Οι μέθοδοι εργαστηριακής διάγνωσης ιογενών λοιμώξεων χωρίζονται σε πολλές μεγάλες ομάδες.
- Άμεσες μέθοδοι, που συνίστανται στην ταυτοποίηση του ίδιου του ιού ή των αντισωμάτων σε αυτόν απευθείας σε βιολογικό υλικό.
- Οι έμμεσες μέθοδοι περιλαμβάνουν την τεχνητή παραγωγή του ιού σε σημαντικές ποσότητες και την περαιτέρω ανάλυσή του.
Οι πιο σχετικές διαγνωστικές μέθοδοι στην καθημερινή πρακτική περιλαμβάνουν:
Ορολογικές διαγνωστικές μέθοδοι - ανίχνευση ορισμένων αντισωμάτων ή αντιγόνων στον ορό αίματος του ασθενούς ως αποτέλεσμα της αντίδρασης αντιγόνου-αντισώματος (AG-AT). Δηλαδή, κατά την αναζήτηση ενός συγκεκριμένου αντιγόνου σε έναν ασθενή, χρησιμοποιείται το αντίστοιχο τεχνητά συντιθέμενο αντίσωμα και, κατά συνέπεια, αντίστροφα, κατά την αναγνώριση αντισωμάτων, χρησιμοποιούνται συντιθέμενα αντιγόνα.
αντίδραση ανοσοφθορισμού (RIF)
Βασίζεται στη χρήση αντισωμάτων επισημασμένων με βαφή. Εάν υπάρχει ιικό αντιγόνο, δεσμεύεται με επισημασμένα αντισώματα και παρατηρείται ένα συγκεκριμένο χρώμα στο μικροσκόπιο, το οποίο υποδηλώνει θετικό αποτέλεσμα. Με αυτή τη μέθοδο, δυστυχώς, μια ποσοτική ερμηνεία του αποτελέσματος είναι αδύνατη, αλλά μόνο ποιοτική.
Η δυνατότητα ποσοτικού προσδιορισμού παρέχεται με ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία (ELISA). Είναι παρόμοιο με το RIF, ωστόσο, δεν χρησιμοποιούνται βαφές ως δείκτες, αλλά ένζυμα που μετατρέπουν άχρωμα υποστρώματα σε έγχρωμα προϊόντα, γεγονός που καθιστά δυνατό τον ποσοτικό προσδιορισμό του περιεχομένου τόσο των αντιγόνων όσο και των αντισωμάτων.
- Τα μη δεσμευμένα αντισώματα και αντιγόνα ξεπλένονται.
- Προστίθεται ένα άχρωμο υπόστρωμα και στα φρεάτια με το αντιγόνο που ανιχνεύουμε, θα προκύψει χρωματισμός, επειδή θα υπάρχει ένα ένζυμο που σχετίζεται με το αντιγόνο, μετά το οποίο αξιολογείται η ένταση της φωταύγειας του έγχρωμου προϊόντος χρησιμοποιώντας μια ειδική συσκευή.
Τα αντισώματα ανιχνεύονται με παρόμοιο τρόπο.
Έμμεση (παθητική) αντίδραση αιμοσυγκόλλησης (IPHA).
Η μέθοδος βασίζεται στην ικανότητα των ιών να δεσμεύουν τα ερυθρά αιμοσφαίρια. Κανονικά, τα ερυθρά αιμοσφαίρια πέφτουν στο κάτω μέρος της πλάκας, σχηματίζοντας ένα λεγόμενο κουμπί. Ωστόσο, εάν υπάρχει ιός στο υπό μελέτη βιολογικό υλικό, θα δεσμεύσει τα ερυθρά αιμοσφαίρια σε μια λεγόμενη ομπρέλα που δεν θα πέσει στον πάτο του πηγαδιού.
Εάν το καθήκον είναι ο εντοπισμός αντισωμάτων, τότε αυτό μπορεί να γίνει χρησιμοποιώντας αντίδραση αναστολής αιμοσυγκόλλησης (HAI).Διάφορα δείγματα ενσταλάσσονται στο φρεάτιο με τον ιό και τα ερυθρά αιμοσφαίρια. Εάν υπάρχουν αντισώματα, θα δεσμεύσουν τον ιό και τα ερυθρά αιμοσφαίρια θα πέσουν στο κάτω μέρος για να σχηματίσουν ένα «κουμπί».
Τώρα ας σταθούμε σε μεθόδους για την άμεση διάγνωση των νουκλεϊκών οξέων των υπό μελέτη ιών, καιΠρώτα απ 'όλα, σχετικά με την PCR (αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης) .
Η ουσία αυτής της μεθόδου είναι να ανιχνεύσει ένα συγκεκριμένο θραύσμα DNA ή RNA ενός ιού αντιγράφοντας το πολλές φορές υπό τεχνητές συνθήκες. Η PCR μπορεί να πραγματοποιηθεί μόνο με DNA, δηλαδή για τους ιούς RNA είναι πρώτα απαραίτητο να πραγματοποιηθεί μια αντίδραση αντίστροφης μεταγραφής.
Η PCR πραγματοποιείται απευθείας σε μια ειδική συσκευή που ονομάζεται θερμικός κυκλοποιητής ή θερμικός κυκλοποιητής, ο οποίος διατηρεί την απαιτούμενη θερμοκρασία. Το μείγμα PCR αποτελείται από προστιθέμενο DNA, το οποίο περιέχει το θραύσμα που μας ενδιαφέρει, εκκινητές (ένα σύντομο θραύσμα νουκλεϊκού οξέος, συμπληρωματικό στο DNA στόχο, χρησιμεύει ως εκκινητής για τη σύνθεση της συμπληρωματικής αλυσίδας), πολυμεράση DNA και νουκλεοτίδια.
Στάδια κύκλου PCR:
- Η μετουσίωση είναι το πρώτο στάδιο. Η θερμοκρασία ανεβαίνει στους 95 βαθμούς, οι αλυσίδες DNA αποκλίνουν μεταξύ τους.
- Ανόπτηση ασταριών. Η θερμοκρασία μειώνεται στους 50-60 βαθμούς. Οι εκκινητές βρίσκουν τη συμπληρωματική περιοχή της αλυσίδας και δεσμεύονται σε αυτήν.
-
Σύνθεση. Η θερμοκρασία αυξάνεται και πάλι στους 72, αυτή είναι η θερμοκρασία λειτουργίας για την DNA πολυμεράση, η οποία, ξεκινώντας από τους εκκινητές, χτίζει θυγατρικές αλυσίδες.
Ο κύκλος επαναλαμβάνεται πολλές φορές. Μετά από 40 κύκλους, ένα μόριο DNA παράγει 10*12 μοίρες αντιγράφων αντιγράφων του επιθυμητού θραύσματος.
Κατά την εκτέλεση PCR σε πραγματικό χρόνο, τα συντιθέμενα αντίγραφα ενός θραύσματος DNA επισημαίνονται με μια χρωστική ουσία. Η συσκευή καταγράφει την ένταση της λάμψης και δημιουργεί γραφήματα της συσσώρευσης του επιθυμητού θραύσματος καθώς προχωρά η αντίδραση.
Οι σύγχρονες μέθοδοι εργαστηριακής διάγνωσης με υψηλή αξιοπιστία καθιστούν δυνατό τον εντοπισμό της παρουσίας ενός παθογόνου ιού στο σώμα, συχνά πολύ πριν από την εμφάνιση των πρώτων συμπτωμάτων της νόσου.
Ανοσολογικές αντιδράσειςχρησιμοποιείται σε διαγνωστικές και ανοσολογικές μελέτες σε ασθενείς και υγιείς ανθρώπους. Για το σκοπό αυτό χρησιμοποιούν ορολογικές μεθόδους , δηλαδή, μέθοδοι για τη μελέτη αντισωμάτων και αντιγόνων χρησιμοποιώντας αντιδράσεις αντιγόνου-αντισώματος που προσδιορίζονται στον ορό του αίματος και άλλα υγρά, καθώς και στους ιστούς του σώματος.
Ανίχνευση στον ορό αίματοςΗ παρουσία αντισωμάτων έναντι των παθογόνων αντιγόνων επιτρέπει τη διάγνωση της νόσου. Χρησιμοποιούνται επίσης ορολογικές μελέτες για τον εντοπισμό μικροβιακών αντιγόνων, διαφόρων βιολογικά ενεργών ουσιών, ομάδων αίματος, αντιγόνων ιστών και όγκων, ανοσοσυμπλεγμάτων, κυτταρικών υποδοχέων κ.λπ.
Όταν ένα μικρόβιο απομονώνεταιΤο παθογόνο αναγνωρίζεται από τον ασθενή μελετώντας τις αντιγονικές του ιδιότητες χρησιμοποιώντας ανοσοδιαγνωστικούς ορούς, δηλαδή ορούς αίματος υπερανοσοποιημένων ζώων που περιέχουν ειδικά αντισώματα. Αυτό είναι το λεγόμενο ορολογική ταυτοποίησημικροοργανισμών.
Χρησιμοποιείται ευρέως στη μικροβιολογία και την ανοσολογίααντιδράσεις συγκόλλησης, κατακρήμνιση, εξουδετέρωση, αντιδράσεις που περιλαμβάνουν συμπλήρωμα, χρησιμοποιώντας επισημασμένα αντισώματα και αντιγόνα (ραδιοανοσολογική, ενζυμική ανοσοδοκιμασία, μέθοδοι ανοσοφθορισμού). Οι αντιδράσεις που αναφέρονται διαφέρουν ως προς το καταχωρημένο αποτέλεσμα και την τεχνική παραγωγής, ωστόσο, όλες βασίζονται στην αντίδραση αλληλεπίδρασης ενός αντιγόνου με ένα αντίσωμα και χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση τόσο αντισωμάτων όσο και αντιγόνων. Οι ανοσολογικές αντιδράσεις χαρακτηρίζονται από υψηλή ευαισθησία και ειδικότητα.
Χαρακτηριστικά της αλληλεπίδρασης αντισωμάτων με αντιγόνααποτελούν τη βάση των διαγνωστικών αντιδράσεων στα εργαστήρια. Αντίδραση in vitroμεταξύ αντιγόνου και αντισώματος αποτελείται από μια ειδική και μη ειδική φάση. ΣΕ συγκεκριμένη φάσηλαμβάνει χώρα ταχεία ειδική δέσμευση του ενεργού κέντρου του αντισώματος στον καθοριστή αντιγόνου. Μετά έρχεται μη ειδική φάση -πιο αργή, η οποία εκδηλώνεται με ορατά φυσικά φαινόμενα, για παράδειγμα σχηματισμό κροκίδων (φαινόμενο συγκόλλησης) ή ίζημα με τη μορφή θολότητας. Αυτή η φάση απαιτεί την παρουσία ορισμένων συνθηκών (ηλεκτρολύτες, βέλτιστο pH του περιβάλλοντος).
Η δέσμευση του καθοριστή αντιγόνου (επίτοπος) στο ενεργό κέντρο του θραύσματος Fab των αντισωμάτων οφείλεται σε δυνάμεις van der Waals, δεσμούς υδρογόνου και υδρόφοβη αλληλεπίδραση. Η ισχύς και η ποσότητα του αντιγόνου που δεσμεύεται από τα αντισώματα εξαρτώνται από τη συγγένεια, την απληστία των αντισωμάτων και το σθένος τους.
Ανοσοανεπάρκειες, πρωτοπαθείς και ιδιαίτερα δευτεροπαθείςείναι ευρέως διαδεδομένα μεταξύ των ανθρώπων. Είναι η αιτία πολλών ασθενειών και παθολογικών καταστάσεων, και ως εκ τούτου απαιτούν πρόληψη και θεραπεία με τη βοήθεια ανοσοτροπικών φαρμάκων.
34. Αδρανοποιημένα (σωματιδιακά) εμβόλια. Παραλαβή. Εφαρμογή. Πλεονεκτήματα. Ελαττώματα.
Αδρανοποιημένα (θανατωμένα, σωματιδιακά ή μοριακά) εμβόλια– παρασκευάσματα που ως ενεργό συστατικό περιλαμβάνουν καλλιέργειες παθογόνων ιών ή βακτηρίων που θανατώνονται με χημική ή φυσική μέθοδο (κυτταρικά, ιοσωμάτια) ή σύμπλοκα αντιγόνων που εξάγονται από παθογόνα μικρόβια που περιέχουν προστατευτικά αντιγόνα (υποκυτταρικά, υποβιοτικά εμβόλια).
Για την απομόνωση αντιγονικών συμπλεγμάτων (γλυκοπρωτεΐνες, LPS, πρωτεΐνες) από βακτήρια και ιούς, χρησιμοποιούνται τριχλωροξικό οξύ, φαινόλη, ένζυμα και ισοηλεκτρική κατακρήμνιση.
