιές είναι αρνητικές.
  1. Αντίδραση ακινητοποίησης ωχρού τρεπόνεμα (TRE)

Το τεστ χρησιμοποιείται για την ανίχνευση λανθάνοντων μορφών σύφιλης. Είναι έντασης εργασίας και τεχνικά πολύπλοκο. Η τεχνική βασίζεται στο φαινόμενο της ακινητοποίησης των ζωντανών τρεπονέμων από το σύμπλεγμα «αντιγόνο + αντίσωμα». Τα βακτήρια για τη δοκιμή καλλιεργούνται σε κουνέλια. Όλα τα γυάλινα σκεύη για ανάλυση πρέπει να είναι αποστειρωμένα. Λαμβάνεται αίμα από τον ασθενή με την προϋπόθεση ότι πήρε αντιβιοτικά το αργότερο ένα μήνα πριν από την ημέρα της εξέτασης. Τα τρεπόνεμα προστίθενται στον ορό. Στο προσοφθάλμιο ενός μικροσκοπίου, ένας βοηθός εργαστηρίου αναζητά ακίνητα βακτήρια.

Αποκωδικοποίηση του αποτελέσματος:

  • εάν η ακινητοποίηση των τρεπονεμίων είναι μεγαλύτερη από 50% - αποτέλεσμα 4+.
  • 31-50% – ασθενώς θετικό 3+;
  • 21-30% – αμφίβολο 2+;
  • έως 20% – αρνητικό.
  1. Ανοσοκηλίδα (Western-blot)

Η πιο σύγχρονη μέθοδος για τη διάγνωση της σύφιλης, εξαλείφοντας τις ψευδώς θετικές απαντήσεις από άλλες συγκεκριμένες εξετάσεις. Στην κλινική πράξη χρησιμοποιείται ως επιβεβαιωτική εξέταση. Ο ορός αίματος του ασθενούς εφαρμόζεται σε μια μεμβράνη νιτροκυτταρίνης επικαλυμμένη με ηλεκτροφορητικά διαχωρισμένα αντιγόνα Treponema pallidum. Εάν υπάρχουν αντισώματα IgG και IgM, εμφανίζονται λωρίδες στο τεστ.

Τα αποτελέσματα του συστήματος δοκιμής ερμηνεύονται με βάση τη θέση των ζωνών και την έντασή τους.

Η τελική διάγνωση γίνεται λαμβάνοντας υπόψη τις μη τρεπονεμικές και τρεπονεμικές εξετάσεις.

Πηγές:

  1. Akovbyan V.A., Prokhorenkov V.I., Novikov A.I., Guzey T.N. // Σύφιλη: Εικονογράφηση. εγχειρίδιο (Επιμ. V.I. Prokhorenkov). – Μ.: Medkniga, 2002. – Σ. 194-201.
  2. Dmitriev G.A., Frigo N.V. // Σύφιλη. Διαφορική κλινική και εργαστηριακή διάγνωση. – Μ.: Ιατρ. βιβλίο, 2004. – σσ. 26-45.
  3. Loseva O.K., Lovenetsky A.N. Επιδημιολογία, κλινική εικόνα, διάγνωση και θεραπεία της σύφιλης: Ένας οδηγός για τους γιατρούς. – Μ., 2000.
  4. Novikov A.I. et al. Western blot ως επιβεβαιωτική εξέταση στην εργαστηριακή διάγνωση της σύφιλης. - "Σφήνα." εργαστήριο. Διαγνωστικά», 2011, Νο 8. – Σελ. 4 -45.
  5. Pankratov V.G., Pankratov O.V., Navrotsky A.L. κ.λπ. // Συνταγή (παράρτημα: Διεθνές επιστημονικό και πρακτικό συνέδριο «Σύγχρονες προσεγγίσεις στη διάγνωση, τη θεραπεία και την πρόληψη των σεξουαλικά μεταδιδόμενων λοιμώξεων», Grodno, 2005). – Σελ.165-169.
  6. Pankratov V.G., Pankratov O.V., Krukovich A.A. και άλλα // Υγειονομική περίθαλψη. – 2006. – Νο. 6. – Σ. 35-39.
  7. Rodionov A.N. // Σύφιλη: οδηγός για γιατρούς. – Πετρούπολη: Πέτρος, 1997. – Σ. 226-245.
  8. Jurado R.L. // ΣΜΝ. – 1997. – Νο. 3. – Σ. 3-10.
  9. Schmidt B.L. // Πρώτο Ρωσικό Συνέδριο Δερματοφλεβιολόγων: Περιλήψεις. επιστημονικός έργα – Αγία Πετρούπολη, 2003. – T. II. – Σελ. 40-
  10. Romanowski B., Sutherland R., Flick G.H. et al. //Αννα. Κρατώ. Med. –1991. – V. 114. – P. 1005-1009. Τι είναι η ορολογική διάγνωση της σύφιλης

Τι δείχνει μια ορολογική εξέταση αίματος; Τα διαγνωστικά μέτρα είναι το πιο σημαντικό στάδιο στη θεραπεία οποιασδήποτε ασθένειας. Η επιτυχία της θεραπείας εξαρτάται όχι μόνο από τα συνταγογραφούμενα φάρμακα, αλλά και σε μεγάλο βαθμό από το πόσο σωστά έγινε η διάγνωση.

Επιπλέον, η διάγνωση σάς επιτρέπει να αποτρέψετε επιπλοκές και συνακόλουθες ασθένειες. Χρησιμοποιώντας ορολογική εξέταση του αίματος του ασθενούς, ανιχνεύεται η παρουσία αντισωμάτων και αντιγόνων. Η μελέτη βοηθά στην εύρεση πολλών ασθενειών, στον προσδιορισμό της φάσης τους και στην παρακολούθηση της προόδου της θεραπείας.

Τι είναι η ορολογία;

Η ορολογία είναι ο κλάδος της ανοσολογίας που μελετά τις αντιδράσεις των αντιγόνων στα αντισώματα. Αυτός ο κλάδος της ιατρικής ασχολείται με τη μελέτη του πλάσματος του αίματος και των ανοσολογικών του χαρακτηριστικών.

Σήμερα, μια ορολογική εξέταση αίματος για αντισώματα είναι ένας αξιόπιστος τρόπος ανίχνευσης του ιού της ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας, της ηπατίτιδας, της βρουκέλλωσης, των ΣΜΝ και άλλων απειλητικών για τη ζωή ασθενειών. Ας μάθουμε σε ποιες περιπτώσεις συνταγογραφείται.

Ενδείξεις χρήσης

Μια ορολογική εξέταση αίματος είναι απαραίτητη για τον εντοπισμό του αιτιολογικού παράγοντα της νόσου εάν είναι δύσκολο να γίνει διάγνωση.

Για να πραγματοποιηθεί αυτή η αντίδραση, τα αντιγόνα των παθογόνων εισάγονται στο πλάσμα και στη συνέχεια η συνεχιζόμενη διαδικασία μελετάται από έναν βοηθό εργαστηρίου. Ή πραγματοποιούν την αντίστροφη αντίδραση: αντισώματα εγχέονται στο μολυσμένο αίμα για να προσδιοριστεί η συγκεκριμένη ταυτότητα του παθογόνου.

Πεδίο εφαρμογής

Αυτή η έρευνα χρησιμοποιείται σε διάφορους κλάδους της ιατρικής. Αυτή η αντίδραση προσδιορίζει συγκεκριμένα κύτταρα και αντισώματα που παράγονται από το σώμα για την καταπολέμηση λοιμώξεων και ιών.

Επιπλέον, ο τύπος αίματος ενός ατόμου προσδιορίζεται με την ορολογική μέθοδο.

Μια παρόμοια ορολογική εξέταση αίματος χρησιμοποιείται στη γυναικολογία για τη διάγνωση σεξουαλικά μεταδιδόμενων νοσημάτων. Η μέθοδος αυτή χρησιμοποιείται και για ολοκληρωμένες εξετάσεις εγκύων (ανίχνευση τοξοπλάσμωσης, HIV, σύφιλης κ.λπ.). Η επιτυχία αυτής της εξέτασης είναι υποχρεωτική κατά την εγγραφή σας σε προγεννητική κλινική.

Στα παιδιά, μια ορολογική αντίδραση χρησιμοποιείται για την επιβεβαίωση της διάγνωσης των λεγόμενων «παιδικών» ασθενειών (ανεμοβλογιά, ιλαρά, ερυθρά, κ.λπ.) εάν τα συμπτώματα δεν έχουν έντονες εκδηλώσεις και είναι αδύνατο να εντοπιστεί η ασθένεια με ανάλυση κλινικών ενδείξεων .

Ανίχνευση σεξουαλικά μεταδιδόμενων νοσημάτων

Για τους αφροδισιολόγους, αυτή η εξέταση είναι πραγματικά αναντικατάστατη και σας επιτρέπει να κάνετε μια διάγνωση με μεγάλη ακρίβεια.

Με θολή κλινική εικόνα, μια ορολογική εξέταση αίματος για σύφιλη, γιαρδίαση, ουρεαπλάσμωση, χλαμύδια, έρπητα και άλλες ασθένειες μπορεί γρήγορα να ανιχνεύσει την παρουσία αντισωμάτων.