Λαμβάνονται από την ανάπτυξη παθογόνων βακτηρίων και ιών σε τεχνητά θρεπτικά μέσα, την αδρανοποίησή τους, την απομόνωση αντιγονικών συμπλεγμάτων, τον καθαρισμό τους και την κατασκευή τους με τη μορφή υγρού ή λυόφιλου παρασκευάσματος.
Το πλεονέκτημα αυτού του τύπου εμβολίου είναι η σχετική ευκολία παραγωγής του (δεν απαιτείται μακροχρόνια μελέτη και απομόνωση στελεχών). Τα μειονεκτήματα περιλαμβάνουν τη χαμηλή ανοσογονικότητα, την ανάγκη για τρεις φορές χρήση και την υψηλή αντιδραστικότητα των επίσημων εμβολίων. Επίσης, σε σύγκριση με τα ζωντανά εμβόλια, η ανοσία που παράγουν δεν διαρκεί πολύ.
Επί του παρόντος χρησιμοποιούνται τα ακόλουθα σκοτωμένα εμβόλια: τυφοειδής, εμπλουτισμένος με αντιγόνο Vi. εμβόλιο χολέρας, εμβόλιο κοκκύτη.
119. Ορολογικές εξετάσεις που χρησιμοποιούνται για τη διάγνωση ιογενών λοιμώξεων.
Ανίχνευση στον ορόΗ παρουσία αντισωμάτων έναντι των παθογόνων αντιγόνων επιτρέπει τη διάγνωση της νόσου. Χρησιμοποιούνται επίσης ορολογικές μελέτες για τον εντοπισμό μικροβιακών αντιγόνων, διαφόρων βιολογικά ενεργών ουσιών, ομάδων αίματος, αντιγόνων ιστών και όγκων, ανοσοσυμπλεγμάτων, κυτταρικών υποδοχέων κ.λπ.
Όταν ένα μικρόβιο απομονώνεταιΤο παθογόνο αναγνωρίζεται από τον ασθενή μελετώντας τις αντιγονικές του ιδιότητες χρησιμοποιώντας ανοσοδιαγνωστικούς ορούς, δηλαδή ορούς αίματος υπερανοσοποιημένων ζώων που περιέχουν ειδικά αντισώματα. Αυτό είναι το λεγόμενο ορολογική ταυτοποίησημικροοργανισμών.
Χρησιμοποιείται ευρέως στη μικροβιολογία και την ανοσολογίααντιδράσεις συγκόλλησης, κατακρήμνιση, εξουδετέρωση, αντιδράσεις που περιλαμβάνουν συμπλήρωμα, χρησιμοποιώντας επισημασμένα αντισώματα και αντιγόνα (ραδιοανοσολογική, ενζυμική ανοσοδοκιμασία, μέθοδοι ανοσοφθορισμού). Οι αντιδράσεις που αναφέρονται διαφέρουν ως προς το καταχωρημένο αποτέλεσμα και την τεχνική παραγωγής, ωστόσο, όλες βασίζονται στην αντίδραση αλληλεπίδρασης ενός αντιγόνου με ένα αντίσωμα και χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση τόσο αντισωμάτων όσο και αντιγόνων. Οι ανοσολογικές αντιδράσεις χαρακτηρίζονται από υψηλή ευαισθησία και ειδικότητα.
Χαρακτηριστικά της αλληλεπίδρασης αντισωμάτων με αντιγόνααποτελούν τη βάση των διαγνωστικών αντιδράσεων στα εργαστήρια. Αντίδραση in vitroμεταξύ αντιγόνου και αντισώματος αποτελείται από μια ειδική και μη ειδική φάση. ΣΕ συγκεκριμένη φάσηλαμβάνει χώρα ταχεία ειδική δέσμευση του ενεργού κέντρου του αντισώματος στον καθοριστή αντιγόνου. Μετά έρχεται μη ειδική φάση -πιο αργή, η οποία εκδηλώνεται με ορατά φυσικά φαινόμενα, για παράδειγμα σχηματισμό κροκίδων (φαινόμενο συγκόλλησης) ή ίζημα με τη μορφή θολότητας. Αυτή η φάση απαιτεί την παρουσία ορισμένων συνθηκών (ηλεκτρολύτες, βέλτιστο pH του περιβάλλοντος).
Η δέσμευση ενός προσδιοριστή αντιγόνου (επιτόπου) στην ενεργό θέση ενός θραύσματος αντισώματος Fab οφείλεται σε δυνάμεις van der Waals, δεσμούς υδρογόνου και υδρόφοβες αλληλεπιδράσεις. Η ισχύς και η ποσότητα του αντιγόνου που δεσμεύεται από τα αντισώματα εξαρτώνται από τη συγγένεια, την απληστία των αντισωμάτων και το σθένος τους.
Στην ερώτηση σχετικά με τα express διαγνωστικά:
1. Μπορεί να διαγνωστεί μια καλλιέργεια που απομονώνεται στην καθαρή της μορφή. 2. Σε ειδικά εξοπλισμένα εργαστήρια (πρέπει να υπάρχει άδεια) 3. Τήρηση αυστηρών κανόνων όπως: απομονωμένος χώρος, απαιτούμενες ειδικές προστατευτικές στολές, υποχρεωτική πλήρης απολύμανση του δωματίου μετά την εργασία με το παθογόνο, απολύμανση ερευνητών μετά την ολοκλήρωση της εργασίας. Μέθοδοι διάγνωσης ειδικών. 1. Βακτηριολογία - συνδυασμένα πολυτροπικά θρεπτικά μέσα για γρήγορη μελέτη μορφών, βαφής, βιοχημικών. ιδιότητες. Χρήση ενζυμικής ενδεικτικής ταινίας, ηλεκτροφυσική μέθοδος, μέθοδος χάρτινων δίσκων εμποτισμένων σε διάφορες ουσίες (γλυκόζη, λακτόζη κ.λπ.) 2. Διαγνωστικά φάγων. 3. Οροδιάγνωση - Μέθοδος Mancini, καθίζηση σε γέλη κατά Ascoli, RA, RPGA. 4. Βακτηριοσκόπηση - άμεση και έμμεση RIF. Εξπρές διαγνωστικές μέθοδοι για: Χολέρα - M.Z. Ermolyeva, σταθμός ακινητοποίησης με διαγνωστικό ορό χολέρας, RIF. Τουλαραιμία - RA σε γυαλί, RPGA Chume - τυποποίηση φάγου, μέθοδος χάρτινου δίσκου υδατανθράκων, RPGA. Έλκος κόλπων - Μέθοδος Ascoli, RIF, RPGA. Μοτίβο ανάπτυξης: υπάρχουν τρία από αυτά: διάχυτα (προαιρετικά αναερόβια), κάτω (υποχρεωτικά αναερόβια) και επιφάνεια (υποχρεωτικά αερόβια.)
Απομόνωση καθαρής καλλιέργειας αναερόβιων βακτηρίων
Στην εργαστηριακή πρακτική, θα πρέπει συχνά να εργαστείτε με αναερόβιους μικροοργανισμούς. Είναι πιο απαιτητικά για θρεπτικά μέσα από τα αερόβια, απαιτούν συχνότερα ειδικά πρόσθετα ανάπτυξης, απαιτούν τη διακοπή της πρόσβασης σε οξυγόνο κατά την καλλιέργειά τους και η διάρκεια ανάπτυξής τους είναι μεγαλύτερη. Επομένως, η εργασία μαζί τους είναι πιο περίπλοκη και απαιτεί σημαντική προσοχή από βακτηριολόγους και τεχνικούς εργαστηρίου.
Είναι σημαντικό να προστατεύεται το υλικό που περιέχει αναερόβια παθογόνα από τις τοξικές επιδράσεις του ατμοσφαιρικού οξυγόνου. Επομένως, συνιστάται η λήψη υλικού από εστίες πυώδους μόλυνσης κατά τη διάρκεια της παρακέντησης με χρήση σύριγγας· ο χρόνος μεταξύ της λήψης του υλικού και του εμβολιασμού του σε θρεπτικό μέσο πρέπει να είναι όσο το δυνατόν μικρότερος.
Δεδομένου ότι χρησιμοποιούνται ειδικά θρεπτικά μέσα για την καλλιέργεια αναερόβιων βακτηρίων, τα οποία δεν πρέπει να περιέχουν οξυγόνο και έχουν χαμηλό δυναμικό οξειδοαναγωγής (-20 -150 mV), προστίθενται δείκτες στη σύνθεσή τους - ρεσαζουρίνη, μπλε του μεθυλενίου κ.λπ., που αντιδρούν σε μια αλλαγή σε αυτό το δυναμικό. Καθώς μεγαλώνει, οι άχρωμες μορφές των δεικτών αποκαθίστανται και αλλάζουν το χρώμα τους: η ρεσαζουρίνη μετατρέπει το μεσαίο ροζ και το μπλε του μεθυλενίου το μεσαίο μπλε. Τέτοιες αλλαγές υποδηλώνουν την αδυναμία χρήσης μέσων για την καλλιέργεια αναερόβιων μικροβίων.
Η εισαγωγή τουλάχιστον 0,05% άγαρ στο μέσο συμβάλλει στη μείωση του δυναμικού οξειδοαναγωγής, το οποίο, αυξάνοντας το ιξώδες του, βοηθά στη μείωση της παροχής οξυγόνου. Αυτό, με τη σειρά του, επιτυγχάνεται επίσης με τη χρήση φρέσκων (το αργότερο δύο ώρες μετά την παραγωγή) και μειωμένων θρεπτικών μέσων.
Θα πρέπει να ληφθεί υπόψη ότι λόγω των ιδιαιτεροτήτων του ζυμωτικού τύπου μεταβολισμού των αναερόβιων βακτηρίων απαιτούν περιβάλλοντα πλουσιότερα σε θρεπτικά συστατικά και βιταμίνες. Τα πιο συχνά χρησιμοποιούμενα είναι εγχύματα καρδιάς-εγκεφάλου και συκωτιού, εκχυλίσματα σόγιας και ζύμης, υδρολυτική πέψη καζεΐνης, πεπτόνη, τρυπτόνη. Είναι υποχρεωτική η προσθήκη αυξητικών παραγόντων όπως Tween-80, αιμίνη, μεναδιόνη, πλήρες ή αιμολυμένο αίμα.
Η απομόνωση μιας καθαρής καλλιέργειας αερόβιων μικροοργανισμών αποτελείται από διάφορα στάδια. Την πρώτη ημέρα (στάδιο 1 της μελέτης), το παθολογικό υλικό εισάγεται σε αποστειρωμένο δοχείο (δοκιμαστικός σωλήνας, φιάλη, φιάλη). Μελετάται για την εμφάνιση, τη συνοχή, το χρώμα, την οσμή και άλλα χαρακτηριστικά του, παρασκευάζεται επίχρισμα, βάφεται και εξετάζεται σε μικροσκόπιο. Σε ορισμένες περιπτώσεις (οξεία γονόρροια, πανώλη), σε αυτό το στάδιο είναι δυνατό να γίνει προηγούμενη διάγνωση και επιπλέον να επιλέξετε τα μέσα στα οποία θα εμβολιαστεί το υλικό. Η κατάληψη πραγματοποιείται με βακτηριολογικό βρόχο (που χρησιμοποιείται πιο συχνά), χρησιμοποιώντας σπάτουλα με τη μέθοδο Drigalsky και μπατονέτα από βαμβάκι-γάζα. Τα κύπελλα κλείνονται, αναποδογυρίζονται, υπογράφονται με ειδικό μολύβι και τοποθετούνται σε θερμοστάτη στη βέλτιστη θερμοκρασία (37 ° C) για 18-48 χρόνια. Ο σκοπός αυτού του σταδίου είναι να ληφθούν απομονωμένες αποικίες μικροοργανισμών. Ωστόσο, μερικές φορές, για να συσσωρευτεί υλικό, σπέρνεται σε υγρά θρεπτικά μέσα.
Παρασκευάζονται επιχρίσματα από ύποπτες αποικίες, που χρωματίζονται με τη μέθοδο Gram για τη μελέτη των μορφολογικών και χρωματικών ιδιοτήτων των παθογόνων και εξετάζονται κινητά βακτήρια σε μια «κρεμασμένη» ή «θρυμματισμένη» σταγόνα. Αυτά τα σημάδια έχουν εξαιρετικά μεγάλη διαγνωστική αξία όταν χαρακτηρίζονται ορισμένοι τύποι μικροοργανισμών. Τα υπολείμματα των υπό μελέτη αποικιών αφαιρούνται προσεκτικά από την επιφάνεια του μέσου χωρίς να αγγίξουν άλλα και εμβολιάζονται σε κεκλιμένες πλευρές άγαρ ή σε τομείς ενός τρυβλίου Petri με θρεπτικό μέσο για να ληφθεί μια καθαρή καλλιέργεια. Οι δοκιμαστικοί σωλήνες ή τα πιάτα με καλλιέργειες τοποθετούνται σε θερμοστάτη στη βέλτιστη θερμοκρασία για 18-24 ώρες.