Ιογενείς και μολυσματικές ασθένειες

Η ορολογική ανάλυση χρησιμοποιείται ενεργά από γαστρεντερολόγους, ηπατολόγους και λοιμωξιολόγους για τη διάγνωση της ιογενούς ηπατίτιδας.

Η αποκρυπτογράφηση μιας ορολογικής εξέτασης αίματος καθιστά δυνατό τον προσδιορισμό του σταδίου της νόσου και την απάντηση στο ερώτημα πόσο απαραίτητη είναι η νοσηλεία αυτή τη στιγμή. Πώς να προετοιμαστείτε σωστά;

Προετοιμασία για τη δοκιμή

Οι ορολογικές εξετάσεις αίματος γίνονται τόσο σε δημόσιες όσο και σε εμπορικές κλινικές. Θα πρέπει να προτιμάται εργαστήριο με σύγχρονο εξοπλισμό και εξειδικευμένο προσωπικό.

Τα βιολογικά δείγματα για εξέταση μπορεί να είναι σάλιο και κόπρανα, αλλά στις περισσότερες περιπτώσεις χρησιμοποιείται το φλεβικό αίμα του ασθενούς. Αίμα για ορολογική εξέταση λαμβάνεται από την φλέβα σε εργαστήριο. Πριν κάνετε το τεστ, θα πρέπει να συμβουλευτείτε το γιατρό σας σχετικά με την προετοιμασία αυτής της διαδικασίας.

Για να προετοιμαστείτε για μια ορολογική εξέταση, πρέπει να ακολουθήσετε μερικούς απλούς κανόνες.

Το αίμα χορηγείται σε ήρεμη κατάσταση πριν από τα γεύματα, δηλαδή με άδειο στομάχι. Πριν από αυτό, δεν πρέπει να υποβληθείτε σε άλλες εξετάσεις, όπως ακτινογραφίες, υπερηχογράφημα κ.λπ.

Είναι απαραίτητο να αποφεύγεται η λήψη αντιβακτηριακών και κάποιων άλλων φαρμάκων αρκετές εβδομάδες πριν από την αιμοδοσία. Ορισμένες συστάσεις σε αυτή την περίπτωση εξαρτώνται από την ασθένεια για την οποία γίνεται η εξέταση. Για παράδειγμα, μια εξέταση για ηπατίτιδα περιλαμβάνει την εξάλειψη των λιπαρών τροφών και του αλκοόλ 48 ώρες πριν από τη διαδικασία.

Αντίδραση φθορισμού

Μεταξύ των τύπων ορολογικών αντιδράσεων υπάρχει μια αντίδραση φθορισμού. Αυτή η τεχνική χρησιμοποιεί ένα αντιδραστήριο που φωτίζει τα αντισώματα στον ορό του αίματος.

Η δημιουργία μιας άμεσης ορολογικής αντίδρασης περιλαμβάνει τη σήμανση συγκεκριμένων αντισωμάτων με μια φθορίζουσα ουσία. Αυτή η αντίδραση είναι η ταχύτερη και πραγματοποιείται σε ένα στάδιο.

Μια άλλη επιλογή για τη διεξαγωγή μιας τέτοιας ανάλυσης ονομάζεται έμμεση ή RNIF. Πραγματοποιείται σε δύο στάδια. Στο πρώτο βήμα, τα αντισώματα δεν επισημαίνονται με φθορίζουσες ετικέτες και στο δεύτερο, κατάλληλα επισημασμένα αντισώματα χρησιμοποιούνται για την αναγνώριση αντιγόνων και αντισωμάτων. Η λάμψη εμφανίζεται μόνο μετά τη σύνδεση με ένα συγκεκριμένο αντίσωμα.

Τι δείχνει μια ορολογική εξέταση αίματος; Το αποτέλεσμα της όλης διαδικασίας αξιολογείται από μια ειδική συσκευή που αναλύει την ισχύ της ακτινοβολίας και αποκαλύπτει το σχήμα και το μέγεθος του υπό μελέτη αντικειμένου. Οι αιτιολογικοί παράγοντες των μολυσματικών ασθενειών ανιχνεύονται με αποτέλεσμα η αξιοπιστία του οποίου είναι 90-95%, ανάλογα με τον τύπο και το στάδιο της παθολογίας.

Συνδεδεμένη ανοσοπροσροφητική δοκιμασία

Αυτοί οι τύποι ορολογικών δοκιμών χρησιμοποιούν μοναδικά, σταθερά αντιδραστήρια. Οι επισημασμένες ουσίες φαίνεται να κολλάνε στα επιθυμητά αντισώματα. Ως αποτέλεσμα, παίρνουμε ένα ποιοτικό ή ποσοτικό αποτέλεσμα.

Εάν δεν βρεθούν έντονοι δείκτες, το αποτέλεσμα θα θεωρηθεί αρνητικό. Εάν η παρουσία αντισωμάτων σε βιολογικά δείγματα ανιχνευθεί κατά τη διάρκεια μιας ποιοτικής μελέτης, τότε το αποτέλεσμα της εξέτασης θεωρείται θετικό. Με τον ποσοτικό προσδιορισμό των κυττάρων, η ανάλυση δίνει ένα πιο ακριβές αποτέλεσμα.

Αναλύοντας τους δείκτες ανάλυσης (για παράδειγμα, το άθροισμα των αναγνωρισμένων κυττάρων), ο ειδικός καθορίζει εάν η ασθένεια βρίσκεται στο αρχικό στάδιο, στο οξύ στάδιο ή εάν η χρόνια μορφή της παθολογίας έχει επιδεινωθεί. Για να τεθεί μια διάγνωση, ο γιατρός λαμβάνει υπόψη όχι μόνο τα δεδομένα μιας ορολογικής μελέτης, αλλά και την κλινική εικόνα της νόσου.

Χαρακτηριστικά αυτής της δοκιμής

Η διεξαγωγή αυτής της ανάλυσης δεν είναι πάντα ικανή να παρέχει 100% εμπιστοσύνη ότι έχει εντοπιστεί μια συγκεκριμένη ασθένεια. Συμβαίνει ότι τα αποτελέσματα μπορεί να είναι ασαφή και να απαιτούνται άλλες διαδικασίες.

Για παράδειγμα, κατά τη διάρκεια μιας εξέτασης για βρουκέλλωση, ο ορός αίματος ελέγχεται για αυτοκατακράτηση χωρίς αντιγόνο. Αυτό αυξάνει σημαντικά την αξιοπιστία των δοκιμών. Ένα τεστ για βρουκέλλωση μπορεί να είναι θετικό ή αρνητικό και μπορεί επίσης να εγείρει αμφιβολίες.

Εάν λάβετε αμφίβολα αποτελέσματα που δεν έχουν ξεκάθαρη ερμηνεία, συνιστάται να κάνετε ξανά το τεστ. Επιπλέον, η βρουκέλλωση μπορεί να ανιχνευθεί με καλλιέργειες αίματος, εξέταση μυελού των οστών και εγκεφαλονωτιαίου υγρού.

Πλεονεκτήματα της ορολογικής εξέτασης αίματος

Οι διαγνωστικές τεχνικές που χρησιμοποιούν ορολογικές αντιδράσεις χρησιμοποιούνται ευρέως στη σύγχρονη ιατρική πρακτική. Αυτό γίνεται ιδιαίτερα συχνά κατά τον προσδιορισμό ιογενών και μολυσματικών παθολογιών.

Οι ίδιες εξετάσεις χρησιμοποιούνται κατά τον γεωγραφικό έλεγχο και την ιατρική εξέταση για την πρόληψη της επιδημιολογικής εξάπλωσης της λοίμωξης.

Τα πλεονεκτήματα της μεθόδου περιλαμβάνουν:

  • Υψηλό επίπεδο αυτοπεποίθησης.
  • Γρήγορη αντίδραση και αποτελέσματα. Τα αποτελέσματα του RSC είναι γνωστά εντός 24 ωρών. Σε ειδική περίπτωση, σε νοσοκομειακό περιβάλλον, η ανάλυση θα είναι έτοιμη σε λίγες ώρες.
  • Παρακολούθηση της εξέλιξης της νόσου και της αποτελεσματικότητας της θεραπείας.
  • Χαμηλό κόστος και προσβασιμότητα για τους ασθενείς.

Μειονεκτήματα της μεθόδου

Ωστόσο, οι ορολογικές μελέτες έχουν και τα μειονεκτήματά τους.

Αυτά περιλαμβάνουν το γεγονός ότι κατά τη διεξαγωγή μιας ανάλυσης θα πρέπει να λαμβάνεται υπόψη η περίοδος επώασης της νόσου προκειμένου να ληφθεί μια πιο αξιόπιστη εικόνα.

Για παράδειγμα, ο προσδιορισμός του απλού έρπητα τύπου 1 ή 2 είναι δυνατός μόνο 14 ημέρες μετά τη μόλυνση. Μια ανάλυση για την παρουσία του ιού της ανοσοανεπάρκειας πραγματοποιείται 30 ημέρες, 90 ημέρες και έξι μήνες μετά την επαφή με ένα μολυσμένο άτομο.

Φυσικά, η αξιοπιστία των αποτελεσμάτων μπορεί επίσης να επηρεαστεί από τον ανθρώπινο παράγοντα: παραμέληση των κανόνων προετοιμασίας για αιμοληψία ή σφάλμα που έκανε ο βοηθός εργαστηρίου κατά την εκτέλεση της αντίδρασης.

Σύμφωνα με στατιστικά στοιχεία, ένα λανθασμένο αποτέλεσμα μπορεί να ληφθεί στο 5% των περιπτώσεων. Ένας έμπειρος γιατρός, όταν εξετάζει έναν ασθενή, έχοντας μελετήσει την κλινική εικόνα, στις περισσότερες περιπτώσεις μπορεί να υπολογίσει το λάθος που έγινε.

Τι είναι οι ορολογικές εξετάσεις, γιατί γίνονται, ποιες είναι οι κύριες μέθοδοι ορολογικής διάγνωσης;

Οι ορολογικές μελέτες είναι μέθοδοι για τη μελέτη αντιγόνων ή αντισωμάτων στο βιολογικό υλικό ασθενών, με βάση ορισμένες ανοσολογικές αντιδράσεις. Η ανίχνευση αντισωμάτων έναντι του μολυσματικού παράγοντα ή αντιγόνων σε βιολογικό υλικό καθιστά δυνατό τον προσδιορισμό της αιτίας της νόσου.

δεν έχουν 100% ειδικότητα και ευαισθησία στη διάγνωση μολυσματικών ασθενειών. Επομένως, τα αποτελέσματά τους πρέπει να αξιολογούνται λαμβάνοντας υπόψη την κλινική εικόνα της νόσου. Αυτό εξηγεί την ανάγκη χρήσης αρκετών εξετάσεων για τη διάγνωση της λοίμωξης, καθώς και τη χρήση μεθόδων Western blot, επιβεβαιώνοντας τα αποτελέσματα των μεθόδων προσυμπτωματικού ελέγχου.

«Το ανοσοστύπωμα (Western blot) είναι στην πραγματικότητα η τελική μέθοδος επαλήθευσης (επιβεβαίωσης) στην αλυσίδα των ανοσολογικών μελετών που μας επιτρέπουν να βγάλουμε ένα τελικό εργαστηριακό συμπέρασμα. Αυτή η εξέταση είναι ιδιαίτερα σημαντική για την επιβεβαίωση ή την απόρριψη μιας λοιμώδους νόσου (για παράδειγμα, κοκκύτη, μπορελίωση κ.λπ.). Η μέθοδος Western blot είναι συνήθως απαραίτητη μετά την ανίχνευση θετικών αντισωμάτων IgG της μολυσματικής διαδικασίας, επειδή Σε αυτόν τον συνδυασμό προκύπτει μια πιο σωστή εργαστηριακή ερμηνεία των αποτελεσμάτων και περαιτέρω θεραπευτικές τακτικές για τον ασθενή. Για την εκτέλεση ενός στυπώματος Western, χρησιμοποιούνται ειδικές λωρίδες νιτροκυτταρίνης, στις οποίες μεταφέρονται πρωτεΐνες χρησιμοποιώντας οριζόντια και στη συνέχεια κατακόρυφη ανοσοφόρηση κατά σειρά αυξανόμενου μοριακού βάρους. Τα αντισώματα από τον ορό του ασθενούς αλληλεπιδρούν με πρωτεΐνες σε ορισμένες περιοχές της λωρίδας και στη συνέχεια προχωρά μια αντίδραση παρόμοια με μια ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία (ELISA)».- εξηγεί υποψήφια ιατρικών επιστημών, ιατρική διευθύντρια του εργαστηρίου SYNEVO Ukraine, Oksana Vladislavovna Nebyltsova.

Βιολογικό υλικό που χρησιμοποιείται για ορολογική έρευνα
  • Ορός αίματος
  • Σάλιο
  • Περιττώματα
Ποιες καταστάσεις χρησιμοποιούνται για τη διάγνωση των ορολογικών εξετάσεων;

Σκοπός των ορολογικών μελετών είναι η διαπίστωση της αποτελεσματικότητας της θεραπείας μετά την ανάρρωσή του ασθενούς, καθώς και η ανίχνευση υποτροπής της νόσου. Επιπλέον, οι ορολογικές μέθοδοι μπορούν να ανιχνεύσουν ασθένειες όπως:

  • Αμοιβίαση
  • Giardiasis
  • Οπιθωρχίαση
  • Τριχίνιαση
  • Τοξοκαρίαση
  • Κυστικέρκωση
  • Εχινοκοκκίαση
Οι κύριες μέθοδοι που χρησιμοποιούνται στην ορολογική διάγνωση
Αντίδραση ανοσοφθορισμού (RIF, μέθοδος Koons)

Τύποι μεθόδων:

Απευθείας: τα μικρόβια ή τα αντιγόνα ιστών ή τα μικρόβια αντιμετωπίζονται με ειδικούς ορούς με αντισώματα, καθώς και με επισημασμένα φθοριόχρωμα που λάμπουν στις ακτίνες UV. Τα βακτήρια έτσι λάμπουν ως πράσινο περίγραμμα γύρω από την περιφέρεια του κυττάρου. Παρατηρήθηκε με μικροσκόπιο φθορισμού.

Έμμεσα: τα επιχρίσματα αντιμετωπίζονται με αντιμικροβιακά αντισώματα ορού κουνελιού. Τα αντισώματα που δεν έχουν δεσμευτεί με μικροβιακά αντιγόνα στη συνέχεια ξεπλένονται. Με αυτόν τον τρόπο, ανιχνεύονται τα αντισώματα που παραμένουν στα μικρόβια. Ως αποτέλεσμα, σχηματίζεται ένα σύμπλεγμα από μικροβιακά + αντισώματα κατά κουνελιού + αντιμικροβιακά αντισώματα κουνελιού, με επισήμανση φθορίου. Αυτό το σύμπλεγμα παρατηρείται κάτω από ένα μικροσκόπιο φθορισμού.

Για την αξιολόγηση των αποτελεσμάτων, υπάρχει μια κλίμακα τεσσάρων σημείων, η οποία χαρακτηρίζεται από την ένταση της επιφανειακής κιτρινοπράσινης λάμψης των αντιγονικών κυττάρων:

Πολύ αμυδρή λάμψη κυττάρων

Ασθενής λάμψη της περιφέρειας των κυττάρων

+++/++++ φωτεινή λάμψη του κυττάρου

Ως τίτλος της αντίδρασης θεωρείται η αραίωση του ορού με το αποτέλεσμα της αντίδρασης +++ ή ++++.

Έμμεση αντίδραση αιμοσυγκόλλησης (IHR)

Η παθητική ή έμμεση αντίδραση αιμοσυγκόλλησης χρησιμοποιείται για διάγνωση λοιμώξεωνπροκαλείται από πρωτόζωα, βακτήρια και ρικέτσια.

Η τεχνική αποτελείται από πολλά στάδια. Αρχικά, τα ερυθρά αιμοσφαίρια υποβάλλονται σε επεξεργασία και «πλένονται» με ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου, στη συνέχεια, εάν είναι απαραίτητο, με διάλυμα τανίνης 1: 20.000 και στη συνέχεια ευαισθητοποιούνται με διαλυτά αντιγόνα. Μετά από επεξεργασία με ρυθμισμένο ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου, το αντιγόνο είναι έτοιμο για χρήση. Ο ορός αραιώνεται σε δοκιμαστικούς σωλήνες με ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου, μετά από το οποίο προστίθεται ένα διαγνωστικό ερυθροκυττάρων σε κάθε αραιωμένο ορό.

Τα αποτελέσματα αξιολογούνται από τη φύση του ιζήματος των ερυθροκυττάρων:

Χαμηλή ένταση

Μέτριας έντασης

Έντονη αντίδραση

Απότομα έντονη αντίδραση

Θετικό θεωρείται το αποτέλεσμα μιας αντίδρασης με έντονη αντίδραση +++ ή απότομη έντονη αντίδραση ++++, στην οποία τα ερυθρά αιμοσφαίρια καλύπτουν ολόκληρο τον πυθμένα του σωλήνα.

Ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία (ELISA)

Η μέθοδος έχει υψηλή ειδικότητα και ευαισθησία, πάνω από 90%. Το κύριο πλεονέκτημα είναι η δυνατότητα ανίχνευση μόλυνσηςκαι παρακολούθηση της δυναμικής της διαδικασίας, η οποία υποδεικνύεται από το επίπεδο των αντισωμάτων.

Το τεστ χρησιμοποιείται για τη διάγνωση ενός ευρέος φάσματος λοιμώξεων, συμπεριλαμβανομένων:

  • HIV λοίμωξη
  • Ιογενής ηπατίτιδα
  • Λοίμωξη από κυτταρομεγαλοϊό
  • Λοίμωξη από έρπητα
  • Λοίμωξη από τοξόπλασμα

Νέες συστάσεις για υγιεινή διατροφή με βάση νέα έρευνα

Το αντιγόνο ή το αντίσωμα στερεώνεται σε στερεές πλάκες και στη συνέχεια, χρησιμοποιώντας μια ενζυμική ετικέτα, ανιχνεύονται σύμπλοκα αντιγόνου-αντισώματος.