Τα βακτήρια μπορούν επίσης να αναπτυχθούν διαφορετικά σε υγρά θρεπτικά μέσα, αν και τα χαρακτηριστικά των εκδηλώσεων ανάπτυξης είναι φτωχότερα από ότι στα στερεά μέσα.
Τα βακτήρια είναι ικανά να προκαλέσουν διάχυτη θολότητα του μέσου, το χρώμα του μπορεί να μην αλλάξει ή να αποκτήσει το χρώμα μιας χρωστικής. Αυτό το μοτίβο ανάπτυξης παρατηρείται συχνότερα στους περισσότερους προαιρετικούς αναερόβιους μικροοργανισμούς.
Μερικές φορές σχηματίζεται ένα ίζημα στον πυθμένα του δοκιμαστικού σωλήνα. Μπορεί να είναι εύθρυπτο, ομοιογενές, παχύρρευστο, βλεννώδες κ.λπ. Το μέσο από πάνω του μπορεί να παραμείνει διαφανές ή να γίνει θολό. Εάν τα μικρόβια δεν σχηματίζουν χρωστική ουσία, το ίζημα έχει μπλε-μπλε ή κιτρινωπό χρώμα. Κατά κανόνα, τα αναερόβια βακτήρια αναπτύσσονται με παρόμοιο τρόπο.
Η βρεγματική ανάπτυξη εκδηλώνεται με το σχηματισμό νιφάδων και κόκκων που συνδέονται στα εσωτερικά τοιχώματα του δοκιμαστικού σωλήνα. Το μέσο παραμένει διαφανές.
Τα αερόβια βακτήρια τείνουν να αναπτύσσονται επιφανειακά. Μια λεπτή, άχρωμη ή μπλε μεμβράνη σχηματίζεται συχνά με τη μορφή μιας ελάχιστα αισθητής επίστρωσης στην επιφάνεια, η οποία εξαφανίζεται όταν το μέσο ανακινείται ή ανακινείται. Η μεμβράνη μπορεί να είναι υγρή, παχιά, να έχει κολλώδη, γλοιώδη υφή και να κολλάει στη θηλιά, τραβώντας πίσω της. Ωστόσο, υπάρχει επίσης ένα πυκνό, ξηρό, εύθραυστο φιλμ, το χρώμα του οποίου εξαρτάται από τη χρωστική ουσία που παράγουν οι μικροοργανισμοί.
Εάν είναι απαραίτητο, γίνεται ένα επίχρισμα, χρωματίζεται, εξετάζεται στο μικροσκόπιο και οι μικροοργανισμοί εμβολιάζονται με βρόχο στην επιφάνεια ενός στερεού θρεπτικού μέσου για να ληφθούν απομονωμένες αποικίες.
Την τρίτη ημέρα (στάδιο 3 της μελέτης), μελετάται το πρότυπο ανάπτυξης μιας καθαρής καλλιέργειας μικροοργανισμών και πραγματοποιείται η ταυτοποίησή του.
Αρχικά, δίνουν προσοχή στα χαρακτηριστικά της ανάπτυξης μικροοργανισμών στο μέσο και κάνουν ένα επίχρισμα, βάφοντάς το με τη μέθοδο Gram, προκειμένου να ελέγξουν την καθαρότητα της καλλιέργειας. Εάν παρατηρηθούν βακτήρια ίδιου τύπου μορφολογίας, μεγέθους και ιδιοτήτων βαφής (ικανότητα βαφής) στο μικροσκόπιο, συμπεραίνεται ότι η καλλιέργεια είναι καθαρή. Σε ορισμένες περιπτώσεις, με βάση την εμφάνιση και τα χαρακτηριστικά της ανάπτυξής τους, μπορεί κανείς να βγάλει ένα συμπέρασμα σχετικά με τον τύπο των παθογόνων που απομονώνονται. Ο προσδιορισμός του είδους των βακτηρίων με βάση τα μορφολογικά χαρακτηριστικά τους ονομάζεται μορφολογική ταυτοποίηση. Ο προσδιορισμός του τύπου του παθογόνου με βάση τα πολιτισμικά του χαρακτηριστικά ονομάζεται πολιτισμική ταυτοποίηση.
Ωστόσο, αυτές οι μελέτες δεν επαρκούν για να βγάλουμε ένα τελικό συμπέρασμα σχετικά με τον τύπο των μικροβίων που απομονώνονται. Επομένως, μελετώνται οι βιοχημικές ιδιότητες των βακτηρίων. Είναι αρκετά διαφορετικοί.
Τις περισσότερες φορές, μελετώνται σακχαρολυτικές, πρωτεολυτικές, πεπτολυτικές, αιμολυτικές ιδιότητες, ο σχηματισμός ενζύμων αποκαρβοξυλάσης, οξειδάσης, καταλάσης, πλασμακοαγουλάσης, DNase, ινωδολυσίνης, η αναγωγή νιτρικών σε νιτρώδη και παρόμοια. Για το σκοπό αυτό, υπάρχουν ειδικά θρεπτικά μέσα που ενοφθαλμίζονται με μικροοργανισμούς (διαφοροποιημένη σειρά Hiss, MPB, πηγμένο ορό γάλακτος, γάλα κ.λπ.).
Ο προσδιορισμός του τύπου του παθογόνου με βάση τις βιοχημικές του ιδιότητες ονομάζεται βιοχημική ταυτοποίηση.
ΜΕΘΟΔΟΙ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑΣ ΚΑΙ ΑΠΟΜΟΝΩΣΗΣ ΑΓΝΗΣ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑΣ ΒΑΚΤΗΡΙΩΝ Για επιτυχημένη καλλιέργεια, εκτός από σωστά επιλεγμένα μέσα και σωστά σπαρμένα, απαιτούνται βέλτιστες συνθήκες: θερμοκρασία, υγρασία, αερισμός (παροχή αέρα). Η καλλιέργεια αναερόβιων είναι πιο δύσκολη από τα αερόβια· χρησιμοποιούνται διάφορες μέθοδοι για την απομάκρυνση του αέρα από το θρεπτικό μέσο. Η απομόνωση μεμονωμένων τύπων βακτηρίων (καθαρή καλλιέργεια) από το υλικό δοκιμής, το οποίο συνήθως περιέχει μείγμα διαφόρων μικροοργανισμών, είναι ένα από τα στάδια κάθε βακτηριολογικής μελέτης. Μια καθαρή καλλιέργεια μικροβίων λαμβάνεται από μια απομονωμένη μικροβιακή αποικία. Κατά την απομόνωση μιας καθαρής καλλιέργειας από το αίμα (αιμοκαλλιέργεια), αυτή πρώτα «αναπτύσσεται» σε υγρό μέσο: 10-15 ml στείρα ληφθέντος αίματος εμβολιάζονται σε 100-150 ml υγρού μέσου. Η αναλογία του εμβολιασμένου αίματος προς το θρεπτικό μέσο 1:10 δεν είναι τυχαία - έτσι επιτυγχάνεται η αραίωση του αίματος (το μη αραιωμένο αίμα έχει επιζήμια επίδραση στους μικροοργανισμούς). Στάδια απομόνωσης καθαρής καλλιέργειας βακτηρίων Στάδιο Ι (εγγενές υλικό) Μικροσκόπηση (κατά προσέγγιση ιδέα της μικροχλωρίδας). Σπορά σε στερεά θρεπτικά μέσα (λήψη αποικιών). Στάδιο ΙΙ (απομονωμένες αποικίες) Μελέτη αποικιών (πολιτιστικές ιδιότητες βακτηρίων). Μικροσκοπική μελέτη μικροβίων σε λεκιασμένο επίχρισμα (μορφολογικές ιδιότητες βακτηρίων). Σπορά σε κλίση θρεπτικού άγαρ για να απομονωθεί μια καθαρή καλλιέργεια. Στάδιο III (καθαρή καλλιέργεια) Προσδιορισμός πολιτιστικών, μορφολογικών, βιοχημικών και άλλων ιδιοτήτων για τον προσδιορισμό μιας βακτηριακής καλλιέργειας ΤΑΥΤΟΠΟΙΗΣΗ ΒΑΚΤΗΡΙΩΝ Η αναγνώριση απομονωμένων βακτηριακών καλλιεργειών πραγματοποιείται με τη μελέτη της μορφολογίας των βακτηρίων, των πολιτισμικών, βιοχημικών και άλλων χαρακτηριστικών τους που είναι εγγενή σε κάθε είδος .
Νο. 1 Ορολογικές αντιδράσεις που χρησιμοποιούνται για τη διάγνωση ιογενείς λοιμώξεις.
Οι ανοσολογικές αντιδράσεις χρησιμοποιούνται σε διαγνωστικές και ανοσολογικές μελέτες σε ασθενείς και υγιείς ανθρώπους. Για το σκοπό αυτό χρησιμοποιούν ορολογικές μεθόδους, δηλαδή, μέθοδοι για τη μελέτη αντισωμάτων και αντιγόνων χρησιμοποιώντας αντιδράσεις αντιγόνου-αντισώματος που προσδιορίζονται στον ορό του αίματος και άλλα υγρά, καθώς και στους ιστούς του σώματος.
Η ανίχνευση αντισωμάτων έναντι των παθογόνων αντιγόνων στον ορό αίματος του ασθενούς επιτρέπει τη διάγνωση της νόσου. Χρησιμοποιούνται επίσης ορολογικές μελέτες για τον εντοπισμό μικροβιακών αντιγόνων, διαφόρων βιολογικά ενεργών ουσιών, ομάδων αίματος, αντιγόνων ιστών και όγκων, ανοσοσυμπλεγμάτων, κυτταρικών υποδοχέων κ.λπ.
Όταν απομονώνεται ένα μικρόβιο από έναν ασθενή, το παθογόνο αναγνωρίζεται μελετώντας τις αντιγονικές του ιδιότητες χρησιμοποιώντας ανοσοδιαγνωστικούς ορούς, δηλαδή ορούς αίματος υπερανοσοποιημένων ζώων που περιέχουν ειδικά αντισώματα. Αυτή είναι η λεγόμενη ορολογική ταυτοποίηση μικροοργανισμών.
Στη μικροβιολογία και την ανοσολογία, χρησιμοποιούνται ευρέως η συγκόλληση, η κατακρήμνιση, οι αντιδράσεις εξουδετέρωσης, οι αντιδράσεις που περιλαμβάνουν συμπλήρωμα, χρησιμοποιώντας επισημασμένα αντισώματα και αντιγόνα (ραδιοανοσολογική, ενζυμική ανοσοδοκιμασία, μέθοδοι ανοσοφθορισμού). Οι αντιδράσεις που αναφέρονται διαφέρουν ως προς το καταχωρημένο αποτέλεσμα και την τεχνική παραγωγής, ωστόσο, όλες βασίζονται στην αντίδραση αλληλεπίδρασης ενός αντιγόνου με ένα αντίσωμα και χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση τόσο αντισωμάτων όσο και αντιγόνων. Οι ανοσολογικές αντιδράσεις χαρακτηρίζονται από υψηλή ευαισθησία και ειδικότητα.
Τα χαρακτηριστικά της αλληλεπίδρασης των αντισωμάτων με τα αντιγόνα αποτελούν τη βάση των διαγνωστικών αντιδράσεων στα εργαστήρια. Η in vitro αντίδραση μεταξύ αντιγόνου και αντισώματος αποτελείται από μια ειδική και μη ειδική φάση. Στη συγκεκριμένη φάση, λαμβάνει χώρα ταχεία ειδική δέσμευση του ενεργού κέντρου του αντισώματος στον προσδιοριστή αντιγόνου. Στη συνέχεια έρχεται μια μη ειδική φάση - μια πιο αργή, η οποία εκδηλώνεται με ορατά φυσικά φαινόμενα, για παράδειγμα το σχηματισμό νιφάδων (φαινόμενο συγκόλλησης) ή ιζήματος με τη μορφή θολότητας. Αυτή η φάση απαιτεί την παρουσία ορισμένων συνθηκών (ηλεκτρολύτες, βέλτιστο pH του περιβάλλοντος).
Η δέσμευση του καθοριστή αντιγόνου (επίτοπος) στο ενεργό κέντρο του θραύσματος Fab των αντισωμάτων οφείλεται σε δυνάμεις van der Waals, δεσμούς υδρογόνου και υδρόφοβη αλληλεπίδραση. Η ισχύς και η ποσότητα του αντιγόνου που δεσμεύεται από τα αντισώματα εξαρτώνται από τη συγγένεια, την απληστία των αντισωμάτων και το σθένος τους.