Η ELISA έχει μια σειρά από πλεονεκτήματα σε σχέση με άλλες ορολογικές μεθόδους. Η αντίδραση είναι η πιο ευαίσθητη και οι δοκιμές χρησιμοποιούν αντιδραστήρια γενικής χρήσης. Η ανάλυση είναι γρήγορη και έχει τη δυνατότητα μελέτης ανοσοσφαιρινών διαφόρων τάξεων. Επί του παρόντος, η ELISA είναι μία από τις κύριες μεθόδους εργαστηριακής διάγνωσης.

Η αξιολόγηση των αποτελεσμάτων ELISA πραγματοποιείται αυτόματα χρησιμοποιώντας ειδικές συσκευές. Σε ορισμένες περιπτώσεις, επιτρέπεται επίσης η οπτική καταγραφή των αποτελεσμάτων της αντίδρασης. Η αξιοπιστία της ορολογικής διάγνωσης εξαρτάται από την οργάνωση του εργαστηριακού ελέγχου, ο οποίος αποτελείται από διάφορες διαδικασίες που έχουν σχεδιαστεί για την αξιολόγηση της ποιότητας των αποτελεσμάτων.

Οι μολυσματικές ασθένειες ξεκινούν την παραγωγή κατάλληλων αντισωμάτων στο αίμα ενός άρρωστου ατόμου. Έτσι λειτουργεί η ανοσολογική άμυνα του οργανισμού.

Ο προσδιορισμός της παρουσίας αντισωμάτων σε έναν συγκεκριμένο ιό ή βακτήριο καθιστά δυνατό να ενημερωθείτε για την εμφάνιση μιας ασθένειας πριν εμφανιστούν τα κύρια συμπτώματά της. Σήμερα, οι ορολογικές εξετάσεις παρέχουν την πληρέστερη εικόνα. Επομένως, σε αυτό το άρθρο θα μιλήσουμε για ορολογικό έλεγχο.

Τι είναι οι ορολογικές εξετάσεις

Οι μέθοδοι για τη μελέτη βιολογικών υλικών ανθρώπων και ζώων που μπορούν να ανιχνεύσουν αντισώματα ή αντιγόνα σε αυτά που παράγει το σώμα ως προστατευτική αντίδραση στην καταπολέμηση των λοιμώξεων ονομάζονται ορολογικές μελέτες. Τέτοιες μέθοδοι χρησιμοποιούνται για τον προσδιορισμό του αιτιολογικού παράγοντα της μόλυνσης, καθώς και για τους σκοπούς:

  • προσδιορισμός της ομάδας αίματος,
  • μελέτη της ανοσίας μέσω του προσδιορισμού του επιπέδου του χυμικού συστατικού της,
  • προσδιορισμός των αντιγόνων των ιστών.

Σε ποιον συνταγογραφείται;

Γιατί να το κάνω;

Η μέθοδος εκτιμάται από τους ειδικούς ως ένας τρόπος για τη διάγνωση υψηλής ποιότητας της νόσου.

  • Εάν ο ασθενής βρίσκεται στο στάδιο της νόσου, τότε συνιστάται η διεξαγωγή επαναλαμβανόμενων μελετών σε διαστήματα περίπου μιας εβδομάδας προκειμένου να παρακολουθείται η αποτελεσματικότητα της θεραπείας που χρησιμοποιείται.
  • Οι ορολογικές εξετάσεις χρησιμοποιούνται συχνά για να προσδιοριστεί ποιο παθογόνο προκάλεσε την ασθένεια αφού ο ασθενής την έχει υποστεί.

Τύποι διαδικασίας

Οι μέθοδοι ορολογικής έρευνας βασίζονται σε διάφορες αντιδράσεις:

  • Αντίδραση εξουδετέρωσηςβασίζεται στην ιδιότητα των αντισωμάτων του ανοσοποιητικού ορού να δρουν ως εξουδετερωτικός παράγοντας έναντι των ίδιων των τοξινών ή των μικροοργανισμών, αποτρέποντας τις καταστροφικές τους επιπτώσεις.
  • Αντίδραση συγκόλλησης, το οποίο, με τη σειρά του, χωρίζεται στους ακόλουθους υποτύπους:
    • άμεσες αντιδράσεις - χρησιμοποιούνται για τον έλεγχο ορού αίματος για την παρουσία αντισωμάτων. Σκοτωμένα μικρόβια προστίθενται στη σύνθεση που μελετάται και εάν εμφανιστεί ένα ίζημα με τη μορφή νιφάδων, σημαίνει ότι η αντίδραση σε αυτόν τον τύπο μικροβίου είναι θετική.
    • η έμμεση αντίδραση αιμοσυγκόλλησης πραγματοποιείται με την εισαγωγή στον ορό του αίματος ερυθροκυττάρων στα οποία προσροφούνται αντιγόνα. Αυτοί οι παράγοντες αλληλεπιδρούν με το ίδιο είδος αντιγόνων που υπάρχουν στον ορό του αίματος, με αποτέλεσμα ένα ίζημα με όστρακο.
  • Αντίδραση που περιλαμβάνει συμπλήρωμαχρησιμοποιείται για την ανίχνευση μολυσματικών ασθενειών. Η μέθοδος υλοποιείται μέσω της ενεργοποίησης του συμπληρώματος και της παρατήρησης των αντιδράσεων που συμβαίνουν στο υπό μελέτη μέσο.
  • Αντίδραση καθίζησηςπραγματοποιείται με την επίστρωση ενός διαλύματος αντιγόνου σε ένα υγρό μέσο - ανοσοποιητικό ορό. Το αντιγόνο που χρησιμοποιείται για αυτή τη μέθοδο είναι διαλυτό. Η αντίδραση είναι ότι το σύμπλεγμα αντιγόνου-αντισώματος υφίσταται καθίζηση. το ίζημα που προκύπτει ονομάζεται ίζημα.
  • Αντίδραση χρησιμοποιώντας επισημασμένα αντιγόνα και αντισώματαβασίζεται στο γεγονός ότι τα μικρόβια ή τα αντιγόνα ιστών, επεξεργασμένα με συγκεκριμένο τρόπο, αποκτούν την ικανότητα να εκπέμπουν φως υπό την επίδραση των υπεριωδών ακτίνων. Η μέθοδος χρησιμοποιείται όχι μόνο για τη διάγνωση αντιγόνων, αλλά και για τον προσδιορισμό φαρμακευτικών ουσιών, ενζύμων και ορμονών.

Αντενδείξεις για

Λόγω του γεγονότος ότι η μέθοδος περιλαμβάνει τη μελέτη του βιολογικού υλικού του ασθενούς, δεν μπορεί να έχει αρνητικό αντίκτυπο στον άνθρωπο. Επομένως, δεν υπάρχουν αντενδείξεις για χρήση.

Η μελέτη είναι απολύτως ασφαλής.

Θα περιγράψουμε παρακάτω πώς γίνεται μια ορολογική εξέταση.

Ενδείξεις για δοκιμές

Η μέθοδος χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό του αιτιολογικού παράγοντα της μόλυνσης, συμπεριλαμβανομένων των ακόλουθων ασθενειών:

  • HIV λοίμωξη,
  • τοξοπλάσμωση,
  • μολυσματικές ασθένειες που αποκτώνται μέσω σεξουαλικής επαφής·
  • διφθερίτιδα,
  • Διαθεσιμότητα ;
  • βρουκέλλωση,
  • σταφυλοκοκκικές λοιμώξεις,
  • ηπατίτιδα.

Η μέθοδος χρησιμοποιείται επίσης για τον εντοπισμό των ακόλουθων ασθενειών:

  • οπισθορχίαση,
  • αμοιβάδα,
  • κυστικέρκωση,
  • γιαρδίαση,
  • πνευμονία.

Προετοιμασία για τη διαδικασία

Δεν απαιτούνται ειδικές προετοιμασίες για τη διαδικασία. Πρέπει να τηρείται μία προϋπόθεση: η αιμοληψία να γίνεται με άδειο στομάχι.

Ο αλγόριθμος δειγματοληψίας (λήψης) αίματος (υλικού) για ορολογικές εξετάσεις περιγράφεται παρακάτω.

Διεξαγωγή ανάλυσης

Το αίμα λαμβάνεται από την ωλένια φλέβα. Για να λειτουργήσει η μελέτη, το αίμα λαμβάνεται όχι με σύριγγα, αλλά με τη βαρύτητα. Μια βελόνα χωρίς σύριγγα εισάγεται σε μια φλέβα και συλλέγονται έως και 5 ml αίματος σε δοκιμαστικό σωλήνα.

Κατά τη διάρκεια της διαδικασίας, ο ασθενής αισθάνεται ελαφρά ενόχληση καθώς η βελόνα εισάγεται στη φλέβα. Τα επόμενα βήματα δεν είναι καθόλου ανησυχητικά.