Νο 2 αιτιολογικοί παράγοντες λεϊσμανίασης. Ταξονομία. Χαρακτηριστικά. Μικροβιολογική διάγνωση. Θεραπεία.
Ταξινομία:φυλή Sarcomastigophorae, υποφύλο Mastigophora - μαστίγια, τάξη Zoomastigophora, τάξη Kinetoplastida, γένος Leishmania.
Καλλιέργεια: Θρεπτικό μέσο NNN που περιέχει απινιδωμένο άγαρ αίματος κουνελιού. Η λεϊσμανία αναπτύσσεται επίσης στη χοριακή αλλαντοϊκή μεμβράνη του εμβρύου του κοτόπουλου και σε κυτταροκαλλιέργειες.
Επιδημιολογία: σε θερμά κλίματα. Ο μηχανισμός μετάδοσης των παθογόνων είναι μεταδοτικός, μέσω του τσιμπήματος των κουνουπιοφορέων. Οι κύριες πηγές παθογόνων παραγόντων: για δερματική ανθρωποπονωτική λεϊσμανίαση - άτομα. για δερματική ζωονοσογόνο λεϊσμανίαση - τρωκτικά. για σπλαχνική λεϊσμανίαση - άτομα. για βλεννογονοδερματική λεϊσμανίαση - τρωκτικά, άγρια και οικόσιτα ζώα.
Παθογένεια και κλινική.Υπάρχουν δύο αιτιολογικοί παράγοντες της δερματικής λεϊσμανίασης: L. tropica - ο αιτιολογικός παράγοντας της ανθρωπονοτικής λεϊσμανίασης και L. major - ο αιτιολογικός παράγοντας της ζωονοσογόνου δερματικής λεϊσμανίασης.
Η ανθρωποπονητική δερματική λεϊσμανίαση χαρακτηρίζεται από μακρά περίοδο επώασης αρκετών μηνών. Στο σημείο του τσιμπήματος του κουνουπιού εμφανίζεται ένα φυμάτιο, το οποίο διευρύνεται και εξελκώνεται μετά από 3 μήνες. Τα έλκη εντοπίζονται συχνότερα στο πρόσωπο και τα άνω άκρα, με ουλές μέχρι το τέλος του χρόνου. Η ζωονοσογόνος δερματική λεϊσμανίαση (πρώιμη ελκώδης λεϊσμανίαση, έλκος Pendinsky, αγροτική μορφή) είναι πιο οξεία. Η περίοδος επώασης είναι 2-4 εβδομάδες. Τα έλκη με κλάμα εντοπίζονται συχνότερα στα κάτω άκρα. Η βλεννογονοδερματική λεϊσμανίαση προκαλείται από το σύμπλεγμα Leishmania L. braziliensis. αναπτύσσονται κοκκιωματώδεις και ελκώδεις βλάβες του δέρματος της μύτης, των βλεννογόνων του στόματος και του λάρυγγα. Η ανθραπονωτική σπλαχνική λεϊσμανίαση προκαλείται από το σύμπλεγμα Leishmania L. donovani. Στους ασθενείς επηρεάζεται το ήπαρ, ο σπλήνας, οι λεμφαδένες, ο μυελός των οστών και η πεπτική οδός.
Ασυλία, ανοσία:επίμονη δια βίου
Σε επιχρίσματα (από φυματισμούς, περιεχόμενο ελκών, στίγματα από όργανα), βαμμένα σύμφωνα με τον Romanovsky-Giemsa, εντοπίζεται ενδοκυτταρικά μικρή λεϊσμανία ωοειδούς σχήματος (μαστιγώτες). Για να απομονωθεί μια καθαρή καλλιέργεια του παθογόνου, ενοφθαλμίστε σε μέσο NNN: επώαση για 3 εβδομάδες. Οι ορολογικές μέθοδοι δεν είναι αρκετά συγκεκριμένες. Είναι δυνατή η χρήση RIF, ELISA.
Το τεστ δερματικής αλλεργίας για HRT στη λεϊσμανίνη χρησιμοποιείται σε επιδημιολογικές μελέτες λεϊσμανίασης.
Θεραπεία:Για τη σπλαχνική λεϊσμανίαση χρησιμοποιούνται σκευάσματα αντιμονίου και διαμιδίνης (πενταμιδίνη). Για δερματική λεϊσμανίαση - κινακρίνη, αμφοτερικίνη.
Πρόληψη:καταστρέφουν άρρωστα ζώα, καταπολεμούν τα τρωκτικά και τα κουνούπια. Η ανοσοπροφύλαξη της δερματικής λεϊσμανίασης πραγματοποιείται με εμβολιασμό ζωντανής καλλιέργειας L. major.
ΕΙΣΙΤΗΡΙΟ Νο 28
Αρ. 1Ανοσοσφαιρίνες, δομή και λειτουργίες.
Η φύση των ανοσοσφαιρινών. Ως απόκριση στην εισαγωγή ενός αντιγόνου, το ανοσοποιητικό σύστημα παράγει αντισώματα - πρωτεΐνες που μπορούν να συνδεθούν ειδικά με το αντιγόνο που προκάλεσε το σχηματισμό τους και έτσι να συμμετέχουν σε ανοσολογικές αντιδράσεις. Τα αντισώματα αναφέρονται σε β-σφαιρίνες, δηλ., το λιγότερο κινητό κλάσμα των πρωτεϊνών του ορού του αίματος στο ηλεκτρικό πεδίο. Στο σώμα, οι β-σφαιρίνες παράγονται από ειδικά κύτταρα - κύτταρα πλάσματος. Οι β-σφαιρίνες που φέρουν τις λειτουργίες των αντισωμάτων ονομάζονται ανοσοσφαιρίνες και ονομάζονται με το σύμβολο Ig. Επομένως, τα αντισώματα είναι ανοσοσφαιρίνες που παράγονται ως απόκριση στην εισαγωγή ενός αντιγόνου και ικανές να αλληλεπιδρούν ειδικά με το ίδιο αντιγόνο.
Λειτουργίες. Η κύρια λειτουργία είναι η αλληλεπίδραση των ενεργών κέντρων τους με τους συμπληρωματικούς αντιγονικούς καθοριστές τους. Η δευτερεύουσα λειτουργία είναι η ικανότητά τους να:
Δεσμεύστε ένα αντιγόνο για να το εξουδετερώσετε και να το αποβάλλετε από το σώμα, δηλ. να λάβετε μέρος στο σχηματισμό προστασίας έναντι του αντιγόνου.
Συμμετοχή στην αναγνώριση «ξένου» αντιγόνου.
Διασφάλιση της συνεργασίας των ανοσοεπαρκών κυττάρων (μακροφάγα, Τ- και Β-λεμφοκύτταρα).
Συμμετέχουν σε διάφορες μορφές ανοσοαπόκρισης (φαγοκυττάρωση, φονική λειτουργία, HNT, HRT, ανοσολογική ανοχή, ανοσολογική μνήμη).
Δομή αντισωμάτων. Όσον αφορά τη χημική τους σύνθεση, οι πρωτεΐνες ανοσοσφαιρίνης ταξινομούνται ως γλυκοπρωτεΐνες, καθώς αποτελούνται από πρωτεΐνη και σάκχαρα. κατασκευασμένο από 18 αμινοξέα. Έχουν διαφορές ειδών που σχετίζονται κυρίως με το σύνολο των αμινοξέων. Τα μόριά τους έχουν κυλινδρικό σχήμα και είναι ορατά σε ηλεκτρονικό μικροσκόπιο. Έως και το 80% των ανοσοσφαιρινών έχουν σταθερά καθίζησης 7S. ανθεκτικό σε αδύναμα οξέα, αλκάλια, θέρμανση έως 60 ° C. Οι ανοσοσφαιρίνες μπορούν να απομονωθούν από τον ορό του αίματος χρησιμοποιώντας φυσικές και χημικές μεθόδους (ηλεκτροφόρηση, ισοηλεκτρική καθίζηση με αλκοόλη και οξέα, εξάλειψη, χρωματογραφία συγγένειας, κ.λπ.). Αυτές οι μέθοδοι χρησιμοποιούνται στην παραγωγή για την παρασκευή ανοσοβιολογικών παρασκευασμάτων.
Οι ανοσοσφαιρίνες ανάλογα με τη δομή, τις αντιγονικές και ανοσοβιολογικές τους ιδιότητες χωρίζονται σε πέντε κατηγορίες: IgM, IgG, IgA, IgE, IgD. Οι ανοσοσφαιρίνες M, G, A έχουν υποκατηγορίες. Για παράδειγμα, το IgG έχει τέσσερις υποκατηγορίες (IgG, IgG 2, IgG 3, IgG 4). Όλες οι κατηγορίες και οι υποκατηγορίες διαφέρουν ως προς την αλληλουχία αμινοξέων.
Τα μόρια των ανοσοσφαιρινών και των πέντε τάξεων αποτελούνται από πολυπεπτιδικές αλυσίδες: δύο πανομοιότυπες βαριές αλυσίδες Η και δύο ίδιες ελαφριές αλυσίδες L, διασυνδεδεμένες με δισουλφιδικές γέφυρες. Συνεπώς, κάθε κατηγορία ανοσοσφαιρινών, δηλ. M, G, A, E, D, υπάρχουν πέντε τύποι βαριών αλυσίδων: ? (μου), ? (γάμα), ? (άλφα), ? (έψιλον) και; (δέλτα), που διαφέρει ως προς την αντιγονικότητα. Οι ελαφριές αλυσίδες και των πέντε κατηγοριών είναι κοινές και διατίθενται σε δύο τύπους: ? (κάπα) και; (λάμδα); Οι L-αλυσίδες ανοσοσφαιρινών διαφόρων τάξεων μπορούν να συνδυαστούν (ανασυνδυαστούν) τόσο με ομόλογες όσο και με ετερόλογες αλυσίδες Η. Ωστόσο, στο ίδιο μόριο μπορεί να υπάρχουν μόνο πανομοιότυπες αλυσίδες L (; ή;). Και οι δύο αλυσίδες H και L έχουν μια μεταβλητή - V περιοχή, στην οποία η αλληλουχία των αμινοξέων δεν είναι σταθερή, και μια σταθερή - C περιοχή με ένα σταθερό σύνολο αμινοξέων. Σε ελαφριές και βαριές αλυσίδες διακρίνονται οι τερματικές ομάδες NH 2 - και COOH.
Κατά την επεξεργασία; -η σφαιρίνη με μερκαπτοαιθανόλη διασπά τους δισουλφιδικούς δεσμούς και το μόριο της ανοσοσφαιρίνης διασπάται σε ξεχωριστές αλυσίδες πολυπεπτιδίων. Όταν εκτίθεται στο πρωτεολυτικό ένζυμο παπαΐνη, η ανοσοσφαιρίνη χωρίζεται σε τρία θραύσματα: δύο μη κρυσταλλοποιούμενα θραύσματα που περιέχουν καθοριστικές ομάδες για το αντιγόνο και ονομάζονται θραύσματα Fab I και II και ένα κρυσταλλοποιητικό θραύσμα Fc. Τα θραύσματα FabI και FabII είναι παρόμοια σε ιδιότητες και σύνθεση αμινοξέων και διαφέρουν από το θραύσμα Fc. Τα θραύσματα Fab και Fc είναι συμπαγείς σχηματισμοί που συνδέονται μεταξύ τους με εύκαμπτα τμήματα της αλυσίδας Η, λόγω των οποίων τα μόρια ανοσοσφαιρίνης έχουν εύκαμπτη δομή.
Και οι δύο αλυσίδες H και οι αλυσίδες L έχουν διακριτές, γραμμικά συνδεδεμένες συμπαγείς περιοχές που ονομάζονται τομείς. υπάρχουν 4 από αυτά στην αλυσίδα H και 2 στην αλυσίδα L.
Τα ενεργά κέντρα, ή οι καθοριστικοί παράγοντες, που σχηματίζονται στις περιοχές V καταλαμβάνουν περίπου το 2% της επιφάνειας του μορίου της ανοσοσφαιρίνης. Κάθε μόριο περιέχει δύο καθοριστικούς παράγοντες που σχετίζονται με τις υπερμεταβλητές περιοχές των αλυσίδων Η και L, δηλαδή, κάθε μόριο ανοσοσφαιρίνης μπορεί να δεσμεύσει δύο μόρια αντιγόνου. Επομένως, τα αντισώματα είναι δισθενή.
Η τυπική δομή ενός μορίου ανοσοσφαιρίνης είναι η IgG. Οι υπόλοιπες κατηγορίες ανοσοσφαιρινών διαφέρουν από την IgG από πρόσθετα στοιχεία της οργάνωσης των μορίων τους.