Η ερμηνεία των αποτελεσμάτων μιας ορολογικής εξέτασης αίματος περιγράφεται παρακάτω.

Αποκωδικοποίηση των αποτελεσμάτων

Τα αποτελέσματα που λαμβάνονται θα πρέπει να λαμβάνονται υπόψη σε συνδυασμό με την κλινική εικόνα της νόσου, ελέγχοντας την ύποπτη διάγνωση χρησιμοποιώντας διάφορες εξετάσεις. Αυτό οφείλεται στο γεγονός ότι οι εξετάσεις είναι συγκεκριμένες και μερικές φορές δεν έχουν απόλυτη ευαισθησία σε μολυσματικές ασθένειες.

Η τιμή για μια ολοκληρωμένη ορολογική εξέταση αίματος περιγράφεται παρακάτω.

Μέσο κόστος της διαδικασίας

Η τιμή της διαδικασίας θα εξαρτηθεί από το είδος της μελέτης. Αποτελείται από το κόστος της ανάλυσης και το κόστος των αντισωμάτων σε ένα συγκεκριμένο παθογόνο. Το μέσο κόστος της διαδικασίας είναι εντός 700 ρούβλια.

Οι ορολογικές αντιδράσεις περιγράφονται στο παρακάτω βίντεο:

ΟΡΙΛΟΓΙΚΕΣ ΜΕΛΕΤΕΣ(Λατινικός ορός ορός + Ελληνικό δόγμα logos) - μέθοδοι ανοσολογίας που μελετούν τις ειδικές ιδιότητες του αίματος ανθρώπου ή ζώου για τον εντοπισμό αντιγόνων ή αντισωμάτων χρησιμοποιώντας ορολογικές αντιδράσεις.

Αρχή Σ. και. ορίστηκε στα τέλη του περασμένου αιώνα, αφού διαπιστώθηκε ότι ο συνδυασμός ενός αντιγόνου με ένα αντίσωμα (βλ. Αντιγόνο - Αντίδραση αντισώματος) συνοδεύεται από μια σειρά από φαινόμενα προσβάσιμα στην οπτική παρατήρηση - συγκόλληση (βλ.), κατακρήμνιση (βλ. ) ή λύση. Υπάρχει πλέον η δυνατότητα ειδικής αναγνώρισης αντιγόνων (βλ.) ή αντισωμάτων (βλ.), εάν ένα από αυτά τα συστατικά είναι γνωστό.

Το 1897, ο F. Vidal ανέφερε ότι ο ορός αίματος ασθενών με τυφοειδή πυρετό συγκολλεί επιλεκτικά τα βακτήρια του τύφου και επομένως αυτή η αντίδραση (βλ. Αντίδραση Vidal) μπορεί να χρησιμοποιηθεί στο εργαστήριο. διάγνωση τυφοειδούς πυρετού. Την ίδια χρονιά, αποδείχθηκε ότι τα διηθήματα των καλλιεργειών βακτηρίων πανώλης, τύφου και χολέρας, όταν συνδυάζονται με τους αντίστοιχους ορούς του ανοσοποιητικού, σχηματίζουν νιφάδες ή ιζήματα.

Η αντίδραση κατακρήμνισης αποδείχθηκε κατάλληλη για την ανίχνευση οποιωνδήποτε πρωτεϊνικών αντιγόνων. Το 1900-1901 Ο K. Landsteiner διαπίστωσε ότι στα ανθρώπινα ερυθροκύτταρα υπάρχουν δύο διαφορετικά αντιγόνα (Α και Β), και στον ορό του αίματος υπάρχουν δύο συγκολλητίνες (α και Ρ), που συνέβαλαν στη χρήση της αντίδρασης αιμοσυγκόλλησης για τον προσδιορισμό των ομάδων αίματος (βλ.).

Το τεστ συγκόλλησης για τον προσδιορισμό της ομάδας αίματος και του παράγοντα Rh χρησιμοποιείται στη μαιευτική πρακτική, για μεταγγίσεις αίματος και μεταμόσχευση ιστών. Τα αντισώματα κατά του παράγοντα Rh (βλ.) είναι ατελή αντισώματα· δεν είναι ικανά να αντιδράσουν άμεσα με θετικά Rh ερυθροκύτταρα, επομένως, για την ανίχνευση τους, χρησιμοποιείται η αντίδραση Coombs (βλ. Αντίδραση Coombs), με βάση την ανίχνευση ατελών αντισωμάτων χρησιμοποιώντας οροί αντισφαιρίνης. Ο εξεταζόμενος ορός αίματος προστίθεται σε ερυθρά αιμοσφαίρια γνωστής ειδικότητας, ακολουθούμενος από ορό αντισφαιρίνης έναντι IgG (έμμεση αντίδραση Coombs). Θραύσματα Fab ατελών αντισωμάτων του υπό μελέτη ορού αίματος προσκολλώνται στα ερυθροκύτταρα και αντισώματα αντι-IgG προσκολλώνται στα ελεύθερα θραύσματα Fc αυτών των αντισωμάτων και λαμβάνει χώρα συγκόλληση των ερυθροκυττάρων. Για τη διάγνωση της αιμολυτικής αναιμίας χρησιμοποιείται η άμεση αντίδραση Coombs.Στο σώμα τέτοιων ασθενών, τα ερυθρά αιμοσφαίρια συνδυάζονται με αντισώματα που κυκλοφορούν στο αίμα κατά του παράγοντα Rh. Για την ταυτοποίησή τους, αντισώματα anti-IgG προστίθενται στα ερυθρά αιμοσφαίρια που λαμβάνονται από τον ασθενή. Η εμφάνιση συγκόλλησης ερυθρών αιμοσφαιρίων επιβεβαιώνει τη διάγνωση της νόσου.

Η αντίδραση αναστολής της αιμοσυγκόλλησης - HRI (βλ. Αιμοσυγκόλληση) - βασίζεται στο φαινόμενο της πρόληψης (αναστολής) από τον ανοσοποιητικό ορό της αιμοσυγκόλλησης των ερυθροκυττάρων από ιούς. Το φαινόμενο της ιικής αιμοσυγκόλλησης δεν είναι η σερόλη. αντίδραση και εμφανίζεται ως αποτέλεσμα του συνδυασμού του ιού με τους υποδοχείς των ερυθρών αιμοσφαιρίων, ωστόσο, το HAI είναι μια ορολογική αντίδραση που χρησιμοποιείται για την ανίχνευση και την τιτλοδότηση αντιιικών αντισωμάτων. Η RTGA είναι η κύρια μέθοδος για την οροδιάγνωση της γρίπης, της ιλαράς, της ερυθράς, της παρωτίτιδας, της εγκεφαλίτιδας που μεταδίδεται από κρότωνες και άλλων ιογενών λοιμώξεων, οι αιτιολογικοί παράγοντες των οποίων έχουν ιδιότητες αιμοσυγκόλλησης.

Η αντίδραση παθητικής ή έμμεσης αιμοσυγκόλλησης Χρησιμοποιεί ερυθρά αιμοσφαίρια ή ουδέτερα συνθετικά υλικά (για παράδειγμα, σωματίδια λατέξ), στην επιφάνεια των οποίων προσροφούνται αντιγόνα (βακτηριακά, ιικά, ιστών) ή αντισώματα (βλ. Αντίδραση Boyden). Η συγκόλληση τους γίνεται με την προσθήκη κατάλληλων ορών ή αντιγόνων. Τα ερυθρά αιμοσφαίρια που ευαισθητοποιούνται με αντιγόνα ονομάζονται αντιγονικά ερυθροκύτταρα διαγνωστικά και χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση και την τιτλοδότηση αντισωμάτων. Τα ερυθρά αιμοσφαίρια που ευαισθητοποιούνται με αντισώματα ονομάζονται διαγνωστικά ερυθροκυττάρων ανοσοσφαιρίνης (βλ.) και χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση αντιγόνων:

Η παθητική αντίδραση αιμοσυγκόλλησης χρησιμοποιείται για τη διάγνωση ασθενειών που προκαλούνται από βακτήρια (τύφος και παρατυφοειδής πυρετός, δυσεντερία, βρουκέλλωση, πανώλη, χολέρα κ.λπ.), πρωτόζωα (ελονοσία) και ιούς (γρίπη, αδενοϊικές λοιμώξεις, εγκεφαλίτιδα από κρότωνες, αιμορραγικός πυρετός της Κριμαίας κ.λπ.) . Η ευαισθησία της αντίδρασης παθητικής αιμοσυγκόλλησης δεν είναι κατώτερη από τη μέθοδο απομόνωσης του ιού για αρενοϊικές ασθένειες (βλ.), ιδιαίτερα για τη λεμφοκυτταρική χοριομηνιγγίτιδα. Το ιικό αντιγόνο της λεμφοκυτταρικής χοριομηνιγγίτιδας ανιχνεύεται σε φορείς ιού (οικιακά ποντίκια) σε μια αντίδραση παθητικής αιμοσυγκόλλησης με εναιωρήματα εξαγόμενων οργάνων αραιωμένα δεκάδες χιλιάδες φορές. Σε περίπτωση σαλμονέλωσης, η αντίδραση παθητικής αιμοσυγκόλλησης ανιχνεύει βακτήρια σε συγκέντρωση έως και αρκετές εκατοντάδες μικροβιακά σώματα σε 1 g περιττωμάτων· τα βακτήρια δυσεντερίας στα τρόφιμα ανιχνεύονται όταν υπάρχουν τουλάχιστον 500 μικροβιακά σώματα σε 1 g υλικού.