Σε απόκριση στην εισαγωγή οποιουδήποτε αντιγόνου, μπορούν να παραχθούν αντισώματα και των πέντε τάξεων. Συνήθως παράγεται πρώτα το IgM, μετά το IgG και το υπόλοιπο λίγο αργότερα.
Νο. 2 Ο αιτιολογικός παράγοντας των χλαμυδίων. Ταξονομία. Χαρακτηριστικά. Μικροβιολογική διάγνωση. Θεραπεία.
Ταξινομία:τάξη Chlamydiales, οικογένεια Chlamydaceae, γένος Chlamydia. Το γένος αντιπροσωπεύεται από τα είδη C.trachomatis, C.psittaci, C.pneumoniae.
Οι ασθένειες που προκαλούνται από χλαμύδια ονομάζονται χλαμύδια. Οι ασθένειες που προκαλούνται από το C. trachomatis και το C. pneumoniae είναι ανθρωποπονήσεις. Η ορνίθωση, που προκαλείται από το C. psittaci, είναι μια ζωονοσογόνος λοίμωξη.
Μορφολογία χλαμυδίων: μικρό, γραμμάριο «-» βακτήρια, σφαιρικού σχήματος. Δεν σχηματίζουν σπόρια, δεν υπάρχουν μαστίγια ή κάψουλες. Κυτταρικό τοίχωμα: Μεμβράνη 2 στρώσεων. Έχουν γλυκολιπίδια. Σύμφωνα με το Gram - κόκκινο. Η κύρια μέθοδος χρώσης είναι η Romanovsky-Giemsa.
2 μορφές ύπαρξης: στοιχειώδη σώματα (ανενεργά μολυσματικά σωματίδια, έξω από το κύτταρο). δικτυωτά σώματα (εσωτερικά κύτταρα, βλαστική μορφή).
Καλλιέργεια:Μπορεί να πολλαπλασιαστεί μόνο σε ζωντανά κύτταρα. Στον σάκο κρόκου των αναπτυσσόμενων εμβρύων κοτόπουλου, στο σώμα των ευαίσθητων ζώων και στην κυτταροκαλλιέργεια
Ενζυμική δραστηριότητα: μικρό. Ζυμώνουν το πυροσταφυλικό οξύ και συνθέτουν λιπίδια. Δεν είναι σε θέση να συνθέσουν ενώσεις υψηλής ενέργειας.
Αντιγονική δομή: Αντιγόνα τριών τύπων: ειδικός για το γένος θερμοσταθερός λιποπολυσακχαρίτης (στο κυτταρικό τοίχωμα). Εντοπίστηκε με χρήση RSC. ειδικό για είδος αντιγόνο πρωτεϊνικής φύσης (στην εξωτερική μεμβράνη). Εντοπίστηκε με χρήση RIF. ειδικό για παραλλαγή αντιγόνο πρωτεϊνικής φύσης.
Παράγοντες παθογένειας.Οι πρωτεΐνες της εξωτερικής μεμβράνης των χλαμυδίων συνδέονται με τις συγκολλητικές τους ιδιότητες. Αυτές οι προσκολλητίνες βρίσκονται μόνο σε στοιχειώδη σώματα. Τα χλαμύδια παράγουν ενδοτοξίνη. Ορισμένα χλαμύδια έχουν μια πρωτεΐνη θερμικού σοκ που μπορεί να προκαλέσει αυτοάνοσες αντιδράσεις.
Αντίσταση. Υψηλό σε διάφορους περιβαλλοντικούς παράγοντες. Ανθεκτικό σε χαμηλές θερμοκρασίες και στέγνωμα. Ευαίσθητο στη θερμότητα.
Το C. trachomatis είναι ένας αιτιολογικός παράγοντας ασθενειών του ουροποιογεννητικού συστήματος του ανθρώπου, των ματιών και της αναπνευστικής οδού.
Το τράχωμα είναι μια χρόνια μολυσματική ασθένεια που χαρακτηρίζεται από βλάβη στον επιπεφυκότα και τον κερατοειδή χιτώνα των ματιών. Ανθρωποπονία. Μεταδίδεται μέσω της επαφής και της οικιακής επαφής.
Παθογένεση:επηρεάζει τη βλεννογόνο μεμβράνη των ματιών. Διεισδύει στο επιθήλιο του επιπεφυκότα και του κερατοειδούς, όπου πολλαπλασιάζεται, καταστρέφοντας κύτταρα. Αναπτύσσεται ωοθυλακική κερατοεπιπεφυκίτιδα.
Διαγνωστικά:εξέταση απόξεσης από τον επιπεφυκότα. Στα προσβεβλημένα κύτταρα, η χρώση Romanovsky-Giemsa αποκαλύπτει ιώδη κυτταροπλασματικά εγκλείσματα που βρίσκονται κοντά στον πυρήνα - το σώμα Provacek. Για την ανίχνευση ειδικού χλαμυδιακού αντιγόνου σε προσβεβλημένα κύτταρα, χρησιμοποιούνται επίσης RIF και ELISA. Μερικές φορές καταφεύγουν στην καλλιέργεια χλαμυδίων τραχώματος σε έμβρυα κοτόπουλου ή κυτταροκαλλιέργεια.
Θεραπεία:αντιβιοτικά (τετρακυκλίνη) και ανοσοδιεγερτικά (ιντερφερόνη).
Πρόληψη:Μη συγκεκριμένο.
Τα ουρογεννητικά χλαμύδια είναι μια σεξουαλικά μεταδιδόμενη ασθένεια. Πρόκειται για μια οξεία/χρόνια λοιμώδη νόσο, η οποία χαρακτηρίζεται από πρωτογενή βλάβη στο ουρογεννητικό σύστημα.
Η ανθρώπινη μόλυνση εμφανίζεται μέσω των βλεννογόνων του γεννητικού συστήματος. Ο κύριος μηχανισμός μόλυνσης είναι η επαφή, η οδός μετάδοσης είναι σεξουαλική.
Ασυλία, ανοσία: κυτταρικό, με τον ορό μολυσμένων ατόμων - ειδικά αντισώματα. Μετά από μια ασθένεια, δεν σχηματίζεται.
Διαγνωστικά: Για τις οφθαλμικές παθήσεις χρησιμοποιείται η βακτηριοσκοπική μέθοδος - εντοπίζονται ενδοκυτταρικά εγκλείσματα σε ξύσεις από το επιθήλιο του επιπεφυκότα. Για την ανίχνευση του αντιγόνου των χλαμυδίων στα προσβεβλημένα κύτταρα, χρησιμοποιείται το RIF. Σε περίπτωση βλάβης του ουρογεννητικού συστήματος μπορεί να χρησιμοποιηθεί βιολογική μέθοδος, βασισμένη στη μόλυνση της κυτταροκαλλιέργειας με το εξεταζόμενο υλικό (επιθηλιακές ξύσεις από ουρήθρα, κόλπο).
Το RIF και το ELISA μπορούν να ανιχνεύσουν αντιγόνα χλαμυδίων στο υλικό δοκιμής. Ορολογική μέθοδος - για την ανίχνευση IgM έναντι του C. trachomatis στη διάγνωση της πνευμονίας σε νεογνά.
Θεραπεία.αντιβιοτικά (αζιθρομυκίνη από την ομάδα των μακρολιδίων), ανοσοτροποποιητές, ευβιοτικά.
Πρόληψη. Μόνο μη ειδική (θεραπεία ασθενών), προσωπική υγιεινή.
Το αφροδίσιο λεμφοκοκκίωμα είναι μια σεξουαλικά μεταδιδόμενη ασθένεια που χαρακτηρίζεται από βλάβη στα γεννητικά όργανα και στους περιφερειακούς λεμφαδένες. Ο μηχανισμός μόλυνσης είναι η επαφή, η οδός μετάδοσης είναι σεξουαλική.
Ασυλία, ανοσία:επίμονη, κυτταρική και χυμική ανοσία.
Διαγνωστικά:Υλικό για έρευνα - πύον, βιοψία από προσβεβλημένους λεμφαδένες, ορός αίματος. Βακτηριοσκοπική μέθοδος, βιολογική (καλλιέργεια στον σάκο κρόκου εμβρύου κοτόπουλου), ορολογική (το RSC με ζευγαρωμένους ορούς είναι θετικό) και αλλεργιολογική (ενδοδερμική εξέταση με αλλεργιογόνο χλαμύδια).
Θεραπεία. Αντιβιοτικά - μακρολίδες και τετρακυκλίνες.
Πρόληψη: Μη συγκεκριμένο.
Το C. pneumoniae είναι ο αιτιολογικός παράγοντας των αναπνευστικών χλαμυδίων, που προκαλεί οξεία και χρόνια βρογχίτιδα και πνευμονία. Ανθρωποπονία. Η μόλυνση γίνεται με αερομεταφερόμενα σταγονίδια. Εισέρχονται στους πνεύμονες μέσω της ανώτερης αναπνευστικής οδού. Προκαλέστε φλεγμονή.
Διαγνωστικά:σταδιοποίηση RSC για την ανίχνευση ειδικών αντισωμάτων (ορολογική μέθοδος). Κατά την πρωτογενή μόλυνση, λαμβάνεται υπόψη η ανίχνευση IgM. Το RIF χρησιμοποιείται επίσης για την ανίχνευση χλαμυδιακού αντιγόνου και PCR.
Θεραπεία:Αυτό γίνεται με τη χρήση αντιβιοτικών (τετρακυκλίνες και μακρολίδες).
Πρόληψη: Μη συγκεκριμένο.
Ο S. psittaci είναι ο αιτιολογικός παράγοντας της ορνίθωσης, μιας οξείας λοιμώδους νόσου που χαρακτηρίζεται από βλάβη στους πνεύμονες, το νευρικό σύστημα και τα παρεγχυματικά όργανα (ήπαρ, σπλήνα) και δηλητηρίαση.
Ζωοανθρωπονωση. Πηγές μόλυνσης είναι τα πουλιά. Ο μηχανισμός μόλυνσης είναι αερογενής, η οδός μετάδοσης είναι αερομεταφερόμενη. Ο αιτιολογικός παράγοντας είναι μέσω της βλέννας. τα κοχύλια αναπνέουν. μονοπάτια, στο επιθήλιο των βρόγχων, κυψελίδες, πολλαπλασιάζεται, φλεγμονή.
Διαγνωστικά:Υλικό για έρευνα - αίμα, πτύελα ασθενούς, ορός αίματος για ορολογική έρευνα.
Χρησιμοποιείται μια βιολογική μέθοδος - καλλιέργεια χλαμυδίων στον σάκο κρόκου ενός εμβρύου κοτόπουλου, σε κυτταροκαλλιέργεια. Ορολογική μέθοδος. Τα RSK, RPGA, ELISA χρησιμοποιούνται χρησιμοποιώντας ζευγαρωμένους ορούς αίματος ασθενών. Ενδοδερμικό αλλεργικό τεστ με ορνιθίνη.
Θεραπεία: αντιβιοτικά (τετρακυκλίνες, μακρολίδες).
ΕΙΣΙΤΗΡΙΟ #29
Νο. 1 Ο αιτιολογικός παράγοντας της διφθερίτιδας. Ταξινόμηση και χαρακτηριστικά. Υπό όρους παθογόνα κορυνοβακτήρια. Μικροβιολογική διάγνωση. Ανίχνευση ανοξικής ανοσίας. Ειδική πρόληψη και θεραπεία.
Η διφθερίτιδα είναι μια οξεία μολυσματική ασθένεια που χαρακτηρίζεται από ινώδη φλεγμονή στον φάρυγγα, τον λάρυγγα και σπανιότερα σε άλλα όργανα και συμπτώματα δηλητηρίασης. Ο αιτιολογικός παράγοντας του είναι το Corynebacterium diphtheriae.
Ταξονομία.Το Corynebacterium ανήκει στην κατηγορία Firmicutes, γένος Corynebacterium.
Μορφολογικές και χρωστικές ιδιότητες.Ο αιτιολογικός παράγοντας της διφθερίτιδας χαρακτηρίζεται από πολυμορφισμό: λεπτές, ελαφρώς κυρτές ράβδους (οι πιο συνηθισμένες) και κοκκοειδείς και διακλαδιζόμενες μορφές. Τα βακτήρια βρίσκονται συχνά σε γωνία μεταξύ τους. Δεν σχηματίζουν σπόρια, δεν έχουν μαστίγια και πολλά στελέχη έχουν μικροκάψουλα. Χαρακτηριστικό γνώρισμα είναι η παρουσία κόκκων βολουτίνης στα άκρα του ραβδιού (προκαλώντας σχήμα σε σχήμα ρόμπας). Ο αιτιολογικός παράγοντας της διφθερίτιδας κηλιδώνεται θετικός σε Gram.