Η παθητική αντίδραση αιμοσυγκόλλησης χρησιμοποιείται στη διάγνωση και την πρόληψη της ιογενούς ηπατίτιδας Β. Στη Σοβιετική Ένωση, για την ανίχνευση του αντιγόνου HBs (βλ. Αυστραλιανό αντιγόνο) στο αίμα ασθενών με οξεία ηπατίτιδα Β, παράγεται ένα διαγνωστικό, το οποίο είναι τα ερυθροκύτταρα κοτόπουλου ευαισθητοποιημένη με ανοσοσφαιρίνη κατσίκας έναντι του αντιγόνου HBs. Μια σταγόνα diagnosticum συνδυάζεται με ίσο όγκο ορού αίματος από τα άτομα που εξετάζονται και εάν υπάρχει αντιγόνο HBs σε αυτό, συμβαίνει συγκόλληση. Η αντίδραση είναι ικανή να συλλάβει έως και 1,5 ng/ml αντιγόνου HBs. Για την ανίχνευση αντισωμάτων HBs, χρησιμοποιούνται ερυθρά αιμοσφαίρια με το αντιγόνο HBs προσροφημένο πάνω τους, απομονωμένα από το αίμα ασθενών. Η παθητική αντίδραση αιμοσυγκόλλησης χρησιμοποιείται επίσης για τον εντοπισμό της υπερευαισθησίας του ασθενούς σε φάρμακα και ορμόνες, για παράδειγμα, πενικιλίνη ή ινσουλίνη. Σε αυτή την περίπτωση, τα ερυθρά αιμοσφαίρια της ανθρώπινης ομάδας αίματος 0 ευαισθητοποιούνται με ένα φάρμακο και στη συνέχεια χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση συγκολλητινών σε αυτό στον ορό αίματος του ασθενούς.

Η παθητική αντίδραση αιμοσυγκόλλησης χρησιμοποιείται για την ανίχνευση της γοναδοτροπικής ορμόνης στα ούρα προκειμένου να διαπιστωθεί εγκυμοσύνη (βλ. Χοριακή γοναδοτροπίνη). Για να γίνει αυτό, ο τυπικός ορός για αυτήν την ορμόνη επωάζεται με τα ούρα που εξετάζονται. Με την επακόλουθη προσθήκη ερυθρών αιμοσφαιρίων με την ορμόνη που απορροφάται πάνω τους, δεν εμφανίζεται συγκόλληση (θετική απόκριση), αφού η ορμόνη που περιέχεται στα ούρα εξουδετέρωσε τα συγκολλητικά αντισώματα.

Αντιδράσεις με βάση το φαινόμενο της βροχόπτωσης

Χρησιμοποιούνται για τον προσδιορισμό μιας μεγάλης ποικιλίας αντιγόνων και αντισωμάτων. Το απλούστερο παράδειγμα μιας ποιοτικής αντίδρασης είναι ο σχηματισμός μιας αδιαφανούς ζώνης καθίζησης στο όριο της στιβάδας του αντιγόνου στο αντίσωμα σε έναν δοκιμαστικό σωλήνα. Διάφοροι τύποι αντιδράσεων κατακρήμνισης σε ημι-υγρό άγαρ ή πηκτώματα αγαρόζης χρησιμοποιούνται ευρέως (μέθοδος διπλής ανοσοδιάχυσης σύμφωνα με τον Ouchterlohn, μέθοδος ακτινικής ανοσοδιάχυσης, ανοσοηλεκτροφόρηση), που είναι τόσο ποιοτικής όσο και ποσοτικής φύσης (βλ.

Για να πραγματοποιηθεί διπλή ανοσοδιάχυση, ένα στρώμα λιωμένου πήγματος χύνεται σε γυάλινη πλάκα και, μετά τη σκλήρυνση, κόβονται φρεάτια με διάμετρο 1,5-3 mm. Τα δοκιμαστικά αντιγόνα τοποθετούνται σε φρεάτια που βρίσκονται σε κύκλο και ορός ανοσοποιητικού γνωστής ειδικότητας τοποθετείται στο κεντρικό φρεάτιο. Διαχέονται μεταξύ τους, ομόλογοι οροί και αντιγόνα σχηματίζουν ένα ίζημα. Με ακτινική ανοσοδιάχυση (με τη μέθοδο Mancini), προστίθεται ανοσοποιητικός ορός στο άγαρ. Το αντιγόνο που τοποθετείται στα φρεάτια διαχέεται μέσω του άγαρ και ως αποτέλεσμα της καθίζησης με ανοσοορό, σχηματίζονται αδιαφανείς δακτύλιοι γύρω από τα φρεάτια, η εξωτερική διάμετρος των οποίων είναι ανάλογη με τη συγκέντρωση του αντιγόνου. Μια τροποποίηση αυτής της αντίδρασης χρησιμοποιείται στη διάγνωση της γρίπης για την αναγνώριση των αντισωμάτων IgM και IgG (βλέπε Ανοσοσφαιρίνες). Αντιγόνο γρίπης προστίθεται στο άγαρ και ορός αίματος προστίθεται στα φρεάτια. Οι πλάκες στη συνέχεια υποβάλλονται σε επεξεργασία με ανοσοορούς έναντι αντισωμάτων IgM ή IgG, γεγονός που βοηθά στην ανίχνευση της αντίδρασης των αντίστοιχων αντισωμάτων με αντιγόνα. Η μέθοδος σάς επιτρέπει να προσδιορίζετε ταυτόχρονα τους τίτλους αντισωμάτων και την ιδιότητά τους σε μια συγκεκριμένη κατηγορία ανοσοσφαιρινών.

Ένας τύπος ανοσοηλεκτροφόρησης είναι η ραδιοανοσοφόρηση. Σε αυτή την περίπτωση, μετά τον ηλεκτροφορητικό διαχωρισμό των αντιγόνων, πρώτα ανοσιακός ορός επισημασμένος με ραδιενεργό ιώδιο έναντι των αντιγόνων που προσδιορίζονται χύνεται σε μια αυλάκωση παράλληλη με την κίνηση των αντιγόνων στο πήκτωμα, και στη συνέχεια ανοσιακός ορός έναντι των αντισωμάτων IgG, τα άκρα του οποίου καθιζάνει τα προκύπτοντα σύμπλοκα του αντισώματος με το αντιγόνο. Όλα τα μη δεσμευμένα αντιδραστήρια ξεπλένονται και το σύμπλεγμα αντιγόνου-αντισώματος ανιχνεύεται με αυτοραδιογραφία (βλ.).

Αντιδράσεις που περιλαμβάνουν συμπλήρωμα. Οι αντιδράσεις που περιλαμβάνουν συμπλήρωμα (βλ.) βασίζονται στην ικανότητα του υποσυστατικού του συμπληρώματος Cl(Clq) και στη συνέχεια άλλων συστατικών του συμπληρώματος να προσκολλώνται σε ανοσοσυμπλέγματα.

Η αντίδραση στερέωσης συμπληρώματος επιτρέπει την τιτλοποίηση αντιγόνων ή αντισωμάτων σύμφωνα με τον βαθμό στερέωσης του συμπληρώματος από το σύμπλεγμα αντιγόνου-αντισώματος. Αυτή η αντίδραση αποτελείται από δύο φάσεις: την αλληλεπίδραση του αντιγόνου με τον εξεταζόμενο ορό αίματος (σύστημα δοκιμής) και την αλληλεπίδραση του αιμολυτικού ορού με τα ερυθρά αιμοσφαίρια προβάτου (σύστημα δεικτών). Εάν η αντίδραση είναι θετική, λαμβάνει χώρα στερέωση συμπληρώματος στο σύστημα δοκιμής και, στη συνέχεια, όταν προστίθενται ερυθροκύτταρα ευαισθητοποιημένα με αντισώματα, δεν παρατηρείται αιμόλυση (βλ. Αντίδραση στερέωσης συμπληρώματος). Η αντίδραση χρησιμοποιείται ευρέως για την οροδιάγνωση της σπλαχνικής σύφιλης (βλέπε αντίδραση Wasserman) και των ιογενών λοιμώξεων (βλ. Ιολογικές μελέτες).

Κυτταρόλυση. Τα αντισώματα κατά των κυτταρικών δομών μπορούν, με τη συμμετοχή συμπληρώματος, να διαλύσουν τα κύτταρα που φέρουν αυτές τις δομές. Η λύση των ερυθρών αιμοσφαιρίων εκτιμάται εύκολα από το βαθμό και την ένταση της απελευθέρωσης αιμοσφαιρίνης. Η λύση των πυρηνικών κυττάρων εκτιμάται με τον υπολογισμό του ποσοστού των νεκρών κυττάρων που δεν έχουν χρωματιστεί με μπλε του μεθυλενίου. Συχνά χρησιμοποιείται επίσης ραδιενεργό χρώμιο, το οποίο έχει προηγουμένως δεσμευτεί χημικά με τα κύτταρα. Ο αριθμός των κατεστραμμένων κυττάρων καθορίζεται από την ποσότητα του μη δεσμευμένου χρωμίου που απελευθερώνεται κατά τη λύση των κυττάρων.

Η αντίδραση της ακτινικής αιμόλυσης των ερυθροκυττάρων μπορεί να συμβεί στο πήκτωμα. Ένα εναιώρημα ερυθρών αιμοσφαιρίων προβάτου τοποθετείται σε γέλη αγαρόζης, προσθέτοντας συμπλήρωμα. Κατασκευάζονται φρεάτια στο στρώμα που έχει παγώσει στο γυαλί και προστίθεται αιμολυτικός ορός σε αυτά. Μια ζώνη αιμόλυσης θα σχηματιστεί γύρω από τα φρεάτια ως αποτέλεσμα της ακτινικής διάχυσης των αντισωμάτων. Η ακτίνα της ζώνης αιμόλυσης είναι ευθέως ανάλογη με τον τίτλο του ορού. Εάν προσροφήσετε οποιοδήποτε αντιγόνο σε ερυθροκύτταρα, για παράδειγμα, τη γλυκοπρωτεΐνη αιμοσυγκολλητίνη του ιού της γρίπης, της ερυθράς ή της εγκεφαλίτιδας που μεταδίδεται από κρότωνες, τότε μπορείτε να αναπαράγετε το φαινόμενο της αιμόλυσης με ανοσοορούς σε αυτούς τους ιούς. Η αντίδραση ακτινικής αιμόλυσης σε ένα πήκτωμα έχει βρει εφαρμογή στη διάγνωση ιογενών λοιμώξεων λόγω της ευκολίας παραγωγής, της αναισθησίας στους αναστολείς ορού και της ικανότητας τιτλοδότησης ορού αίματος σύμφωνα με τη διάμετρο της ζώνης αιμόλυσης χωρίς να καταφεύγουμε σε σειριακές αραιώσεις.

Ανοσολογική προσκόλληση. Τα ερυθρά αιμοσφαίρια, τα αιμοπετάλια και άλλα αιμοσφαίρια έχουν υποδοχείς για το τρίτο συστατικό του συμπληρώματος (C3) στην επιφάνειά τους. Εάν ο κατάλληλος ανοσοορός και το συμπλήρωμα προστεθούν σε ένα αντιγόνο (βακτήρια, ιοί κ.λπ.), σχηματίζεται ένα σύμπλεγμα αντιγόνου-αντισώματος επικαλυμμένο με το συστατικό C3 του συμπληρώματος. Όταν αναμιγνύεται με αιμοπετάλια, λόγω του συστατικού C3 του συμπληρώματος, το σύμπλεγμα αντιγόνου-αντισώματος θα κατακαθίσει στα κύτταρα και θα προκαλέσει τη συγκόλλησή τους (βλ. Ανοσολογική προσκόλληση). Αυτή η αντίδραση χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό των αντιγόνων του συστήματος HLA (βλ. Ανοσία μεταμόσχευσης) και στη μελέτη ενός αριθμού ιογενών λοιμώξεων (εγκεφαλίτιδα που μεταδίδεται από κρότωνες, δάγγειος πυρετός), οι οποίες συνοδεύονται από ανοσοπαθόλη. διεργασίες και κυκλοφορία στο αίμα των ιικών αντιγόνων σε συνδυασμό με αντισώματα.

Η αντίδραση εξουδετέρωσης βασίζεται στην ικανότητα των αντισωμάτων να εξουδετερώνουν ορισμένες ειδικές λειτουργίες μακρομοριακών ή διαλυτών αντιγόνων, για παράδειγμα, ενζυμική δραστηριότητα, βακτηριακές τοξίνες και παθογονικότητα ιών. Στη βακτηριολογία, αυτή η αντίδραση χρησιμοποιείται για την ανίχνευση αντιστρεπτολυσινών, αντιστρεπτοκινάσης και αντισταφυλολυσινών. Η αντίδραση εξουδετέρωσης των τοξινών μπορεί να εκτιμηθεί με βιολ. αποτέλεσμα, για παράδειγμα, οι οροί αντιτετάνου και αντιβοτουλινικής τιτλοδοτούνται (βλ. Τοξίνη - αντίδραση αντιτοξίνης). Ένα μείγμα τοξίνης και αντιορού που χορηγείται σε ζώα αποτρέπει τον θάνατό τους. Στην ιολογία χρησιμοποιούνται διάφορες εκδοχές της αντίδρασης εξουδετέρωσης. Με την ανάμειξη των ιών με τον κατάλληλο αντιορό και την έγχυση αυτού του μείγματος σε ζώα ή κυτταροκαλλιέργειες, εξουδετερώνεται η παθογένεια των ιών.

Αντιδράσεις με χρήση χημικών και φυσικών ετικετών

Ο ανοσοφθορισμός, που αναπτύχθηκε από τον A. N. Coons το 1942, χρησιμοποιείται για τη σερόλη. αντιδράσεις ορών σημασμένων με φθοριόχρωμα (βλέπε Ανοσοφθορισμό). Ο σημασμένος με φθορόχρωμο ορός σχηματίζει ένα σύμπλεγμα αντιγόνου-αντισώματος με το αντιγόνο, το οποίο γίνεται προσιτό στην παρατήρηση κάτω από μικροσκόπιο στις υπεριώδεις ακτίνες, οι οποίες διεγείρουν το φθόριο. Η άμεση αντίδραση ανοσοφθορισμού χρησιμοποιείται για τη μελέτη κυτταρικών αντιγόνων, την ανίχνευση του ιού σε μολυσμένα κύτταρα και την ανίχνευση βακτηρίων και ρικετσιών σε επιχρίσματα. Έτσι, για τη διάγνωση της λύσσας, τα αποτυπώματα κομματιών του εγκεφάλου ζώων για τα οποία υπάρχει υποψία ότι φέρουν τον ιό αντιμετωπίζονται με φωταύγεια ορό κατά της λύσσας. Εάν το αποτέλεσμα είναι θετικό, παρατηρούνται εξογκώματα λαμπερού πράσινου χρώματος στο πρωτόπλασμα των νευρικών κυττάρων. Η γρήγορη διάγνωση της γρίπης, της παραγρίπης και της αδενοϊικής λοίμωξης βασίζεται στην ανίχνευση ιικών αντιγόνων σε κύτταρα δακτυλικών αποτυπωμάτων από τον ρινικό βλεννογόνο.

Η πιο ευρέως χρησιμοποιούμενη μέθοδος είναι ο έμμεσος ανοσοφθορισμός, ο οποίος βασίζεται στην ανίχνευση του συμπλέγματος αντιγόνου-αντισώματος με τη χρήση φωταυγούς ανοσοορού έναντι αντισωμάτων IgG και χρησιμοποιείται για την ανίχνευση όχι μόνο αντιγόνων, αλλά και τιτλοδοτήσεων αντισωμάτων. Η μέθοδος έχει βρει εφαρμογή στην οροδιάγνωση του έρπητα, της κυτταρομεγαλίπας και του πυρετού Lassa. Στο εργαστήριο, ένα απόθεμα παρασκευασμάτων κυττάρων που περιέχουν αντιγόνο, για παράδειγμα, κύτταρα VERO που αναπτύσσονται σε κομμάτια λεπτού γυαλιού και έχουν μολυνθεί με ιό ή ινοβλάστες κοτόπουλου στερεωμένους με ακετόνη θα πρέπει να φυλάσσονται στους -20°. Ο ορός δοκιμής αίματος τοποθετείται σε στρώματα πάνω στα παρασκευάσματα, το παρασκεύασμα τοποθετείται σε θερμοστάτη στους f 37° για να σχηματιστούν ανοσοσυμπλέγματα και στη συνέχεια, μετά την έκπλυση των μη δεσμευμένων αντιδραστηρίων, αυτά τα σύμπλοκα ανιχνεύονται με επισημασμένο ορό φωταύγειας έναντι ανθρώπινων σφαιρινών. Χρησιμοποιώντας επισημασμένους ανοσοορούς έναντι αντισωμάτων IgM ή IgG, είναι δυνατό να διαφοροποιηθεί ο τύπος των αντισωμάτων και να ανιχνευθεί η πρώιμη ανοσοαπόκριση με την παρουσία αντισωμάτων IgM.

Στην ενζυμική-ανοσολογική μέθοδο χρησιμοποιούνται αντισώματα συζευγμένα με ένζυμα, κεφ. αρ. υπεροξειδάση χρένου ή αλκαλική φωσφατάση. Για να ανιχνευθεί ο συνδυασμός επισημασμένου ορού με αντιγόνο, προστίθεται ένα υπόστρωμα που αποσυντίθεται από το ένζυμο που συνδέεται με τον ορό, παράγοντας ένα κιτρινο-καφέ (υπεροξειδάση) ή κιτρινοπράσινο (φωσφατάση). Χρησιμοποιούνται επίσης ένζυμα που αποσυνθέτουν όχι μόνο χρωμογόνα, αλλά και αυλογόνα υποστρώματα. Σε αυτή την περίπτωση, με μια θετική αντίδραση, εμφανίζεται μια λάμψη. Όπως ο ανοσοφθορισμός, η ενζυματική ανοσολογική μέθοδος χρησιμοποιείται για την ανίχνευση αντιγόνων στα κύτταρα ή την τιτλοδότηση αντισωμάτων σε κύτταρα που περιέχουν αντιγόνο.