Πολιτιστικές ιδιότητες.Προαιρετικό αναερόβιο, βέλτιστο. θερμοκρασία. Το μικρόβιο αναπτύσσεται σε ειδικά θρεπτικά μέσα, για παράδειγμα, στο μέσο του Clauberg (αγαρικό τελλουρίτη αίματος), στο οποίο ο βάκιλος της διφθερίτιδας παράγει αποικίες 3 τύπων: α) μεγάλες, γκρι, με ανομοιόμορφες άκρες, ακτινικές ραβδώσεις, που θυμίζουν μαργαρίτες. β) μικρό, μαύρο, κυρτό, με λείες άκρες. γ) παρόμοια με την πρώτη και τη δεύτερη.
Ανάλογα με τις πολιτιστικές και ενζυμικές ιδιότητες, διακρίνονται 3 βιολογικές παραλλαγές του C.diphtheriae: gravis, mitis και intermediate intermedius.
Ενζυμική δραστηριότητα.Υψηλός. Ζυμώνουν τη γλυκόζη και τη μαλτόζη σε σχηματισμό οξέος, αλλά δεν αποσυνθέτουν τη σακχαρόζη, τη λακτόζη και τη μαννιτόλη. Δεν παράγουν ουρεάση και δεν σχηματίζουν ινδόλη. Παράγει το ένζυμο κυστινάση, το οποίο διασπά την κυστεΐνη σε H 2 S. Σχηματίζει καταλάση, ηλεκτρική αφυδρογονάση.
Αντιγονικές ιδιότητες.Τα αντιγόνα Ο είναι θερμοσταθεροί πολυσακχαρίτες που βρίσκονται βαθιά στο κυτταρικό τοίχωμα. Τα αντιγόνα Κ είναι επιφανειακά, θερμοευαίσθητα, γκριζωπά ειδικά. Με τη βοήθεια ορών στο Κ-αντιγόνο C.diph. διαιρείται σε ορόμετρα (58).
Παράγοντες παθογένειας.Μια εξωτοξίνη που διαταράσσει την πρωτεϊνική σύνθεση και ως εκ τούτου επηρεάζει τα κύτταρα του μυοκαρδίου, των επινεφριδίων, των νεφρών και των νευρικών γαγγλίων. Η ικανότητα παραγωγής εξωτοξίνης οφείλεται στην παρουσία στο κύτταρο ενός προφάγου που φέρει το γονίδιο tox που είναι υπεύθυνο για το σχηματισμό της τοξίνης. Ένζυμα επιθετικότητας - υαλουρονιδάση, νευραμινιδάση. Η μικροκάψουλα είναι επίσης παράγοντας παθογένειας.
Αντίσταση.Είναι ανθεκτικό στο στέγνωμα και στις χαμηλές θερμοκρασίες, επομένως μπορεί να παραμείνει σε αντικείμενα ή στο νερό για αρκετές ημέρες.
Επιδημιολογία.Η πηγή της διφθερίτιδας είναι άρρωστα άτομα.Η μόλυνση εμφανίζεται συχνότερα μέσω της αναπνευστικής οδού. Η κύρια οδός μετάδοσης είναι αερομεταφερόμενη· η διαδρομή επαφής είναι επίσης δυνατή - μέσω λευκών ειδών και πιάτων.
Παθογένεση.Οι πύλες εισόδου της μόλυνσης είναι οι βλεννογόνοι του φάρυγγα, η μύτη, η αναπνευστική οδός, τα μάτια, τα γεννητικά όργανα και η επιφάνεια του τραύματος. Στο σημείο της πύλης εισόδου, παρατηρείται ινώδης φλεγμονή, σχηματίζεται ένα χαρακτηριστικό φιλμ, το οποίο είναι δύσκολο να διαχωριστεί από τους υποκείμενους ιστούς. Τα βακτήρια απελευθερώνουν μια εξωτοξίνη που εισέρχεται στην κυκλοφορία του αίματος, προκαλώντας τοξιναιμία. Η τοξίνη επηρεάζει το μυοκάρδιο, τα νεφρά, τα επινεφρίδια και το νευρικό σύστημα.
Κλινική.Υπάρχουν διάφορες μορφές εντοπισμού της διφθερίτιδας: διφθερίτιδα του φάρυγγα, που παρατηρείται στο 85-90% των περιπτώσεων, διφθερίτιδα της μύτης, του λάρυγγα, των ματιών, των εξωτερικών γεννητικών οργάνων, του δέρματος, των πληγών. Η περίοδος επώασης κυμαίνεται από 2 έως 10 ημέρες. Η ασθένεια ξεκινά με αύξηση της θερμοκρασίας του σώματος, πόνο κατά την κατάποση, εμφάνιση μεμβράνης στις αμυγδαλές και διευρυμένους λεμφαδένες. Οίδημα του λάρυγγα, αναπτύσσεται διφθερίτιδα, που μπορεί να οδηγήσει σε ασφυξία και θάνατο. Άλλες σοβαρές επιπλοκές που μπορούν επίσης να προκαλέσουν θάνατο είναι η τοξική μυοκαρδίτιδα και η παράλυση των αναπνευστικών μυών.
Ασυλία, ανοσία.Μετά την ασθένεια - επίμονη, έντονη αντιτοξική ανοσία. Ιδιαίτερη σημασία έχει ο σχηματισμός αντισωμάτων στο θραύσμα Β. Εξουδετερώνουν την ιστοτοξίνη της διφθερίτιδας, εμποδίζοντας την τελευταία να προσκολληθεί στο κύτταρο. Αντιβακτηριακή ανοσία – μη ενισχυμένη, γκρι-ειδική
Μικροβιολογική διάγνωση. Χρησιμοποιώντας ένα στυλεό, λαμβάνεται φιλμ και βλέννα από το λαιμό και τη μύτη του ασθενούς. Για να γίνει μια προκαταρκτική διάγνωση, είναι δυνατή η χρήση της βακτηριοσκοπικής μεθόδου. Η κύρια διαγνωστική μέθοδος είναι βακτηριολογική: καλλιέργεια σε μέσο Klauber II (αγαρ τελλουρίτης αίματος), σε στερεό μέσο ορού για την ανίχνευση της παραγωγής κυστινάσης, σε μέσο Hiss, σε θρεπτικό μέσο για προσδιορισμό της τοξικότητας του παθογόνου. Η ενδοειδική ταυτοποίηση συνίσταται στον προσδιορισμό της βιο- και του οροπαραγωγού. Για την ταχεία ανίχνευση της τοξίνης διφθερίτιδας, χρησιμοποιούνται τα ακόλουθα: IRHA (έμμεση αντίδραση αιμοσυγκόλλησης) με αντίσωμα ερυθροκυττάρων diagnosticum, αντίδραση εξουδετέρωσης αντισωμάτων (η παρουσία της τοξίνης κρίνεται από την επίδραση της πρόληψης της αιμοσυγκόλλησης). RIA (ραδιοάνοσος προσδιορισμός) και ELISA (ενζυμικός ανοσοπροσροφητικός προσδιορισμός).
Θεραπεία.Η κύρια μέθοδος θεραπείας είναι η άμεση χορήγηση ειδικού αντιτοξικού αντιδιφθεριτικού υγρού ορού αλόγου. Ανθρώπινη ανοσοσφαιρίνη κατά της διφθερίτιδας για ενδοφλέβια χορήγηση.
Σχετικά εμβόλια: DPT (απορροφημένο εμβόλιο κοκκύτη-τετάνου), ADS (απορροφημένο τοξοειδές διφθερίτιδας-τετάνου).
Νο 2 Κατηγορίες ανοσοσφαιρινών, τα χαρακτηριστικά τους.
Οι ανοσοσφαιρίνες ανάλογα με τη δομή, τις αντιγονικές και ανοσοβιολογικές τους ιδιότητες χωρίζονται σε πέντε κατηγορίες: IgM, IgG, IgA, IgE, IgD.
Ανοσοσφαιρίνη κατηγορίας G. Ο ισότυπος G αποτελεί το μεγαλύτερο μέρος της Ig στον ορό του αίματος. Αντιπροσωπεύει το 70-80% του συνόλου της Ig ορού, με το 50% να περιέχεται στο υγρό των ιστών. Η μέση περιεκτικότητα IgG στον ορό αίματος ενός υγιούς ενήλικα είναι 12 g/l. Ο χρόνος ημιζωής του IgG είναι 21 ημέρες.
Το IgG είναι μονομερές, έχει 2 κέντρα δέσμευσης αντιγόνου (μπορεί να δεσμεύσει ταυτόχρονα 2 μόρια αντιγόνου, επομένως, το σθένος του είναι 2), μοριακό βάρος περίπου 160 kDa και σταθερά καθίζησης 7S. Υπάρχουν υπότυποι Gl, G2, G3 και G4. Συντίθεται από ώριμα Β λεμφοκύτταρα και πλασματοκύτταρα. Ανιχνεύεται καλά στον ορό του αίματος στην κορυφή της πρωτογενούς και δευτερογενούς ανοσοαπόκρισης.
Έχει υψηλή συγγένεια. Τα IgGl και IgG3 δεσμεύονται με συμπλήρωμα, με το G3 να είναι πιο ενεργό από το Gl. Το IgG4, όπως και το IgE, έχει κυτταροφιλικότητα (τροπισμός ή συγγένεια για τα μαστοκύτταρα και τα βασεόφιλα) και εμπλέκεται στην ανάπτυξη της αλλεργικής αντίδρασης τύπου Ι. Σε ανοσοδιαγνωστικές αντιδράσεις, το IgG μπορεί να εκδηλωθεί ως ατελές αντίσωμα.
Περνάει εύκολα από τον φραγμό του πλακούντα και παρέχει χυμική ανοσία στο νεογέννητο τους πρώτους 3-4 μήνες της ζωής του. Είναι επίσης ικανό να εκκρίνεται στις εκκρίσεις των βλεννογόνων, συμπεριλαμβανομένου του γάλακτος με διάχυση.
Το IgG διασφαλίζει την εξουδετέρωση, την οψωνοποίηση και τη σήμανση του αντιγόνου, ενεργοποιεί την κυτταρόλυση που προκαλείται από το συμπλήρωμα και την κυτταροτοξικότητα που προκαλείται από το αντίσωμα.
Τάξη ανοσοσφαιρίνης Μ. Το μεγαλύτερο μόριο από όλα τα Igs. Αυτό είναι ένα πενταμερές που έχει 10 κέντρα δέσμευσης αντιγόνου, δηλαδή το σθένος του είναι 10. Το μοριακό του βάρος είναι περίπου 900 kDa, η σταθερά καθίζησης είναι 19S. Υπάρχουν υποτύποι Ml και M2. Οι βαριές αλυσίδες του μορίου IgM, σε αντίθεση με άλλους ισότυπους, κατασκευάζονται από 5 τομείς. Ο χρόνος ημιζωής του IgM είναι 5 ημέρες.
Αντιπροσωπεύει περίπου το 5-10% όλων των Igs ορού. Η μέση περιεκτικότητα IgM στον ορό αίματος ενός υγιούς ενήλικα είναι περίπου 1 g/l. Αυτό το επίπεδο στον άνθρωπο επιτυγχάνεται στην ηλικία των 2-4 ετών.
Η IgM είναι φυλογενετικά η αρχαιότερη ανοσοσφαιρίνη. Συντίθεται από πρόδρομες ουσίες και ώριμα Β λεμφοκύτταρα. Σχηματίζεται στην αρχή της πρωτογενούς ανοσοαπόκρισης και είναι επίσης το πρώτο που συντίθεται στο σώμα ενός νεογνού - προσδιορίζεται ήδη στην 20η εβδομάδα της ενδομήτριας ανάπτυξης.
Έχει υψηλή απελπισία και είναι ο πιο αποτελεσματικός ενεργοποιητής συμπληρώματος μέσω της κλασικής οδού. Συμμετέχει στο σχηματισμό ορού και εκκριτικής χυμικής ανοσίας. Όντας ένα μόριο πολυμερούς που περιέχει μια αλυσίδα J, μπορεί να σχηματίσει μια εκκριτική μορφή και να εκκριθεί σε βλεννώδεις εκκρίσεις, συμπεριλαμβανομένου του γάλακτος. Τα περισσότερα φυσιολογικά αντισώματα και ισοσυγκολλητίνες είναι IgM.
Δεν διέρχεται από τον πλακούντα. Η ανίχνευση ειδικών αντισωμάτων του ισοτύπου Μ στον ορό του αίματος ενός νεογνού υποδεικνύει προηγούμενη ενδομήτρια λοίμωξη ή ελάττωμα του πλακούντα.
Το IgM διασφαλίζει την εξουδετέρωση, την οψωνοποίηση και τη σήμανση του αντιγόνου, ενεργοποιεί την κυτταρόλυση που προκαλείται από το συμπλήρωμα και την κυτταροτοξικότητα που προκαλείται από το αντίσωμα.
Ανοσοσφαιρίνη κατηγορίας Α. Υπάρχει σε ορό και εκκριτική μορφή. Περίπου το 60% όλων των IgA περιέχονται στις βλεννογόνες εκκρίσεις.
IgA ορού:Αντιπροσωπεύει περίπου το 10-15% όλων των Igs ορού. Ο ορός αίματος ενός υγιούς ενήλικα περιέχει περίπου 2,5 g/l IgA, το μέγιστο επιτυγχάνεται μέχρι την ηλικία των 10 ετών. Ο χρόνος ημιζωής της IgA είναι 6 ημέρες.
Το IgA είναι ένα μονομερές, έχει 2 κέντρα δέσμευσης αντιγόνου (δηλαδή, 2-σθενή), μοριακό βάρος περίπου 170 kDa και σταθερά καθίζησης 7S. Υπάρχουν υποτύποι Α1 και Α2. Συντίθεται από ώριμα Β λεμφοκύτταρα και πλασματοκύτταρα. Ανιχνεύεται καλά στον ορό του αίματος στην κορυφή της πρωτογενούς και δευτερογενούς ανοσοαπόκρισης.
Έχει υψηλή συγγένεια. Μπορεί να είναι ένα ατελές αντίσωμα. Δεν δεσμεύει συμπλήρωμα. Δεν διέρχεται από τον φραγμό του πλακούντα.
Το IgA εξασφαλίζει εξουδετέρωση, οψωνοποίηση και σήμανση του αντιγόνου και πυροδοτεί κυτταροτοξικότητα που προκαλείται από το αντίσωμα.
Εκκριτική IgA:Σε αντίθεση με τον ορό, το εκκριτικό sIgA υπάρχει σε πολυμερική μορφή με τη μορφή διμερούς ή τριμερούς (4- ή 6-σθενούς) και περιέχει J- και S-πεπτίδια. Μοριακή μάζα 350 kDa και άνω, σταθερά καθίζησης 13S και υψηλότερη.
Συντίθεται από ώριμα Β-λεμφοκύτταρα και τους απογόνους τους - πλασματοκύτταρα αντίστοιχης εξειδίκευσης μόνο εντός των βλεννογόνων και εκκρίνεται στις εκκρίσεις τους. Ο όγκος παραγωγής μπορεί να φτάσει τα 5 g την ημέρα. Η δεξαμενή slgA θεωρείται η πιο πολυάριθμη στο σώμα - η ποσότητα της υπερβαίνει τη συνολική περιεκτικότητα σε IgM και IgG. Δεν ανιχνεύεται στον ορό του αίματος.
Η εκκριτική μορφή της IgA είναι ο κύριος παράγοντας της ειδικής χυμικής τοπικής ανοσίας των βλεννογόνων του γαστρεντερικού συστήματος, του ουρογεννητικού συστήματος και της αναπνευστικής οδού. Χάρη στην αλυσίδα S, είναι ανθεκτικό στις πρωτεάσες. Το slgA δεν ενεργοποιεί το συμπλήρωμα, αλλά συνδέεται αποτελεσματικά με τα αντιγόνα και τα εξουδετερώνει. Αποτρέπει την προσκόλληση μικροβίων στα επιθηλιακά κύτταρα και τη γενίκευση της μόλυνσης εντός των βλεννογόνων.
Ανοσοσφαιρίνη κατηγορίας Ε. Ονομάζεται επίσης reagin. Η περιεκτικότητα στον ορό αίματος είναι εξαιρετικά χαμηλή - περίπου 0,00025 g/l. Η ανίχνευση απαιτεί τη χρήση ειδικών ιδιαίτερα ευαίσθητων διαγνωστικών μεθόδων. Μοριακό βάρος - περίπου 190 kDa, σταθερά καθίζησης - περίπου 8S, μονομερές. Αντιπροσωπεύει περίπου το 0,002% όλων των κυκλοφορούντων Ig. Αυτό το επίπεδο επιτυγχάνεται σε ηλικία 10-15 ετών.
Συντίθεται από ώριμα Β λεμφοκύτταρα και πλασματοκύτταρα κυρίως στον λεμφοειδή ιστό του βρογχοπνευμονικού δέντρου και του γαστρεντερικού σωλήνα.
Δεν δεσμεύει συμπλήρωμα. Δεν διέρχεται από τον φραγμό του πλακούντα. Έχει έντονη κυτταροφιλικότητα - τροπισμό για μαστοκύτταρα και βασεόφιλα. Συμμετέχει στην ανάπτυξη άμεσου τύπου υπερευαισθησίας - αντίδρασης τύπου Ι.
Ανοσοσφαιρίνη κατηγορίας D. Δεν υπάρχουν πολλές πληροφορίες για την Ig αυτού του ισοτύπου. Περιέχεται σχεδόν πλήρως στον ορό του αίματος σε συγκέντρωση περίπου 0,03 g/l (περίπου 0,2% του συνολικού Ig που κυκλοφορεί). Το IgD έχει μοριακό βάρος 160 kDa και σταθερά καθίζησης 7S, μονομερές.
Δεν δεσμεύει συμπλήρωμα. Δεν διέρχεται από τον φραγμό του πλακούντα. Είναι ένας υποδοχέας για πρόδρομες ουσίες Β-λεμφοκυττάρων.
ΕΙΣΙΤΗΡΙΟ Νο 30
Νο. 1 αιτιολογικός παράγοντας αμοιβάδας. Ταξονομία. Χαρακτηριστικό γνώρισμα. Μικροβιολογική διάγνωση. Ειδική θεραπεία.
Ταξινομία:φυλή Sarcomastigophorae, υποφύλο Sarcodina, τάξη Lobosia, τάξη Amoebida.
Μορφολογία:Υπάρχουν δύο στάδια ανάπτυξης του παθογόνου: το βλαστικό και το κυστικό. Το βλαστικό στάδιο έχει διάφορες μορφές: μεγάλο βλαστικό (ιστός), μικρό βλαστικό. προκυστική μορφή, παρόμοια με την αυλική, σχηματίζοντας κύστεις.
Η κύστη (στάδιο ηρεμίας) έχει ωοειδές σχήμα. Μια ώριμη κύστη περιέχει 4 πυρήνες. Η μορφή του αυλού είναι ανενεργή, ζει στον αυλό του άνω τμήματος του παχέος εντέρου ως αβλαβές συστατικό, τρέφεται με βακτήρια και υπολείμματα.
Μια μεγάλη βλαστική μορφή σχηματίζεται, υπό προϋποθέσεις, από μια μικρή βλαστική μορφή. Είναι το μεγαλύτερο, σχηματίζει ψευδοπόδια και έχει κίνηση. Μπορεί να φαγοκυτταρώσει τα ερυθρά αιμοσφαίρια. Βρίσκεται σε φρέσκα κόπρανα κατά τη διάρκεια της αμοιβάδας.
Καλλιέργεια: σε μέσα πλούσια σε θρεπτικά συστατικά.
Αντίσταση:Έξω από το σώμα, οι φυτικές μορφές του παθογόνου πεθαίνουν γρήγορα (μέσα σε 30 λεπτά). Οι κύστεις είναι επίμονες στο περιβάλλον και επιμένουν στα κόπρανα και στο νερό. Σε τρόφιμα, λαχανικά και φρούτα, οι κύστεις επιμένουν για αρκετές ημέρες. Πεθαίνουν όταν βράσουν.
Επιδημιολογία: Η αμεβίαση είναι μια ανθρωπονωτική νόσος. πηγή εισβολής είναι οι άνθρωποι. Ο μηχανισμός μετάδοσης είναι κοπράνων-στοματικό. Η μόλυνση εμφανίζεται όταν οι κύστεις εισάγονται μέσω τροφής, νερού ή οικιακών αντικειμένων.
Παθογένεση και κλινική:Οι κύστεις που εισέρχονται στο έντερο και οι αυλικές μορφές αμοιβάδων που σχηματίζονται στη συνέχεια από αυτές, μπορούν να ζήσουν στο παχύ έντερο χωρίς να προκαλέσουν ασθένεια. Όταν η αντίσταση του σώματος μειώνεται, οι αμοιβάδες διεισδύουν στο τοίχωμα του εντέρου και πολλαπλασιάζονται. Αναπτύσσεται εντερική αμεβίαση.
Τα τροφοζωίδια της ιστικής μορφής είναι κινητά λόγω του σχηματισμού ψευδοπόδων. Διεισδύουν στο τοίχωμα του παχέος εντέρου, προκαλώντας νέκρωση. ικανό να φαγοκυτταρώσει τα ερυθρά αιμοσφαίρια. μπορεί να βρεθεί στα ανθρώπινα κόπρανα. Με νέκρωση, σχηματίζονται έλκη. Κλινικά, η εντερική αμεβίαση εκδηλώνεται με τη μορφή συχνών, χαλαρών, αιματηρών κοπράνων, που συνοδεύονται από πυρετό και αφυδάτωση. Πύον και βλέννα, μερικές φορές με αίμα, βρίσκονται στα κόπρανα.
Οι αμοιβάδες με την κυκλοφορία του αίματος μπορούν να εισέλθουν στο ήπαρ, τους πνεύμονες και τον εγκέφαλο, με αποτέλεσμα την ανάπτυξη εξωεντερικής αμοιβάδας.
Ασυλία, ανοσία:Ασταθής, ενεργοποιείται κυρίως το κυτταρικό συστατικό.
Μικροβιολογική διάγνωση.Η κύρια μέθοδος είναι η μικροσκοπική εξέταση των κοπράνων του ασθενούς, καθώς και του περιεχομένου των αποστημάτων των εσωτερικών οργάνων. Τα επιχρίσματα βάφονται με διάλυμα Lugol ή αιματοξυλίνη. Ορολογικές εξετάσεις (RNGA, ELISA, RSK): ο υψηλότερος τίτλος αντισωμάτων στον ορό του αίματος ανιχνεύεται με εξωεντερική αμεβίαση.
Θεραπεία:Χρησιμοποιούνται μετρονιδαζόλη και φουραμίδη.
Πρόληψη:εντοπισμός και θεραπεία κύστεων εκκρίντων και φορέων αμοιβάδας, με τη λήψη γενικών υγειονομικών μέτρων.
Νο 2 Ιντερφερόνες. Φύση, μέθοδοι παραγωγής. Εφαρμογή.
Οι ιντερφερόνες είναι γλυκοπρωτεΐνες που παράγονται από τα κύτταρα ως απόκριση σε ιογενή μόλυνση και άλλα ερεθίσματα. Μπλοκάρουν την αναπαραγωγή του ιού σε άλλα κύτταρα και συμμετέχουν στην αλληλεπίδραση των κυττάρων του ανοσοποιητικού συστήματος. Υπάρχουν δύο ορολογικές ομάδες ιντερφερονών: τύπου Ι - IFN-? και IFN -?; Τύπος II - IFN-.; Οι ιντερφερόνες τύπου Ι έχουν αντιϊκές και αντικαρκινικές επιδράσεις, ενώ οι ιντερφερόνες τύπου ΙΙ ρυθμίζουν την ειδική ανοσοαπόκριση και τη μη ειδική αντίσταση.
Η ιντερφερόνη (λευκοκύτταρα) παράγεται από λευκά αιμοσφαίρια που έχουν υποστεί επεξεργασία με ιούς και άλλους παράγοντες. Η β-ιντερφερόνη (ινοβλάστες) παράγεται από ινοβλάστες που έχουν υποστεί αγωγή με ιούς.
Η IFN τύπου Ι, δεσμευόμενη σε υγιή κύτταρα, τα προστατεύει από τους ιούς. Η αντιϊκή δράση της IFN τύπου Ι μπορεί επίσης να οφείλεται στο γεγονός ότι είναι σε θέση να αναστέλλει τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό παρεμβαίνοντας στη σύνθεση αμινοξέων.
IFN-? που παράγεται από Τ λεμφοκύτταρα και ΝΚ. Διεγείρει τη δραστηριότητα των Τ- και Β-λεμφοκυττάρων, των μονοκυττάρων/μακροφάγων και των ουδετερόφιλων. Προκαλεί απόπτωση ενεργοποιημένων μακροφάγων, κερατινοκυττάρων, ηπατοκυττάρων, κυττάρων μυελού των οστών, ενδοθηλιακών κυττάρων και καταστέλλει την απόπτωση των περιφερικών μονοκυττάρων και των νευρώνων που έχουν μολυνθεί από έρπητα.