Ο πιο δημοφιλής τύπος ενζυμικής-ανοσολογικής μεθόδου είναι η ανοσοπροσρόφηση. Σε ένα στερεό φορέα, που μπορεί να είναι κυτταρίνη, πολυακρυλαμίδιο, δεξτράνη και διάφορα πλαστικά, το αντιγόνο απορροφάται. Τις περισσότερες φορές, η επιφάνεια των φρεατίων μικροπάνελ χρησιμεύει ως φορέας. Ο εξεταζόμενος ορός αίματος προστίθεται στα φρεάτια με το απορροφημένο αντιγόνο και στη συνέχεια τον σημασμένο με ένζυμο αντιορό και το υπόστρωμα. Τα θετικά αποτελέσματα λαμβάνονται υπόψη από αλλαγές στο χρώμα του υγρού μέσου. Για την ανίχνευση αντιγόνων, τα αντισώματα απορροφώνται στον φορέα, στη συνέχεια το υλικό δοκιμής προστίθεται στα φρεάτια και η αντίδραση διεξάγεται με έναν σημασμένο με ένζυμο αντιμικροβιακό ορό.

Η ραδιοανοσολογική μέθοδος βασίζεται στη χρήση ραδιοϊσοτόπων επισημάνσεων αντιγόνων ή αντισωμάτων. Αρχικά αναπτύχθηκε ως μια ειδική μέθοδος για τη μέτρηση των επιπέδων των ορμονών που κυκλοφορούν στο αίμα. Το σύστημα δοκιμής ήταν μια ορμόνη (αντιγόνο) σημασμένη με ισότοπο και αντιορός σε αυτήν. Εάν ένα υλικό που περιέχει την επιθυμητή ορμόνη προστεθεί σε έναν τέτοιο αντιορό, θα δεσμεύσει μέρος των αντισωμάτων· με την επακόλουθη προσθήκη μιας επισημασμένης τιτλοδοτημένης ορμόνης, μια μειωμένη ποσότητα αυτής θα δεσμευτεί στα αντισώματα σε σύγκριση με τον έλεγχο. Το αποτέλεσμα αξιολογείται συγκρίνοντας τις καμπύλες του δεσμευμένου και μη δεσμευμένου ραδιενεργού ιχνηθέτη. Αυτός ο τύπος μεθόδου ονομάζεται ανταγωνιστική αντίδραση. Υπάρχουν και άλλες τροποποιήσεις της ραδιοανοσολογικής μεθόδου. Η ραδιοανοσολογική μέθοδος είναι η πιο ευαίσθητη μέθοδος για τον προσδιορισμό αντιγόνων και αντισωμάτων, που χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό ορμονών, φαρμάκων και αντιβιοτικών, για τη διάγνωση βακτηριακών, ιικών, ρικετσιωτικών, πρωτοζωικών ασθενειών, για τη μελέτη πρωτεϊνών αίματος, αντιγόνων ιστών.

Συγκριτικά χαρακτηριστικά και χρήση ορολογικών ερευνητικών μεθόδων στην ιατρική πράξη

Μέθοδοι S. and. βελτιώνονται συνεχώς για να αυξηθεί η ευαισθησία και η ευελιξία χρήσης. Αρχικά σερόλη. Η διάγνωση βασίστηκε στην ανίχνευση αντισωμάτων. Με την έλευση των μέσων του 20ου αιώνα. Οι αντιδράσεις ανοσοφθορισμού και παθητικής αιμοσυγκόλλησης, που είναι πιο ευαίσθητες, κατέστησαν δυνατή την ανίχνευση όχι μόνο αντισωμάτων, αλλά και αντιγόνου απευθείας σε υλικό από ασθενείς. Οι ενζυμικές-ανοσολογικές και ραδιοανοσολογικές μέθοδοι, οι οποίες είναι 2-3 τάξεις μεγέθους πιο ευαίσθητες από τον ανοσοφθορισμό και την παθητική αιμοσυγκόλληση, πλησιάζουν τις βιολογικές μεθόδους. ανίχνευση βακτηρίων και ιών. Το πεδίο εφαρμογής τους για την ανίχνευση τόσο των αντιγόνων όσο και των αντισωμάτων είναι θεωρητικά απεριόριστο.

Πληροφορίες οροδιάγνωσης. Οι ασθένειες βασίζονται στην εμφάνιση αντισωμάτων σε ένα απομονωμένο ή ύποπτο παθογόνο, ανεξάρτητα από το αν το παθογόνο εντοπίστηκε στο οξύ στάδιο της νόσου. Εξετάζονται ζεύγη ορού αίματος που λαμβάνονται κατά την έναρξη της νόσου και 2-3 εβδομάδες αργότερα. αργότερα. Η αύξηση των αντισωμάτων στον δεύτερο ορό αίματος τουλάχιστον 4 φορές σε σύγκριση με τον πρώτο είναι διαγνωστικά σημαντική. Έχει επίσης σημασία από ποια κατηγορία ανοσοσφαιρινών αντιπροσωπεύονται τα αντισώματα. Τα αντισώματα IgM ανιχνεύονται στο τέλος της οξείας περιόδου της νόσου και στο πρώιμο στάδιο της ανάρρωσης. Τα αντισώματα IgG εμφανίζονται αργότερα κατά την ανάρρωση και κυκλοφορούν για μεγάλο χρονικό διάστημα. Εάν ανιχνευθούν αντισώματα IgM στον ιό της ερυθράς σε μια γυναίκα στο πρώτο τρίμηνο της εγκυμοσύνης, αυτό χρησιμεύει ως βάση για τη διακοπή της εγκυμοσύνης, καθώς κατά τη διάρκεια αυτής της περιόδου το έμβρυο είναι ιδιαίτερα ευαίσθητο στον ιό. Με διαφορετική πληρ. ασθένειες, χρησιμοποιούνται επιλεκτικά οι πιο συγκεκριμένες και βολικές μέθοδοι.

S. και. χρησιμοποιείται ευρέως στην επιδημιολογία. Η συστηματική συλλογή και εξέταση δειγμάτων αίματος από διάφορες ομάδες πληθυσμού καθιστά δυνατή την κατανόηση των επαφών του πληθυσμού με την πηγή των μολυσματικών παραγόντων. ασθένειες. Η μελέτη του επιπέδου συλλογικής ανοσίας μας επιτρέπει να εντοπίσουμε ομάδες υψηλού κινδύνου και να σχεδιάσουμε δραστηριότητες εμβολιασμού και να μελετήσουμε τη γεωγραφική εξάπλωση των λοιμώξεων. S. και. διαφορετικές ηλικιακές ομάδες του πληθυσμού κατέστησαν δυνατό, για παράδειγμα, τον αναδρομικό προσδιορισμό της κυκλοφορίας διαφορετικών παραλλαγών του ιού της γρίπης κατά τη διάρκεια ορισμένων χρονικών περιόδων.

S. και. έχουν μεγάλη σημασία στη μελέτη κληρονομικών ασθενειών (βλ.) και αυτοάνοσων ασθενειών, που συνοδεύονται από την εμφάνιση ιστών και οργάνων ειδικών αντισωμάτων που καταστρέφουν τα αντίστοιχα κύτταρα στόχους, καθώς και στην ογκολογία για την ανίχνευση καρκινικών αντιγόνων. Έτσι, η ανοσοδιάγνωση του καρκίνου του ήπατος βασίζεται στον προσδιορισμό της άλφα-εμβρυϊκής πρωτεΐνης και άλλων εμβρυϊκών αντιγόνων στον ορό αίματος ασθενών με τη μέθοδο της ανοσοδιάχυσης και τη ραδιοανοσολογική μέθοδο.

Σημαντική επιστημονική πρόοδος στη μελέτη της λεπτής αντιγονικής δομής των κυτταρικών αντιγόνων, των αντιγόνων των βακτηρίων και των ιών επιτυγχάνεται με τη χρήση της σερόλης. αντιδράσεις μονοκλωνικών αντισωμάτων, τα οποία μπορούν να ληφθούν σε μεμονωμένους καθοριστές αντιγόνων.

Βιβλιογραφία:Μέθοδοι έρευνας στην ανοσολογία, επιμ. I. Lefkovits και B. Pernis, μτφρ. from English, Μ., 1981; Οδηγός ανοσολογίας, εκδ. Ο. Ε. Vyazova and Sh. X. Khodzhaeva, Μ., 1973; Guide to Clinical Laboratory Diagnostics, ed. V.V. Menshikova, Μ., 1982; Immunology, επιμ. από τον J.-F. Bach, Ν. Υ., 1978.

S. Ya. Gaidamovich.