Η γενετικά τροποποιημένη ιντερφερόνη λευκοκυττάρων παράγεται σε προκαρυωτικά συστήματα (Escherichia coli). Βιοτεχνολογία για την παραγωγή ιντερφερόνης λευκοκυττάρωνπεριλαμβάνει τα ακόλουθα βήματα: 1) επεξεργασία της μάζας λευκοκυττάρων με επαγωγείς ιντερφερόνης. 2) απομόνωση ενός μίγματος mRNA από τα επεξεργασμένα κύτταρα. 3) λήψη ολικού συμπληρωματικού DNA χρησιμοποιώντας αντίστροφη μεταγραφάση. 4) εισαγωγή cDNA στο πλασμίδιο Ε. coli και κλωνοποίηση του. 5) επιλογή κλώνων που περιέχουν γονίδια ιντερφερόνης. 6) συμπερίληψη ενός ισχυρού προαγωγέα στο πλασμίδιο για επιτυχή μεταγραφή του γονιδίου. 7) έκφραση γονιδίου ιντερφερόνης, δηλ. σύνθεση της αντίστοιχης πρωτεΐνης· 8) καταστροφή προκαρυωτικών κυττάρων και καθαρισμός ιντερφερόνης με χρήση χρωματογραφίας συγγένειας.
Ιντερφερόνες ισχύουνγια την πρόληψη και τη θεραπεία μιας σειράς ιογενών λοιμώξεων. Η επίδρασή τους καθορίζεται από τη δόση του φαρμάκου, αλλά οι υψηλές δόσεις ιντερφερόνης έχουν τοξική δράση. Οι ιντερφερόνες χρησιμοποιούνται ευρέως για τη γρίπη και άλλες οξείες αναπνευστικές ασθένειες. Το φάρμακο είναι αποτελεσματικό στα αρχικά στάδια της νόσου και εφαρμόζεται τοπικά. Οι ιντερφερόνες έχουν θεραπευτική δράση κατά της ηπατίτιδας Β, του έρπητα, καθώς και κατά των κακοήθων νεοπλασμάτων.
11621 0
Οι ορολογικές αντιδράσεις χαρακτηρίζονται σύμφωνα με τα φαινόμενα που συνοδεύουν το σχηματισμό του συμπλόκου αντιγόνου-αντισώματος κατά την αλληλεπίδραση συστατικών με διαφορετικές ιδιότητες. Υπάρχουν αντιδράσεις συγκόλλησης, καθίζησης και λύσης.
Αντίδραση συγκόλλησης (RA)
Η αντίδραση συγκόλλησης (RA) βασίζεται στη χρήση ενός σωματικού αντιγόνου (εναιώρημα βακτηρίων, ευαισθητοποιημένων ερυθροκυττάρων, σωματιδίων λατέξ, κ.λπ.) που αλληλεπιδρά με συγκεκριμένα αντισώματα, ως αποτέλεσμα του οποίου καθιζάνει το προκύπτον σύμπλεγμα αντιγόνου-αντισώματος. Αυτή η αντίδραση χρησιμοποιείται ευρέως στην εργαστηριακή πρακτική για την ορολογική διάγνωση βακτηριακών λοιμώξεων και για την ταυτοποίηση μεμονωμένων μικροοργανισμών.
Η ΡΑ χρησιμοποιείται για τη διάγνωση πολλών μολυσματικών ασθενειών: βρουκέλλωση (αντίδραση Wright, Heddleson), τουλαραιμία, λεπτοσπείρωση (RAL - αντίδραση συγκόλλησης και λύσης Leptospira), λιστερίωση, τύφος (αντίδραση συγκόλλησης RAR - Rickettsia), σιγκέλλωση, γιερσινίωση, ψευδοφυματίωση κ.λπ.
Έμμεση ή παθητική αντίδραση συγκόλλησης (RIGA ή RPGA).
Για τη σταδιοποίηση αυτής της αντίδρασης, χρησιμοποιούνται ερυθρά αιμοσφαίρια ζώων (πρόβατα, πίθηκοι, ινδικά χοιρίδια, ορισμένα πτηνά) ευαισθητοποιημένα με αντισώματα ή αντιγόνο, τα οποία επιτυγχάνονται με επώαση ενός εναιωρήματος ερυθρών αιμοσφαιρίων και ενός διαλύματος αντιγόνου ή ανοσοποιητικού ορού.
Τα διαγνωστικά που λαμβάνονται με βάση ερυθροκύτταρα ευαισθητοποιημένα με αντιγόνα ονομάζονται διαγνωστικά αντιγόνων ερυθροκυττάρων. Προορίζονται για τον προσδιορισμό αντισωμάτων σε σειριακές αραιώσεις ορών αίματος, για παράδειγμα, shigella diagnosticums ερυθροκυττάρων, salmonella O-diagnosticums ερυθροκυττάρων.
Κατά συνέπεια, ονομάζονται διαγνωστικά που βασίζονται σε ερυθροκύτταρα ευαισθητοποιημένα με συγκεκριμένες ανοσοσφαιρίνες αντισώματα(ανοσοσφαιρίνη) διαγνωστικάκαι χρησιμεύουν για την ανίχνευση αντιγόνων σε διάφορα υλικά, για παράδειγμα, ερυθροκυτταρική ανοσοσφαιρίνη diphtheria diagnosticum για RIGA, που χρησιμοποιείται για την ανίχνευση της εξωτοξίνης διφθερίτιδας των κορυνοβακτηρίων σε ένα υγρό θρεπτικό μέσο όταν εμβολιάζεται υλικό από τη μύτη και τον στοματοφάρυγγα.
Η αντίδραση αιμοσυγκόλλησης χρησιμοποιείται για τη διάγνωση τόσο βακτηριακών (τύφος, παρατυφοειδής πυρετός, δυσεντερία, βρουκέλλωση, πανώλη, χολέρα κ.λπ.) όσο και ιογενείς (γρίπη, αδενοϊικές λοιμώξεις, ιλαρά κ.λπ.). Όσον αφορά την ευαισθησία και την ειδικότητα, το RIGA είναι ανώτερο από το RA.
Αντίδραση αναστολής αιμοσυγκόλλησης (HAI)
Η αντίδραση αναστολής της αιμοσυγκόλλησης (HAI) χρησιμοποιείται για την τιτλοδότηση αντιιικών αντισωμάτων στον ορό του αίματος, καθώς και για τον καθορισμό του τύπου των απομονωμένων ιικών καλλιεργειών. Το RTGA μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη διάγνωση εκείνων των ιογενών λοιμώξεων των οποίων τα παθογόνα έχουν ιδιότητες αιμοσυγκόλλησης.
Η αρχή της μεθόδου είναι ότι ο ορός που περιέχει αντισώματα έναντι ενός συγκεκριμένου τύπου ιού καταστέλλει την αιμοσυγκολλητική του δραστηριότητα και τα ερυθρά αιμοσφαίρια παραμένουν μη συγκολλημένα.
Αντίδραση παθητικής αναστολής (καθυστέρησης) αιμοσυγκόλλησης (RPHA).
Τρία συστατικά εμπλέκονται στο RTPGA: ανοσοποιητικός ορός, αντιγόνο (υλικό δοκιμής) και ευαισθητοποιημένα ερυθροκύτταρα.
Εάν το υλικό δοκιμής περιέχει ένα αντιγόνο που αντιδρά ειδικά με τα αντισώματα του ανοσοποιητικού τυπικού ορού, τότε τα δεσμεύει και με την επακόλουθη προσθήκη ερυθροκυττάρων ευαισθητοποιημένων με ένα αντιγόνο ομόλογο στον ορό, δεν λαμβάνει χώρα αιμοσυγκόλληση.
Το RTPHA χρησιμοποιείται για την ανίχνευση μικροβιακών αντιγόνων, για τον ποσοτικό προσδιορισμό τους, καθώς και για τον έλεγχο της ειδικότητας του RTPGA.
Αντίδραση συγκόλλησης λατέξ (RLA)
Τα σωματίδια λατέξ χρησιμοποιούνται ως φορείς αντισωμάτων (ανοσοσφαιρίνες). Το RLA είναι μια εξπρές μέθοδος για τη διάγνωση μολυσματικών ασθενειών, λαμβάνοντας υπόψη τον απαιτούμενο χρόνο (έως 10 λεπτά) και την ικανότητα ανίχνευσης αντιγόνου σε μικρό όγκο υλικού δοκιμής.
Το RLA χρησιμοποιείται για την ένδειξη αντιγόνων του Streptococcus pneumoniae, του Haemophilus influenzae τύπου b, της Neisseria meningitidis στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό, για την ανίχνευση στρεπτόκοκκων της ομάδας Α σε επιχρίσματα λαιμού, για τη διάγνωση της σαλμονέλωσης, της γερσινίωσης και άλλων ασθενειών. Η ευαισθησία της μεθόδου είναι 1-10 ng/ml, ή 103 -106 βακτηριακά κύτταρα σε 1 μl.
Αντίδραση πήξης (CoA)
Η αντίδραση πήξης (CoA) βασίζεται στην ικανότητα της πρωτεΐνης Α των σταφυλόκοκκων να προσκολλά συγκεκριμένες ανοσοσφαιρίνες. Η RCA - μια μέθοδος ταχείας διάγνωσης - χρησιμεύει για τον εντοπισμό διαλυτών θερμοσταθερών αντιγόνων στις ανθρώπινες εκκρίσεις και στη σύνθεση των κυκλοφορούντων ανοσοσυμπλεγμάτων (CIC). Η ανίχνευση ειδικών αντιγόνων στη σύνθεση του CEC απαιτεί την προκαταρκτική καθίζηση τους από τον ορό του αίματος.
Αντίδραση καθίζησης
Στην αντίδραση καθίζησης (RP), ως αποτέλεσμα της αλληλεπίδρασης αντισωμάτων με διαλυτά αντιγόνα υψηλής διασποράς (πρωτεΐνες, πολυσακχαρίτες), σχηματίζονται σύμπλοκα με τη συμμετοχή συμπληρώματος - ιζημάτων. Είναι ένα ευαίσθητο τεστ που χρησιμοποιείται για την ανίχνευση και τον χαρακτηρισμό μιας ποικιλίας αντιγόνων και αντισωμάτων. Το απλούστερο παράδειγμα υψηλής ποιότητας RP είναι ο σχηματισμός μιας αδιαφανούς ζώνης καθίζησης σε έναν δοκιμαστικό σωλήνα στο όριο της στιβάδας αντιγόνου στον ανοσοποιητικό ορό - η αντίδραση κατακρήμνισης δακτυλίου. Διάφοροι τύποι RP σε ημι-υγρό άγαρ ή πηκτώματα αγαρόζης χρησιμοποιούνται ευρέως (μέθοδος διπλής ανοσοδιάχυσης, μέθοδος ακτινικής ανοσοδιάχυσης, ανοσοηλεκτροφόρηση).
Αντίδραση στερέωσης συμπληρώματος (CFR)
Η αντίδραση στερέωσης συμπληρώματος (CFR) βασίζεται στο φαινόμενο της αιμόλυσης με τη συμμετοχή συμπληρώματος, δηλ. ικανό να ανιχνεύει μόνο αντισώματα στερέωσης συμπληρώματος.
Το RSC χρησιμοποιείται ευρέως για τη διάγνωση πολλών βακτηριακών και ιογενών λοιμώξεων, ρικετσιαλικών λοιμώξεων, χλαμυδίων, λοιμώδους μονοπυρήνωσης, λοιμώξεων από πρωτόζωα και ελμινθασών. Το RSC είναι μια σύνθετη ορολογική αντίδραση στην οποία εμπλέκονται δύο συστήματα: η εξέταση (ορός αίματος), που αντιπροσωπεύεται από το σύστημα αντιγόνου-αντισώματος και συμπληρώματος, και η αιμολυτική (ερυθρά αιμοσφαίρια προβάτου + αιμολυτικός ορός). Ο αιμολυτικός ορός είναι αδρανοποιημένος με θερμότητα ορός αίματος κουνελιού ανοσοποιημένος με ερυθροκύτταρα προβάτου. Περιέχει αντισώματα κατά των ερυθρών αιμοσφαιρίων προβάτου.
Ένα θετικό αποτέλεσμα RSC - απουσία αιμόλυσης - παρατηρείται εάν ο ορός δοκιμής περιέχει αντισώματα ομόλογα με το αντιγόνο. Σε αυτή την περίπτωση, το προκύπτον σύμπλεγμα αντιγόνου-αντισώματος δεσμεύει το συμπλήρωμα και ελλείψει ελεύθερου συμπληρώματος, η προσθήκη του αιμολυτικού συστήματος δεν συνοδεύεται από αιμόλυση. Εάν δεν υπάρχουν αντισώματα που να αντιστοιχούν στο αντιγόνο στον ορό, δεν προκύπτει ο σχηματισμός συμπλόκου αντιγόνου-αντισώματος, το συμπλήρωμα παραμένει ελεύθερο και ο ορός προκαλεί αιμόλυση των ερυθρών αιμοσφαιρίων, δηλ. η παρουσία αιμόλυσης είναι αρνητικό αποτέλεσμα της αντίδρασης.
Yushchuk N.D., Vengerov Yu.Ya.